尿样中4种β-激动剂残留GC-MS确证检测技术研究

应用SLH优化固相萃取净化、BSTFA+TMCS衍生、气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)同时检测确证尿样中4种典型β-激动剂(克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林)的残留量。采用简化的前处理净化和衍生技术,结合扫描和选择离子监测技术,通过标准添加和对特异性酶联免疫法初筛呈阳性样品再确证,建立了一套应用GC-MS技术检测确证β-激动剂多残留的方法。方法具有准确度高、速度快、成本低等优点,方法最小检出限为0.5μg/kg。

采供血机构开展集中确证检测的问题与建议

开展集中确证检测,有利于提高血液筛查实验室的检测能力和质量管理能力,也有利于改进献血者全程动态管理体系。目前,我国采供血机构集中确证检测开展存在体系滞后,实验室检测水平有待提高,献血者管理短板突出,献血者全程有效管理机制亟待改进等问题。对此,提出以下3方面改进建议:一是政策层面的驱动,二是区域应用的驱动,三是需求层面的驱动。

500例HIV抗体筛查阳性样本确证检测

目的研究分析HIV抗体筛查阳性样本确证检测的临床价值。方法回顾性探析广东省某HIV确证实验室检测的500例HIV抗体筛查阳性样品,应用免疫印迹法(Western-blot,WB)进行确证检测,对确证试验的带型进行分析。结果本组500例HIV抗体筛查阳性标本中,确证HIV抗体阳性468例,符合率为93.6%;阴性11例,占2.2%;不确定结果 21例,占4.2%。468例HIV抗体阳性样品的带型分析,反应条带gp160出现率为97.86%(458/468);gp120的出现率为98.72%(462/468);p17出现率为80.34%(376/468);p55出现率为56.41%(264/468)。21例HIV抗体不确定样品中,共发现9种带型,其中以p24出现率最高,为71.43%(15/21);全部患者均随访成功,转阳样品8例,占38.10%(8/21);带型主要为p24、p66、gp160组合模式;转阴样品2例,占9.52%(2/21);带型无进展样品11例,占52.38%(11/21)。结论确定为HIV-1抗体阳性者经WB确证,阳性结果负荷率较高,但阳性者反应条带各带型的出现率不同。HIV抗体不确定者,具有一定的假阳性,必须谨慎处理,重视随访监测,提高对确证结果判读有助于临床诊断。

杭州市2013-2019年HIV待确证检测样本重复情况

HIV抗体是HIV感染诊断的一个重要指标[1]。近年来,已确证病例因其他疾病就诊时,医院对其进行HIV抗体筛查呈阳性后,会按《全国艾滋病检测技术规范》(2020年修订版)[2](简称《规范》)要求将样本送至上级实验室进一步检测。为减少资源浪费,本研究对杭州市HIV确证检测中已确证病例的重复送检情况进行了分析,为进一步改进相关措施提供依据。

2016年哈尔滨市HIV抗体确证检测结果分析

目的2016年对哈尔滨市HIV抗体确证检测结果分析，了解其年龄分布、样品来源等因素，为艾滋病的防治工作提供依据。方法根据《全国艾滋病检测技术规范》（2015年修订版）和人类免疫缺陷病毒（HIV 1＋2型）抗体检测试剂盒试剂说明书，进行免疫印迹试验，对确证结果进行流行病学分析。结果2016年共检测样本1 325份，确证结果阳性为1 044份（78.79%），确证结果不确定为149份（11.25%），确证结果阴性为132份（9.96%）。其中男性1 158份（87.3%），女性168份（12.7%）。21-30岁485份（36.60%），31-40岁290份（21.89%），41-50岁233份（17.58%）。样品来源于哈尔滨市各级疾病预防控制中心（简称疾控中心）艾滋病自愿咨询检测（HIV voluntary counseling ＆ testing，VCT）379份（28.53%），医疗机构的医务人员主动提供艾滋病检测（provider initiated HIV testing and counseling，PITC）门诊、住院患者762份（57.51%）。结论2016年哈尔滨市HIV抗体确证检测阳性者以21-50岁青壮年为主，以疾控中心和医疗机构为主要来源，加大疾病控制中心和医疗机构的HIV-Ab筛查力度，加强对青壮年的宣传教育，遏制艾滋病的蔓延。

减肥产品中非法添加西布曲明类似物的ESI-MS/MS检测与确证

通过分析西布曲明和减肥类健康产品中未知化合物质谱图的质谱信息,由高分辨串联质谱获得裂解碎片离子的精密质量数,质谱软件给出碎片的可能组成,推测了西布曲明和未知化合物的质谱裂解途径,进而推测出该化合物的结构。并通过合成该结构的化合物,采用液相色谱-串联质谱法对样品作确证检验,证实样品中添加了新的西布曲明类似物。该实验提供了一种可用于检测和确证健康产品中非法添加合成药物未知类似物的方法。

应对“肯定列表”,出口蔬菜中多农残检测及确证

通过对出口蔬菜中常见高频农药残留气相色谱-质谱测定所使用的提取溶剂、固相萃取柱吸附剂类型、淋洗液的种类和用量等主要因素进行优化和选择,系统确立了结合使用SAX/PSA净化剂等前处理方法和检测仪器的选择方法及其监测离子选择,明确了分析保护剂种类及配比,前处理技术好于GB/T19648-2006和多个实验室使用的方法。

2017年淮安市HIV抗体筛查阳性标本复检与确证结果

目的对艾滋病病毒(HIV)抗体筛查阳性标本的确证结果进行分析,为艾滋病防治工作提供依据。方法对2017年淮安市231例HIV抗体筛查阳性标本采用蛋白免疫印迹试验(WB)进行确证。结果 231例筛查阳性样本经WB确证,阳性151例(占56.37%),阴性44例(占19.05%),不确定36例(占15.58%)。不同机构筛查阳性标本的确证阳性率差异有统计学意义(P<0.01),其中采供血机构的确证阳性率最低,为11.11%。在确证阳性的标本中,出现7条以上带型139份(占92.05%);条带gp160、gp120和p24出现率最高,为100.00%,条带p39出现率最低,为64.24%。不确定的样本中,条带gp160出现率最高,占61.11%;33例成功随访,其中2例HIV抗体转阳。结论通过WB确证实验可以排除筛查实验中的假阳性,对于不确定的样本要加强随访,减少潜在新发感染者的流失。

HIV-1核酸检测在抗体确证不确定和阴性病例中的应用研究

目的明确上海市HIV抗体确证不确定或阴性病例中可通过HIV-1核酸检测进行诊断的感染者规模,探讨常规化开展核酸检测对增加感染者发现的价值。方法对上海市三家艾滋病检测确证实验室在HIV抗体确证检测中发现的136例不确定和210例阴性病例的检测余样(多来源分析)进行HIV-1核酸定量检测,结合样本来源进行分析;根据初步结果在某自愿咨询及检测点(VCT试点)开展HIV-1核酸检测工作试点,对抗体确证不确定和阴性样本进行HIV-1核酸定量检测、HIV-1 DNA定性检测,对可根据HIV-1病毒载量诊断的病例进行CD4^(+)T淋巴细胞检测。结果2021年2月—2022年2月多来源样本的HIV-1核酸定量检测结果显示:136例确证不确定样本中,24例(17.7%)超过5000 CPs/ml、2例(1.5%)检出但低于5000 CPs/ml;210例确证阴性样本中,4例(1.9%)超过5000 CPs/ml。VCT来源的抗体不确定病例病毒载量高于检测限的比例(85.7%)高于此外来源。根据上述结果,在2022年1—9月某VCT开展试点:84例HIV抗体筛查有反应的样本中,70例确证阳性;14例确证不确定或阴性者中8例(57.1%)可由核酸检测诊断,占同期病例报告数的10.3%。结论目前以HIV抗体确证为主要补充试验方法的框架下,有必要对确证不确定者进行HIV-1核酸检测。HIV-1核酸检测对VCT来源的HIV感染者发现有重要贡献,且包含核酸检测的工作流程在基层艾滋病确证实验室具有较强的可操作性。

气质联用法快速检测中毒患者体液中毒鼠强

目的建立毒鼠强中毒患者的胃内容物、血液和尿液中快速检测毒鼠强的气质联用方法。方法运用C18小柱对胃内容物与血液进行除杂、净化后,通过气质联用仪上的大体积进样与程序升温进样,并利用小口径毛细管色谱柱HP-5MS(0.18 mm×20 m,0.18μm)进行检测,用选择离子模式对m/z 92、132、212、240进行采集。结果从样品前处理到确证完成全过程耗时约20 min。结论该方法具操作简易快速、定性准确、灵敏度高等特点,能应用于应急检验,为患者抢救工作节省了宝贵的时间。

成都市PITC人群HIV筛查阳性者脱失情况及原因分析

目的了解成都市医务人员主动提供艾滋病检测咨询(PITC)人群筛查阳性者脱失情况及原因,为提升HIV检测发现成功率提供科学依据。方法通过艾滋病综合防治信息系统下载成都市各医疗机构截至2022年底HIV检测历史卡片,获得2018-2022年各医疗机构PITC人群HIV筛查阳性人次数和确证检测人数。设计专用表格收集2022年成都市23个区(市)县所有医疗机构PITC人群HIV筛查阳性者确证检测情况,对脱失比例和原因进行统计分析。结果2018-2022年,成都市PITC人群筛查阳性者粗确证检测比例分别为73.27%、50.82%、44.04%、35.72%、33.15%,呈逐年下降趋势(χ^(2)_(趋势)=7630.41,P<0.001)。剔除既往阳性、筛查阳性后即死亡和已在外院确证人数后,2022年成都市PITC人群筛查阳性者校正后确证检测比例为97.64%(9815/10052),脱失比例为2.36%(237/10052)。不同级别医疗机构脱失比例差异有统计学意义(χ^(2)=46.05,P<0.001),民营医疗机构脱失比例最高(3.57%)。不同地区脱失比例差异有统计学意义(χ^(2)=10.37,P<0.01),近郊区脱失比例最高(3.14%)。脱失的最主要原因为筛查阳性者拒绝确证检测(108人/45.57%),其中男性79人(73.15%),50岁及以上年龄组53人(49.07%),现住址在成都市内65人(60.19%)。结论成都市PITC人群筛查阳性者脱失比例较低,但民营医疗机构脱失比例高于其他机构,应进一步规范检测工作流程,提升检测发现成功率。针对本地50岁及以上中老年人群,应加强检测必要性和检测流程的宣传,强调早检测、早确证、早治疗的益处,提高确证检测依从性。

HIV抗体确证试验条带用于新发感染判定的研究

目的分析凉山州HIV-1新发感染检测结果与四种确证试剂检测带型相关性,了解新近感染者与长期感染者在四种确证检测试剂中所体现的带型特征。方法收集2018-2020年凉山州9733份经过HIV抗体确证试验阳性且为当年新报告感染者并保存完好的血样,用限制性抗原亲和力酶免试验(LAg-Avidity EIA)进行新发感染检测,比较新发感染者和长期感染者四种确证试剂带型特征。结果9733份新报告阳性样本中,7.61%(741/9733)判为HIV-1新发感染。MP-WB确证检测新发感染者确证带型gp41、p66、p51、p31、p55、p39、p17检出率明显低于长期感染者,且差异有统计学意义(Ρ<0.05)。IMT-WB确证检测新发感染者确证带型gp120、gp41、p66、p51、p31、p17检出率低于长期感染者,差异均有统计学意义(Ρ<0.05)。MK-LIA确证检测新发感染者确证带型gp120、p51、p31、p17检出率低于长期感染者,差异均有统计学意义(Ρ<0.05)。WT-RIBA确证检测新发感染者确证带型gp120、p31、p17检出率低于长期感染者,差异均有统计学意义(Ρ<0.05)。结论新发感染者和长期感染者四种确证试剂带型特征存在差异。缺失p31、p17提示为新发感染者的概率高。两种WB确认试剂当gp41、p66、p51条带缺失以及MK-LIA、WTRIBA缺失gp120时也对HIV-1新发感染判断有提示作用。

滁州市2018~2019年HIV抗体筛查阳性标本复检与确证结果分析

目的了解滁州市2018~2019年HIV抗体初筛阳性标本的免疫印迹类型分布情况,为临床诊治提供科学依据。方法收集滁州市2018~2019年200份初筛HIV抗体阳性标本进行免疫印迹(WB)检测。结果 200份阳性标本经免疫印迹确证,其中阳性168份,阳性率84.00%,阴性22份(占11.00%),不确定10份(占5.00%)。不同机构的筛查阳性率差异统计学意义(χ~2=44.561,P<0.001),阳性率最低为采供血机构(26.67%)。168份HIV抗体确认阳性标本,58份标本出现8个全带,占34.52%,gp160、gp120、p66和p51的阳性率最高,其中gp160的阳性率为100.00%,p17条带阳性率最低(41.67%)。10份不确定标本,gpl60条带出现率最高, 5例随访成功,其中3例按规定判定为阳性。结论免疫印迹确证试验能排除筛查实验的假阳性,应高度重视不确定结果,排除艾滋的窗口期和终末期。