消脂素的间接碘标记法与直接碘标记法的对比研究

间接碘标记法是先以氯胺T(ch-T)法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(Bolton-hunter试剂,BH试剂),制备125I-BH,然后于冰浴中与LEP联结,得到125I-LEP;直接碘标记法是以ch-T法按常规对LEP直接进行标记。结果显示,间接碘标记法标记的125I-LEP放射性比活度为1.43MBq/μg,125I的总标记率为37.8%,所建立的RIA的灵敏度为0.25μg/L,在45天内标准曲线(0.5～30μg/L)稳定,B:B0位于92.7%～17.5%到94.6%～22.8%之间。直接法制备的125I-LEP,放射性比活度为1.79MBq/μg,125I的总标记率为41.4%,方法灵敏度为0.37μg/L。在44天内标准曲线(0.5～30μg/L)亦较稳定,B:B0位于87.7%～23.7%到91.4%～35.2%之间。表明两方法的标准曲线稳定性在45天内差异不大,均能满足临床工作的需求。

以间接碘标记法制备瘦素标记抗原的研究

目的:以间接碘标记法制备瘦素(leptin)的标记抗原(125I-leptin),建立瘦素的放射免疫分析(RIA)并用于临床。方法:先以氯胺T(ch-T)法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(Bolton-hunter试剂,BH试剂)制备125I-BH,然后于冰浴中与leptin进行联结制备125I-leptin。结果:125I-leptin的放射性比活度为1 43MBq/μg,125I的总标记率为37 8%,用以建立的RIA各项技术指标均满足临床要求。结论:由于以间接法制备125I-leptin,减少了leptin与氧化剂、还原剂和放射性碘的接触,避免了对其抗原性的损伤,从而制备出具较高标记率和较高放射性比活度的125I-leptin。

抗CEA单克隆抗体碘标记方法研究

本文报道用几种碘标记方法(Iodosen、ChT、NBS、Bolton-Hunter试剂等)制备了^(125)I(^(131)I)-抗CEA单克隆抗体。产品通过Sephacex G-50(或-75)柱凝胶过滤纯化后,经纸层析和高压液相层析法鉴定,其放化纯度达到使用要求;用免疫放射双抗体夹心法测定,标记抗体能保持良好的免疫活性。同时我们对上述几种碘标方法进行比较研究,结果NBS法标记率最高,达98％,Iodogen法免疫活性保持最好,与CEA的净结合数达9960cpm(3ng CEA/250μl)。

碘标记示踪沉淀法研究神经生长因子的药代动力学

12 5 I-神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)用氯胺 T法制备 ,采用同位素示踪结合三氯醋酸(TCA )沉淀法 ,测定小鼠血浆 NGF的浓度 ,并研究其在体内的分布与排泄。结果表明 ,静注 1 2 5 I- NGF,小鼠体内代谢符合二房室分布模型 ;肌注 1 2 5 I- NGF,小鼠体内代谢符合一房室分布模型。静注 1 2 5 I- NGF2 5 μg.kg- 1 ,测得消除半衰期 (t1 / 2 β)为 4.431h。肌注 1 2 5 I- N GF 75、2 5、10、3.3μg.kg- 1 ,测得消除半衰期 (t1 / 2 β)分别为 2 .135、2 .70 3、3.12 7、4.2 12 h,平均达峰时间 (tmax)为 0 .5 83h。测得 1 2 5 I- N GF平均血浆清除率 (CL)为 0 .2 77L.h- 1 .kg- 1 ,表观分布容积 (Vd)为 1.0 39L.kg- 1 ,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.2 38h。1 2 5 I- NGF在组织器官内的分布速率以颈上神经节分布最快 ,大脑、小脑、脊髓分布极低。1 2 5 I- NGF主要经尿液和粪便排泄 ,注射后 72 h内 ,小鼠粪尿中放射性总排泄量为 80 .36 % ,其中尿排泄量占 73.87%

碘钡联合标记肠内容物法有限肠道准备在CT结肠成像中的可行性研究

目的:探讨应用碘钡联合标记肠内容物法的有限肠道准备方案在CT结肠成像检查中的可行性。方法:21例临床诊断为结直肠疾病或存在高发因素的志愿者接受CT结肠成像前的碘钡联合标记肠内容物法有限肠道准备方案,包括低渣饮食、口服比沙可啶、口服硫酸钡混悬液和碘海醇、肠道充气等,通过64排单源宝石能谱CT进行容积扫描来获得图像。依据志愿者的反馈评估对该准备方案的耐受程度,同时评估应用碘钡联合标记法标记肠内容物的效果和所获CT图像的质量。结果:21例(100%)志愿者均能够耐受碘钡联合标记肠内容物法有限肠道准备方案,其中15例(71.43%)志愿者没有因为该准备方案而影响正常排便规律;结直肠内容物通过碘钡联合标记后的有效标记能够达到91.23%,并且89.04%肠段内残留物质的标记充分性为100%,其中27.73%肠段存在少量不影响诊断的对比剂伪影,而左、右侧结肠的标记效果差异无统计学意义(P=0.0502);87.62%的肠段图像质量满足诊断要求,在临床中可被接受。此外,升结肠的肠道扩张程度优于降结肠(P=0.00158)。结论:志愿者对碘钡联合标记肠内容物法有限肠道准备方案的耐受性良好,并且能够获得满足诊断要求的标记效果和图像质量,具有应用于CT结肠成像检查的可行性。

^(131)I 后标记法检测 DNA-蛋白交联物

应用１３１Ｉ后标记方法，在整体动物水平，检测因环境污染物和化学致癌物而产生的ＤＮＡ－蛋白交联物（ＤＰＣｓ）。研究结果表明，建立最佳１３１Ｉ后标记法反应条件，能有效、灵敏、快速和简便地检测出由食品中常见的化学致癌物黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）和亚硝胺引起的大鼠肝脏ＤＰＣｓ的形成量，为该法广泛性应用于检测ＤＰＣｓ展示了良好的前景。

Iodogen碘标记大肠癌单克隆抗体条件探索

本文报道了Iodogen碘标记大肠癌单克隆抗体最佳条件的实验探索。通过对Iodogen涂量、缓冲液pH值和旋涡反应时间三因素的各自比较实验,获得了碘标记的最佳条件。在最佳条件下,标记率可达80%以上,峰值管的游离碘率在15%左右,标记单抗对大肠癌细胞系8348的结合率较小鼠骨髓瘤细胞SP2/0高6—11倍。并对Iodogen碘标记单抗的优越性和降低标记单抗中游离碘率进行了讨论。

人瘦素放射免疫分析法的研究

目的 :建立人瘦素的放射免疫分析 (RIA)方法并用于临床。 方法 :以重组人瘦素 (LPT)小剂量多次刺激新西兰白兔制备抗血清 ,以间接碘标记法制备12 5I LPT ,然后建立LPT的RIA法并用于临床。 结果 :LPT的抗血清工作液稀释度为 1∶6 4 0 0 ;12 5I LPT的放射性比活度为 1.4 3MBq/ μg ,12 5I的总标记率为 37.8% ;LPT的RIA各项技术指标均符合要求 ;临床检测结果 ,正常男性为 (4 .9± 2 .7) μg/L ,女性为 (8.9± 4 .0 ) μg/L ,性别差异显著 (P <0 .0 1)。 结论 :LPT的RIA方法各项考核指标均较好 。

^(125)I标记消脂素的制备研究

以间接碘标记法与直接碘标记法标记消脂素(leptin,LEP),并分别建立LEP的RIA进行方法学的比较。间接碘标记法先以氯胺T法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(BH试剂)制备125I-BH,并与LEP进行联结制备125I-LEP。125I-LEP放射性比活度为1.43 MBq/μg,125I的总标记率为37.8%,125I-LEP的最大结合率(Bmax)为97.5%。所建立的RIA的NSB为6.7%,零计量管(B0)的结合率(B/T)为43.7%,灵敏度为0.25μg/L,高、中、低三种浓度的样品批内CV为7.8%,批间CV为12.9%,回收率为96.4%~103.2%,与TSH、LH、FSH、PRL、GH及Ins等均无交叉反应,与Linco的药盒进行临床测试对比亦显示良好的线性关系,r为0.951,以间接碘标记法标记的125I-LEP在45天内其标准曲线的稳定性较直接法标记的125I-LEP有较大的提高,能满足临床工作的需求。

放射性^(125)碘对移液器容量的比对与校准

目的:建立精确有效、简便快速的同位素标记法用于实验室移液器容量的比对与校准,实现移液器准确度与精确度的有效监控。方法:以125I标记溶液为示踪材料,以放射性γ计数仪为设备,以测定CPM值为观察指标,用已通过重量分析法检定的移液器为标准,其他待检移液器容量通过放射性同位素溶液吸样测定CPM与之比较进行方法学评价。结果:放射性同位素法检测批内精密度在0.88%~1.08%之间;平均回收率98.83%;CPM值与125I浓度梯度及容量之间关系的回归方程分别为:Y=23879X-388.4(r2=0.9992)和Y=572.18X-175.83(r2=0.9994)呈正相关;标准移液器与待检移液器的容量平行试验结果良好。结论:放射性同位素125I标记进行移液器容量比对与校准技术,方法灵敏、精确、简便,可适用于临床实验室。