具有α-淀粉酶分泌活性而低产氨基甲酸乙酯的酵母菌构建

为了构建可利用淀粉而低产氨基甲酸乙酯的酵母菌株,通过构建分别含ADH1和ADH2启动子的α-淀粉酶表达载体p ADH1/alp1和p ADH2/alp1,并将其分别转入精氨酸酶基因缺失的酵母菌株SΔcar1中。在此基础上,分析比较其在固态和液态条件下产α-淀粉酶的能力以及葡萄糖对α-淀粉酶表达的影响。结果表明:可利用淀粉而低产氨基甲酸乙酯的黄酒酵母SΔcar1/A1和SΔcar1/A2已成功构建。SΔcar1/A1在固体和液体培养基中产生淀粉酶时,都需要葡萄糖的诱导,且随着培养基中葡萄糖浓度的增加,酶的表达量增加。SΔcar1/A2在两种培养基中产生淀粉酶时,不需葡萄糖诱导,但SΔcar1/A2α-淀粉酶表达受葡萄糖的反馈抑制,低浓度的葡萄糖会促进α-淀粉酶的产生,过高的葡萄糖浓度使其α-淀粉酶的表达量减少,但是在含葡萄糖的培养基中的产酶量要比在不含葡萄糖的培养基上的高。总体而言,SΔcar1/A2产α-淀粉酶和水解淀粉的能力比SΔcar1/A1的强。因此,SΔcar1/A2可被用于生料发酵,但对其在实际生产中的产酶、催化和发酵条件等则有待进一步研究。