生物素化硫酸软骨素多糖衍生物纳米粒的制备及表征

目的合成生物素化硫酸软骨素多糖衍生物并制备纳米粒。方法生物素和硫酸软骨素多糖进行酯化反应,得到疏水改性的衍生物,傅立叶红外光谱仪对其表征;采用高压均质法制备衍生物纳米粒,以粒径、多分散系数为评价指标,星点设计-效应面法优化处方。结果优化后的硫酸软骨素多糖衍生物纳米粒的粒径为(108.04±23)nm,分散系数为(0.182±0.03)。结论生物素和硫酸软骨素多糖以酯键连接在一起,合成了生物素化硫酸软骨素多糖衍生物。合成的衍生物有望成为疏水药物的载体。

硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤中的研究进展

硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)是中枢神经系统细胞外基质的组成部分,在中枢神经系统发育、正常维持及病理过程中都发挥着关键的作用。脊髓损伤后,损伤部位CSPGs的表达明显上调,这主要源于病变部位活化的星形胶质细胞。CSPGs的上调会限制脊髓损伤部位的轴突再生、传导和再髓鞘化,并且可以促进脊髓损伤中的炎症反应,不利于脊髓损伤后神经功能恢复。因此,抑制CSPGs可能是促进脊髓损伤后轴突再生和功能恢复的有效治疗方法。本文对CSPGs在脊髓损伤中的研究现状进行综述。

硫酸软骨素蛋白多糖抑制神经元轴突生长体外生物模型的建立

目的利用硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的生物特性建立抑制神经元生长和轴突再生的体外生物模型。方法将不同浓度CSPG与无生物毒性的德克萨斯红荧光染料混合,取5μl滴在培养板的中心部位,形成边界清楚的红色圆形斑点,称CSPG圆斑(CSPG SPOT)。将神经母细胞瘤SY5Y细胞和小鼠小脑颗粒细胞(CGNs)铺在含有CSPG SPOT的培养板中,48h后观察细胞的生长情况。结果含有1μg/ml和3μg/ml CSPG的SPOT分别使CGNs和神经母细胞瘤SY5Y细胞停止生长、死亡,没有发现细胞的轴突延伸到SPOT上生长。高浓度的CSPG可渗透到SPOT周围区域,使CSPG SPOT周围区域的细胞生长和轴突再生受到抑制。结论该模型可以在体外模拟胶质细胞分泌的CSPG对神经细胞生长的抑制作用,对研究中枢神经系统损伤后神经元的生长和轴突的再生具有广泛的应用前景。

硫酸软骨素蛋白多糖与神经系统的发育和再生

硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)是中枢神经系统(CNS)细胞外基质中的重要组成成分,在CNS的发育、成熟后正常功能的维持中发挥重要功能,如发育中影响神经细胞的迁移和轴突生长,成年后参与神经可塑性的控制等;而病理条件下,如CNS受损后又可做为胶质瘢痕的重要组分抑制受损神经的再生。研究发现,用酶降解CSPGs的糖氨多糖链或阻断其合成可以有效地削弱CSPGs对受损神经的抑制作用,促进轴突再生。然而,精确调控CSPGs特定时空表达模式的分子机制,以及功能发挥所涉及的完整信号转导通路还有待进一步研究。

硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC对严重脊髓损伤(SCI)大鼠硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法制作大鼠脊髓横断伤模型,60只大鼠随机分为对照组10只、损伤组25只和治疗组25只。治疗组给予硫酸软骨素酶ABC髓鞘浸润治疗。用免疫荧光组织化学观察脊髓CSPGs的表达;用免疫荧光组织化学及Western-blot方法观察脊髓GFAP的表达。结果 SCI后星形胶质细胞明显活化增殖,CSPGs和GFAP的表达明显增加(P<0.05);治疗组脊髓CSPGs和GFAP的表达均较损伤组减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善SCI区的微环境,改善GFAP蛋白的表达,是修复SCI,促进神经再生的机制之一。

脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖及GFAP表达的变化

目的探讨脊髓损伤后NG2、Neurocan、GFAP表达的变化。方法将32只雌性SD大鼠随机分为空白对照组和模型组。模型组采用脊髓横切法制作脊髓损伤模型,空白对照组仅切除T10全椎板及T9、T11部分椎板,对脊髓未作任何处理。分别在大鼠脊髓损伤制作后3、7、14及28 d时取材,利用免疫组织化学染色方法检测NG2、Neurocan、GFAP的表达情况。结果模型组脊髓损伤后3 d时NG2的表达出现明显升高,7 d时NG2的表达达到最高点,14 d及28 d时NG2仍然维持在较高水平,但与7 d时的表达相比有下降,空白对照组NG2各时间点均呈低表达。模型组脊髓损伤后7 d时Neurocan的表达显著增加,于14 d时达到最高点,从14 d开始Neurocan的表达开始逐步下降,空白对照组Neurocan各时间点均呈低表达。模型组脊髓损伤后3 d时GFAP的表达明显升高,14 d时GFAP的表达达到顶点,28 d时损伤部位GFAP的表达均较空白对照组明显升高,两组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论脊髓损伤后NG2、Neurocan、GFAP表达升高,可能是脊髓损伤后抑制轴突再生的因素之一。

硫酸软骨素蛋白多糖与脊髓损伤

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)一直以来是困扰骨科和神经外科的一大难题,它致残率高,患者主要为青壮年,治疗耗费大,且缺乏有效的对策。

硫酸软骨素和硫酸软骨素蛋白多糖在糖尿病肾病中的研究进展

目的糖尿病肾脏病(DKD)是糖尿病的严重并发症,是全球面临的重要公共卫生问题。由于DKD发病机制复杂,至今尚缺乏特异有效的治疗措施。细胞外基质(ECM)增多是DKD最主要的病理特征。硫酸软骨素/硫酸软骨素蛋白多糖(CS/CSPG)是ECM的重要组成部分,包含一大类结构复杂、功能多样的生物活性分子。它们在生理和病理条件下发挥重要的功能和调节作用。现有证据表明,DKD肾脏中存在CS/CSPG重塑,几种CSPG在DKD发生、发展的关键环节(如炎症、纤维化、脂质代谢)中发挥重要作用,调控CS/CSPG可能是防治DKD的有效措施,进一步探索CS/CSPG在DKD中的作用和机制有可能为DKD的治疗带来新的突破。

硫酸软骨素蛋白多糖与脊髓损伤修复

脊髓损伤(SC I)的治疗一直未获突破性进展,近年研究认为,SC I后分泌了大量抑制因子,阻碍了轴突有效再生和功能恢复。其中硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)是由胶质瘢痕为主分泌的一种重要轴突生长抑制因子,随着研究的深入其越来越多的功能被发现。本文就CSPGs以及它在脊髓损伤后抑制作用的研究进展情况作如下综述。

脊髓康对大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成及硫酸软骨素蛋白多糖表达的影响

目的:研究脊髓康对大鼠脊髓损伤区胶质瘢痕形成及硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPG)表达的抑制作用。方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、脊髓康组及激素组,每组15只。除正常对照组外,其余3组利用改良Allen法制造脊髓损伤大鼠模型,各组给予对应药物治疗。于第3、7、14天抽取样本制备切片标本,通过HE染色与EnVision法染色观察各组大鼠脊髓受损区的病理形态学改变;实时荧光定量PCR检测各组脊髓损伤区CSPG表达水平。结果:在造模后第3、7、14天,脊髓康组和激素组相比于模型组,病理图片中脊髓损伤区域内胶质瘢痕形成更少,且CSPG表达受到明显抑制(P<0.05),同时,脊髓康组相比于激素组,病理图片中脊髓损伤区域内胶质瘢痕形成差异不明显,但CSPG表达量高于激素组(P<0.05)。结论:中药脊髓康可以抑制大鼠脊髓损伤区胶质瘢痕过度形成及CSPG的表达,对于促进脊髓损伤后神经修复再生具有积极意义。

大鼠硫酸软骨素蛋白多糖基因shRNA慢病毒载体的构建及干扰效率鉴定

背景:最近研究发现硫酸软骨素蛋白多糖(NG2)在中枢神经系统中参与多种生理病理功能,慢病毒载体可感染分裂期细胞或非分裂期的细胞,并能在细胞内高效稳定的表达。目的:构建大鼠源性NG2基因shRNA慢病毒载体并检测其干扰效率。方法:选择大鼠NG2基因RNA干扰的靶序列,合成OligoDNA,退火形成双链DNA,与HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-RNAi载体连接产生pLV-NG2-RNAi,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将重组载体与pHelper1.0载体、pHelper2.0载体通过lipofectamineTM2000共转染293T细胞包装产生慢病毒LV-NG2-RNAi,收集病毒上清并浓缩。采用孔稀释滴度测定法计算病毒滴度。将LV-NG2-RNAi慢病毒感染C6细胞,于感染后96h提取细胞总蛋白,采用Westernblot检测NG2的表达。结果与结论:经PCR和测序证实构建片段大小及DNA序列与目的序列一致,实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体LV-NG2-RNAi。包装浓缩慢病毒的滴度为8×1011TU/L。Westernblot检测显示在感染复数为50时,感染LV-NG2-RNAi慢病毒的C6细胞较感染对照慢病毒及未感染细胞NG2的表达明显降低,干扰效率可达100%(P<0.05)。结果证实了实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体,且该载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。

硫酸软骨素蛋白多糖与中枢神经可塑性

硫酸软骨素蛋白多糖不仅影响中枢神经系统的发育成熟 ,也作为神经抑制因素参与成年期中枢神经系统损害后的神经可塑性过程 ,并调节成年神经再生。研究硫酸软骨素蛋白多糖和神经可塑性的相互关系及影响因素 ,有助于指导中枢神经系统损害后的康复治疗。

大鼠脊髓硫酸软骨素蛋白多糖4细胞的生后发育特征

目的研究大鼠脊髓中硫酸软骨素蛋白多糖4(NG2)细胞生后发育特征。方法采用免疫组织化学及West-ern blot,观察大鼠生后不同发育阶段的脊髓中NG2细胞形态变化。结果大鼠生后各发育阶段的脊髓内均有NG2阳性细胞表达;NG2细胞的胞体逐渐增大,其形态由圆形或卵圆形变为不规则形,突起数目和长度随之增加,与同时期大脑皮质的NG2细胞形态比较,脊髓内的NG2细胞胞体要大,突起短而少。P1d脊髓内NG2表达值最高,为0.75±0.11,P7d显著下降为0.40±0.05,P21d表达值降至最低,为0.16±0.06,P60d回升为0.37±0.06。结论在大鼠不同发育阶段的脊髓内,NG2细胞形态数量有所不同;P7d到P21d是脊髓内神经纤维髓鞘主要形成期;脊髓内NG2细胞可能处于少突胶质细胞系发育的早期阶段。

硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与生长相关蛋白43表达的影响

目的:探讨硫酸软骨素酶ABC对严重的大鼠脊髓损伤蛋白多糖及生长相关蛋白43(GAP-43)基因表达的影响。方法:制作大鼠脊髓横断伤模型,分为脊髓损伤组和脊髓损伤治疗组,给于治疗组硫酸软骨素酶ABC鞘内注射,用免疫荧光组织化学观察硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的表达,半定量RT-PCR、Western印迹法观察GAP-43 mR- NA及蛋白的表达。结果:治疗组与损伤组比较,CSPGs的表达减少,差异具有显著性,而GAP-43mRNA及蛋白表达增多。结论:硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善脊髓损伤区的微环境,促进GAP-43 mRNA及蛋白的表达,是修复脊髓损伤和促进神经再生的机制之一。

硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤病理机制中的作用

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是由各种因素导致的脊髓损伤平面以下的感觉、运动及其他系统功能紊乱的中枢神经系统疾病.SCI不仅给患者带来严重的身心伤害,还会对家庭和社会造成巨大的经济负担.静息状态的星形胶质细胞被激活后转化为反应性星形胶质细胞(reac-tive astrocytes,RAS)是脊髓受损后所导致的一系列临床表现的病理基础[1].

大鼠脊髓半横断损伤后硫酸软骨素蛋白多糖Versican的变化

目的观察大鼠脊髓半横断损伤(hSCI)位点头尾段硫酸软骨素蛋白多糖Versican的表达变化,探讨其与脊髓损伤修复的关系。方法20只成年健康SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3d、7d和14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9～T10)模型。取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片,运用Versican抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数各组前角中Versican阳性细胞数,采用计算机图像分析技术测量免疫阳性产物的平均光密度(A)值。结果Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,前角神经元和胶质细胞的胞浆中也有分布;损伤后前角中Versican阳性神经元和胶质细胞数较对照组明显减少(P<0.05),免疫阳性产物平均A值较对照组明显增加(P<0.05)。结论脊髓半横断损伤后,表达增加的Versican很可能参与损伤后轴突生长被抑制的过程。

硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤后修复中的抑制作用

目的综述硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤后修复中抑制作用的研究现状。方法查阅近年来有关硫酸软骨素蛋白多糖与脊髓损伤相关的文献。结果硫酸软骨素蛋白多糖是中枢神经系统细胞外基质中重要的抑制因子。结论研究能有效抑制硫酸软骨素蛋白多糖的方法可能促进损伤后脊髓的再生。

硫酸软骨素蛋白多糖对神经系统损伤修复的影响

硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)是一组共价结合硫酸软骨素的蛋白质,其在中枢神经系统的发育和成熟以及在神经损伤的病理生理反应中均发挥着重要作用。本文就CSPGs在神经系统损伤及修复过程中发挥作用的功能性研究和机制性研究进行综述。

胰腺癌组织中硫酸软骨素蛋白多糖4的表达及其临床意义

目的探讨硫酸软骨素蛋白多糖4（chondroitin sulfate proteoglycan 4,CSPG4）在胰腺癌（pancreatic carcinoma）中的表达及其临床意义。方法收集2007年6月至2010年6月西南医院肝胆外科的胰腺导管腺癌及正常胰腺组织（距肿瘤边缘〉2 cm）标本各160例,其中男性124例,女性36例;年龄33-75（56.98±10.75）岁。应用免疫组织化学染色法检测其中CSPG4的表达,分析CSPG4的表达与临床病理参数的相关性;采用Kaplan-Meier法分析胰腺癌中CSPG4的表达与患者预后的关系,Cox回归模型分析胰腺癌患者预后的影响因素。结果胰腺导管腺癌组织中CSPG4的阳性表达率显著高于正常胰腺组织（46.25%vs 10.00%,P〈0.01）。胰腺癌中CSPG4的表达与有无淋巴结转移或血管侵犯、肿瘤T分期、TNM分期显著相关（P〈0.01）。胰腺癌中CSPG4阳性表达患者术后总生存率显著低于阴性表达者（P〈0.01）。CSPG4的表达是影响胰腺癌患者预后的独立危险因素之一（P〈0.01）。结论 CSPG4在胰腺导管腺癌中异常高表达,其表达水平是评估患者预后的独立预测指标,提示CSPG4可能成为胰腺癌治疗的一个新靶点。

硫酸软骨素蛋白多糖胶质细胞的研究进展

目的简介硫酸软骨素蛋白多糖(NG2)胶质细胞的生理特性及功能。方法归纳总结NG2胶质细胞的特性和研究现状。结果在中枢神经系统中,有一类胶质细胞,细胞表面专一表达NG2蛋白聚糖,称之为NG2胶质细胞。近年来对NG2细胞在中枢神经系统中作用的研究越来越多。已经从先前的分化和鉴别发展到对它与神经元功能和突触可塑性之间关系的研究。结论提示近年来有关NG2细胞的发育分化、功能特性、与神经元的相互作用及其与神经再生和疾病关系等的研究方向。