大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白－2 mRNA水平的生后变化

对大鼠睾丸支持细胞硫酸糖蛋白－２ｍＲＮＡ水平生后变化的动态观察发现，大鼠生后２ｄ睾丸支持细胞即具有表达ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ的能力。以后随着出生时间的延长，睾丸ＳＧｐ－２ｍＲＮＡ水平不断增加，于生后２５ｄ达高峰。随后迅速下降，于出生４０ｄ降至最低点。出生４０ｄ之后，睾丸ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平再次呈现升高的趋势。本文对生后支持细胞ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平的变化和作用进行了讨论。

miR-5787通过靶向HSPG2基因对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响

目的观察微小RNA(miR)-5787在乳腺癌组织及多种乳腺癌细胞系中的表达,分析过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响并探讨其可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-5787在47例乳腺癌组织及癌旁组织、4种乳腺癌细胞系及正常乳腺上皮细胞中的表达。选择miR-5787表达最低的乳腺癌细胞系,分别转染miR-5787模拟物(实验组)和对照NC模拟物(对照组)。qRT-PCR检测两组细胞中miR-5787的表达。Transwell侵袭实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)分别检测过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响。生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-5787可配对结合的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测靶基因mRNA及蛋白的表达。结果与癌旁组织(5.05±0.82)相比,乳腺癌组织miR-5787的表达(1.32±0.33)明显降低(P<0.01)。与正常乳腺上皮细胞相比,4种乳腺癌细胞系miR-5787的表达均降低(P<0.05),HCC1937细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR-5787模拟物后,实验组HCC1937细胞中miR-5787的表达明显高于对照组(P<0.01),表明转染成功。过表达miR-5787可抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭(P<0.05)和增殖(P<0.05)。生物信息学软件预测miR-5787的靶基因可能是硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2),miR-5787可配对结合HSPG2 mRNA(P<0.01)。qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达miR-5787可明显抑制HSPG2蛋白和mRNA的表达(P<0.01),波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显降低(P<0.05)。结论乳腺癌组织和细胞系中miR-5787均呈低表达,过表达miR-5787通过靶向干扰HSPG2基因的表达,抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭和增殖。

胚胎期氟他胺暴露对SD大鼠支持细胞增殖和成熟的影响

目的:探讨胚胎期暴露于氟他胺(Flu)对SD雄性仔鼠睾丸支持细胞的影响。方法:将妊娠的SD大鼠随机分为Flu组和正常组,Flu组自妊娠后第12～21日每日皮下注射25 mg/kg Flu以建立生殖发育障碍模型,正常组不作任何处理。分别在雄性幼仔出生后第13日(PD 13)、PD15、PD 17随机颈椎脱臼法处死幼仔鼠,收集雄仔鼠睾丸组织。免疫组织化学检测雄仔鼠BrdU并计算支持细胞增殖指数,Real-time PCR检测各组雄仔鼠SGP-2基因的表达。结果:随着生长发育,正常组和Flu组雄仔鼠睾丸支持细胞增殖指数均呈下降趋势,PD 17正常组支持细胞增殖已经停止,Flu组PD 13、PD 15、PD 17支持细胞增殖指数升高,明显高于正常组(P<0.05)。PD13 Flu组支持细胞SGP-2 mRNA表达量较正常组无明显差异(P>0.05);PD 15、PD 17 Flu组支持细胞中SGP-2 mRNA表达量明显低于正常组(P<0.01)。结论:胚胎期Flu暴露导致支持细胞增殖期延长、成熟延迟,这可能是导致其生殖细胞发育障碍的重要原因之一。