聚乳酸凝胶预防硬膜外瘢痕粘连的实验研究

目的 探讨新型生物可吸收材料聚乳酸凝胶 (polyactic acid glue,PL A- G)预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用。 方法 切除 2 4只成年日本大耳白兔的 L2 和 L5椎板 ;在 L5外露的硬膜及神经根表面喷涂液态PL A- G形成胶冻膜 ,为实验组 ;L2 处只做椎板切除 ,为自身空白对照组。术后 2、4、6、8、10及 12周随机处死各 4只兔 ,取标本行大体、组织学及超微结构的观察。 结果 2周时实验组 PL A- G未降解为机械屏障膜 ,硬膜与外侧瘢痕组织 (scartissue,ST)间有明显间隙 ,光镜下显示间隙内无细胞 ;对照组为血肿覆盖较易分开 ,硬膜与 ST间有血细胞团块 ,成纤维细胞 (fibroblast,FB)增生活跃。 4周时实验组 PL A- G部分降解 ,机械屏障及间隙存在 ,光镜下 ST中 FB增多 ;对照组为较多质脆 ST与硬膜广泛粘连 ,光镜下可见组织细胞浸润间隙 ,ST内 FB明显多于实验组。 6周时实验组 PL A- G完全降解 ,少量 ST与硬膜无粘连 ,光镜下 FB已减少 ;对照组有大量质韧难以从硬膜分离的 ST,FB继续增生活跃。 8、10及 12周时实验组 ST与硬膜无粘连 ;对照组 ST与硬膜粘连严重 ,光镜下见 ST和硬膜粘连紧密伴毛细血管再造。超微结构观察 :4周时实验组 FB的粗面内质网较稀疏 ,分泌胶原纤维少 ;对照组 FB的粗面内质网极丰富 ,胶?

干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的实验

背景:应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其研究方向。目的:制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]与干扰素/PLGA复合膜,观察其防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用。设计、时间及地点:2005-05/2007-04在中科院长春应用化学研究所完成材料制备,随机对照动物实验在解放军第二○八医院实验动物室完成。材料:PLGA膜、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜由中科院长春应用化学研究所制备。方法:大耳白兔120只行L2及L4椎板切除,随机分为6组,每组20只,于椎板缺损区处理如下:①空白对照组:硬膜外不放任何物质。②自体游离脂肪组:取皮下脂肪贴于硬膜表面。③透明质酸钠组:透明质酸钠1mL涂于硬膜外。④PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组:分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外。主要观察指标:术后2,4,6,8周处死动物,观察L2手术区硬膜外瘢痕形成及粘连程度并评分,然后完整取下L4节段脊柱,行苏木精-伊红染色及Masson染色,光镜下观察并行组织学评分。结果:随着时间的延长,空白对照组形成较广泛的瘢痕;自体游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组,前两者比较差异无显著性;透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组,后期差异无显著性,但仍优于空白对照组;壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量最少,与硬膜无或轻微粘连,明显优于其他各组,两种复合膜组间差异不明显。结论:壳聚糖/PLGA与干扰素/PLGA复合膜均可预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连,效果相近。

三七透明质酸钠凝胶对家兔硬膜外瘢痕中Cox-2、TGF-β1及CTGF表达的影响

目的:研究三七透明质酸钠凝胶对家兔硬膜外瘢痕中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)及结缔组织生长因子(connective-tissue growth factor,CTGF)表达的影响。方法:将72只大耳白品系家兔随机分为A、B、C、D 4组,制作家兔L6椎板切除模型,分别在硬膜囊周围滴加生理盐水、三七浓缩液、透明质酸钠、三七透明质酸钠凝胶各0.5ml。各组于术后1、2、4周取手术局部硬膜外瘢痕组织,采用原位杂交法检测Cox-2 mRNA和CTGF mRNA的表达情况,采用免疫组化法检测TGF-β1抗体的表达情况。结果:术后1、2周时D组硬膜外瘢痕中Cox-2 mRNA的表达较其他各组显著减少(P<0.05),其他各组间无显著性差异(P>0.05);各组2、4周时较1周时及A、B、C组4周时较2周时均显著减少(P<0.05),D组2周和4周时无显著性差异(P>0.05)。术后1周时CTGF mRNA的表达B、C、D组较A组及D组较B、C组均显著降低(P<0.05);2周时D组较其他各组均降低(P<0.05),其他各组间无显著性差异(P>0.05);A、C组2、4周及B组4周较1周时均显著减少(P<0.05),其他各组各时间点之间无显著性差异(P>0.05)。术后1周时TGF-β1抗体的表达B、C、D组较A组及D组较B、C组均显著减少(P<0.05),2周时D组较A、B、C组均显著减少(P<0.05),其他各组之间无明显差异(P>0.05);各组2周与1周时比较均无显著性差异(P>0.05),4周时较1、2周时均明显减少(P<0.05)。术后4周时各指标各组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:三七透明质酸钠凝胶可明显抑制硬膜外瘢痕组织中与成纤维细胞增殖相关的Cox-2、TGF-β1、CTGF的表达,其作用优于单独使用三七浓缩液或透明质酸钠。

活血消瘢冲剂预防腰椎间盘突出术后硬膜外瘢痕的临床研究

目的 :探讨活血消瘢冲剂预防腰椎间盘突出术后硬膜外瘢痕形成的有效性。方法 :4 5例腰椎间盘突出病人随机分为 3组 :活血消瘢冲剂组 (中药组 ) ,双氯芬酸钠组 (西药组 ) ,空白对照组 (空白组 ) ,均行标准的后正中入路、单侧椎板间开窗、髓核摘除手术。中、西药组术后分别给予活血消瘢冲剂、扶他林缓释片口服。 3组于术前及术后 1、2周测定血液流变学、血浆前列腺素E2 (PGE2 )的含量、尿羟脯氨酸 (UHOP)含量。术后 8周行增强CT扫描并按陆裕朴疗效标准评定手术效果。结果 :中、西药组术后各阶段各项生化指标与空白组比较差异有显著性意义。术后 8周增强CT扫描示中、西药组硬膜外瘢痕增强程度较空白组为轻 ,手术优良率明显高于空白组。结论 :活血消瘢冲剂有减少腰椎间盘术后硬膜外瘢痕的作用。

内窥镜下髓核摘除术后硬膜外瘢痕的MRI测量及评估

目的:观察后路内窥镜下髓核摘除术(MED)后3个月硬膜外瘢痕的MRI表现,探讨面积测量结合分级评分法评估硬膜外瘢痕临床应用价值。方法:选择2010年3月至2010年8月行MED治疗的32例单节段单侧腰椎间盘突出症患者,术后3个月复查腰椎平扫+增强MRI。3位评估者应用面积测量结合分级评分法分别独立评估测量32例患者的术后增强MRI,计算硬膜外瘢痕平均面积及瘢痕指数。采用组内相关系数(ICC)检验分析评估者间测量一致性。结果:3位评估者测得3组硬膜外瘢痕平均面积的组间差异无统计学意义(P>0.05),评估者间一致性良好(ICC值为0.771,95%可信区间[0.715,0.819])。3位评估者测得3组硬膜外瘢痕指数组间差异无统计学意义(P>0.05),评估者间一致性良好(ICC值为0.788,95%可信区间[0.659,0.881])。结论:面积测量结合分级评分法可对术后硬膜外瘢痕情况进行定量,操作简单可行,具有一定的临床指导意义。

三七透明质酸钠凝胶对家兔硬膜外瘢痕中成纤维细胞凋亡的影响

目的:研究三七透明质酸钠凝胶(以下简称"三七凝胶")对硬膜外瘢痕组织中成纤维细胞凋亡的影响。方法:选取大耳白品系家兔作为实验动物,制作家兔椎板切除模型,在硬膜囊周围分别滴加三七凝胶、三七浓缩液、透明质酸钠、生理盐水,于术后第2、4、8周取材。通过末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TdT)介导的原位缺口末端标记法(Tunel)和原位杂交法观察各组局部硬膜外瘢痕中成纤维细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达情况。结果:对硬膜外瘢痕中成纤维细胞凋亡的Tunel染色显示,三七凝胶组在第2、4、8周的细胞凋亡指数显著高于生理盐水组和透明质酸钠组(P<0.01),且于第2周与三七浓缩液组无明显差异;透明质酸钠组在第2、4、8周与生理盐水组均无明显差异(P>0.05)。原位杂交检测Caspase-3表达的结果显示,实验第2周时三七凝胶组的Caspase-3表达量最高,较其他各组均具有显著性差异(P<0.05),三七浓缩液组较生理盐水组高,有统计学意义(P<0.05);第4周时各组间均无统计学差异;第8周时三七凝胶组的Caspase-3表达量均显著高于生理盐水、三七浓缩液及透明质酸钠组(分别P<0.01,0.01,0.05)。结论:三七凝胶可明显诱导成纤维细胞凋亡,促进凋亡执行因子Caspase-3的表达;透明质酸钠对瘢痕中成纤维细胞凋亡的影响不大;三七凝胶诱导瘢痕中成纤维细胞凋亡的机制可能与促进Caspase-3的表达有关。

几丁糖和聚乳酸防粘连凝胶及玻璃酸钠预防硬膜外瘢痕粘连的实验研究

目的:观察和评价几丁糖、聚乳酸防粘连凝胶及玻璃酸钠对椎板切除模型大鼠硬膜外瘢痕粘连的干预效果,并探讨其作用机制。方法:72只成年雄性SD大鼠随机分为几丁糖组、聚乳酸防粘连凝胶组、玻璃酸钠组和生理盐水组,每组18只。行L1椎板切除术,造成0.4cm×1.0cm大小缺损,同时于硬膜外分别涂以几丁糖、聚乳酸防粘连凝胶、玻璃酸钠及生理盐水冲洗,术后常规饲养。分别于术后第4、8、12周处死大鼠,每批每组随机抽取6只大鼠取术段脊椎进行大体观察、HE染色光学切片组织学观察,评估瘢痕粘连程度,电镜观察纤维细胞结构。结果:术后4周,生理盐水组大体、组织学观察结果评分与几丁糖组、聚乳酸防粘连凝胶组及玻璃酸钠组比较,差异有统计学意义(P<0.01),几丁糖组、聚乳酸防粘连凝胶组及玻璃酸钠组间差别无统计学意义(P>0.05);术后8周及12周,聚乳酸防粘连凝胶组大体、组织学观察结果评分优于几丁糖组、玻璃酸钠组及生理盐水组(P<0.01),几丁糖组、玻璃酸钠组优于生理盐水组(P<0.01),几丁糖组优于玻璃酸钠组(P<0.01)。术后12周,电镜观察,生理盐水组纤维细胞细胞器充分,合成胶原功能完全;几丁糖组细胞器较玻璃酸钠组少,合成胶原功能较低;聚乳酸组中细胞器最少,合成胶原功能最低。结论:几丁糖、聚乳酸防粘连凝胶、玻璃酸钠对椎板切除模型大鼠硬膜外瘢痕形成均有明显抑制作用,聚乳酸防粘连凝胶预防粘连效果优于几丁糖和玻璃酸钠。

一种预防腰椎管术后硬膜外瘢痕粘连的手术方法的临床观察

腰椎管狭窄症、腰椎间盘突出症及椎管内肿瘤常常采用后路部分或全部椎板切除术,大多数患者的症状得到长期缓解,但有部分病人由于手术破坏了脊柱的后柱结构,术后发生持续反复的腰腿疼,其原因较多,而硬膜外瘢痕粘连是最重要的原因。为了预防腰椎管术后硬膜外瘢痕粘连的形成，自2006年8月～2009年4月我们采用钛网椎管成形加玻璃酸钠治疗椎管内疾病，取得了良好效果，报告如下。

聚乙交酯膜预防椎管术后硬膜外瘢痕粘连的实验研究-大体影像学改变

目的 :观察聚乙交酯 (PolyglycolicPGA)膜对预防椎板切除术后硬膜周围粘连的作用。方法 :健康成年新西兰兔 32只 ,在L3 ,L5部位切除椎板 1.0cm× 0 .5cm一缺损部位在硬膜外放置聚乙交酯膜 ,另一缺损部放置明胶海绵或空白对照 ,分别于手术后 3,6 ,9和 12周进行大体形态 ,CT和B超观察。结果 :大体形态观察PGA膜 3周时开始降解 ,6周时分解成较大碎片 ,9周时吸收 6 0 %～ 80 % ,12周时仅残留部分小碎片 ,硬膜外无瘢痕粘连。明胶海绵和空白对照组无明显差异 ,瘢痕粘连发生率为 88%和 10 0 %。CT观察 :静脉增强造影前后明胶海绵组和空白对照组硬膜外组织CT值各个周期均比同一周期的PGA膜组为高。三种方法造影前、造影后各期所测CT值同期比较 ,经方差分析 ,PGA膜组与明胶海绵组及空白对照组之间存在明显的差异(P <0 .0 0 1)。明胶海绵组与空白对照组造影前后所测CT值同期比较经t检验 ,无明显差异 (P >0 .0 5 )。B超提示 :PGA膜组各期椎管边缘清晰整齐 ,明胶海绵及空白对照组椎管内密度增高 ,有强回声团 ,椎管后缘不整齐。结论 :PGA膜能有效防止椎管术后瘢痕粘连。

重组人干扰素α-2b对硬膜外瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

目的探讨重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)对体外培养的硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞生物学作用的影响。方法制作兔椎板切除模型。利用体外细胞培养技术,通过MTT测定法、流式细胞术等方法观察、分析rhIFNα-2b对硬膜外瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,数据采用方差分析及SNK-q检验处理。结果与对照组比较,实验组加入rhIFNα-2b后,硬膜外瘢痕成纤维细胞生长趋势及增殖活性被明显抑制,G1期细胞百分数明显增高。结论rhIFNα-2b对硬膜外瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用,说明rhIFNα-2b在预防硬膜外瘢痕的形成中有一定的应用价值。

腰椎术后硬膜外瘢痕的形成机制及其防治研究

腰椎间盘突出症、腰椎管狭窄症、腰椎管内肿瘤等疾病是骨科临床上常见的脊柱疾病,椎板切除术是治疗此类疾病常规的手术步骤和常用的减压方式,能够明显缓解腰部和下肢疼痛症状,促进患者肢体功能的恢复。然而。

预防硬膜外瘢痕粘连的实验研究

目的通过动物实验观察几丁糖对预防椎板切除术后硬膜瘢痕粘连的作用。方法24只成年山羊行腰2腰4短节段椎弓根钉系统固定及取自体髂骨行后外侧植骨融合术,腰3水平全椎板切除,切除口约3cm×1.5cm,腰3硬膜外分别放置几丁糖或空白对照各12只。于术后24周进行大体形态、组织学观察,并进行硬膜外瘢痕粘连程度分级。结果几丁糖组硬膜与瘢痕无明显粘连,空白对照组硬膜与瘢痕紧密粘连。结论几丁糖能有效地预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连。

姜黄素对椎板切除术后大鼠硬膜外瘢痕组织中羟脯氨酸含量的影响

目的:观察姜黄素对椎板切除术后大鼠硬膜外瘢痕组织中羟脯氨酸含量的影响,探讨其作用机制。方法:36只SD大鼠手术切除L1椎板后造成0.3 cm×0.5 cm硬脊膜裸露区,随机分为3组。空白对照组(A组)不作任何治疗;胶原蛋白海绵组(B组)、姜黄素胶原蛋白海绵组(C组)分别在椎板缺损处放置0.5 cm×0.7 cm胶原蛋白海绵和吸收姜黄素二甲基亚砜溶液(0.25 g/ml)的胶原蛋白海绵。术后4周进行瘢痕组织羟脯氨酸含量测定,并按Rydell法大体评定粘连程度。结果:B、C组硬膜外瘢痕组织中羟脯氨酸含量均低于A组(P<0.05和P<0.01)。Rydell分级显示,C组与A组差异有统计学意义(P<0.01),而B组与A组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:姜黄素能减少椎板切除术后硬膜外瘢痕生成,抑制胶原纤维的形成。

预防硬膜外瘢痕粘连脂肪移植体大小的筛选研究

目的 比较用不同大小自体脂肪株植入预防椎板切除术后硬膜外腔瘢痕粘连的效果。方法 将 10 0只SD大鼠随机分为A组 (大片脂肪植入组 ,n =2 0 )、B组 (直径约为 4～ 6mm的脂肪株植入组 ,n =2 0 )、C组 (直径约为 2～ 4mm的脂肪株植入组 ,n =2 0 )、D组 (直径约为 1～ 2mm的脂肪株植入组 ,n =2 0 )、E组 (空白对照组 ,n =2 0 ) ,在椎板切除造模同时 ,取手术动物的自体脂肪精确制成大小不同的脂肪株后 ,将其植入椎板缺损区。分别于术后 2、 4、 8、 12周进行大体、光镜、电镜及免疫组化检查。结果 各组预防硬膜外腔瘢痕粘连效果的比较结果为C组最优 ,B组次之 ,A组、D组差别不大。结论 用直径为 2～ 4mm的自体脂肪株植入预防硬膜外腔瘢痕粘连比用其他大小的自体脂肪效果更佳 ,从而为在临床上应用自体脂肪预防椎板切除术后硬膜外腔瘢痕粘连时选用移植体的大小提供了一定的参考依据。