硫酸酯酶1(SULF1)与结肠癌预后相关性及其机制的生物信息学分析

目的探究细胞外分泌蛋白硫酸酯酶1(SULF1)与结肠癌预后及结肠癌免疫细胞浸润的相关性。方法检索肿瘤免疫评估(Timer)数据库差异表达模块和Oncomine数据库获得SULF1在肿瘤和正常组织中的差异表达水平;检索预后分析(Prognoscan)数据库和基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析获得SULF1与结肠癌预后相关性;检索Timer数据库基因模块及基因相关性模块获得SULF1与结肠癌免疫细胞浸润相关性及与肿瘤相关巨噬细胞表面标志物相关性,该结果进一步用GEPIA数据库验证。结果Timer,Oncomine数据库分析结果表明SULF1在结肠癌中高表达,Prognoscan芯片GSE17536和GEPIA数据库分析结果表明SULF1高表达与结肠癌预后不良呈正相关。SULF1与结肠癌免疫细胞CD8^+T细胞、CD4^+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞浸润呈正相关,与B细胞不相关。SULF1与巨噬细胞的正相关性最强(r=0.628),其中与M2型巨噬细胞相关性明显高于M1型巨噬细胞。结论SULF1在结肠癌中高表达与结肠癌的不良预后有关,与肿瘤相关巨噬细胞浸润有关。

人芳香基硫酸酯酶(HSulf-1)基因的原核表达及酶活初步研究

人芳香基硫酸酯酶(HSulf-1)是一类分泌型蛋白,能在中性条件下改变硫酸肝素蛋白聚糖(HSPGs)的硫酸化状态,从而影响多种信号分子与其相应受体的结合,进而影响细胞信号通路。鉴于HSulf-1具有重要的潜在应用价值,为获得大量纯化蛋白以探索其功能与应用,文章将HSulf-1功能域基因片段与pGEX-6p-1表达载体连接构建成重组质粒,在原核表达系统BL21中表达、分离纯化了HSulf-1的功能域片段,并以4-Mus为底物用荧光光度法进行了酶活性的测定。结果表明,原核表达能得到电泳纯级的HSulf-1纯化蛋白,但其具有酶活性的条件需要进一步探索。

小鼠抗棉铃虫硫酸酯酶(HaSulf1)多克隆抗体的制备与鉴定

目的原核表达棉铃虫硫酸酯酶1(HaSulf1)蛋白,制备其多克隆抗体。方法构建原核表达载体,诱导表达,用镍柱纯化重组蛋白,注射免疫小鼠。采血后用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性。结果获得重组质粒,诱导表达得到融合蛋白并成功纯化。ELISA实验检测获得的多克隆抗体效价最高可达到1∶819200。Western blot结果显示该抗体能与体外表达重组蛋白及棉铃虫体内的天然硫酸酯酶结合。结论原核表达获得重组HaSulf1蛋白并制备了特异性的小鼠多克隆抗体。

人硫酸酯酶-1基因与肿瘤关系的研究进展

近年来，越来越多的研究表明，人硫酸酯酶-1（HSulf-1）基因在人类多种肿瘤中有着重要的作用，对肿瘤的生长，转移的起着负性调节的作用，而其启动子甲基化则是HSulf-1基因沉默的一种重要机制。但是，HSulf-1基因的抑癌机制尚没有完全研究清楚，本文就HSulf-1基因的结构、作用机制及在肿瘤中研究现状做一综述。

人硫酸酯酶1基因的作用机制及抗瘤活性

人硫酸酯酶-1(hSulf-1)能够使细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)脱硫酸化,从而抑制下游肝素结合生长因子信号途径的激活。人恶性肿瘤中hSulf-1常处于失活状态,转染外源性hSulf-1能够抑制癌细胞的增殖、迁移和侵袭,因此hSulf-1是肿瘤基因治疗的一个很有潜力的靶点。

人硫酸酯酶1对生长因子介导的胰腺癌细胞生长的作用

目的:探讨人硫酸酯酶1对生长因子诱导下胰腺癌细胞生长作用的影响及其机制。方法:应用lipo-fectam ine方法转染人硫酸酯酶1基因到低表达该基因的胰腺癌细胞Panc-1,通过Northern bloting筛选阳性转染的细胞克隆,并检测转染后胰腺癌细胞硫酸酯酶1的水平;应用噻唑氮蓝比色分析(MTT)法检测转染后胰腺癌细胞对生长因子作用的影响;应用W estern bloting检测人硫酸酯酶1转染对生长因子受体与MAPK磷酸化水平的影响。结果:硫酸酯酶1稳定转染入Panc-1细胞后,Panc-1细胞稳定表达硫酸酯酶1 mRNA,并且硫酸酯酶1表达水平升高。FGF-2、HB-EGF、EGF均促进胰腺癌细胞Panc-1的生长,硫酸酯酶1基因转染后减弱FGF-2对细胞的生长促进作用,降低FGF-2所诱导的MAPK磷酸化水平,但对HB-EGF、EGF的作用无明显影响。结论:人硫酸酯酶1转染减弱生长因子FGF-2所诱导的胰腺癌细胞的生长促进作用;人硫酸酯酶1可能参与胰腺癌的病理发生发展过程。

Sumf2与Sumf1可能存在代偿性的相互作用以维持硫酸酯酶的活性不变

目的 通过Sumf2（硫酸酯酶修饰因子2）基因剔除小鼠来研究Sumf2在分子水平、细胞水平及组织器官水平的生物学功能及其与硫酸酯酶活性的关系.方法 用免疫荧光共定位的方法观察小鼠Sumf2的细胞定位情况;用组织或细胞蛋白与4种硫酸酯酶特异的底物反应,通过检测产物的生成量来计算硫酸酯酶的活性;用MTT的方法检测小鼠胚胎成纤维细胞的增殖能力;通过Alcian blue染色观察硫酸酯酶的底物葡糖氨基聚糖是否堆积在组织中,用qPCR的方法检测Sumfl的表达情况.结果 激光共聚焦显微镜结果证实小鼠Sumf2定位于内质网上;检测四种芳香族硫酸酯酶的酶活性和小鼠胚胎成纤维细胞的增殖能力,测定结果显示：基因缺失小鼠的检测结果都略低于野生型小鼠,但并未达到显著性水平;组织病理及葡糖氨基聚糖类染色并未发现基因剔除小鼠与野生型小鼠有明显差异;qPCR的结果显示Sum f2基因敲除小鼠中Sumfl的表达量明显下调.结论 Sumf2定位于内质网上,体内缺失Sumf2后代偿性地下调Sumfl的表达从而使得硫酸酯酶活性维持不变.

SUMF1及SUMF2对硫酸酯酶功能的影响

硫酸酯酶作为硫酸酯类分解代谢酶在人体内起着重要的作用,若其活性出现异常会导致多种疾病。硫酸酯酶的活性需要一个独立的翻译后调节,这个调节由硫酸酯酶的一种调控因子硫酸酯酶调控因子1(SUMF1)来完成。研究发现,硫酸酯酶具有另一种调控因子SUMF2。其中SUMF1既存在于原核生物中又存在于真核生物中,SUMF2只存在于脊椎动物体内,两者对硫酸酯酶的活性调节对生物体内硫酸酯类代谢有着深远的影响。该文对硫酸酯酶、SUMF1和SUMF2的结构、功能及它们之间的相互作用进行综述。

SULF1作为特发性肺纤维化与肺腺癌共同基因的鉴定及其生物学功能分析

背景和目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种原因不明的慢性、进行性、间质性肺疾病,确诊后中位生存期为3-5年。IPF与肺癌风险增加有关。因此,探索IPF和肺腺癌的关键共同致病基因和分子通路,对开发IPF合并肺腺癌的新治疗手段和个性化精准治疗策略的制定具有重要意义。方法利用基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中公开的IPF和肺腺癌基因表达数据集进行生物信息学分析。使用加权基因共表达网络分析识别涉及两种疾病进程的共同基因,进而功能富集分析。随后,联合额外数据集鉴定两种疾病的核心共同基因。并通过癌症基因组图谱计划(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和单细胞RNA测序数据集,分析核心共同基因与患者预后的关系,并评估其在肺腺癌中的表达模式、临床相关性、遗传特征和免疫相关功能。最后通过药物数据库筛选出相关的潜在治疗药物。结果两者之间有529个共同致病基因。其中,SULF1作为核心共同致病基因与患者预后不良相关,其在肺腺癌组织中的表达水平显著升高,同时与高突变频率、显著基因组异质性以及抑制性免疫微环境相关。随后的单细胞分析发现SULF1高表达主要源于肿瘤相关成纤维细胞。SULF1表达与肿瘤药物敏感性变化相关,并筛选出与靶向SULF1高表达成纤维细胞相关的潜在小分子药物。结论本研究鉴别出IPF和肺腺癌之间的共同分子途径和核心基因,其中SULF1可能作为两种疾病的潜在生物标志物和治疗靶点。

癌相关成纤维细胞源性SULF1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响和机制

目的:探讨癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)衍生的硫酸酯酶1(sulfatase1,SULF1)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)进展的影响。方法:从癌旁组织和NSCLC组织中分离正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)和CAFs,将NFs-CM和CAFs-CM与NSCLC细胞共培养。干预CAFs中SULF1的表达。CCK8检测细胞增殖,Transwell检测侵袭,Western Blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin)和Wnt/β-catenin通路核心蛋白(Wnt3、β-catenin)的表达。构建裸鼠成瘤模型,评估CAFs分泌的SULF1对肿瘤生长的影响。结果:与NFs-CM相比,CAFs-CM促进NSCLC细胞增殖、侵袭和EMT(P<0.01)。与CAFs^(si-NC)-CM组相比,CAFs^(si-SULF1)-CM组细胞增殖、侵袭和EMT被抑制(P<0.01)。与CAFs^(vector)-CM组比较,过表达SULF1能够上调Wnt3和β-catenin的表达(P<0.001)。但是CAFs中SULF1过表达对NSCLC细胞的影响被Wnt/β-catenin通路抑制剂部分挽救。体内研究显示,CAFs促进肿瘤生长和Ki67表达,而敲低SULF1则抑制肿瘤生长以及瘤组织中Ki67表达。结论:CAFs来源的SULF1通过激活Wnt/β-catenin通路诱导NSCLC的进展。

基于GEO和TCGA联合分析SULF1对胃癌总体生存率的影响

目的应用基因表达数据库(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库联合分析硫酸酯酶1(SULF1)在胃癌组织中的表达情况及其对胃癌总体生存率(OS)的影响,探索SULF1表达与胃癌患者OS的相关性。方法从GEO数据库选取胃癌数据集进行差异表达基因(DEG)分析,使用数据集TCGA-STAD验证SULF1在胃癌组织中表达情况,cBioPortal数据库分析胃癌中SULF1基因的突变情况。单因素和多因素Cox回归分析SULF1与胃癌OS的关系。列线图验证SULF1对胃癌预后的影响。受试者操作特征曲线(ROC)分析SULF1表达对胃癌诊断的价值。结果GEO和TCGA数据集分析发现SULF1在胃癌组织中表达上调(P<0.001),胃癌中存在SULF1基因突变的情况。胃癌的发病、发展与年龄、肿瘤分期、SULF1基因表达有关,SULF1基因高表达与不良预后相关。SULF1基因表达是胃癌患者OS的一个独立预后标志物,SULF1高表达的胃癌患者OS相对较差(P<0.05)。SULF1表达对胃癌有较好的诊断价值。结论SULF1在胃癌中呈高表达,且与不良预后相关,可作为胃癌诊断和治疗的潜在靶点。

hSulf-1过表达提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性

目的:探讨人硫酸酯酶-1(human sulfatase 1,hSulf-1)基因过表达是否提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性。方法:采用不同浓度AZD2281处理细胞,并筛选AZD2281处理的最佳浓度。将携hSulf-1基因的重组腺病毒Ad5-hSulf1感染MCF-7细胞,以Ad-hSulf1和AZD2281单独或联合处理MCF-7细胞,以Ad5-EGFP处理为对照。采用流式细胞术检测细胞周期,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达,Transwell法、MTT法分别检测细胞的迁移及增殖。结果:AZD2281浓度为7μmol/L时对MCF-7细胞的抑制作用趋于峰值,用于后续实验。Ad5-hSulf1+AZD2281联合处理与AZD2281单独处理相比,MCF-7细胞的G2/M期细胞比例明显增多[(22.15±0.17)%vs(17.44±0.57)%,P<0.01],细胞克隆形成率[(21.43±1.52)%vs(49.43±1.44)%,P<0.01]及细胞周期蛋白CDK4的表达[(0.67±0.02)vs(0.72±0.02),P<0.05]、AKT的磷酸化水平[(0.17±0.003)vs(0.42±0.02),P<0.01]均明显降低,同时细胞的增殖率和迁移能力也有明显下降[(57.69±4.83)%vs(79.35±5.44)%;(10.33±1.53)个vs(50.67±2.31)个,均P<0.01]。结论:hSulf-1过表达可明显提高乳腺癌细胞MCF-7对AZD2281的化疗敏感性,阻滞细胞周期于G2/M期,并更明显地抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,这一效应可能是通过调节细胞周期蛋白CDK4及AKT通路产生的。

硫酸酯酶家族在恶性肿瘤研究中的进展

硫酸酯酶家族包括硫酸酯酶1(SULF1)与硫酸酯酶2(SULF2)。其主要通过调节硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)的硫酸化水平来参与多项生理、病理进程。近年来,对SULF家族的研究成为恶性肿瘤研究的热点之一,SULF1与SULF2被证明参与了肝癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的发生、发展,并展现出在诊断和治疗上的潜力。针对SULF1和SULF2在恶性肿瘤研究中的进展进行论述。

miR-199a-5p和miR-206靶向调控SULF1并抑制卵巢上皮细胞对顺铂的敏感性

目的SULF1是硫酸酯酶家族成员之一,主要发挥肿瘤抑制因子的作用,在多种肿瘤中低表达,本研究旨在筛选直接靶向SULF1的microRNAs,并验证候选microRNAs对SULF1表达的负调控作用。方法利用TargetScanHuman 7.2、miRDB、DIANA和RNAhybrid数据库预测调控SULF1的microRNAs。利用实时荧光定量PCR和Western blotting实验探索microRNAs对SULF1表达的影响。双荧光素酶报告基因实验探究microRNAs和SULF1基因的直接结合能力。CCK-8实验验证microRNAs对铂类药物敏感性的影响。结果利用数据库预测到两个microRNAs:miR-199a-5p和miR-206,二者均可靶向SULF1的3’-UTR区域。实时荧光定量PCR结果显示,与IOSE80细胞中的阴性对照相比,miR-199a-5p和miR-206对应的模拟物(mimics)分别使SULF1的mRNA表达水平降低至23.07%和20.11%,而它们的抑制剂(inhibitors)则分别使SULF1的mRNA表达水平升高3.62倍和3.09倍。Western blotting结果表明,miR-199a-5p和miR-206也可降低SULF1蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验表明,miR-206和miR-199a-5p均可直接结合SULF1的3’-UTR,且miR-206具有更强的调控作用。CCK-8实验结果表明,降低miR-199a-5p和miR-206的表达水平可显著增强IOSE80细胞对顺铂的敏感性(IC50:9.287μmol·L^(-1)/11.32μmol·L^(-1)vs.16.75μmol·L^(-1)),相反,二者过表达可显著降低IOSE80细胞对顺铂的敏感性。结论miR-199a-5p和miR-206均可直接与SULF1的3’-UTR结合,下调SULF1表达,降低卵巢细胞对顺铂的敏感性。

Pim-1、SULF1、E-cadherin在结直肠癌组织中的表达意义

目的:探究丝/苏氨酸激酶-1(Pim-1)、硫酸酯酶1(SULF1)、上皮型黏附素(E-cadherin)在结直肠癌组织中的表达意义。方法:选择2018年1月—2019年8月我院收治的180例结直肠癌患者作为观察对象,取结直肠癌和癌旁组织标本,通过免疫组织化学测试Pim-1、SULF1、E-cadherin表达情况,分析三者的表达与结直肠癌临床病理参数的关系,统计结直肠癌患者随访24个月的生存状况,分析Pim-1、SULF1、E-cadherin表达情况与预后的相关性。结果:相比癌旁组织,结直肠癌组织中Pim-1、SULF1阳性率明显更高,E-cadherin阳性率明显更低(P<0.05)。在结直肠癌组织中,Pim-1、SULF1阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而增加;E-cadherin阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而降低(P<0.05)。结直肠癌患者24个月生存率为81.67%,其中Pim-1、SULF1阳性表达患者24个月生存率明显低于阴性表达患者,E-cadherin阳性表达患者24个月生存率明显高于阴性表达患者(P<0.05)。结论:Pim-1、SULF1、E-cadherin参与结直肠癌的发病,与患者临床特征和预后密切相关。

Hsulf-1介导PI3K/AKT信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的作用机制研究

目的探讨人硫酸酯酶-1(Hsulf-1)基因介导磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的作用机制。方法将构建成功的pcDNA 3.1(+)-Hsulf-1质粒及Hsulf-1 siRNA质粒分别转染肝癌细胞系SMMC7221细胞,应用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理,分为Hsulf-1过表达组、Hsulf-1 siRNA组、抑制剂组及空白组;采用RT-PCR法及Western blot法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和β连环蛋白(β-catenin)的mRNA及蛋白表达水平,采用Transwell小室实验法检测细胞迁移能力。结果Hsulf-1过表达组E-cadherin和β-catenin mRNA表达水平均明显高于空白组(均P<0.05);Hsulf-1 siRNA组、抑制剂组E-cadherin和β-catenin mRNA表达水平均明显低于空白组(均P<0.05)。与空白组比较,Hsulf-1过表达组Hsulf-1、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为高,p-AKT均明显为低(均P<0.05);Hsulf-1 siRNA组p-AKT蛋白表达水平明显为高,Hsulf-1、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低(均P<0.05);抑制剂组p-AKT、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低(均P<0.05)。与Hsulf-1 siRNA组比较,抑制剂组p-AKT、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低(均P<0.05)。与空白组比较,Hsulf-1过表达组、Hsulf-1 siRNA组SMMC7221细胞迁移数均明显为高,抑制剂组SMMC7221细胞迁移数明显为低(均P<0.05);与Hsulf-1 siRNA组比较,抑制剂组SMMC7221细胞迁移数明显为低(P<0.05)。结论Hsulf-1基因可通过PI3K/AKT信号通路刺激E-cadherin,β-catenin的表达,抑制肝癌细胞侵袭转移,是肝癌侵袭转移的重要机制。

SULF1对肝癌细胞增殖的抑制作用相关分子机制研究

目的探究硫酸酯酶-1(SULF1)调控肝癌细胞增殖的相关机制。方法通过Western blot和免疫组化实验分析SULF1在正常肝组织和肝癌组织中表达的差异性。在HepG2和HuH-7细胞中构建过表达SULF1的稳转细胞系。通过EdU、CCK-8和集落形成实验探究过表达SULF1对肝癌细胞增殖的影响。通过Western blot探究SULF1调控肝癌细胞增殖的相关分子机制。结果与正常肝组织相比,SULF1在肝癌组织中呈低表达。过表达SULF1可以抑制肝癌细胞的增殖。SULF1可以促进p53的表达。结论SULF1在肝癌中作为一种抑癌基因,通过促进p53抑制肝癌细胞的增殖。

重叠延伸PCR法构建小鼠Sumf1基因的定点突变真核表达载体

前期通过染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay，CHIP）筛选出了转录因子activator protein．2 alpha（AP-2α）的靶基因Sumf1．采用重叠延伸PCR定点诱变技术，对AP．2α在Sumf1内含子片段上的两个结合位点的碱基进行定点突变，并构建定点突变表达载体．DNA测序表明，Sumf1内含子片段103—111bp，411～419bp两处的碱基已分别由GCCGTCAGG突变为GAAGTCCTG，由GCCTCTAGG突变为GGATCTCTG，成功实现定点诱变，为进一步研究AP-2α对基因Sumf1的表达调控奠定了基础．

人硫酸酯酶1转染对胰腺癌细胞膜结构及对细胞生物学行为的影响

目的检测人硫酸酯酶1在胰腺癌细胞株中的表达水平,及转染后对胰腺癌细胞膜的结构及生长增殖能力的影响。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7株胰腺株硫酸酯酶1 mRNA的表达水平。采用脂质体Lipofectamine方法对Panc-1细胞进行硫酸酯酶1基因转染。Western blot检测转染前后Panc-1细胞硫酸酯酶1蛋白表达。共聚焦显微镜检测细胞膜表面硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)结构的变化,应用噻唑蓝(MTT)比色分析法测定胰腺癌细胞的生长增殖能力,并检测转染前后的胰腺癌细胞对3种化疗药物(5-氟尿嘧啶、吉西他滨及放线菌素D)敏感性的影响。结果7株人胰腺癌细胞株中3株硫酸酯酶1 mRNA呈高表达,其余4株低表达或无表达。硫酸酯酶1稳定转染后,Panc-1细胞稳定表达硫酸酯酶1蛋白成分。转染后细胞膜表面HSPG结构明显改变,并且硫酸酯酶1表达细胞增殖速度减慢,转染组细胞倍增时间为(68.2±4.3)h,明显慢于对照组(50.3±3.2)h,P<0.05。转染后的胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性并无明显改变。结论人硫酸酯酶1的表达通过影响细胞膜表面HSPG的结构,影响胰腺癌细胞的生长增殖能力,可能作为胰腺癌基因治疗的靶点。

硫酸酯酶1对高糖诱导小鼠肾足细胞自噬损伤的影响

目的探讨小鼠肾足细胞在高糖状态下硫酸酯酶1(sulfatase 1, SULF1)表达情况及其在高糖诱导肾足细胞自噬损伤中的作用机制。方法小鼠肾足细胞根据干预方式分为对照组(采用5.5 mmol/L葡萄糖处理)、高渗组(采用5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇处理)和高糖组(采用25 mmol/L葡萄糖处理),各组分别处理24 h。小鼠肾足细胞再分为空白对照组、阴性对照组和转染组,空白对照组细胞正常培养,转染组细胞转染Sulf1 siRNA,阴性对照组细胞转染negative siRNA,转染48 h。采用反转录PCR法检测各组细胞Sulf1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测各组细胞SULF1蛋白、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt, p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)和磷酸化mTOR(phosphorylated mTOR, p-mTOR)相对表达量,比较p-Akt/Akt p-mTOR/mTOR、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果高糖组细胞SULF1蛋白相对表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(0.84±0.20、0.67±0.60)低于对照组(1.42±0.19、1.99±0.31)和高渗组(1.33±0.25、1.75±0.22)(P<0.05),p-Akt/Akt(0.41±0.03)、p-mTOR/mTOR(0.61±0.01)高于对照组(0.21±0.02、0.27±0.05)和高渗组(0.18±0.02、0.20±0.04)(P<0.05),对照组与高渗组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。转染组细胞Sulf1mRNA和SULF1蛋白、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(0.627±0.074、0.73±0.07、0.55±0.07)低于空白对照组(1.000±0.013、1.63±0.06、1.17±0.10)和阴性对照组(0.924±0.141、1.65±0.14、1.20±0.06)(P<0.05),p-Akt/Akt(0.78±0.04)、p-mTOR/mTOR(0.58±0.01)高于空白对照组(0.30±0.04、0.44±0.03)和阴性对照组(0.34±0.03、0.44±0.04)(P<0.05),空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高糖环境下,肾足细胞SULF1表达降低,对PI3K/Akt/mTOR信号通路的抑制作用减弱,导致通路活性增加,从而抑制自噬,致足细胞损伤;SULF1对高糖诱导的小鼠肾足细胞自噬具有保护作用。