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斜纹夜蛾SpLPDI的克隆、表达及其对莱氏野村菌的免疫应答分析 被引量:3
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作者 李燕 王中康 +2 位作者 陈环 冯二艳 殷幼平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1359-1369,共11页
【目的】研究斜纹夜蛾(Spodoptera litura)蛋白质二硫键异构酶基因(SpLPDI)的表达特性以及在莱氏野村菌入侵过程中的可能作用,为深入探讨斜纹夜蛾应答莱氏野村菌侵染的免疫分子机制奠定基础。【方法】根据斜纹夜蛾脂肪体抑制差减杂交文... 【目的】研究斜纹夜蛾(Spodoptera litura)蛋白质二硫键异构酶基因(SpLPDI)的表达特性以及在莱氏野村菌入侵过程中的可能作用,为深入探讨斜纹夜蛾应答莱氏野村菌侵染的免疫分子机制奠定基础。【方法】根据斜纹夜蛾脂肪体抑制差减杂交文库(SSH)中筛选的PDI的EST序列设计特异引物,结合SMART RACE技术,克隆SpLPDI的cDNA全长,并进行生物信息学分析;运用半定量RT-PCR和定量qPCR进行该基因的组织分布与差异分析;用qPCR研究SpLPDI被莱氏野村侵染诱导后的表达特性;用原核表达来研究其蛋白特征。【结果】斜纹夜蛾SpLPDI的cDNA全长为2 367 bp,包含1个1 485 bp的ORF,编码494个氨基酸。生物信息学分析表明,SpLPDI含有1个17个氨基酸残基的信号肽,2个硫氧还蛋白的活性域和1个RDEL内质网定位信号肽,且具有典型的PDI蛋白家族a-b-b′-a′的结构特点;同源序列对比分析发现SpLPDI蛋白在a和a′结构的活性域和内质网定位信号肽均极为保守;进化分析表明,斜纹夜蛾SpLPDI与家蚕的亲缘最近,与隐孢子虫和黑曲霉的亲缘较远。表达谱分析表明,SpLPDI在所选组织中均有表达,在血液中表达量最高,脂肪体次之,头部最低。经莱氏野村菌诱导后,SpLPDI在脂肪体和中肠中表达均有显著上调表达,但是在脂肪体的上调幅度比中肠的大。克隆的SpLPDI在大肠杆菌中成功表达出大量可溶蛋白。【结论】从斜纹夜蛾中克隆出蛋白质二硫键异构酶基因SpLPDI,在莱氏野村菌的诱导下有显著上调表达,可能与斜纹夜蛾相关的免疫应答有关。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾 蛋白异构酶基因 莱氏野村菌 SpLPDI
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Increase Renaturation Yield of Reteplase Using the Recombinant Human Protein Disulfide Isomerase
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作者 赵友春 Wang Ge +4 位作者 Kong Yang WANG Yanbing Zhang Changkai Chen Chao Liang Bufeng 《High Technology Letters》 EI CAS 2004年第1期49-51,共3页
Reteplase, the recombinant type of novel tissue plasminogen activator (t-PA) variant, is a promising thrombolytics in clinics. Expressed in the form of an inclusion body, reteplase consists of about 40 % of the total ... Reteplase, the recombinant type of novel tissue plasminogen activator (t-PA) variant, is a promising thrombolytics in clinics. Expressed in the form of an inclusion body, reteplase consists of about 40 % of the total intracellular proteins of Escherichia coli. The recombinant human protein disulfide isomerase (rhPDI) is used to increase the chance for the correct matching of the 18 hydrosulfide groups of the reteplase molecule in the renaturation process and it increase is the reteplase renaturation yield from 1%~2% to 15%~20% with a the purity aboue 99% and the specific activity of 5(105 IU/mg is reached. This novel method can reduce significantly the cost of production. 展开更多
关键词 人体组织 血浆酶原催化剂 硫蛋白异构酶 重建 复活产量 心脑血管疾病 溶血栓剂
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蛋白质组学在结肠癌研究中的进展
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作者 吴傲(综述) 张丽军(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期224-229,共6页
结肠癌的诊断及治疗一直是医疗界的难题。近年有关结肠癌差异蛋白质的研究越来越多,运用蛋白质组学技术发现癌症组织中的差异蛋白质,并研究其在癌症中的功能及作用,从而用于癌症的诊断和治疗,已成为一种新的趋势。本课题组前期通过蛋白... 结肠癌的诊断及治疗一直是医疗界的难题。近年有关结肠癌差异蛋白质的研究越来越多,运用蛋白质组学技术发现癌症组织中的差异蛋白质,并研究其在癌症中的功能及作用,从而用于癌症的诊断和治疗,已成为一种新的趋势。本课题组前期通过蛋白质组学技术发现乳腺癌相关耐药蛋白2(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)和蛋白质二硫异构酶A2(protein disulfide-isomerase A2,PDIA2)两种结肠癌差异蛋白质,本文对这两种蛋白质在结肠癌中的表达及功能作一综述。 展开更多
关键词 结肠癌 差异蛋白 乳腺癌相关耐药蛋白2 蛋白质二异构酶A2
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