糖胺聚糖的荧光标记及其与硫酸软骨素抗体的相互作用

以1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺为催化剂,将糖胺聚糖(肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素A,B,C,D,E)中糖醛酸的羧基与氨基荧光素中氨基偶联,分别得到各荧光标记糖胺聚糖。将标记糖胺聚糖用点样仪点在硝酸纤维素包被玻璃芯片上,分别探讨其在硝酸纤维素薄膜上的保留率及其与硫酸软骨素抗体(克隆号CS-56)的相互作用。结果表明,各种糖胺聚糖在硝酸纤维素膜中保留率显著不同,硫酸软骨素E(51.7%)>硫酸软骨素A(19.5%)>硫酸乙酰肝素(16.4%)>肝素(14.1%)>硫酸软骨素B(12.3%)>硫酸软骨素D(10.8%)>硫酸软骨素C(10.7%);定量计算得各种糖胺聚糖与CS-56结合能力:硫酸软骨素C>硫酸软骨素D>硫酸软骨素A>硫酸软骨素E,硫酸软骨素B、肝素及硫酸乙酰肝素与CS-56无结合。