3-酮硫裂解酶基因phbA的克隆、序列分析及功能检测

用聚合酶链式反应扩增并克隆了真养产碱杆菌 (Alcaligeneseutrophus)中合成聚 β 羟基丁酸酯 (PHB)的一个关键酶——— 3 酮硫裂解酶基因phbA .DNA序列分析表明 ,所克隆的基因与国外报道序列同源性很高 ,只有 1个碱基的区别 .为了检测该基因的功能及导肽的定位效率 ,构建了带有导肽基因的组成型表达载体 ,并转化烟草得到转基因植株 .蛋白质电泳结果表明 ,导肽可以将外源蛋白定位于质体 ,phbA基因能翻译成相应大小的蛋白 .酶活性分析证实 ,转基因烟草中的 3 酮硫裂解酶可以催化乙酰 CoA合成乙酰乙酰 CoA .

SCWO处理轮胎裂解脱硫废液的响应面法优化

采用超临界水氧化(SCWO)法处理废旧轮胎热解过程中产生的脱硫废液,利用响应面法对处理过程中的主要影响因素进行了优化,并通过中心复合设计(CCD)建立了COD去除率的二次回归模型。将实测值与根据模型计算的预测值进行对比,结果表明,以模型代替真实实验点对实验结果进行分析具有较高的可靠性。

胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在小鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系

目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在脑缺血/再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系。方法采用双侧颈总动脉结扎制备小鼠脑缺血/再灌注损伤模型,激光散斑法检测脑血流量,HE染色法观察脑海马组织病理学变化,检测LDH、NSE、RhoA和ROCK_(2)活性及H_(2)S含量和ROCK_(2)蛋白表达。结果H_(2)S合酶CSE底物L-Cys(300 mg·kg^(-1))可明显促进脑I/R小鼠脑血流量的恢复,改善海马组织的病理损伤,抑制血清中LDH活性和脑组织中NSE、RhoA及ROCK_(2)活性的升高,并抑制血清H_(2)S含量的降低和脑组织中ROCK_(2)蛋白表达的增多。但L-Cys上述作用可被CSE合酶抑制剂PPG(50 mg·kg^(-1))明显地减弱;H_(2)S供体NaHS(4.8 mg·kg^(-1))也有与L-Cys相同的上述作用。结论CSE产生的H_(2)S对小鼠脑I/R损伤有保护作用,其作用可能与抑制RhoA-ROCK信号通路及增加脑血流量有关。

抗裂快凝快硬高贝利特硫铝酸盐水泥在无机人造石板中的应用研究

阐述了白色抗裂快凝快硬高贝利特硫铝酸盐水泥42.5、抗裂快凝快硬高贝利特硫铝酸盐水泥42.5为基材,添加级配石英砂,装饰骨料(装饰骨料可根据设计需要,采用钢化玻璃、贝壳、彩色砂石、玉石、玛瑙、金属等一种或几种材料搭配形成多种花色),高抗碱纤维,颜料,功能性助剂为原料,采用搅拌泵送、浇筑摊铺、铺设网布、定厚找平、打磨抛光的平模工艺方法制成装饰效果极佳的无机人造石板材的应用研究。对两种型号的高贝利特硫铝酸盐水泥分别在40%、45%、50%、55%掺量下浆料的抗折强度、抗压强度、尺寸变化率进行了试验对比;结合无机人造石板材在实际生产工程中的流变性能、24h吸盘吸附后对板材所产生的破坏临界强度、板材变形"落差"进行了研究。

硫化氢对离体大鼠急性缺血心肌心功能的影响

目的观察离体大鼠急性缺血心肌内源性硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶(H2S/CSE)体系的动态变化,研究H2S对急性心肌缺血损伤大鼠心脏功能,心肌组织H2S/CSE及心肌梗死体积的影响。方法应用Langendorff心脏灌注系统建立急性心肌缺血损伤模型。分别于相应时间点取材,取材前应用Powerlab/8s多导生理仪记录各组大鼠左室发展压(LVDP)、左室压力变化速率(±dp/dtmax);测定冠脉流量(CF);检测心肌组织中H2S含量及CSE活性;以Evan's蓝和TTC双染法检测心肌梗死体积。结果①与相应假手术组比较,缺血30 min、1、2、3、4 h组LVDP、±dp/dtmax、CF明显降低(P<0.01)。缺血30 min组H2S含量和CSE活性无明显变化,心肌组织无明显梗死灶,缺血1、2、3、4 h组H2S含量和CSE活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。缺血1h组可见明显梗死灶(P<0.01),缺血2、3、4 h组梗死体积明显增大(P<0.01);②与缺血4 h组比较,NaHS低、中、高剂量组LVDP、±dp/dtmax、CF明显升高(P<0.05或P<0.01),H2S含量和CSE活性均升高(P<0.05或P<0.01),NaHS中、高剂量组心肌梗死体积明显减小(P<0.01)。结论H2S与CSE参与了离体大鼠急性心肌缺血损伤。NaHS可增强急性缺血损伤心肌CSE活性,增加H2S含量,使心肌梗死体积缩小,提示H2S可改善急性心肌缺血损伤。

高温裂解高掺量胶粉改性沥青路用性能

为探究高温裂解高掺量胶粉(pyrolyzed high content crumb rubber,PHC)改性沥青混合料性能及沥青胶结料对混合料性能影响,本研究制备了PHC改性沥青及PHC/聚乙烯(PE)复合改性沥青,以基质沥青与胶粉改性沥青为对照,并在最佳油石比下成型AC-13型沥青混合料.采用流变学试验对沥青高低温性能进行测定,通过冻融劈裂试验、车辙试验、弯曲试验和疲劳试验对混合料水稳定性、高温稳定性、低温抗裂性和疲劳性能进行评价.结果表明,PHC显著提高沥青混合料水稳定性与抗疲劳性能,60℃时多应力蠕变回复(multiple stress creep recovery,MSCR)试验的蠕变回复率和不可恢复蠕变柔量与混合料动稳定度有较强相关性.沥青混合料累计车辙深度结果显示,PHC改性沥青混合料高温性能优于胶粉改性沥青混合料.采用PE对PHC复合改性后可大幅提高沥青及其混合料高温性能.采用破坏强度、破坏应变与应变能密度对混合料低温抗裂性进行评价,发现PHC改性沥青混合料低温性能远优于其他两种沥青混合料,PE对低温性能有负面影响.劲度模量、蠕变速率与破坏应变均有较强线性相关,相关系数分别大于0.87、0.95.

大鼠肝硬化形成中气体信号分子一氧化氮、一氧化碳对硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系的影响

目的:研究气体信号分子一氧化氮(NO)、一氧化碳(CO)在大鼠肝硬化中对硫化氢(H2S)/胱硫酶-γ-裂解酶(CSE)体系的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组)、肝硬化模型组(CIRM组)、肝硬化模型+左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)+锌原卟啉-Ⅸ(Znpp-Ⅸ)组(CIRM+L-NAME+ZnPP-Ⅸ组)。采用复合因素法建立大鼠肝硬化模型。运用敏感硫电极方法检测大鼠血浆中H2S的含量;应用免疫组织化学方法对大鼠门静脉(PV)上CSE蛋白进行定位及半定量分析;利用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)测定大鼠肝组织中CSE蛋白的表达量。结果:在大鼠肝硬化形成后,血浆H2S含量显著降低,CIRM组〔(134.49±12.25)umol/L〕与NC组〔(180.34±11.71)umol/L〕比较有显著性差异(P<0.01);门静脉上CSE蛋白的表达〔NC组、CIRM组分别为(139.19±1.13)、(153.68±0.90)〕及其在肝组织中的蛋白含量〔NC组、CIRM组分别为(159.30±1.37)、(121.72±1.61)〕显著降低(P<0.01);当外源性给予L-NAME、ZnPP-Ⅸ后,CIRM+L-NAME+ZnPP-Ⅸ组血浆H2S含量〔(160.81±6.79)u-mol/L〕显著高于CIRM组〔(134.49±12.25)umol/L,P<0.01〕,同时,CIRM+L-NAME+ZnPP-Ⅸ组门静脉上CSE蛋白的表达(148.72±1.39)及其在肝组织中的蛋白含量(142.79±1.13)显著高于CIRM组(P<0.01)。结论:在大鼠肝硬化形成中,NO、CO可以上调H2S/CSE体系。

内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢调控HepG2细胞凋亡(英文)

探讨内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢(CSE/H2S)对人肝癌HepG2细胞凋亡的调控作用。采用MTT法和台盼蓝染色法检测细胞增殖;亚甲基蓝法检测细胞内源性H2S的产生;PI/Hoechst双染法检测细胞凋亡;荧光探针法检测细胞内超氧阴离子及ROS水平;OxiSelect Total Glutathione Assay试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平;Western blotting检测activated-caspase 3、p-AKT和Nrf2表达。结果显示,CSE抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)和CSE siRNA可明显降低细胞内H2S水平,可呈剂量和时间依赖性地抑制HepG2细胞增殖。PAG和CSE siRNA均可明显增加HepG2细胞凋亡率以及细胞内超氧阴离子和ROS的水平,降低细胞内GSH水平。CSE siRNA引起的ROS水平升高及GSH水平降低可被重组质粒pcDNA 3.1/myc-His()-CSE恢复。CSE siRNA可促进caspase 3的活化,但不会影响p-AKT及Nrf2蛋白的表达。结果表明,内源性CSE/H2S系统可通过氧化应激调控HepG2细胞的增殖及凋亡。

超稳定Y型沸石为载体的新型Ni-Mo环境催化剂

The effects of boron on sulfided Ni Mo/γ Al 2O 3 catalysts have been studied. The addition of boron modifies the acidity of the acid sites and the active metal dispersion of the catalysts. USY(ultrastable Y type) zeolite supported Ni Mo enviromental catalyst has significantly high hydrocracking (HC) and hydrodesulfurization (HDS) activity.

内毒素血症中肝损伤与H_2S的关系及阳离子A的保护效应分析

本研究旨在探讨在内毒素血症中肝脏病理损伤与气体信号分子硫化氢(H2S)的关系及阳离子A(CA)的保护效应。试验将72只SD大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、ET致病组、CA保护组。3组动物经相应处理后分别在第3、4、8、12小时采集血清与肝脏作为检测样本,检测血清中ALT与AST水平变化,采用分光光度法检测肝脏中H2S生成率,采用原位杂交染色与图像分析检测肝脏组织中CSEmRNA的转录水平。结果显示,与对照组比较,ET组血清ALT与AST水平显著升高,CA保护组血清ALT与AST水平则显著低于ET组;ET能够使肝脏组织中H2S生成率显著升高,而CA保护组H2S生成率显著低于ET组;原位杂交图像分析可见ET上调肝脏组织中CSEmRNA的转录水平,而CA能够抑制这种上调效应。研究表明,在内毒素血症的肝脏病理损伤过程中,CSEmRNA的转录水平与H2S的生成率上调,而CA则下调肝脏组织中H2S的水平从而对肝脏损伤发挥了保护作用。

不同月龄大鼠阴茎海绵体内CSE含量与勃起功能的相关性分析

目的:研究不同月龄大鼠阴茎海绵体内CSE(胱硫脒-γ-裂解酶)含量的变化与阴茎勃起功能之间的关系,探求勃起功能障碍发生的深层次原因。方法:2月龄、8月龄、16月龄及24月龄雄性Wistar大鼠分别10只,在相同环境下给予相同饲料喂养4周,用阿朴吗啡在每只大鼠的颈项背部行皮下注射后记录勃起次数。APO试验后测定每只大鼠的ICP/MAP。后测定各组大鼠阴茎海绵体组织内CSE的含量。结果:随着月龄的增加,各组大鼠阴茎勃起次数减少,5V电刺激下ICP/MAP的平均比值逐渐降低,阴茎海绵体内CSE的含量逐渐降低;阴茎海绵体内CSE的含量和相应的5V电刺激下ICP/MAP值之间均呈正相关。结论:随着月龄的增长,大鼠阴茎勃起功能逐渐减弱,与此同时,阴茎海绵体内CSE的含量逐步降低,这说明增龄中勃起功能障碍发生的原因之一可能是阴茎海绵体内源性CSE含量降低,导致因阴茎生成H2S量减少。

一种改进的方法提取白头鹤粪便DNA

现有的粪便DNA提取方法通用性不好,DNA纯度不高不适用于白头鹤等水鸟,本研究探索一种改进的硫氰酸胍裂解法。通过线粒体DNA细胞色素b、控制区基因和微卫星DNA的PCR扩增及线粒体DNA控制区序列的测定,经琼脂糖凝胶电泳检测以及测定序列显示,提取的DNA模板纯度高,效果很好,证实改进方法的可靠性、有效性。为其他濒危水鸟的非损伤取样提供了新的材料和方法,为其保护遗传学的研究提供一定的新技术。

全国各地清理统计报表情况报道

截至十月底,根据各大区各省市统计局报告,各地清理报表工作,业已普遍展开.除中南区个别省市因布置较迟,可能延至十二月份始能结束外,其他省市均可于十一月份基本结束.兹将情况报道如下:

在贯彻一九五三年工业年报中的几点经验

在一九五三年全国国营、地方国营及公私合营工业年报工作中创造和积累了不少的经验.现将这些经验中的主要几点介绍出来,以供贯彻一九五四年工业年报时参考.