正常与硬化肝组织基因表达差异的初步分析

目的:了解肝硬化的基因表达概况,寻找在肝硬化及正常肝组织中差异表达基因.方法:以各24例肝硬化及正常肝组织的总RNA混合定量后反转录合成含有α-32pdATP的cDNA为探针,与Atlas微阵列表达分析膜杂交.结果:放射自显影结果经AtlasImageTM软件分析显示:在所分析的588种已知基因中,Integrinbeta7、collagentypeⅩⅧ等17个基因在肝硬化组织中表达上调,TFDP2、BAK、ABL等98个表达下调,参与细胞增生、凋亡、分化、细胞间相互作用、与细胞侵袭相关的基因表达水平发生了明显改变.结论:通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变组成了—个肝硬化特异的基因表达谱.系统地研究肝硬化的基因表达改变,与肝硬化发生相关基因的差异变化可为肝硬化诊断和治疗提供线索.

不同肝缺血时限肝硬化及非肝硬化肝组织基因差异表达及其意义

目的探讨肝硬化和非肝硬化肝组织肝缺血不同时限基因差异表达，为合理掌握肝缺血安全时限提供理论依据。方法以正常肝组织为对照，将观测标本分为A（非肝硬化）、B（肝硬化）两组，每组按不同缺血时限（分别为15、30、45min）分为3个亚组。标本取材后立即置入冻存备测，应用4000点基因芯片分析不同缺血时限各组基因差异表达。结果肝缺血15min，非肝硬化组基因表达谱变化以调控内环境稳定的编码基因表达上调为主，而肝硬化组则出现了多个调亡相关基因的高表达。肝缺血30min，两组肝组织调亡相关基因表达均处高峰阶段，不同点在于：肝硬化组促调亡基因表达的数量和Ratio值均大于非肝硬化组；非肝硬化组同期有多个热休克蛋白家族成员编码基因和抗氧化蛋白编码基因高表达肝缺血45min，肝硬化组和热休克蛋白和抗氧化蛋白编码基因均处于低表达水平。结论肝脏遭受缺血性损伤后决定细胞生存状态的关键时限点大约在30min左右；非肝硬化组织抗损伤能力较强，有可能发生耐受超过30min甚至更长的肝缺血时限；肝硬化组织肝缺血安全时限以控制在30min以内为宜。参18。

基因芯片检测肝炎肝硬化患者肝组织中HBVDNA

目的研究病毒性肝炎基因芯片的制备,用肝炎基因诊断芯片,免疫组织化学法和原位分子杂交法,检测99例乙型肝炎后肝硬化肝组织,比较各种方法的优缺点。方法将PCR扩增的HBVDNA探针用点样仪点于玻片介质上,并经过点样处理后制备成基因芯片;收集肝炎后肝硬化肝组织标本99份,分别用基因芯片、原位分子杂交法、免疫组织化学法检测HBVDNA和HBcAg。结果53例HBcAg、HBVDNA阳性组织中基因芯片检测阳性40例;22例HBcAg阳性组织中基因芯片检测阳性6例;32例HBcAg、HBVDNA阴性组织中基因芯片检测均阴性。结论肝炎基因诊断芯片可以检测肝组织中HBVDNA,准确率可达75%,假阳性率低。