N-乙酰半胱氨酸对肝缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4表达的影响

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对肝缺血再灌注(ischemic reperfusion,I/R)损伤大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。方法：Wistar大鼠随机分为3组：假手术组(P)、I/R组、I/R+NAC组。P组只开腹不阻断肝血流,另2组阻断大部肝血流后再灌注,其中I/R+NAC组再灌注前5 min尾静脉给予300 mg/kg NAC。各组分别检测不同时间点的血丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、脂多糖(LPS)与肝组织TLR4 mRNA及其蛋白。结果：在各时间点,P组血ALT,AST,LPS和肝绍织TLR4表达无显著差异；另2组较P组均有显著升高,但I/R+NAC组各指标升高低于I/R组。肝组织TLR4 mRNA表达在I/R组从3 h起显著增强并维持高表达,而I/R+NAC组各时相无显著变化；但两者TLR4蛋白表达变化类似,都在6,24 h表达显著增强。结论：LPS及其TLR4参与了I/R肝损伤的病理过程；NAC减弱肠源性LPS及其启动的TLR4炎症信号通路而保护缺血再灌注肝损伤。

N-乙酰半胱氨酸对高糖合并缺血缺氧小胶质细胞中Toll样受体4通路的作用研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高糖合并缺血缺氧小胶质细胞中Toll样受体4(TLR4)通路的作用。方法体外培养小胶质细胞,分为7组:正常组、对照组、高糖组、模型组、NAC组、NAC高糖组和NAC模型组(后3组加NAC 1mmol/L干预),分别在不同的培养液、正常培养箱或缺氧培养箱培养12h建立体外细胞模型。采用TUNEL染色观察小胶质细胞凋亡的病理变化,采用RT-PCR检测各组细胞TLR4通路中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平。结果对照组、高糖组和模型组较正常组小胶质细胞凋亡率显著升高(0.36±0.03、0.33±0.02、0.37±0.02 vs 0.15±0.02,P<0.05),NAC组、NAC高糖组和NAC模型组较对照组、高糖组和模型组小胶质细胞凋亡率显著下降(0.20±0.02 vs 0.36±0.03,0.21±0.02 vs 0.33±0.02,0.22±0.02 vs 0.37±0.02,P<0.05),仅高糖组与NAC高糖组MyD88无明显差异(P>0.05),NAC组、NAC高糖组和NAC模型组TLR4,MyD88,NF-κB,IL-1βmRNA表达较对照组、高糖组和模型组明显降低(P<0.05)。结论NAC可以减轻高糖及缺血缺氧对小胶质细胞的损伤,其机制可能与抑制TLR4炎症相关通路有关。

人急性胰腺炎早期外周血单核细胞Toll样受体4表达变化

目的探讨人急性胰腺炎早期外周血单核细胞(peripheral blood monocytes,PBMCs)表面Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)表达变化。方法发病24 h内入院的早期急性胰腺炎患者30例,采集入院当天及第3、7 d外周血及20名正常志愿者外周血,分离单核细胞。用流式细胞仪检测单核细胞表面TLR4、CD14表达变化情况。同时检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)等指标,研究它们之间的相关性。结果急性胰腺炎患者PBMCs表面TLR4发病后表达上调,1周左右恢复正常。TNF-α的变化与TLR4变化一致。结论人急性胰腺炎早期可能通过先天性免疫门户蛋白TLR4激活单核巨噬细胞系统导致TNF-α等促炎细胞因子的产生和释放。

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探究N-乙酰半胱氨酸对肺气肿大鼠的干预效果

目的基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88/核转录因子(NF)-κB信号通路探讨N-乙酰半胱氨酸对肺气肿大鼠的影响。方法选取60只大鼠,按照整群随机法分为对照组、模型组、N-乙酰半胱氨酸低剂量组、高剂量组各15只,模型组、N-乙酰半胱氨酸低剂量组、高剂量组建立肺气肿模型。建模成功后N-乙酰半胱氨酸低剂量组灌胃给予N-乙酰半胱氨酸片100 mg,3次/d,N-乙酰半胱氨酸高剂量组灌胃给予N-乙酰半胱氨酸片200 mg,3次/d,对照组、模型组采用等剂量的生理盐水灌胃,连续给药2 w。对比分析4组肺气肿相关征象:平均肺泡面积(MAA)、肺泡平均内衬间隔(MLI);肺功能指标:气道阻力(AR)、肺动态顺应性(Cdyn)、峰流速值(PEF);肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;TLR4/MyD88/NF-κB信号通路情况。结果与对照组相比,其余3组MAA、MLI、AR、IL-6、TLR4、MyD88、NF-κB水平显著升高,Cdyn、PEF、IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,N-乙酰半胱氨酸低剂量组及高剂量组MAA、MLI、AR、IL-6、TLR4、MyD88、NF-κB水平显著降低,Cdyn、PEF、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与N-乙酰半胱氨酸低剂量组相比,N-乙酰半胱氨酸高剂量组MAA、MLI、AR、IL-6、TLR4、MyD88、NF-κB水平显著降低,Cdyn、PEF、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸能改善大鼠肺气肿症状,抑制肺部炎症感染,其机制可能与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。

乙酰水杨酸姜黄素酯通过TLR4/NF-κB通路拮抗LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症损伤

目的研究乙酰水杨酸姜黄素酯(curcumin acetylsalicylate,CA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症的改善作用及机制。方法应用Discovery Studio分子模拟软件将CA与核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、胰岛素诱导基因2(nsulin inducible gene 2,Insig2)、Wnt信号蛋白(Wnt)、尼曼匹克C1型L1(Niemann-Pick C1 like 1,NPC1-L1)、Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)和Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)蛋白进行分子对接,筛选出结合紧密的蛋白。将BV2小胶质细胞分为对照组、模型组、CA干预组。对照组不做处理;模型组加入10 mg/L的LPS作用24 h;CA干预组加入20、40、60μmol/L的CA作用2 h后,加入10 mg/L LPS作用24 h。CCK-8法检测CA对BV2小胶质细胞增殖的影响;ELISA法检测细胞TNF-α、IL-1β;Griess法检测细胞分泌NO的水平;Western blot法检测iNOS、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκB-α、p-IκB-α、TLR4和MYD88蛋白的表达。结果与对照组比较,在0~80μmol/L浓度范围内,CA干预组细胞存活率无显著性差异(P>0.05)。与对照组比较,模型组细胞TNF-α、IL-1β、NO水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,CA干预组细胞TNF-α、IL-1β、NO水平明显下降(P<0.05)。与对照组比较,模型组的p-NF-κB水平升高(P<0.05);与模型组比较,CA干预组降低p-NF-κB水平(P<0.05)。与对照组比较,模型组的TLR4、MYD88的蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,CA干预组的TLR4、MYD88的蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论CA能有效抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,其作用可能与其抑制NF-κB/TLR4信号通路有关。

人急性胰腺炎早期外周血单核细胞Toll样受体4及CD14表达变化

目的探讨人急性胰腺炎早期外周血单核细胞(peripheral blood monocytes,PBMCs)表面Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)、CD14表达变化。方法收集发病24 h内入院的早期急性胰腺炎病人36例,采集入院当日及第3、第7日外周血,分离单核细胞。用流式细胞术检测单核细胞表面TLR4、CD14表达变化情况。同时检测血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、白细胞介素6(interlelakin 6,IL-6),研究它们之间的相关性。结果急性胰腺炎病人外周血单核细胞表面TLR4发病后表达上调,在轻症病人渐下降,1周左右恢复正常。TNF-α的变化一致。结论人急性胰腺炎早期可能通过先天性免疫门户蛋白TLR4激活单核巨噬细胞系统导致TNF-α等促炎细胞因子的产生和释放。

急性心肌梗死患者外周血TLR4、HPSE表达及其临床意义

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者外周血Toll样受体4(TLR4)、乙酰肝素酶(HPSE)的表达及其临床意义。方法:选取2019年1月-2021年1月本院收治的60例急性心肌梗死(AMI)患者纳入AMI组,选取同期于本院接受治疗的不稳定型心绞痛(UAP)患者60例作为UAP组,另选取同期于本院因出现胸痛不适,经一系列检查后排除冠心病患者60例作为对照组。比较三组外周血TLR4、HPSE水平及冠状动脉病变程度(Gensini积分),并采用Pearson相关系数对上述指标进行相关性分析。结果:AMI组TLR4、HPSE水平及Gensini积分均>UAP组>对照组,三组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性检验结果显示,AMI患者外周血TLR4、HPSE水平均与Gensini积分呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:AMI患者外周血TLR4、HPSE呈高表达,且与冠状动脉病变程度密切相关,可为临床AMI患者病情评估提供参考依据。

N-乙酰半胱氨酸对脓毒症性急性肾损伤TLR4信号通路的影响

目的探讨TOLL样受体4(TLR4)信号通路在大鼠脓毒症性急性肾损伤(sepsis-induced AKI,S-AKI)中的作用机制,及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制造脓毒症模型。将SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham组,S组)、脓毒血症组(CLP组)和NAC干预组(NAC+CLP组),每组18只,分别在术后6、12和24h观察以下各指标:苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色光镜下观察各组大鼠肾脏组织结构改变,免疫组化染色(SP法)检测TLR4动态表达水平,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)水平动态变化。结果与CLP组比较,NAC+CLP组肾脏组织结构改善,TNF-α、IL-1为表达水平下降。肾组织免疫组化染色显示TLR4主要在肾小管细胞胞质表达,肾小球几乎不表达,CLP组较S组表达增强,NAC+CLP组表达则较CLP组减弱。结论NAC对S-AKI具有保护作用,其机制可能为抑制TLR4信号通路,降低血清前炎症介质TNF-α、IL-1水平,进而抑制炎症反应;调节TLR4信号通路可成为防治S-AKI的新靶点。

N-乙酰半胱氨酸对大鼠肝缺血-再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对肝缺血-再灌注损伤的保护作用及机制。方法60只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(P组),只开腹不阻断肝血流,I/R组和I/R-NAC组均阻断大鼠肝70%的血流,45min后恢复再灌注,其中I/R-NAC组再灌注前5min经尾静脉注射NAC300mg/kg。在再灌注后1、3、6、24h时,采取血液及肝组织,分别检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、脂多糖(LPS)、Toll样受体4(TLR4)mRNA及其蛋白的表达。结果I/R组和I/R-NAC组ALT、AST及LPS的含量均在6h达高峰,但组内在各时间点比较,ALT、AST及LPS含量的差异并无统计学意义(P>0.05);I/R组同一时间点的ALT、AST及LPS含量均高于I/R-NAC组(P<0.05)。I/R组肝组织TLR4mRNA的表达从再灌注3h起明显增强(P<0.01),并维持高表达,而I/R-NAC组TLR4mRNA的表达在各时间点无显著变化(P>0.05)。I/R组和I/R-NAC组TLR4蛋白表达在再灌注1、3h时类似于P组,但在6、24h时显著增强。结论TLR4参与了肝缺血-再灌注损伤的病理过程,NAC可通过抑制TLR4mRNA表达而减弱肠源性内毒素血症对肝脏的损伤。

人类疱疹病毒7型感染机制的研究进展

人类疱疹病毒7型能感染以CD4^+T细胞为主的多种组织和细胞。人类疱疹病毒7型和人类疱疹病毒6型一样,主要引起婴幼儿急疹、玫瑰糠疹等疾病。CD4、硫酸乙酰肝素是人类疱疹病毒7型已知的主要受体,CXCR4可能是协同受体。由于与人类免疫缺陷病毒有共同受体,人类疱疹病毒7型在人类免疫缺陷病毒防治研究中具有重要意义。

木犀草素对反复尿路感染大鼠模型尿路上皮屏障的影响

目的探究木犀草素对反复尿路感染大鼠模型尿路上皮屏障的影响.方法选取SPF级SD雌性大鼠45只,其中空白组、模型组、低剂量组、高剂量组各10只;空白组、模型组只进行生理盐水灌胃,不做其他任何处理,低剂量组在模型组的基础上给予木犀草素10 mg/kg灌胃,高剂量组给予40 mg/kg灌胃;检测尿量、尿白细胞水平、炎症因子、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、尿乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平、尿路上皮屏障功能情况及Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路相对表达量.结果与空白组比较,模型组、低剂量组、高剂量组尿量情况、E黏钙蛋白(E-cadherin)、闭合小带蛋白-1(ZO-1)水平降低,尿白细胞、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、SIg A、NAG水平、TLR4、NF-κB相对表达量均升高(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、高剂量组,尿量、E-cad-herin、ZO-1水平升高,尿白细胞、IL-6、IL-8、SIgA、NAG、TLR4、NF-κB相对表达量均降低(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组尿量、E-cadherin、ZO-1水平升高,尿白细胞、IL-6、IL-8、SIgA、NAG、TLR4、NF-κB相对表达量均降低(P<0.05).结论木犀草素能对反复尿路感染大鼠尿路上皮屏障情况进行改善,减轻炎症情况,提高排尿功能,调节免疫功能,通过调节TLR4/NF-κB信号通路能反映出对反复尿路感染的干预效果.