人脐带间充质干细胞联合莱菔硫烷对阿尔茨海默病转基因小鼠治疗作用的初步研究

目的:探索人源性脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)或莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)单独或联合应用对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)转基因小鼠脑内生物标志物的影响,并为AD治疗策略或进一步研究提供依据。方法:将24只8周龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为4组,分别接受PBS、SFN、hUC-MSCs单用或与SFN联合治疗。药物腹腔内注射、间充质干经细胞脑室注入,14天后处死小鼠,取大脑进行免疫荧光染色和蛋白质印迹分析。结果:hUC-MSCs和SFN单独或联合使用均能降低大脑皮层Aβ和Tau蛋白水平,联合使用效果更显著。结论:本研究动物实验初步结果见AD主要两个生物标志物Aβ和Tau蛋白下调,提示hUC-MSCs与SFN联合应用可能有效治疗早期AD,这表明SFN和hUCMSCs的联合治疗可能是治疗AD的一种新颖、有效的策略,需要进一步研究。

莱菔硫烷下调PI3K/Akt信号通路对高糖诱导人血小板凋亡的保护作用

目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane, SFN)对高糖(high glucose, HG)诱导人血小板凋亡的保护作用及机制。方法 将不同浓度(5、10、20μmol/L)的SFN或溶剂对照(0.05%DMSO)与健康人纯化血小板在体外共同孵育40 min,然后加入normal glucose(NG, 5 mmol/L)或HG(25 mmol/L)的葡萄糖溶液干预血小板90 min,用流式细胞术检测血小板线粒体膜电位(ΔΨm)去极化、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)暴露和胞内总活性氧(reactive oxygen species, ROS)生成水平,用蛋白免疫印迹法检测PI3K、Akt蛋白磷酸化水平。结果 与NG组相比,HG可显著增加血小板ΔΨm去极化和PS暴露水平(P <0.001),且可被不同浓度的SFN显著抑制(P <0.001)。机制上,与溶剂对照组相比,SFN显著下调HG诱导的血小板PI3K(P <0.01)和Akt(P <0.05)蛋白的磷酸化水平,显著降低HG诱导的胞内总ROS生成水平(P <0.001);PI3K的特异性激动剂740 Y-P可完全逆转SFN对HG诱导的PI3K和Akt蛋白磷酸化的抑制作用,部分逆转SFN对总ROS生成、ΔΨm去极化和PS暴露的抑制作用。结论 SFN在体外具有保护HG诱导健康人血小板凋亡的作用,其作用机制可能是下调PI3K/Akt介导的信号通路。

莱菔硫烷对脂毒性致肾损伤保护作用的研究进展

莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)是一种天然的异硫氰酸盐类化合物,广泛存在于西兰花等十字花科蔬菜中,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种生物活性。脂毒性导致的肾损伤是慢性肾病的重要原因,本文概括SFN对脂毒性致肾损伤的改善作用,为研究十字花科蔬菜防治肾损伤提供理论基础。

十字花科植物中莱菔硫烷防癌机制研究进展

十字花科蔬菜中的异硫氰酸酯——莱菔硫烷(sulforaphane,SF)可以在癌症的起始、发展和增生3个阶段阻滞癌细胞的生长发育,降低癌症发生的风险,其前体物主要存在于西兰花中。本文主要对国内外近年来有关SF对化学致癌物代谢酶的影响、激活抗氧化基因活性、激活转录因子、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡等方面的研究进展进行综述,以探讨SF的防癌机制,为防癌抗癌食品和药物的研发提供参考。

十字花科植物种子中莱菔硫烷含量的比较

目的研究十字花科植物种子中莱菔硫烷的含量和测定方法。方法采用反相高效液相色谱法对不同种属、不同产地的十字花科植物种子提取物中莱菔硫烷的含量进行了系统的分析。结果十字花科植物种子中莱菔硫烷的含量存在显著差异,且青花菜种子中莱菔硫烷的含量最高,可达4.748mg·g-1。结论青花菜种子是制备莱菔硫烷的优良原材料。

莱菔硫烷抑制肺癌干细胞增殖的体外实验

目的研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对肺癌干细胞增殖的影响及其机制。方法采用MTT法分析SFN对H460细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FACS)检测SFN对细胞凋亡和侧群细胞比例的影响;肿瘤球培养法分析SFN对肿瘤球生长的影响;使用sh RNA慢病毒载体构建β-catenin低表达细胞株,并应用蛋白电泳法检测在β-catenin正常或低表达情况下莱菔硫烷对β-catenin、Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog等基因表达的影响。结果 SFN有效抑制H460细胞增殖,IC50为11.2μmol/L。SFN处理72 h后,细胞凋亡呈剂量依赖性增高。SFN有效抑制原代肿瘤球和2代肿瘤球的生长,在较低浓度(1.0μmol/L)下即有明显的抑制作用。FACS检测提示侧群细胞比例随SFN浓度增高而减少。SFN浓度依赖性地抑制β-catenin、Oct4、Sox2、c-Myc和Nanog等蛋白表达。在低表达β-catenin情况下,Oct4、Sox2、c-Myc、Nanog等基因表达水平与SFN浓度相关。结论 SFN通过β-catenin和干性相关基因(Sox2、c-Myc、Nanog和Oct4)特异地抑制肺癌干细胞的增殖。

莱菔硫烷抗凋亡对移植大鼠心脏的保护作用

目的莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)抗氧化作用减轻心肌的缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的研究已有报道,文中研究SFN抗细胞凋亡作用对移植心脏IRI的影响。方法健康雄性Lewis大鼠40只随机分成2组,每组20只。对照组受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的等渗盐水,实验组受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。实验组和对照组的供心均冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠异体异位心脏移植模型。半定量方法分析评价移植心脏功能,免疫组织化学检测移植心脏心肌组织Caspase-3蛋白的表达,Tunel法检测心肌细胞凋亡,Kaplan-Meier分析移植心脏存活时间(BN→Lewis)。结果实验组移植心脏的中位生存期明显高于对照组(7 d vs 5 d,P<0.05),心脏功能评分实验组较对照组明显提高[(3.67±0.21)分vs(2.44±0.29)分,P<0.05],心肌组织Caspase-3蛋白的表达实验组较对照组明显降低[(1.38±0.14)分vs(2.03±0.21)分,P<0.05],心肌细胞凋亡指数较对照组明显降低(0.56±0.04 vs 0.78±0.01,P<0.05)。结论 SFN对移植心脏的保护作用可能与其抑制Caspase-3蛋白的表达、减少心肌细胞凋亡有关。

甘蓝和青花菜不同器官中莱菔硫烷含量差异研究

十字花科蔬菜含有抗癌活性成分莱菔硫烷,为了筛选富含莱菔硫烷的甘蓝和青花菜材料,本研究以48份甘蓝和29份青花菜为试材,对其不同器官中莱菔硫烷含量进行HPLC分析。结果表明,不同甘蓝和青花菜基因型间莱菔硫烷含量差异显著,青花菜同一基因型不同器官中莱菔硫烷含量差异较大。甘蓝叶球中莱菔硫烷含量变化范围为4.28~57.18 mg·kg^(-1)DW,并平均含量为25.72 mg·kg^(-1)DW,筛选到莱菔硫烷含量较高的甘蓝自交系2份和杂交F1材料1份。青花菜中莱菔硫烷变化范围为:花球:3.58~1 137.47 mg·kg^(-1)DW;幼茎:13.79~259.58 mg·kg^(-1)DW;叶片:0~297.05 mg·kg^(-1)DW。花球、幼茎和叶片中莱菔硫烷平均含量分别为301.23、84.25和47.96 mg·kg^(-1)DW,初步筛选到莱菔硫烷含量较高的青花菜自交系3份。本研究结果为甘蓝类蔬菜新品种选育与改良提供了依据和材料。

青花菜P450CYP79F1全长克隆、表达及其与不同器官中莱菔硫烷含量的相关性分析

【目的】克隆青花菜细胞色素家族P450CYP79F1,分析其序列特征,阐明其在不同发育时期器官中的表达情况及其与莱菔硫烷含量的关系,为进一步揭示莱菔硫烷合成机理提供科学依据,为青花菜品种改良和新品种选育奠定基础。【方法】通过5′和3′端RACE克隆技术获得青花菜CYP79F1全长序列,利用DNAMAN 6.0进行基因拼接、氨基酸序列分析和蛋白二级结构预测,结合在线分析程序和软件进行基因和编码蛋白生物信息学分析;利用荧光定量PCR技术研究CYP79F1在不同发育器官中的表达情况;结合HPLC方法测定各相应时期器官中莱菔硫烷含量,包括青花菜发育时期的根、茎、叶,成熟花球,抽薹期花蕾(顶端蕾、成熟蕾、开花前1 d的蕾和花)和种子;对CYP79F1表达量与和莱菔硫烷含量进行相关性分析。【结果】获得了CYP79F1全长序列,Gen Bank登录号为MG012890,该基因全长2 014 bp,包含一个1 620 bp的开放读码框(ORF),编码540个氨基酸;编码的蛋白与甘蓝、白菜、芥蓝和油菜等同源蛋白的相似性均在95%以上;生物信息学分析表明该基因编码的酶蛋白有2个信号肽和2个跨膜结构域,为亲水性稳定蛋白,Wolf Psort预测其亚细胞定位于细胞质中;CYP79F1在根和茎中的表达量较高,叶中表达量最低,在花器官发育时期,自顶端蕾到花发育过程中呈现逐渐降低的表达趋势,种子中该基因表达量与花处于同一水平。Pearson相关性分析显示,青花菜发育时期的根、茎、叶、成熟花球、抽薹期花蕾和种子中莱菔硫烷含量与CYP79F1表达量无显著相关关系,但抽薹期花蕾自顶端花蕾到花中莱菔硫烷生成量与CYP79F1表达量呈显著正相关关系(R=0.96,P<0.05),CYP79F1在调控莱菔硫烷的生成方面起重要作用,尤其是在生殖器官花蕾的发育过程中,能够显著上调莱菔硫烷的生成量。【结论】CYP79F1在青花菜不同发育器官中对莱菔硫烷的生成发挥着重要调控作用,可能与青花菜不同器官中莱菔硫烷含量多样性密切相关。

绿花椰菜片剂中莱菔硫烷含量测定及对急性酒精性肝损伤的保护作用

采用高效液相色谱法测定绿花椰菜水提物中莱菔硫烷的含量;以C57BL/6小鼠建立急性酒精性肝损伤模型,用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测莱菔硫烷对小鼠肝脏病理学的影响;采用半自动生化分析仪测定莱菔硫烷对肝脏丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,以探讨绿花椰菜中的活性成分莱菔硫烷对急性酒精性肝损伤的保护作用.结果表明:绿花椰菜水提物中莱菔硫烷的含量为1.26mg/片;莱菔硫烷各剂量组均可明显降低酒精所致的肝质量增加,肝/体比值较酒精模型组明显下降(P<0.01);莱菔硫烷各剂量组均能减轻酒精对肝脏的病理学损伤,其中,高剂量莱菔硫烷组(80mg/kg)的作用尤为明显;莱菔硫烷能明显抑制酒精对肝脏ALT、AST和ALP等特征性酶的诱导作用,其中40和80mg/kg中、高剂量莱菔硫烷的保护作用更明显.说明莱菔硫烷能保护酒精对肝脏的损伤.

莱菔硫烷预处理对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响

目的:观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法:健康雄性Lewis大鼠60只随机分成3组,每组20只。对照组:受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的生理盐水;NAC组:受体大鼠于移植前半小时经下腔静脉注射N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)300 mg/kg;SFN组:受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。其中供心冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠心脏移植模型。采用半定量法评价心脏功能,再灌注后6、24 h分别从受体鼠内眦静脉和下腔静脉取血,检测血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatinekinase-MB,CK-MB)、肌钙蛋白(troponin T,TnT)的水平;移植后24 h摘取供心,观察心肌组织学及超微结构的变化,检测心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性及脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)含量。结果:心脏功能评分SFN组、NAC组较对照组均明显提高(P<0.05);再灌注6 h,与对照组相比,NAC组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05)。SFN组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05);再灌注24 h,NAC组LDH和TnT的活性亦均降低(P<0.05),CK-MB的活性未见明显变化,SFN组血清中CK-MB和TnT的活性亦均降低(P<0.05);NAC组和SFN组心肌组织学及超微结构的损伤程度均较对照组明显减轻;与对照组相比,NAC组心肌组织SOD活性及SOD/LPO比值明显升高(P<0.05),LPO含量未见明显变化(P>0.05);SFN组供心心肌组织LPO含量显著降低(P<0.05),SOD活性未见明显变化,SOD/LPO明显提高(P<0.01)。结论:SFN能保护移植心脏,其机制可能与其诱导Ⅱ期酶产生,提高心肌细胞对氧化应激的防御能力,减少自由基对心肌的氧化损伤有关。

莱菔硫烷抑制LPS诱导的小鼠星形胶质细胞增殖

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖的影响及其机制。方法体外培养小鼠原代星形胶质细胞,给予0.1μg/m L LPS刺激星形胶质细胞活化增殖;同时分别给予不同浓度的莱菔硫烷(10、15、20μmol/L)处理星形胶质细胞24 h后,CCK8法检测细胞增殖情况;选取20μmol/L作为干预剂量行GFAP、Ki67双标免疫荧光染色及流式细胞仪细胞周期检测,进一步验证莱菔硫烷对LPS诱导星形胶质增殖的作用;Western blot检测细胞周期相关蛋白P27kip1、Cyclin D1、PCNA的表达情况。结果 CCK8法检测显示0.1μg/m L LPS能显著促进星形胶质细胞增殖(P<0.01),而加入20μmol/L莱菔硫烷能显著抑制LPS诱导的星形胶质细胞增殖(P<0.01),并能减少LPS刺激下的Ki67阳性细胞(P<0.05);细胞周期分析提示20μmol/L莱菔硫烷可减少LPS诱导下的星形胶质细胞S期比例,增加G1期细胞比例(P<0.05);Western blot提示20μmol/L莱菔硫烷能下调LPS刺激下PCNA、Cyclin D1的表达,上调P27kip1表达(P<0.05)。结论莱菔硫烷可以通过调控星形胶质细胞细胞周期,抑制体外LPS诱导的星形胶质细胞增殖。

莱菔硫烷对C57BL/6小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究莱菔硫烷对酒精诱发的肝脏功能异常的保护作用。方法:雄性C57BL/6小鼠按体质量随机分为5组(n=12):阴性对照组、酒精模型组、SFN处理组(SFN的剂量分别为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg),先给处理组动物经口灌胃不同剂量的SFN共10 d(1次/d),在末次灌胃SFN后,立即给予酒精模型组和SFN处理组动物酒精(5 g/kg),每12 h 1次,共3次,末次给予酒精4h后结束整个实验,常规HE染色观察肝脏病理变化,采用半自动生化分析仪检测血清、肝匀浆中相关指标的表达水平。结果:病理学和血清学指标表明,成功建立了小鼠急性酒精性肝损伤模型,莱菔硫烷能明显减轻酒精对肝脏的病理学损伤,高剂量莱菔硫烷保护组的作用明显,莱菔硫烷能保护酒精对AST、ALT、ALP 3种代谢酶功能的损伤,莱菔硫烷能提高肝匀浆抗氧化酶SOD和GSH-Px活性,降低脂质过氧化物MDA的水平。结论:莱菔硫烷能保护酒精对肝脏功能的损伤,其主要作用机制与SFN提高了酒精代谢的关键酶SOD和GSH-Px活性密切相关。

莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G_2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响

目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1(Thr14)和CyclinB1蛋白表达的影响。结果:SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),同时p-Cdk1(Thr14)的表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。

莱菔硫烷对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的保护作用

目的:研究莱菔硫烷(SF)对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的保护效应,并初步探讨其作用机制。方法:通过一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型;通过测定活性氧簇(ROS)的生成、TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡和计数存活的视网膜神经节细胞(RGCs)等方法作为指标观察SF对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的保护效应;以免疫组织化学染色和Western blot法检测视网膜核因子E2相关因子2(Nrf2)的核转移和血红素加氧酶1(HO-1)的表达变化。结果:SF能抑制糖尿病大鼠视网膜ROS的生成,抑制视网膜神经细胞的凋亡并增加糖尿病大鼠视网膜RGCs的存活数量;同时SF还可促进Nrf2的激活及HO-1蛋白表达;使用HO-1抑制剂锌原卟啉可明显减弱SF对糖尿病大鼠视网膜RGCs凋亡的抑制作用。结论:SF可能通过激活Nrf2/HO-1抗氧化通路改善糖尿病大鼠视网膜氧化应激状态,减少视网膜神经细胞凋亡,减轻糖尿病大鼠的视网膜损伤。

莱菔硫烷对高糖诱导心肌细胞线粒体损伤的保护作用

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)预处理对高糖诱导心肌细胞线粒体损伤的保护作用。方法用高糖(33 mmol/L)作用于H9c2(2-1)大鼠心肌细胞24 h建立细胞高糖损伤模型,用噻唑蓝染色法检测不同剂量(1、5、7.5、10μmol/L)莱菔硫烷预处理24 h和5μmol/L莱菔硫烷预处理不同时间(12、24、36、48 h)的细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH)活性;荧光酶标仪检测细胞的活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生速度和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);应用透射电镜观察线粒体形态。结果与对照组比较,模型组SDH活性下降(P<0.05),莱菔硫烷组SDH活性显著高于模型组(P<0.05)。与模型组比较,莱菔硫烷组(5μmol/L,24 h)ROS产生速度下降(P<0.01),MMP上升(P<0.01),线粒体损伤性形态变化及细胞早期凋亡形态改变减轻。结论莱菔硫烷能够抑制高糖对心肌细胞线粒体造成的损伤。

莱菔硫烷对镉中毒雄性小鼠生殖机能保护作用的研究

本试验旨在研究莱菔硫烷(SFN)对染镉雄性小鼠生殖机能的保护作用。选择健康的清洁级雄性昆明系小鼠40只,随机分成4组,分别为对照组(H2O)、镉组(2.3mg/kg CdCl2)、莱菔硫烷组(10mg/kg SFN)、镉+莱菔硫烷组(10mg/kg SFN+2.3mg/kg CdCl2),连续给药10d,于最后一次给药2d后脱颈处死,检测小鼠睾丸组织病理学变化、小鼠睾丸及附睾的脏器系数、精液品质及血清睾酮浓度。同时检测睾丸组织内丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的变化。结果表明,与对照组相比,镉组小鼠的睾丸组织发生病理学损伤,睾丸及附睾的脏器系数、精液品质及血清睾酮浓度均极显著降低(P<0.01),睾丸组织T-SOD活性、GSH含量也极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著提高(P<0.01);莱菔硫烷组T-SOD活性和GSH含量显著升高(P<0.05),MDA含量与对照组相比差异不显著(P>0.05)。与镉组相比,镉+莱菔硫烷组小鼠的精子活率、精子总数极显著增加(P<0.01),睾丸与附睾的脏器系数显著增加(P<0.05),小鼠睾丸组织GSH含量、T-SOD活性极显著提高(P<0.01),MDA含量极显著降低(P<0.01)。以上结果指出莱菔硫烷对镉中毒雄性小鼠的生殖机能具有保护作用。

莱菔硫烷对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖和凋亡的影响

目的:研究莱菔硫烷(SFN)对涎腺腺样囊性ACC-M癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:分别用终浓度为5、10、20、30、40、60、80、100μmol/L的SFN处理ACC-M细胞24、48、72 h。用MTT比色试验和台盼蓝拒染实验检测细胞的增殖和存活情况;倒置显微镜、Giemsa染色、透射电镜观察细胞形态学变化;Annexin-V-FITC和PI双标记流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:SFN对ACC-M有明显的增殖抑制作用,最高抑制率达89.2%,作用24、48、72 h时的IC50(μmol/L)分别是75.6、21.3、16.5,增殖抑制率与药物浓度和作用时间具有明显的正相关性。SFN可诱导ACC-M细胞凋亡,凋亡率随处理时间延长和药物浓度增加而上升(P<0.01)。结论:SFN具有抑制涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖和诱导其凋亡的作用,且具有浓度和时间依赖性。

莱菔硫烷通过线粒体诱导HepG-2细胞凋亡

探讨莱菔硫烷(SFN)通过线粒体途径诱导HepG-2细胞凋亡的机制.不同剂量SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h,流式细胞仪检测SFN对HepG-2细胞凋亡率影响;采用Western Blot法测定SFN对HepG-2细胞Cyt-c蛋白表达的影响;酶活性检测试剂盒测定SFN对HepG-2细胞内caspase-3和caspase-9酶活性的影响.SFN能够有效地诱导HepG-2细胞凋亡,10、20、40μmol/L的SFN作用于HepG-2细胞48h后,与对照组比较凋亡率显著升高(P<0.01),并呈剂量依赖性;SFN可使HepG-2细胞胞浆中Cyt-c蛋白含量升高,与对照组比较差异显著(P<0.05);同时使细胞内caspase-3和caspase-9的活性升高,并呈一定的剂量依赖性.SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞的凋亡,可通过促进Cyt-c的释放,进而激活caspase-9,再激活下游caspase-3,最终引起细胞凋亡.

莱菔硫烷对染镉小鼠睾丸间质细胞抗氧化功能影响的研究

试验旨在研究莱菔硫烷(SFN)对染镉(Cd)小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)抗氧化应激能力的影响。向TM3细胞培养液中添加Cd和SFN,分别测定Cd的半数抑制浓度(IC50)和SFN的安全剂量范围,建立试验模型,通过检测TM3细胞的相对存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞抗氧化水平,判定SFN对Cd诱导TM3细胞毒性的影响。结果显示:1随着Cd浓度的增加,TM3细胞的相对存活率降低,Cd对体外培养TM3细胞的IC50为51.4μmol/L;SFN在一定范围内对细胞存活有促进作用,但超过范围后具有毒性,且浓度越大毒性越大,本试验条件下选择SFN浓度为2.5、5和10μmol/L。2与对照组相比,Cd组TM3细胞的T-SOD、GSH-Px活性及GSH含量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),LDH活性、MDA含量升高;SFN组LDH活性、MDA含量降低,GSH含量、T-SOD活性及GSH-Px活力升高;与Cd组相比,Cd+SFN组GSH含量、T-SOD活性及GSH-Px活力显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);LDH活性、MDA含量则降低,表明SFN具有缓解染Cd诱导TM3细胞毒性的作用。