硫酸核糖霉素及新霉胺的反相高效液相色谱分析

我国核糖霉素(Ribostamycin,Vista-mycin)于1984年正式投产,并用于临床。产品中常含有少量的新霉胺,由于抗菌活性和毒副作用的差异,控制核糖霉素中新霉胺的含量是十分必要的。目前。

HPLC-ELSD法测定硫酸核糖霉素的含量和有关物质

目的建立硫酸核糖霉素含量和有关物质的分析方法，为该类药提供质量控制标准。方法应用高效液相色谱．蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）法测定硫酸核糖霉素含量和有关物质。采用Agela Technologies Venusil ASB-C18 15nm（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相为0．11mol／L七氟丁酸酐混合溶液[称取七氟丁酸酐45．1g，置1000mL量瓶中，加乙腈-四氢呋喃-水（8：5：87）混合溶液溶解并稀释至刻度，摇匀]，流速为0．8mL／min，漂移管温度为110℃，雾化气体流速为3．0L／min。结果在选定色谱条件下，核糖霉素和有关物质分离良好。核糖霉素在0．34～2．68μg范围内进样量对数与峰面积对数间呈较好的线性关系（r=0．9988），最低检出量为68ng。结论方法快速、简便，结果准确可靠，重现性好，可用于含量测定和有关物质检测。

硫酸核糖霉素在缓冲液和常用注射液溶媒中的稳定性

本文用经典恒温加速试验法,考察了硫酸核糖霉素在pH6.68磷酸缓冲液中的稳定性,通过微生物效价测定,结果表明:分解活化能E=7.622 kcal·mol^(-1),K_(25c)=5.368×10^(-4)h^(-1)。当60℃时,5%葡萄糖输液中的核糖霉素效价在6h内迅速下降,而在生理盐水和灭菌注射用水中的核糖霉素效价经144h无明显下降。

旋光度法测定硫酸核糖霉素及其注射液的含量

目的：建立测定硫酸核糖霉素及其注射液含量的旋光度法。方法：在室温下、pH4．5～6．5范围内将硫酸核糖霉素或其制剂用蒸馏水适当稀释，即可用旋光光度计测定。结果：线性范围为5000～40000u／ml，回归方程为α＝0．655C＋0．029，r＝0．9999，平均回收率为99．2％，RSD为0．21％（n＝5）。结论：注射液pH值、温度、时间等因素对测定影响甚微。方法便捷、可靠，可用于硫酸核糖霉素注射液中间体含量的快速测定。

硫酸核糖霉素分子式中硫酸数目的确定及控制方法的比较

目的:为了确定硫酸核糖霉素分子式中硫酸的数目,并选择适合的方法控制其硫酸盐的含量。方法:建立了高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)对硫酸核糖霉素的硫酸盐(SO4)含量进行测定,并开发出了同样适用的离子色谱电导法(HPIC-CD)进行结果比对。同时采用《中国药典》方法测定硫酸核糖霉素的酸碱度。结果:HPLC-ELSD法,硫酸盐(SO4)在15～250μg·mL-1范围内线性良好,检测限和定量限分别为0.16μg和0.25μg,回收率为101.1%;HPIC-CD法,硫酸盐(SO4)在20～180μg·mL-1范围内线性良好,检测限和定量限分别为0.17 ng和0.50 ng,回收率为99.8%。结论:两种硫酸盐测定方法,专属性强,灵敏度高,重复性好,测定结果无显著性差异,分子式中硫酸的数目约为1.5,进一步发现,硫酸盐含量和溶液pH值呈显著负相关,并具有一定的线性关系,酸碱度检查可以控制硫酸盐的含量。

高效液相色谱法考察硫酸核糖霉素中新霉胺的稳定性

目的:考察硫酸核糖霉素(原料药)中杂质新霉胺的稳定性。方法:色谱柱为C18,流动相为水-冰醋酸-甲醇(25∶5∶70)配制的0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液,流速为1.0ml/min,紫外检测波长为330nm。结果:将试验数据进行配对t检验(α=0.05),新霉胺杂质在60℃高温、强光照射条件下试验前后差异具有显著性意义;在40℃高温、高湿度条件下,试验前后差异无显著性意义。结论:新霉胺杂质在60℃高温、强光照射条件下不稳定;在40℃高温、高湿度条件下稳定。

硫酸核糖霉素与甲硝唑注射液配伍的稳定性

报道了硫酸核糖霉素与甲硝唑注射液配伍的稳定性试验。结果表明在室温条件下（20-C），24h内配伍药液外观、pH值，含量均未发生明显变化。关键词##4硫酸核糖霉素;;甲硝吐;;配伍;;

标准曲线法测定注射用硫酸核糖霉素的抗生素效价

目的 :探讨用标准曲线法测定注射用硫酸核糖霉素的抗生素效价。方法 :利用标准曲线法测定其效价,与《中华人民共和国药典》(2015年版)四部规定用抗生素微生物检定法二剂量法测定其效价进行比较。结果 :标准曲线法测定其浓度在3.2~7.81 U/m L范围内菌圈清晰,标准品所致抑菌直径平均值的校正值与抗生素浓度对数线性关系良好(r^2=0.998 7)。结论:本法与二剂量法比较,结果无显著性差异、准确,重复性好。

旋光法测定硫酸核糖霉素注射液中间体的含量

运用旋光法对硫酸核糖霉素注射液进行含量测定,并与微生物法进行对照,表明该法有操作简便、迅速、重现性好等优点,可适用于药厂生产中间体的快速分析。

硫酸核糖霉素提炼工艺的研究

核糖霉素是一种新的氨基糖苷类抗生素。其特点是耳、肾毒性甚低,为目前已发现所有的氨糖类抗生素中毒性最低的一个。注射用硫酸核糖霉素已于1972年在日本首先市售。至1979年。

旋光法快速测定注射用硫酸核糖霉素的效价

将硫酸核糖霉素及其制剂用蒸馏水适当稀释,即可用旋光光度计测定。结果显示,溶液的pH值、温度、时间等因素对测定影响甚微。据此建立的测定硫酸核糖霉素及其制剂效价的旋光度法便捷、可靠,可用于硫酸核糖霉素企业中间品控制或企业内控方法,并且可作为快速检验方法之一,用于监督抽验药品初筛和快检。

硫酸核糖霉素杂质谱的在线膜脱盐LC-Orbitrap HRMS研究

目的 建立硫酸核糖霉素杂质谱的在线膜脱盐液相色谱-静电轨道阱质谱(LC-Orbitrap HRMS)研究方法,消除流动相中三氟乙酸等对电喷雾离子化的抑制作用。方法 采用Thermo Aminoglycoside (RP_(18) 4.6 mm×150 mm, 3μm)色谱柱,以体积分数0.20%五氟丙酸0.15%三氟乙酸溶液-乙腈(99∶1)为流动相1 mL·min^(-1)等度洗脱,柱后分流(3∶2)电喷雾正离子化质谱检测。采用在线膜脱盐消除流动相中五氟丙酸和三氟乙酸对电喷雾离子化的抑制作用。结果 测得硫酸核糖霉素中11个有关物质,经质谱解析推测了其结构,分析确定其来源主要为合成中间体、副产物或降解杂质。结论 研究结果可为硫酸核糖霉素质量控制提供参考。

HPLC-CAD法测定硫酸核糖霉素有关物质及含量

目的:建立用于测定硫酸核糖霉素有关物质及含量的高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法,优化补充2020年版《中华人民共和国药典》方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.15%(v/v)五氟丙酸+0.2%(v/v)三氟乙酸-甲醇(95∶5)作为流动相,流速1.0 mL·mL^(-1),柱温40℃;电喷雾检测器温度50℃。结果:所建立方法使核糖霉素及其有关物质实现良好分离,核糖霉素质量浓度在2~200μg·mL^(-1)范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9983),检测限(LOD)为0.8μg·mL^(-1),定量限(LOQ)为2μg·mL^(-1),重复性和精密度试验RSD均<2.0%。HPLC-CAD法测定硫酸核糖霉素及有关物质含量为0.81%~1.02%、74.64%~75.22%。结论:相比于2020年版《中华人民共和国药典》硫酸核糖霉素的检测方法,该方法专属性强,灵敏度和稳定性好,为硫酸核糖霉素质量控制提供了可靠的分析手段。

高效液相色谱-脉冲安培检测法测定硫酸核糖霉素含量及有关物质

目的建立高效液相色谱-脉冲安培检测法(HPLC-PAD)测定硫酸核糖霉素的含量和有关物质。方法采用Thermo Acclaim^(TM)AmG C_(18)(4. 6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,以0. 2%(V/V)五氟丙酸溶液[含0. 15%(V/V)三氟乙酸,用50%(m/m)氢氧化钠溶液调节pH值至1. 5]-乙腈(99∶1)为流动相,脉冲安培检测器,四电位检测波形,检测器温度35℃,进样体积为25μL。结果所建方法使核糖霉素及其有关物质良好分离,核糖霉素的检出限为0. 15μg·m L^(-1)(3. 75 ng),定量限为0. 375μg·m L^(-1)(9. 38 ng),在0. 15～40μg·m L^(-1)内,核糖霉素的浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0. 999 3),含量测定重复性RSD(n=6)为0. 33%,总杂质测定重复性RSD(n=6)为1. 10%。结论该方法专属性强,灵敏度高,稳定好,检验成本较现行Ch. P 2015方法显著降低,有望实现方法替代。

国产注射用硫酸核糖霉素质量评价

目的:采用法定检验与探索性研究相结合的方法对国产注射用核糖霉素质量现状及存在问题进行评价。方法:采用现行标准对抽验样品进行法定检验;建立并完善用于探索性研究的多个方法:(1)建立ELSD、CAD和PAD法测定有关物质及含量;采用在线膜抑制脱盐技术辅助LC-Orbitrap HRMS研究本品杂质谱;采用豚鼠模型和斑马鱼胚胎模型,以及纸片扩散和常量肉汤稀释法分别测定主药和相关物质的毒性以及体外抗菌活性;(2)制备精制品,采用质量平衡法测得其纯度,管碟法测得其效价,建立量效转换桥接关系;(3)建立HPLC-ELSD法及HPIC-CD法测定硫酸核糖霉素中硫酸盐含量;(4)综合应用多种现代分析技术优化干燥失重(或水分)测定条件;等等。结果:法定检验显示,本次抽验样品所有批次均符合标准规定;新建立的3种有关物质和含量测定方法,在灵敏度、专属性、重复性及检验经济学等方面均优于法定方法;杂质谱研究结果显示,注射用硫酸核糖霉素有个10潜在杂质,结合毒理实验与抗菌活性显示,有必要在标准中对新霉胺单独控制;测定得到量效转换系数为991 u·mg^-1,验证结果显示,该系数可实现量效方法转移的要求;HPLC-ELSD法测定硫酸盐结果被HPIC-CD法验证,酸碱度与硫酸盐含量呈负相关,分子式中硫酸个数为约为1.5;干燥失重研究显示,60℃减压干燥6 h较科学。结论:目前国产注射用硫酸核糖霉素制剂工艺较为稳定,总体质量较好;现行注射用硫酸核糖霉素质量标准存在缺陷,有待完善。

硫酸核糖霉素注射液含量测定方法研究

硫酸核糖霉素是氨基糖甙类抗生素,目前部颁标准,采用微生物法测定其含量,该方法比较费时,不便于生产过程中的质量控制和医院药房的快速检验。 1 仪器与试剂: 日本岛津UV-210A型分光光度计 核糖霉素标准品由上海市药品检验所提供,批号:870811-1效价673μ/mg。