硬脂醇半乳糖苷修饰盐酸厄洛替尼脂质体的研制

采用pH梯度结合逆相蒸发法,制备了硬脂醇半乳糖苷(18-Gal)修饰的盐酸厄洛替尼脂质体。以包封率为评价指标,利用正交试验优化处方工艺,并考察脂质体的形态、粒径、包封率和稳定性。结果表明,18-Gal修饰的盐酸厄洛替尼脂质体呈球形,外观圆整,粒径为(197.4±2.3)nm,包封率为(72.2±1.7)%,在4℃贮存60 d渗漏率小于2%。以肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,初步考察该脂质体的体外细胞毒性。MTT试验结果显示,在相同药物浓度作用下,18-Gal修饰的盐酸厄洛替尼脂质体对SMMC-7721细胞株的抑制率优于盐酸厄洛替尼原药及未修饰的盐酸厄洛替尼脂质体。并且,该脂质体诱导SMMC-7721细胞凋亡的能力在3个受试组中最强。

硬脂醇半乳糖苷修饰吉西他滨纳米脂质体的制备及处方优化

目的制备硬脂醇半乳糖苷修饰的盐酸吉西他滨纳米脂质体(18-GGNL),并采用响应面法优化其处方工艺。方法用硫酸铵梯度法制备18-GGNL,以包封率为评价指标,运用Box-Behnken响应面设计法对处方进行优化,并对其包封率、形态、粒径、稳定性和体外释放度进行综合评价。结果得到最优处方为磷脂与胆固醇的质量比为3.10︰1,硫酸铵浓度0.19 mol·L?1,脂物比为20.99︰1,所得的优化脂质体平均包封率为(70.8±0.95)%,平均粒径为(89.5±5.3)nm,粒径分布较窄,稳定性好且具有缓释特性。结论以硫酸铵梯度法制备的18-GGNL理化性质良好。

硬脂醇半乳糖苷修饰盐酸吉西他滨纳米脂质体的包封率测定

建立了微柱离心-高效毛细管电泳法测定硬脂醇半乳糖苷（18-Gal）修饰的盐酸吉西他滨纳米脂质体包封率。采用阳离子交换树脂分离脂质体和游离药物。采用未涂渍标准熔融石英毛细管柱,以pH 2.69的45 mmol/L磷酸二氢钠溶液为电泳缓冲液,运行电压25 kV,毛细管柱温25℃,检测波长269 nm,压力进样5 kPa×3 s。盐酸吉西他滨在4∽250？g/ml浓度范围内线性关系良好。3批制品包封率分别为70.9%、69.7%和72.2%。

硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体的制备及体外活性研究

目的制备硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体,并进行处方筛选及体外活性研究。方法采用硫酸铵梯度法制备硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体,以包封率及粒径为评价指标,采用Box-Behnken响应面设计法优化制备工艺,并研究硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的增殖抑制及凋亡的诱导作用。采用CCK-8法检测硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的生长抑制情况,采用了Annexin V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡。结果最佳工艺:药与磷脂比为1∶14.95,胆固醇与磷脂之比为1∶4.45,水浴温度为61.93℃,硫酸铵溶液的体积为4.31 m L。硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体的粒径为(252±6.4)nm,包封率为(68.50±0.85)%。CCK-8细胞毒性试验结果显示,在药物浓度相同时,抑制率随时间的延长而增加;作用时间相同时,抑制率随药物浓度的增大而增加。Annexin V/PI流式试验结果显示,硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的抑制率优于人肝癌A549细胞株。结论硫酸铵梯度法制备硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体的处方合理,工艺可行,包封率高。硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株有更高的细胞毒性,诱导SMMC-7721细胞株凋亡能力比A549的强。初步判定硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体具有主动肝靶向性。

硬脂醇半乳糖苷修饰阿西替尼脂质体的制备及体外细胞毒性研究

目的:研究硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的增殖及凋亡的诱导作用。方法:采用冷冻干燥法制备硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体,以包封率为评价指标,采用葡聚糖凝胶过滤法和高效液相色谱法测定硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体的包封率。采用Box-Behnken响应面设计法优化制备工艺,并研究CCK-8法检测硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的抑制情况,采用Annexin V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡蛋白Bax,Bcl-2,P53的表达。结果:最佳工艺:药脂比为1∶20,胆脂比为1∶8,硬脂醇半乳糖苷与磷脂比为1∶15,水合温度为55℃。CCK-8法检测不同浓度的硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对SMMC-7721细胞株的增殖具有抑制作用,呈现时间和浓度依赖性。Annexin V/PI流式细胞分析法检测硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体对人肝癌SMMC-7721细胞株的抑制率优于人肺癌A549细胞株,Western blot检测发现随着硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体浓度的升高,Bax,P53蛋白的表达逐渐升高,Bcl-2蛋白的表达逐渐降低。结论:硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体在一定浓度范围内,可在体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株的增殖并诱导其凋亡,且随着硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼前体脂质体的浓度升高,凋亡率显著增加,可能的机制是增强促凋亡蛋白Bax,P53的表达,降低抗凋亡蛋白Bal-2的表达。硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体诱导SMMC-7721细胞株凋亡能力比A549强,初步判定硬脂醇半乳糖苷修饰的阿西替尼脂质体具有主动肝靶向性。

番茄红素肝靶向脂质体制备工艺研究及肝靶向性评价

番茄红素是一种天然功能性类胡萝卜素,因化学稳定性及水溶性较差降低了生物利用率,将其制备成靶向脂质体可改善其水溶性并扩大其应用范围。实验采用探头式超声-逆向蒸发法制备以硬脂醇半乳糖苷为配体修饰的番茄红素肝靶向脂质体,单因素及响应面法优化后最佳工艺为大豆卵磷脂与胆固醇比7∶1、配体与固体脂质比1∶40、药脂比1∶48、旋蒸时间35 min、旋蒸温度51℃,在此条件下制备的脂质体包封率为(91.13±0.20)%,载药量为(2.39±0.37)%,粒径为(252.63±5.87)nm,在不同光照条件、贮藏温度以及有无氧气条件下稳定性均良好。动物实验显示番茄红素肝靶向脂质体组小鼠肝脏部位番茄红素含量最高,证明了经硬脂醇半乳糖苷修饰后,番茄红素脂质体肝靶向性增强。