硬毛常山中EHP对人结直肠癌细胞HCT-15增殖和凋亡的影响

从常山属植物硬毛常山中分离得到化合物(E)-6-(4-羟基苯基)庚-3-烯-2-酮(EHP),发现其具有较好的抑制人结直肠癌HCT-15细胞增殖活性.深入探究其抗肿瘤活性机理,发现其主要通过细胞周期阻滞,诱导HCT-15细胞的凋亡,抑制了人结直肠癌HCT-15细胞增殖.采用SRB细胞活性检测法、台盼蓝染色、平板克隆实验、流式细胞仪、周期试剂盒检测、Western blot检测和Annexin-FITC/PI双染法,研究EHP抑制人结直肠癌HCT-15细胞增殖机理,发现EHP通过抑制P53、P27、P21、CDK4、Cyclin A2和Cyclin D1蛋白表达,促进蛋白CDK1、CDK2、Cyclin B1和Cyclin E1表达,阻滞肿瘤细胞停留在G2期,抑制了细胞的增殖;另外,EHP通过上调cleaved PARP1、active Caspase 9和active Caspase 3活性蛋白表达,诱导HCT-15凋亡作用.

硬毛常山中的1个新羽扇豆烷型三萜

利用硅胶柱色谱、制备液相色谱、凝胶色谱(Sephadex LH-20)、重结晶等方法从硬毛常山枝叶的甲醇提取物中分离得到9个化合物,采用NMR,MS等方法进行化合物的结构鉴定,分别鉴定为3β,21α-二乙酰基-9,11-烯-7β-羽扇豆醇[3β,21α-O-diacetyl-lup-9(11)-en-7β-ol](1)、Z-对羟基肉桂酸甲酯(2)、顺式香豆酸乙酯(3)、E-对羟基肉桂酸甲酯(4)、反式香豆酸乙酯(5)、4-喹唑酮(6)、7-羟基香豆素(7)、绣球酚(8)、丁香醇C(9)。化合物1为未见报道的新羽扇豆烷型三萜类化合物,化合物1～5,8～9为首次从硬毛常山中分离得到。Nrf2-ARE信号通路活性筛选结果显示,化合物2～5对Nrf2-ARE信号通路具有激活活性。