魔芋葡甘低聚糖醛酸丙酯硫酸酯钠盐生物活性研究

为了研究低聚KGM醛酸丙酯硫酸酯钠盐的抗凝和抗栓作用,应用玻片法研究了对小鼠凝血时间的影响;应用大鼠体外颈动脉 -颈静脉血流动旁路法形成血小板血栓模型研究了其对血栓形成的影响;并进行了对兔凝血活酶时间(PT)和纤维白原(Fg)的影响的研究。结果表明剂量在 0.9- 3.6g/kg时,能明显延长小鼠的纤维蛋朱含量效果显著,其LD50 为 8.8lg/kg。说明该物质具明显的高凝血和抗血栓作用,毒性极微。

N-乙酰半胱氨酸对硫酸葡聚糖钠诱导的实验性肠炎的预防及治疗作用

目的:探讨还原型巨噬细胞诱导剂N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)对硫酸葡聚糖钠(Dextran Sodi- um Sulphate,DSS)诱导的小鼠实验性肠炎的预防及治疗作用。方法:建立DSS实验性小鼠肠炎模型,NAC及氧化型巨噬细胞诱导剂N,N’-联乙(?)-L-胱氨酸(N,N’-diacetyle-L-cystine,(NACOMe)2)在致模前后腹腔注射;检测腹腔巨噬细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的变化;对结肠进行病理学评价,并检测结肠IL-4、IFN-g的表达。结果:NAC预处理组:结肠长度和病理学指标均优于其他预处理组,腹腔巨噬细胞内GSH及GSH/GSSG升高;结肠分泌的IL-4、IFN-γ明显降低。NAC治疗组:体重增加程度明显高于其它治疗组,结肠炎症及黏膜损伤较轻,腹腔巨噬细胞内GSSG明显减低,GSH和GSH/GSSG升高,病变结肠分泌的IL-4、IFN-γ明显降低。结论:还原型巨噬细胞诱导剂NAC可以通过诱导巨噬细胞内GSH产生增多从而减轻实验性肠炎的黏膜损伤及临床症状,对DSS诱导的实验性肠炎有一定的预防及治疗作用。

瑞巴匹特预防葡聚糖硫酸酯钠诱发的小鼠结肠炎疗效观察及作用机制初探

目的近年氧自由基在溃疡性结肠炎(UC)发病过程中作用受到关注,一种新型的黏膜保护剂瑞巴匹特被认为具有清除氧自由基的作用,有望成为治疗溃疡性结肠炎的新药物。本文观察瑞巴匹特灌肠和灌胃治疗葡聚糖硫酸酯钠(DSS)诱发的小鼠结肠炎效果并探讨可能的作用机制。方法 3%DSS予8周龄雄性BALB/c小鼠自由饮用7 d制成小鼠结肠炎模型。予DSS前5 d开始瑞巴匹特(45 mg/kg/d)灌肠或灌胃治疗直到造模结束,处死小鼠取结肠组织,测量小鼠体重、结肠长度,进行大体和病理评分,分光光度法测定髓过氧化物酶、丙二醛含量,免疫组化法测定核因子κB(NFκB)表达水平,RT-PCR法测定过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)mRNA表达。结果与安慰剂对照组比较,瑞巴匹特灌肠和灌胃治疗组小鼠大体和病理评分显著改善,髓过氧化物酶活性、丙二醛含量、NFκB活性明显降低,PPARγmRNA的表达显著升高。结论瑞巴匹特可有效预防DSS诱发的小鼠结肠炎,其抑制炎症作用至少部分与清除氧自由基,从而维持局部PPARγ表达和抑制NFκB活性有关。

发酵黑麦糠对右旋葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎的保护作用

背景:溃疡性结肠炎是一种病因和发病机制尚不明确的结肠黏膜和黏膜下层慢性炎症。体内外试实验表明,发酵黑麦糠可抑制幽门螺杆菌(H.pylori)对胃黏膜的黏附作用,从而保护小鼠免受H.pylori感染。目的:明确发酵黑麦糠是否对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎有保护作用。方法:以3.5%DSS诱导小鼠产生结肠炎,部分小鼠同时加用发酵黑麦糠,观察结肠炎小鼠的临床表现(体重下降情况、直肠出血情况和有无腹泻)和结肠黏膜的组织学改变。结果:DSS+发酵黑麦糠组小鼠结肠炎起病晚、症状轻,在观察期内无一例出现腹泻;组织学检查和评分结果亦显示该组小鼠结肠黏膜炎症较DSS组轻。结论:发酵黑麦糠对DSS诱导的小鼠结肠炎有保护作用,其具体作用机制尚有待进一步明确。

敲低Ube2w增加葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的易感性

目的探讨泛素结合酶(E2)W(UBE2W)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎性反应的影响。方法在小鼠成纤维细胞系L929中转染Ube2w siRNA(1#,2#,3#)不同干扰序列,Western blot检测UBE2W蛋白表达,选择干扰效果最佳的siRNA进行小鼠体内转染实验。给10只C57BL/6雄性小鼠随机尾静脉注射siRNA(siUbe2w/si-control),并用2.5%DSS喂养,构建两组DSS小鼠溃疡性结肠炎模型,即Ube2w敲低组和对照组各5只。通过Western blot和RT-qPCR检测小鼠结肠组织UBE2W的表达水平,观察两组小鼠的体质量,并通过组织学评分比较结肠炎性反应的严重程度。结果L929细胞转染后Ube2w siRNA2#抑制UBE2W蛋白表达最为明显,敲低Ube2w组小鼠结肠组织中UBE2W mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且Ube2w敲低组小鼠体质量丢失明显多于对照组,敲低组小鼠溃疡性结肠炎组织学评分为(8.60±0.24)分高于对照组(5.20±0.49)分(P<0.05)。结论UBE2W参与了炎性反应的调控过程,Ube2w敲低能够增加DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的易感性。

二安替比林甲烷共振瑞利散射法测定硫酸葡聚糖钠

采用共振瑞利散射法研究了二安替比林甲烷与硫酸葡聚糖钠的相互作用及其分析应用.在pH为10.0的Britton-Rob- inson缓冲溶液中,二安替比林甲烷与硫酸葡聚糖钠结合后共振瑞利散射急剧增强,最大散射峰在352nm处.研究了此反应体系的最佳实验条件以及共振瑞利散射光谱的特征,在最佳条件下,共振瑞利散射信号的增强与硫酸葡聚糖钠的浓度在0.05～1.5μg·mL^(-1)范围内成正比·检出限为17.0ng·mL^(-1),该法用于痕量硫酸葡聚糖钠的测定,灵敏,简便.

葡聚糖硫酸钠诱导体外溃疡性结肠炎的细胞损伤及细胞焦亡机制

目的:研究葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导体外溃疡性结肠炎的细胞损伤及细胞焦亡的机制。方法:取Caco-2细胞、NCM460细胞,用不同质量浓度(0、10、20、30、40、50、60、70 mg/mL)DSS处理0、24、48 h,通过CCK-8分别筛选两种细胞的IC50质量浓度,建立DSS诱导的体外溃疡性结肠炎细胞损伤模型;设置对照组、24 h组(DSS干预24 h)和48 h组(DSS干预48 h),倒置显微镜观察细胞膜完整性,流式细胞术分析细胞活力,蛋白免疫印迹检测细胞焦亡相关蛋白GSDMD和GSDME的表达水平。结果:CCK-8实验结果表明:DSS对Caco-2细胞、NCM460细胞的IC50质量浓度分别为10、40 mg/mL,分别以此质量浓度构建体外溃疡性结肠炎细胞损伤模型;与对照组相比,24 h组和48 h组的细胞膜完整性被破坏,细胞凋亡增加(P<0.05),活化的GSDMD-N、GSDME-N蛋白表达增加(P<0.05),而GSDMD-Full、GSDME-Full表达减少(P<0.05)。结论:DSS可诱导体外溃疡性结肠炎细胞发生损伤,损伤的肠上皮细胞中可发现细胞焦亡现象。

姜黄素对硫酸葡聚糖钠诱导的炎症性肠病小鼠损伤修复机制研究

为了研究姜黄素对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的炎症性肠病(IBD)小鼠的保护作用,试验将45只小鼠分为模型组、姜黄素治疗组、空白对照组,每组15只,模型组小鼠灌胃给予1%DSS构建IBD模型小鼠,姜黄素治疗组给予姜黄素,空白对照组给予等体积生理盐水。各组小鼠于末次给药24 h后摘眼球采血,脱颈椎处死小鼠并取胸腺、脾脏、结肠。称量胸腺和脾脏并计算胸腺指数与脾脏指数;H.E.染色观察肠黏膜损伤变化程度;ELISA法检测小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果表明:与模型组比较,姜黄素治疗组胸腺指数与脾脏指数显著升高(P<0.05),TNF-α表达水平极显著降低(P<0.01),IL-10表达水平极显著升高(P<0.01);通过姜黄素的治疗可减轻肠黏膜损伤程度。说明姜黄素可调整炎症因子TNF-α、IL-10表达水平,减轻DSS诱导的IBD小鼠的病变进程。

添加葡配甘露聚糖和HSCAS减轻霉菌毒素毒性的效果对比试验

在已知的霉菌毒素中，黄曲霉毒素、赭曲霉毒素和T-2毒素在家禽日粮中最为常见。黄曲霉毒素B1是最强的肝毒素和免疫抑制剂，据报道T-2毒素会引起肉鸡口腔损伤和采食量下降。

热灭活鼠李糖乳杆菌HN001对DSS诱导的小鼠结肠炎保护作用

为探讨热灭活鼠李糖乳杆菌HN001(HK-HN001)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的实验性小鼠结肠炎的保护作用,通过观察结肠长度、疾病活动指数、结肠病理改变、结肠组织氧化应激及促炎因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)表达以及结肠通透性、紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1和E-cadherin)的基因表达,系统研究了HK-HN001(200 mg/kg体质量)对DSS诱导的小鼠结肠炎的保护效果和作用机制。结果显示,HK-HN001对DSS诱导的小鼠结肠炎具有明显的保护效果。其能够有效缓解结肠长度缩短,降低疾病活动指数,减轻结肠组织的水肿、炎性细胞浸润,减轻结肠黏膜损伤,同时降低血清脂多糖水平以及恢复二胺氧化酶活力。进一步研究发现,HK-HN001能够抑制结肠组织的氧化逆境和促炎因子表达,以及调节紧密连接蛋白的转录表达水平。HK-HN001对DSS诱导的小鼠结肠炎有良好的保护作用,HK-HN001具有抗炎性肠病营养食品开发及应用的潜力。

水苏碱对葡聚糖硫酸钠诱导的炎性肠病的保护作用及其机制

为了研究水苏碱(stachydrine,Sta)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的保护作用及其机制.将42只同一批次、体重无明显差异的雄性C57BL/6J小鼠随机分为7组,即对照组(control)、模型组(model)、地塞米松(dexamethasone,DXM)组、水苏碱低中高剂量组(Low-Sta,Mid-Sta,High-Sta)以及水苏碱毒性组(Sta toxicity),每组6只.模型组、地塞米松组和水苏碱低中高剂量组采用DSS水溶液(0.03 g/mL)代替正常饮水进行造模,对照组和水苏碱毒性组采用正常饮水喂养.同时DXM组每天灌胃地塞米松水溶液(1 mg/kg),水苏碱低中高剂量组每天分别灌胃水苏碱水溶液(5、10和20 mg/kg),模型组和对照组每日灌胃等量的生理盐水,水苏碱毒性组每天灌胃高剂量(20 mg/kg)的水苏碱水溶液.7 d后处死小鼠,取各组小鼠结肠测量长度并进行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)和高碘酸希夫氏染色(periodic acid schiff reagent staining,PAS),观察结肠组织的病理改变以及对照组和水苏碱毒性组肝肾的病理变化;采用蛋白印迹技术(Western Blotting,WB)检测结肠组织中炎症相关蛋白白介素-6(IL-6),核因子-κB(NF-κB)和氧化应激相关蛋白如核转录因子2(NRF2)、血红加氧酶1(HMOX1)、醌氧化还原酶1(NQO1)和闭合蛋白(occludin)及膜周蛋白(zonula occludens,ZO)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中IL-6,IL-17a和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;采用流式细胞术检测结肠细胞中活性氧(ROS)阳性细胞的比例.结果显示:水苏碱毒性组小鼠的肝肾及小肠的HE染色结果与对照组相比未见灶性坏死,未见明显纤维化,未见细胞结构破坏及炎症,没有明显差别;与对照组比较,模型组小鼠的结肠长度明显缩短,并且HE结果显示模型组小鼠的肠隐窝结构破坏严重,黏膜下层出现明显的水肿以及炎细胞的浸润,PAS结果显示出模型组的糖蛋白含量显著降低,而在地塞米松和水苏碱处理后上述症状出现了明显的好转;ELISA结果显示,相较于对照组,模型组小鼠血清中的IL-6,IL-17a和TNF-α等促炎因子的含量显著增高(P<0.001),相较于模型组,地塞米松组和低中高剂量水苏碱组的促炎因子的含量显著降低(P<0.05).WB结果显示,水苏碱可显著缓解因DSS诱导所致的结肠中IL-6和NF-κB蛋白含量升高,并同时提高了NRF2,HMOX1,NQO1,Occludin和ZO-1蛋白的表达量;流式细胞术检测ROS结果显示,相较于对照组,模型组的ROS阳性细胞比例显著增高,但在地塞米松和低中高剂量的水苏碱处理后,ROS阳性细胞的比例均明显降低(P<0.05),具统计学意义.以上结果表明,水苏碱可能通过抑制炎症因子的表达和抗氧化应激来缓解DSS诱导的小鼠炎性肠病.

清除巨噬细胞加重葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎

目的观察小鼠腹腔注射氯膦酸二钠脂质体(Clodrolip)后对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法将小鼠分为两组(DSS、DSS+Clodrolip组)后均予以3%DSS饮用水饲养7 d,DSS+Clodrolip组于造模前3 d、造模当天及造模第2、4、6天腹腔注射200μL的Clodrolip。观察体质量变化率、疾病活动指数(DAI)评分、结直肠长度、脾脏质量及组织学损伤,实时荧光定量PCR(RT-PCR)判断巨噬细胞清除情况及肠道组织炎性因子表达情况,TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况。结果DSS+Clodrolip组小鼠肠组织、肝脏组织内F4/80相对表达水平较DSS组均明显降低。从造模第4天开始,DSS+Clodrolip组小鼠体质量变化率较DSS组明显下降;造模第1天DSS+Clodrolip组小鼠率先出现DAI评分,从造模第4天开始,DSS+Clodrolip组小鼠DAI评分较DSS组明显升高。DSS+Clodrolip组小鼠结直肠长度较DSS组缩短;DSS+Clodrolip组小鼠脾脏质量较DSS组增加。DSS+Clodrolip组小鼠的白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相对表达水平高于DSS组。DSS+Clodrolip组小鼠肠上皮细胞凋亡情况较DSS组明显。结论Clodrolip能够上调促炎因子的表达,促进肠上皮细胞的凋亡,加重DSS诱导的小鼠UC。

GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用

目的:探讨硫酸葡聚糖钠(dextransodiumsulphate,DSS)诱导的小鼠肠炎模型病变结肠组织的谷胱甘肽(GSH)变化及其与病变组织分泌的Th1/Th2型细胞因子IFN-γ,IL-4及黏膜损伤的关系.方法:实验组小鼠(n=10)给予含50g/LDSS的蒸馏水自由饮用7d之后处死,分离出的病变结肠一部分评价其病理学改变并用GSH1抗体做免疫组化,另一部分结肠培养后检测其IL-4、IFN-γ的表达.对照组小鼠(n=10)给予蒸馏水自由饮用7d之后处死.结果:DSS诱导实验性肠炎小鼠口服50g/L的DSS溶液7d出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6vs3.14±1.0,t=3.95,P=0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7vs28.7±6.7,t=3.16,P=0.009<0.01),IFN-γ轻度降低(P>0.05).结论:DSS诱导的实验性肠炎小鼠病变结肠组织GSH的减少与病变结肠组织分泌的细胞因子IL-4增加、IFN—γ下降以及黏膜损伤相关.

C57BL/6小鼠炎症性肠病模型的建立与指标评价

【目的】通过葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)或脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激构建小鼠炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)模型,为IBD研究提供高效经济的模型参考,并为IBD抗炎药物筛选与药效评价提供可靠的方法支撑。【方法】本试验以C57BL/6雄性小鼠为研究对象,分别暴露于不同浓度的DSS(3%、4%和5%)7 d或LPS(5、10和20 mg/kg)4 h。通过测量小鼠结肠长度,HE染色观察肠道形态结构及实时荧光定量PCR检测肠道炎性因子的mRNA表达等对模型进行评价。【结果】DSS诱导小鼠结肠变短、病理出血、腺体萎缩、结构排列絮乱、炎性细胞浸润以及结肠中炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA表达显著上升(P<0.05),4%DSS即可高效建立IBD模型。同时,LPS引起小鼠肠系膜出血、肠道肿胀和充血,肠绒毛高度降低,隐窝深度升高,小肠中IL-10和IL-1βmRNA水平升高、IL-6 mRNA水平下降,十二指肠和回肠TNF-αmRNA水平上升,空肠TNF-αmRNA水平降低,且以5 mg/kg LPS综合影响最为显著。【结论】4%DSS和5 mg/kg LPS是C57BL/6小鼠IBD模型建立的最适浓度,肠道病理形态改变、肠道炎性细胞浸润及炎性因子IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的mRNA表达异常是评价IBD模型的重要指标。

靛玉红对DSS诱导结肠炎小鼠紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

目的探讨靛玉红治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法用硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导实验性小鼠结肠炎模型,随机分为靛玉红高剂量组、靛玉红中剂量组、靛玉红低剂量组、美沙拉嗪组、模型I组、模型II组、正常组,每组各10只。其中模型I组于造模7天时处死,其余各组均在造模第7天开始灌胃给予相应的药物,每日1次,连续给药7天后处死;取小鼠结肠病变部位标本,检测结肠组织ZO-1蛋白表达及TNF-α、IFN-γ含量。结果模型I组结肠黏膜TNF-α、IFN-γ含量比正常组增加,ZO-1表达减少;与模型II组比较,靛玉红低、中、高剂量组和美沙拉嗪组TNF-α、IFN-γ含量明显减少,ZO-1表达明显增加,其中靛玉红高剂量组最为明显。结论靛玉红能够修复肠上皮损伤,通过降低TNF-α、IFN-γ含量,增加紧密连接蛋白ZO-1表达而发挥其改善肠上皮屏障功能、消除肠道炎症的作用。

新鱼腥草素钠通过抑制STAT3/NF-κB信号通路的激活改善小鼠炎症性肠病

目的研究新鱼腥草素钠(SNH)对炎症性肠病(IBD)小鼠的疗效及对STAT3/NF-κB信号通路的调控作用。方法选取24只小鼠随机分为空白对照组(CON组)、IBD模型组(IBD组)、药物干预组(SNH组)。按照3%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)造模法对IBD及SNH组小鼠进行造模;SNH组予以药物灌胃,CON组和IBD组予以生理盐水灌胃,共持续2周。每日监测各组小鼠体重、粪便黏稠度和便血,并测定疾病活动指数(DAI)。通过苏木精-伊红染色法观察各组小鼠结肠组织的病理学变化。采用Western blot法检测各组小鼠结肠组织STAT3、NF-κB蛋白表达水平。ELISA方法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-18的表达水平。结果SNH能够明显提高IBD小鼠的体重(P<0.05),缓解IBD小鼠的腹泻、便血和结肠组织损伤,降低DAI(P<0.05)。SNH对IBD小鼠结肠组织的病理学损伤具有一定的改善作用。与CON组相比,IBD组结肠组织STAT3和NF-κB蛋白表达水平明显升高(P<0.05),与IBD组相比,SNH组结肠组织STAT3和NF-κB蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。此外,IBD组炎症因子IL-6、TNF-α及IL-18水平较CON组明显升高(P<0.05),SNH干预后,SNH组IL-6、TNF-α及IL-18水平比IBD组明显降低(P<0.05)。结论SNH具有改善DSS所致小鼠肠道炎症的效果,其作用机制可能与通过抑制STAT3/NF-κB通路的激活进而降低IL-6、TNF-α及IL-18的表达有关。

姜黄素对DSS诱导的结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞活力的影响

为了研究姜黄素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞活力的影响,试验采用DSS建立小鼠结肠炎模型,取30只小鼠随机均分为3组,即空白对照组、DSS模型组、姜黄素组,分别测定脾脏指数,收集脾脏细胞,应用流式细胞术分析脾脏淋巴细胞的凋亡率、活性氧水平。结果表明:与DSS模型组相比,姜黄素组脾脏指数和脾脏淋巴细胞数增加,但脾脏淋巴细胞凋亡率和活性氧相对含量降低。说明姜黄素可通过降低脾脏淋巴细胞活性氧水平减少淋巴细胞凋亡。

DSS对结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响

为了研究葡聚糖硫酸钠(DSS)对结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞损伤的机制,试验用1%DSS诱导Balb/c小鼠建立小鼠结肠炎模型,测定脾脏指数,收集脾脏细胞,应用流式细胞仪分析脾脏淋巴细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平。结果表明:结肠炎小鼠脾脏指数下降,脾脏淋巴细胞数目减少,脾脏淋巴细胞凋亡率增加;与对照组比较,结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞活性氧水平显著升高。说明DSS可能通过提高脾脏淋巴细胞活性氧的水平而诱导淋巴细胞凋亡。

NLRP3敲除小鼠溃疡性结肠炎模型的建立与分析

目的采用不同浓度DSS及给药时间诱导NLRP3^(-/-)小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,并分析与评价其优劣性,为UC发病机制的研究和治疗药物研发提供更贴切临床的动物模型。方法SPF级48只雄性NLRP3^(-/-)小鼠随机分组,每组12只小鼠(空白组、2.5%7 d组、3%7 d组和3%5 d组),采用不同浓度DSS和给药时间相结合诱导UC小鼠模型,观察和评价小鼠的体重、DAI评分、HE染色、结肠长度及相关指标(IL-6、TNF-α和紧密连接蛋白(ZO-1))的表达水平评价造模的效果。结果(1)DSS各小组在不同浓度及给药时间均能诱导UC模型;(2)随着浓度梯度增加及给药时间延长,NLRP3^(-/-)小鼠的体重减轻越显著、粪便潜血呈阳性越明显、DAI评分越高,甚者出现死亡;(3)经HE染色发现,NLRP3^(-/-)小鼠肠黏膜屏障组织病理损伤随DSS给药时间增长或浓度增高而加重;(4)采用免疫组织化学方法检测炎症因子及紧密连接蛋白,相对于空白组、模型组的炎症因子(TNF-α及IL-6)的表达水平均有所升高,而紧密连接蛋白水平表达(ZO-1)较空白组有所降低。结论(1)NLRP3^(-/-)小鼠在2.5%DSS 7 d、3%DSS 7 d和3%DSS 5 d条件下均可诱导UC模型;(2)结合DAI评分、HE染色和相关指标检测以及小鼠生存率,NLRP3^(-/-)小鼠在3%DSS 5 d条件下诱导UC模型更贴切UC临床表现,更有利于后期药物干预。

低分子量肝素对DSS诱导小鼠结肠炎的疗效观察

目的 评价低分子量肝素预防及治疗 DSS结肠炎小鼠的有效性。方法 2 0只正常小鼠随机分成两组 ,饮用 DSS 7d,预防组皮下注射低分子量肝素 ,对照组皮下注射生理盐水。另取 2 0只 DSS诱导的结肠炎小鼠随机分成两组 ,治疗组皮下注射低分子量肝素 ,对照组皮下注射生理盐水 7d。用疾病活动指数 (DAI)、组织学评分和MSB纤维素染色检测微血栓以评价疗效。结果 低分子量肝素预防组与对照组的 DAI、直肠、横结肠组织学评分分别为 2 .4 0、2 .5 2 (P>0 .0 5 ) ,1.6 5、1.85 (P>0 .0 5 ) ,1.5 5、1.72 (P>0 .0 5 )。低分子量肝素在预防组降低微血栓的形成 ,对照组 10例有 6例微血栓阳性 ,预防组 1例阳性 ,P=0 .0 2 9。低分子量肝素治疗组与对照组的 DAI、直肠、横结肠组织学评分分别为 0 .4 2、0 .4 4 (P>0 .0 5 ) ,1.36、1.75 (P<0 .0 5 ) ,1.30、1.6 5 (P<0 .0 5 )。对照组 10例有 3例微血栓阳性 ,治疗组 1例阳性 ,P=0 .2 91。结论 低分子量肝素可预防 DSS结肠炎小鼠微血栓形成和抑制结肠炎症 。