毛细管电泳手性选择剂去硫酸基硫酸软骨素C的研究开发及新药西尼地平对映体的拆分

研究开发了一种新型的毛细管电泳多糖手性选择剂去硫酸基硫酸软骨素C ,并用于二氢吡啶类药物对映体的分离。建立了新药西尼地平对映体的拆分方法 ,同时考察了背景电解质 pH值、手性添加剂浓度、工作电压等因素对手性分离的影响。优化的背景电解质 pH值为 2 5 0、手性添加剂的质量浓度为 30g/L,工作电压为 10kV。以去硫酸基硫酸软骨素C为毛细管电泳手性选择剂拆分新药西尼地平对映体 ,操作简单方便 ,西尼地平两对映体得到了基线分离 ,分离度达 2 0 1。

微波萃取法提取复方硫酸软骨素片中硫酸软骨素C的研究

目的从复方硫酸软骨素片中提取硫酸软骨素C(Chs-C)。方法采用微波萃取法提取复方硫酸软骨素片中的Chs-C,以Chs-C的提取率为考察指标,在单因素试验基础上进行正交试验,确定微波萃取最佳条件。结果微波萃取最佳条件为:萃取功率为595W,浸提时间90s,固液比为1∶75。在此条件下,提取率可达4.1%。结论对照传统乙醇沉淀法,微波法具有省时,操作简单,提高效率等优势。

伊拉兔肺中硫酸软骨素C的分离纯化及二糖组成分析

目的:从伊拉兔肺中提取分离硫酸软骨素C(chondroitin sulfate C,CSC),并对其进行二糖组成分析。方法:采用丙酮、氯仿-甲醇(2∶1)对兔肺进行脱脂,利用木瓜蛋白酶对脱脂粉进行酶解。提取的粗品经75%乙醇沉淀,氯代十六烷基吡啶(CPC)将其中的酸性多糖富集获得总糖胺聚糖TFH。采用Q-Sepharose Fast Flow树脂对TFH分级纯化获得TF-C。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生反相HPLC法分析单糖组成,利用硫酸软骨素酶ABC降解,SAX-HPLC法分析二糖组成。结果:所得TF-C不含蛋白质,主要由葡萄糖醛酸(Glc A)和氨基半乳糖(Gal N)组成,二糖组成以不饱和△UA-Gal NAc6S为主,含有少量的△UA-GalNAc4S。结论:首次从伊拉兔肺中分离获得低硫酸化高纯度CSC,为伊拉兔肺高值化产品的开发和利用提供了理论依据。

结合基因本体论和计算机模式识别技术筛选应答神经损伤的重要效应基因

目的利用基因本体论(gene ontology,GO)方法结合计算机模式识别技术从基因芯片的海量数据中筛选出应答神经损伤的重要基因,并选择一种可能的关键基因Cd44对生物信息学结果进行验证。方法利用MATLAB软件对基因芯片数据(GSE26350)进行数据挖掘和GO分析,利用不同功能模块的基因在主成分得分图上的位置分布,从得出的核心基因分子谱中选择Cd44。干扰Cd44与其配体硫酸软骨素C(chondroitin sulfate C,CSC)的正常结合,观察其对神经突起延伸的影响。结果 GO分析结果显示,主成分得分图上红色*标记的第1类基因在分子功能方面主要与信号传递、受体活动和蛋白结合等相关。Cd44是此类基因6个外围效应蛋白基因之一,其功能多样。向培养的神经元培养基中添加不同试剂干扰CSC与Cd44的正常结合可不同程度缓解CSC对神经突起延伸的抑制作用。结论本实验初步证明CSC与筛选出的神经元表面分子Cd44的结合可抑制神经突起的延伸,这说明利用GO分析基因芯片可筛选出特定生理过程中的重要分子。