血清中硫脂质的提纯及其结构分析

应用离子交换及硅胶柱色谱法分离提纯血清中酸性脂质,并采用薄层色谱法(TLC)、TLC免疫染色法、质谱法及溶化分解等方法分析血清中硫脂质的种类及结构。实验确定了样品的提纯体系,证实胆固醇硫酸及脑硫脂是血清中的主要硫脂质。

CIDP患者血清和脑脊液中硫脂抗体、P2蛋白抗体的临床意义

目的 通过测定慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病 (CIDP)患者血清和脑脊液 (CSF)中抗硫脂抗体及P2蛋白抗体水平 ,探讨其临床意义和可能的致病机制。方法 应用ELISA法检测 2 4例CIDP患者血清和脑脊液中抗硫脂抗体和P2蛋白抗体水平。结果 (1 )CIDP组血清中高滴度抗硫脂抗体与其它周围神经病 (OPN)组和其它神经系统疾病 (OND)组比较无显著的差异 (P >0 .0 5) ;脑脊液中IgM 抗硫脂抗体与各对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5)。 (2 )CIDP组血清中高滴度抗P2抗体与OPN、OND组比较无显著的差异 (P >0 .0 5) ;脑脊液中抗P2抗体与各对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 )。 (3) 1 3例抗硫脂抗体阳性CIDP患者中 9例 (69.2 % )为感觉轴索性损害 ,1 1例阴性患者中 3例 (2 7.4 % )为感觉轴索性损害 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。 (4) 1 8例抗P2抗体阳性CIDP患者中 ,1 3例 (72 .2 % )为轴索性损害 ,6例抗P2抗体阴性患者中 3例 (50 % )为轴索性损害 ,差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论 CIDP患者脑脊液中IgM 抗硫脂抗体可以作为感觉轴索型周围神经病的临床诊断参考指标 ;血清和脑脊液中P2抗体的检测对CIDP诊断参考价值不大 ,可能与疾病的修复有关。

MAG抗体和硫脂抗体在格林-巴利综合征中的意义

目的探讨MAG抗体和硫脂抗体在格林-巴利综合征(GBS)中的意义。方法应用ELISA方法检测33例GBS、32例多发性硬化(MS)患者、21例其他周围神经疾病(OPN)患者、100例健康对照者(NC)血清和(或)脑脊液中MAG抗体、硫脂抗体的阳性率。结果GBS患者血清上述抗体阳性率与MS组及OPN组相比较差异均有显著性(P<0.05)。MAG抗体的产生与前驱感染关系密切,同对照组相比差异有显著性(P<0.05)。GBS患者血清和脑脊液中上述抗体之间无明显相关性(P>0.05)。结论血清和脑脊液上述抗体增高对格林-巴利综合征的诊断和治疗有临床意义,并有助于进一步揭示其发病机制。

大劣按蚊含硫脂蛋白基因在约氏疟原虫感染中的作用

目的分析大劣按蚊含硫脂蛋白(TEP1)基因在约氏疟原虫感染过程中的作用。方法根据GenBank中大劣按蚊TEP1基因序列设计带有T7启动子的引物,以大劣按蚊cDNA为模板,进行PCR扩增,纯化产物,体外转录试剂盒合成AdTEP1双链RNA。羽化1～2日的雌性大劣按蚊分3组(200只/组):TEP1干扰组、绿色荧光蛋白(EGFP)干扰组和对照组。TEP1、EGFP干扰组按蚊分别进行胸部微量注射AdTEP1双链RNA、EGFP双链RNA各147 ng,对照组未处理。干扰后3d,每组取15只按蚊,去头,以大劣按蚊核糖蛋白S7(AdS7)为内参进行半定量PCR,检测干扰效果。干扰后4d,用约氏疟原虫BY256荧光株感染3组大劣按蚊。感染后9d,每组各解剖25只蚊胃,记录感染率和感染度。结果对照组和EGFP干扰组AdTEP1的表达条带亮度基本一致,而TEP1干扰组AdTEP1的表达条带亮度非常微弱。感染后9 d,蚊胃卵囊数统计学分析表明,对照组、EGFP干扰组和TEP1干扰组感染率分别为(24±2.83)%、(24±0.71)%和(80±3.54)%;感染度分别为0.32±0.7、0.44±0.85和5.52±4.84,TEP1干扰组明显高于对照组和EGFP干扰组(P<0.05)。结论 AdTEP1干扰后明显增加了大劣按蚊的感染率和感染度,增强了大劣按蚊对约氏疟原虫易感性。

炎性周围神经病患者血清和脑脊液中抗硫脂抗体的临床意义

目的 通过测定炎性周围神经病患者血清和脑脊液 ( CSF)中抗硫脂抗体水平 ,探讨其临床意义和可能的致病机制。方法 应用 ELISA法检测 3 0例急性吉兰 -巴雷 ( Guillain-Barré syndrome,GBS)患者、2 4例慢性吉兰 -巴雷 ( chronic inflammatory demyelinating polyradiculoneuropathy,CIDP)患者血清和 CSF中抗硫脂抗体水平。结果 ( 1 ) GBS患者血清中高滴度抗硫脂抗体与疾病组和正常对照组比较差异无显著性 ( P >0 .0 5 ) ;CSF中 Ig M-抗硫脂抗体阳性率与各对照组比较差异有极显著性 ( P <0 .0 1 ) ;( 2 ) CIDP患者血清中高滴度抗硫脂抗体与正常对照组比较差异有显著性 ( P <0 .0 5 ) ,CSF中 Ig M-抗硫脂抗体阳性率与各对照组比较差异有显著性( P <0 .0 5 ) ;( 3 )抗硫脂抗体阳性的 GBS患者多有主观感觉障碍 ,差异有显著性 ( P <0 .0 5 ) ;抗硫脂抗体阳性的CIDP患者多为感觉轴索性损害 ,差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;( 4 )轻、重型组 GBS患者血清和 CSF中抗硫脂抗体水平之间差异无显著性 ( P >0 .0 5 ) ;( 5 ) GBS组、CIDP组血清中抗体水平与配对的 CSF中抗体水平无相关性。结论 ( 1 ) GBS患者 CSF中 Ig M-抗硫脂抗体有可能作为感觉神经受累的一项临床辅助参考指标 。

2型糖尿病患者脑硫脂、胰岛素抵抗与颈动脉内膜—中层厚度的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者脑硫脂、胰岛素抵抗(IR)与颈动脉内膜—中层厚度(CIMT)的关系。方法对104例T2DM患者进行血糖、血脂、血尿酸(UA)、真胰岛素(TI)及脑硫脂检测,并行B超检查测量其CI-MT。结果CIMT正常58例,CIMT增厚46例。与CIMT正常者比较,CIMT增厚者的脑硫脂明显降低,年龄、血清TI及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的自然对数[In(TI)、In(HOMA-IR)]、C反应蛋白明显升高(P均<0.05);多元逐步回归分析显示,CIMT与脑硫脂呈负相关,与年龄、In(TI)、In(HOMA-IR)、UA呈正相关。结论脑硫脂与IR有密切相关性,脑硫脂降低、IR是T2DM患者CIMT增厚的危险因素。

硫脂致敏的实验性变态反应性神经炎病理和电生理特点

目的探讨硫脂诱导的实验性变态反应性神经炎病理和电生理特点。方法以硫脂免疫豚鼠，观察其周围神经电生理、病理及免疫细胞化学的变化。结果被致敏动物坐骨神经、脊神经根发生脱髓鞘改变，神经鞘膜ＩｇＧ荧光沉积明显，有的同时伴有髓鞘再生，病损区ＣＤ１１ｂ＋细胞显著增加而ＣＤ５＋细胞增加不明显，坐骨神经传导阻滞及传导速度减慢。结论硫脂致敏的实验性变态反应性神经炎与慢性格林－巴利综合征更相似。

成人代谢综合征脑硫脂与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

目的探讨代谢综合征(MS)患者脑硫脂与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的关系。方法 102例MS患者,其中MS糖耐量低减(MS-IGT)患者58例,MS糖尿病(MS-DM)患者44例,测定其身高、体重、腰围及血压,检测血糖、血脂、血尿酸(UA)、真胰岛素(TI)及脑硫脂,并行B超检查测量其CIMT。结果 MS患者CIMT较正常对照组增厚(P<0.05)。MS患者CIMT正常62例,CIMT增厚40例,与CIMT正常者比较,CIMT增厚者的脑硫脂明显降低,年龄、血清TI及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的自然对数In(TI)、In(HOMA-IR)、C反应蛋白、UA、FBG、SBP明显升高(P均<0.05);多元逐步回归分析显示,CIMT与脑硫脂呈负相关(β=2.471,P<0.01),与年龄、In(HOMA-IR)、InTI、SBP、FPG呈正相关(β值分别为0.001,0.006,0.032,0.057和0.043,P<0.05)。结论脑硫脂与IR有密切相关性,脑硫脂降低、IR、SBP、FPG是MS糖尿病患者CIMT增厚的危险因素。

Ⅱ型硫脂酶与次生代谢产物合成

Ⅱ型硫脂酶(type Ⅱ thioesterases,TEⅡ)属于α/β水解酶,含有保守的催化三元件(Ser-His-Asp),广泛存在于非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetases,NRPS)和聚酮合成酶(polyketide synthases,PKS)系中。与Ⅰ型硫脂酶(type Ⅰ thioesterases,TEⅠ)不同,TEⅡ作为一个独立的蛋白质行使硫脂键水解功能。以往的数据研究发现,合成途径中TEⅡ基因缺失导致聚酮(polyketides,PK)或非核糖体肽(nonribosomal peptide,NRP)的产量显著降低。本文通过对硫酯酶(thioesterases,TE)的聚类分析,显示序列同源性方面TE聚类成两个不同的进化枝,一个含有所有TEⅠ,第二个包含所有TEⅡ。对TEⅡ的多序列比对及结构分析,结果显示TEⅡ序列中的标记序列"GHSMG"为保守序列,结构的差异性导致TEⅡ功能的差异性,综合前期相关数据研究,对TEⅡ在生物合成中的功能途径进行了概括性论述,并对其今后在次生代谢物合成研究中的应用进行了展望,以期加深对TEⅡ的认识和理解。

微拟球藻硫脂酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)基因组序列注释的硫脂酶基因(NoTE)长1 314bp,其编码的硫脂酶长437氨基酸,与其他物种硫脂酶序列相似性较低。为验证其功能,将NoTE克隆到原核表达载体pET-30a上并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测到预期大小的蛋白质条带。气相色谱(GC)分析显示,表达NoTE未改变大肠杆菌脂肪酸种类,但改变了其总脂肪酸含量和脂肪酸比例,其C14∶1、C16∶0、C16∶1、C18∶1及总脂肪酸含量较不含重组质粒菌株分别提高了11%、18%、32%、49%和30%。研究结果证明了克隆的硫脂酶基因能在大肠杆菌中表达并具有相应的酶活性。

硫脂及其生物功能

硫脂及其生物功能方林求（安徽大学生物系，合肥２３００３９）关键词硫脂硫脂（Ｓｕｌｆｏｌｉｐｉｄ）是一类含有硫酸基的酸性糖脂，除硫酸基外，还含有糖基、脂肪酸、鞘氨醇或甘油醇或胆固醇。它在哺乳动物中枢神经系统的髓磷脂鞘及胃肠和分泌系统的膜中含量最为丰富。...

抗硫脂IgG抗体阳性慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病1例

1病例资料患者男性,27岁,因四肢无力2个月余,于2021年5月24日入我院。患者于2021年3月15日无明显诱因下出现双下肢无力,以左侧明显,主要表现为下蹲后起来困难,上楼费力,伴双下肢酸胀不适,于4月5日出现左上肢无力,表现为握物不稳,上抬困难,呈进行性加重,5月1日出现右上肢无力,无吞咽困难、声音嘶哑,无畏寒发热、咳嗽咳痰。为求诊治,遂来我院,以“肢体无力原因待查”收入院,患者自发病以来,精神、饮食、睡眠尚可,二便正常,体重无明显变化。既往2000年因阑尾炎行阑尾切除术;否认吸烟、饮酒史。

格林-巴利综合征患者血清和脑脊液中的抗硫脂抗体

探讨抗硫脂抗体与格林－巴利综合征（ＧＢＳ）的关系。方法采用固相酶联免疫吸附法对急性期ＧＢＳ患者血清和脑脊液（ＣＳＦ）中抗硫脂ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体进行检测。结果ＧＢＳ患者血清和ＣＳＦ中抗硫脂ＩｇＧ及ＩｇＭ抗体的阳性率均明显高于正常对照组；血清中抗硫脂ＩｇＭ抗体滴度与标本收集时患者发病天数呈负相关（Ｐ＜０．０５），而血清中抗硫脂ＩｇＧ抗体滴度与临床分级（Ｐ＜０．０１）、ＣＳＦ中抗硫脂ＩｇＧ抗体滴度（Ｐ＜０．０１）呈正相关；血清中抗硫脂ＩｇＧ或ＩｇＭ阳性的ＧＢＳ患者，体检时有不同程度的感觉障碍患者为５６％，而血清中抗硫脂抗体阴性患者仅为１６％，两者之间差异有显著意义（Ｐ＜０．０５）。

血清脑硫脂与2型糖尿病的相关性研究

目的探讨脑硫脂与2型糖尿病的关系及可能的作用机制。方法测定54例2型糖尿病患者身高、体重、腰围及血压，检测血糖、血脂、真胰岛素及脑硫脂；另设健康对照组48例。结果糖尿病组空腹血糖、胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）水平高于对照组（t=9．216，4．609；P〈0．05），脑硫脂水平低于对照组（t=12．116，P〈0．05）；HOMA—IR与体重指数、腰围、收缩压、空腹血糖、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）和真胰岛素存在单变量相关（r值分别为0．348，0．419，0．368，0．539，-0．533，0．757）；脑硫脂与体重指数、腰围、收缩压、舒张压、空腹血糖、HDL-C和HOMA—IR存在单变量相关（r值分别为-0．326，-0．363，-0．414，-0．342，-0．676，0．430，-0．566）；行多元线性回归显示，脑硫脂（β=-48．651，P=0．000），性别（β=-0．933，P=0．002），腰围（β=0．033，P=0．042）为HOMA—IR的独立危险因素。结论2型糖尿病患者血清脑硫脂降低，血清脑硫脂与糖尿病、胰岛素抵抗之间有密切的相关性，在糖尿病的发生、发展中可能起重要作用。

代谢综合征与脑硫脂的相关性研究

目的探讨脑硫脂与代谢综合征（MS）的关系。方法选择我院内分泌科2008年3月至2009年3月就诊患者。分为MS组（54例）与非MS组（87例）。测定2组身高、体重、腰围（WC）及血压，检测空腹血糖（FPG）、血脂、真胰岛素（TI）及脑硫脂。结果MS组体重指数（BMI）、WC、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、甘油三酯（TG）、TI、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平均高于非MS组（t值分别为4．735，5．247，6．960，6．894，6．609，4．536，4．895，P均〈0．01），脑硫脂水平低于非Ms组[分别为（0．093±0．014）、（0．125±0．028）mg／L，t=4．973，P〈0．01]，Ms组分越多脑硫脂的水平越低；HOMA—IR与BMI、wC、SBP、DBP、FPG、TG和CHO、TI存在单变量相关（r值分别为0．391，0．235，0．369，0．429，0．226，0．370，0．213，0．970，P均〈0．01），与年龄、脑硫脂负相关（r值分别为-0．350，-0．158，P均〈0．05）；脑硫脂与WC、BMI、DBP存在单变量相关（r值分别为-0．251，-0．185，-0．229，P〈0．05）；多元线性回归显示，腰围和脑硫脂为In（HOMA-IR）的独立危险因素。结论MS患者较非MS患者血清脑硫脂降低，MS组分数越多脑硫脂水平越低。血清脑硫脂与MS之间有密切的相关性。

脑硫脂与糖尿病

脑硫脂是一种酸性鞘糖脂,主要表达于神经组织。近年研究发现,脑硫脂还表达于β细胞并与胰岛素的合成、储存和释放过程关系密切。新诊1型糖尿病患者血清中存在抗脑硫脂抗体,而且脑硫脂可以减少非肥胖糖尿病大鼠糖尿病的发生。另外,低血清脑硫脂浓度和2型糖尿病的发病也相关。ob/ob鼠和db/db鼠表现为β细胞选择性缺乏C16∶0脑硫脂,补充该亚型的脑硫脂可以改善Zucker肥胖大鼠的β细胞功能。脑硫脂还具有抗炎和免疫调节作用。对脑硫脂的研究能够深化人们对β细胞生理功能的认识,并可能为糖尿病的治疗提供新思路。

硫脂抗体阳性与阴性患者的临床特征对比

目的分析硫脂(sulfatide)抗体阳性与阴性患者的临床特征差异,探讨其临床应用价值。方法采用ELISA方法,对51例患者的血清和(或)脑脊液进行周围神经抗体谱检测,根据抗sulfatide抗体结果将其分为抗体阳性组(G+)与抗体阴性组(G-),收集两组患者的临床资料并加以比较。结果硫脂抗体阳性组36例,阴性组15例,IgG型硫脂抗体阳性者25例,IgM型抗sulfatide抗体者5例,二者同时阳性者6例。硫脂抗体阳性组多见于吉兰-巴雷综合征(GBS)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(CIDP)、周围神经病、颈椎病、脑血管病等,硫脂抗体阳性在其他疾病诊断中也有发现,如躯体化障碍、颅内感染、不安腿综合征等。所有硫脂抗体阳性组中9例完善了脑脊液检查,共17例合并周围神经抗体谱其他抗体阳性者,其中50%患者合并的阳性抗体是GM1、GM2和GM3。结论硫脂抗体多见于周围神经疾病患者,特别是免疫性周围神经病,对临床诊断缺乏一定的特异性,需要结合患者病史、临床症状及其他辅助检查等。

植物脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶研究综述

植物脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶(FAT)是一种终止脂肪酸合成的酶。它的基本功能就是将acyl-ACPs水解成游离脂肪酸和ACP,从而终止脂肪酸从头合成途径中脂肪酸链的延长。植物中,不同的FAT具有不同的底物特异性,直接决定植物细胞油脂中的脂肪酸的种类和数量。不同的植物组织和物种对于每种脂肪酸的需求各不相同,因此FAT在植物细胞代谢中就有着极为重要的作用。本文对FAT的种类、结构、功能、序列的分离克隆及其应用等方面进行综述。