蛋清内注射三碘甲腺原氨酸对鸭出雏前后生长发育、血清中甲状腺激素水平及肝脏中D1和D3表达的影响

【目的】以金定鸭为研究对象,孵化前向蛋清内注射三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),检测鸭出雏前后体重、胸浅肌重、血清中甲状腺激素(thyroid hormones,THs)水平的变化,分析肝脏中I型脱碘酶(deiodinases I,D1)和Ⅲ型脱碘酶(deiodinasesⅢ,D3)m RNA表达、蛋白水平及酶活性的变化,探究外源性T3对鸭出雏前后生长发育及肝脏中脱碘酶表达的影响。【方法】将200枚金定鸭种蛋随机分为对照组和试验组,在孵化前从蛋的锐端往试验组种蛋蛋清内注射100μL含250 ng T3的生理盐水,对照组注射不含T3的100μL生理盐水,两组种蛋在相同条件下同期孵化。在27胚龄和7日龄时,记录鸭的体重和胸浅肌重,采用放射免疫分析法检测鸭血清中T3和四碘甲腺原氨酸(thyroxine,T4)水平,利用实时荧光定量PCR检测鸭肝脏中D1和D3的m RNA表达,利用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测鸭肝脏中D1和D3蛋白水平及酶活性。【结果】在27胚龄和7日龄时试验组鸭的体重(P=0.035,0.044)和胸浅肌重(P=0.027,0.037)均显著高于对照组;试验组血清中T3和T4水平在27胚龄时与对照组之间差异不显著(P>0.05),而7日龄时均显著低于对照组(P=0.040,0.040);试验组鸭肝脏中脱碘酶m RNA表达量仅D3在7日龄时显著低于对照组(P=0.040);在7日龄时试验组鸭肝脏中D1和D3的蛋白含量和酶活性亦均显著低于对照组(P=0.017,0.045;P=0.013,0.039)。鸭出雏前后的胸浅肌重与血清中T3水平呈强的负线性相关(r=-0.431,P=0.025);血清中T3水平与肝脏中D3的m RNA表达呈极显著正向相关(r=0.778,P=0.005),血清中T4水平与D1和D3的蛋白水平和酶活性均呈正线性相关(r=0.685,P=0.020;r=0.662,P=0.026;r=0.710,P=0.014;r=0.705,P=0.015)。【结论】蛋清内注射T3促进了鸭出雏前后生长发育,同时伴随着出雏后循环中THs水平的降低,肝脏中D1和D3的表达发生下调。

妊娠期患不同甲状腺疾病产后胎盘碘化甲状腺原氨酸脱碘酶表达的变化

目的探讨孕妇在不同甲状腺疾病及自身免疫状态时，胎盘Ⅱ型和Ⅲ型碘化甲状腺原氨酸脱碘酶（D2、D3）表达的变化。方法选择处于不同甲‘状腺功能及自身免疫状态的孕妇为研究对象，并以既往无甲状腺疾病及相关疾病史、妊娠期甲状腺功能正常且抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）阴性的孕妇作为对照，用RT．PCR法对所获得的足月产孕妇的胎盘组织进行D2、D3的检测，观察表达的变化。结果胎盘组织中同时存在D2和D3的表达。在甲减未控制组产妇胎盘中，D2的相对灰度值为0．916±0．035，高于正常对照组的0．833±0．029（P〈0．05）；而D3的相对灰度值低于正常对照组（0．766±0．038与0．848±0．052），但差异无统计学意义（P〉0．05）。妊娠前或妊娠中有甲亢或甲减的孕妇，经过有效治疗，分娩前甲状腺功能已控制在正常范围的产妇，其胎盘D2及D3的表达与正常对照组比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。甲状腺功能正常但TPOAb阳性的产妇，其胎盘D2和D3的相对灰度值分别为0．842±0．032、0．837±0．053，与正常对照组相比差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论人类胎盘组织中D2和D3并存。在母体甲减时，胎盘中D2的表达增强，D3的表达有所减弱，这种变化可能对稳定母体与胎儿间甲状腺激素输送起有益的作用。

几种蛋白质或多肽放射性碘化方法的比较

在放射免疫和放射受体分析中,所要测量的蛋白质或多肽的浓度往往在 pMole 或更低的范围,因此要求放射性配体必需有高比放射性。多肽、蛋白质用 H3或 C14标记比较困难,最常用的是 I131或 I125标记。后者不仅经济便宜,测量操作简便,而且灵敏度也大大提高。多肽或蛋白质的碘化,要求被标记物的用量少,比放射性高,特别是要保持生物活性。比较熟悉的碘化方法为1.一氯化碘法,2.电解法,3.氯胺-T 法和乳过氧化物酶法。这些方法大多基于蛋白质分子中酪氨酸残基的亲电子碘化作用（为图1所示）。

碘化甲腺原氨酸脱碘酶的研究进展

甲状腺激素是哺乳动物生长发育的重要调节激素，碘化甲腺原氨酸脱碘酶是调控甲状腺激素的主要蛋白酶。其可分为3种类型，有相似的结构，但功能各异，在不同的组织器官，如大脑、子宫、胎盘和肝脏等发挥着不同的生理作用。甲状腺疾病、非甲状腺疾病病态综合征及糖尿病等内分泌疾病，以及一些药物的使用等均能影响其活性。

异柠檬酸脱氢酶（IDH）基因突变与急性髓系白血病关系的研究进展

急性髓系白血病（AML）是一组具有显著异质性的血液系统肿瘤。基于染色体核型的风险评估和预后判断对临床诊治起到了一定的指导作用。但近十余年来随着分子生物学的进展，一些与AML致病及预后相关的分子标志被陆续发现并加入到AML的预后评估和靶向治疗选择中，如FMS样酪氨酸激酶3（FLT3）、核磷蛋白1（NPM1）等。这些分子标志对正常核型AML的预后判断显得尤为重要。现就最近在AML中发现的异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）基因突变及其对AML的影响作一综述。

先天性甲状腺功能减退伴甲状腺大病儿DEHAL1基因突变筛查

目的了解山东地区先天性甲状腺功能减退(甲减)伴甲状腺大病儿碘化酪氨酸脱碘酶(DEHAL1)基因突变类型及特点,为基因诊断提供理论依据。方法收集60例先天性甲减伴甲状腺大病儿(观察组)及100例甲状腺功能正常健康体检者(对照组)的外周静脉血标本,提取其基因组DNA,PCR扩增全部外显子并对PCR产物进行一代测序。结合测序结果及生物信息学分析DEHAL1基因突变情况,并对发现的单核苷酸多态性(SNP)位点的基因频率进行分析。结果观察组及对照组均未发现基因突变,但在第5外显子发现2个SNP位点(分别为rs612421,c.793T>C;rs4479949,c.794G>A),3′端发现2个SNP位点(分别为rs2076286,c.*107C>T;rs2076285,c.*131T>C)。两组SNP基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论山东地区先天性甲减伴甲状腺大病儿DEHAL1基因的突变率低,可能不是其主要病因。

胃肠间质瘤的基因分型及相关研究进展

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)是最常见的胃肠道间质肿瘤,常规化疗无效,主要的治疗方式是手术切除和靶向治疗。分子检测作为推荐的诊断标准化流程,还可以预示疾病的临床表现、治疗、预后甚至发生附加肿瘤的风险。本文对其基因型分型以及相关研究进展进行综述。

DIO3基因在肿瘤发病机制中的作用研究进展

碘甲腺原氨酸脱碘酶3(DIO3)基因是编码3型碘甲状腺原氨酸脱碘酶的印迹基因。大量研究显示,DIO3基因与多种疾病的发生、发展相关,特别是在肿瘤的发病中扮演重要角色。DIO3基因可影响肿瘤细胞增殖和分化,参与肿瘤的发生、发展过程,可能成为肿瘤药物治疗的新靶点。该文就DOI3基因在肿瘤发病机制中作用的研究进展作一综述。

甲状腺激素合成基因与碘代谢和甲状腺疾病的相关性研究进展

碘是合成甲状腺激素的重要原料,钠碘转运体(NIS)、氯碘转运体(Pendrin)、碘酪氨酸脱碘酶(IYD)、甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺过氧化物酶(TPO)和促甲状腺激素受体(TSHR)作为甲状腺激素合成重要的相关基因,均参与碘代谢。甲状腺激素合成相关基因功能异常不仅与甲状腺疾病相关,还与乳腺癌等其他疾病相关。文中对甲状腺激素合成相关基因的功能、与疾病的关系,以及如何受碘的调控进行综述,以期为碘与疾病关系的研究提供新思路。

先天性甲状腺功能减退伴甲状腺肿大患儿DEHAL1基因突变研究

目的研究山东地区先天性甲状腺功能减退伴甲状腺肿大患儿碘化酪氨酸脱碘酶(iodotyrosine deiodinase,DEHAL1)基因突变类型及特点,为基因诊断提供理论依据。方法对18例经新生儿筛查确诊为先天性甲减伴甲状腺肿大患者,采用PCR扩增与直接测序的方法,对DEHAL1基因全部外显子进行基因突变检测。结合测序验证及生物信息学分析,探讨山东地区先天性甲状腺功能减退伴甲状腺肿大患者常见的DEHAL1基因突变类型和特点。结果在18例先天性甲减伴甲状腺肿大患者中,均没有发现DEHAL1基因全部外显子基因突变。分别在5例患者中和4例患者中发现DEHAL1c.678 T>C(p.C265R)和DEHAL1 c.679 G>A(p.R265H)两个单核苷酸多态性位点。结论山东地区先天性甲减伴甲状腺肿大患者中,DEHAL1基因突变率低,可能不是该地区先天性甲减伴甲状腺肿大的主要病因。

基于^(18)F-FET PET影像组学分析预测脑胶质瘤IDH1基因表型模型的建立与验证

目的构建基于O-(2-^(18)F-氟代乙基)-L-酪氨酸(^(18)F-FET)PET图像影像组学特征的回归分析模型,探讨其对未经治疗的脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因表型的预测效能。方法回顾性分析2017年11月至2019年2月间复旦大学附属华山医院经病理学证实的58例脑胶质瘤患者[男36例、女22例,年龄(41.8±15.1)岁]的^(18)F-FET PET/CT脑显像数据,应用PyRadiomics软件包提取105个影像组学特征,使用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归构建预测模型,计算每个病灶的影像组学评分(RS),使用受试者工作特征(ROC)曲线量化模型RS的预测效能,并与^(18)F-FET半定量参数{肿瘤靶本比[TBR,包括最大TBR(TBR_(max))、TBR峰值(TBR_(peak))和平均TBR(TBR_(mean))]、肿瘤代谢体积(MTV)及病灶总代谢摄取(TLU)}对IDH1基因表型的预测效能进行对比(Delong检验)。结果LASSO回归模型共纳入7个影像组学特征,分别为最大二维切片直径、一阶最大特征值、一阶灰度值范围、灰度共生矩阵_能量、灰度共生矩阵_反差方差、灰度相关矩阵_熵、灰度相关矩阵_大相关低灰度级增强。构建的LASSO回归模型对IDH1基因表型(突变型20例,野生型38例)的预测效能准确性为81.0%(47/58),灵敏度为65.0%(13/20),特异性为89.5%(34/38),曲线下面积(AUC)为0.842;^(18)F-FET半定量参数中TLU诊断效能较优,其诊断准确性为60.3%(35/58),灵敏度为85.0%(17/20),特异性为47.4%(18/38),AUC为0.661;LASSO回归模型对IDH1基因表型的诊断效能优于传统参数(z=3.426,P<0.01)。结论基于^(18)F-FET PET脑显像的影像组学分析可提高对未经治疗的脑胶质瘤患者IDH1基因表型的预测效能。