低三碘甲腺原氨酸综合征与抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎严重程度及预后的相关分析

目的探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎患者出现低三碘甲腺原氨酸(T3)综合征与疾病严重程度及预后的关系。方法回顾性分析2016年1月至2021年1月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院确诊的32例抗NMDAR脑炎患者的临床资料。根据入院后首次测定的血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)水平,将患者分为低T3综合征组及甲状腺功能正常组,并比较两组患者的人口学信息、临床特征等。根据患者发病后2~4周时的改良Rankin量表(mRS)评分,将患者分为预后良好组(mRS评分<3分)和预后不良组(mRS评分≥3分),并比较两组患者临床特征及实验室检查结果。采用Pearson双变量相关分析探究低T3综合征与抗NMDAR脑炎严重程度及预后的相关性。结果32例患者中有14例(43.75%)出现低T3综合征。与甲状腺功能正常组相比,低T3综合征组患者的意识障碍发生率、入院时mRS评分、癫痫发作率、并发肺部感染率、头颅MRI异常率、死亡率均较高(P均<0.05)。预后不良组合并低T3综合征、癫痫持续状态、发热、并发肺部感染的患者比例均高于预后良好组(P均<0.05)。相关分析结果显示,FT3水平与mRS评分呈负相关(r=-0.514,P=0.003)。结论抗NMDAR脑炎患者甲状腺激素水平改变可能与体内自我保护机制有关,可能是一种潜在的重症抗NMDAR脑炎患者不良预后的生物标志物。常规监测FT3水平对抗NMDAR脑炎患者进行危险分层及预后判断具有重要的临床意义。

中重度颅脑损伤后血清三碘甲腺原氨酸水平变化与预后的关系

目的研究中重度颅脑损伤后血清三碘甲腺原氨酸水平变化与预后的关系。方法应用酶联免疫定量分析法多次检测164例中重度颅脑损伤患者游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)、三碘甲腺原氨酸(T_3)水平的动态变化,同时记录GCS评分,观察分析血清FT_3及T_3水平变化与GCS变化的关系。结果不同程度的中重度颅脑损伤患者,其中恢复较好的患者在第7天和第14天检测的血清T_3和FT_3水平显著高于恢复较差的患者血清T_3和FT_3水平。结论中重度颅脑损伤T_3和FT_3的变化与预后密切相关,提高T_3和FT_3水平有望成为治疗中重度颅脑损伤的重要切入点。

化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸

以辣根过氧化物酶为三碘甲腺原氨酸类似物的标记物，鲁米诺为化学发光反应底物，建立了一种高灵敏度化学发光免疫检测游离三碘甲腺原氨酸的方法。该法线性范围为0．90～80ng／L，批内变异小于12．1％，批间相对标准偏差均小于15％，其余各项指标均良好。利用本法对血清样品进行了测定，关于甲状腺机能亢进组病人的临床诊断符合率达到83．3％。与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为0．9005。在方法条件选择上，以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则，提高游离三碘甲腺原氨酸浓度测定的准确性。

应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)化学发光法

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。

氯化镧对牛血清谷胱甘肽过氧化物酶、生长激素、胰岛素、三碘甲腺原氨酸和四碘甲状腺原氨酸浓度的影响

选用36头平均体重420 kg,年龄2.5岁的中国西门答尔阉牛,采用随机区组设计分为4组,以混合精料和风干玉米秸秆为基础日粮,研究日粮中添加不同水平氯化镧对西门答尔阉牛营养物质消化、血清谷胱甘肽过氧化物酶、生长激素、胰岛素、三碘甲腺原氨酸和四碘甲状腺原氨酸浓度的影响。结果表明:实验至第60天时,每天添加0.9 g氯化镧的饲粮有机物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率较对照组和其它处理组分别提高了8.09%、7.13%、15.20%、9.47%、13.09%和20.48%,血清谷胱甘肽过氧化物酶活性较对照组和其它处理组显著提高了8.22、3.95和5.04个单位,血清生长激素、胰岛素浓度、三碘甲腺原氨酸和四碘甲状腺原氨酸浓度均显著高。

三碘甲腺原氨酸对心肌细胞能量代谢的影响及其在心肌保护中的作用

目的 研究不同甲状腺功能状态下，三碘甲腺原氨酸（T3）对大鼠缺血再灌注（I/R）心肌细胞能量代谢的影响，探讨T3在心肌保护中的作用。方法 将实验大鼠分为甲状腺功能正常（A组）和甲状腺功能减退（甲减，B组）组，两组又随机分成空白缺血组、单纯灌注液组、T3灌注液组；建立离体心工作模型；利用反相高效液相色谱法测定各组心肌细胞ATP、ADP、AMP含量。结果 甲减状态心肌细胞ATP、ADP、AMP含量均明显降低（P<0.01）；I/R过程中，A、B两组ATP、ADP、AMP含量均大幅度下降，然而，T3灌注液组ATP含量显著高于单纯灌注液组：A组（1.03±0.02）vs（0.62±0.02）(mol/g，B组（0.85±0.02）vs（0.40±0.01）(mol/g，P<0.01。结论 甲减或I/R损伤使心肌细胞的能量合成及利用受到严重损害，T3可明显增加心肌细胞ATP的合成量与储备量，具有良好的心肌保护作用。

三碘甲腺原氨酸对心肌细胞肌浆网钙-ATP酶活性的影响及对心肌功能的调控

目的 研究不同甲状腺功能状态下，缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）过程中心肌细胞肌浆网钙－ＡＴＰ酶（ＳＲ·Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ， ＳＥＲＣＡ）活性的变化及三碘甲腺原氨酸（Ｔ３）对其变化的影响，同时探讨心肌功能的调控。方法将实验大鼠分为甲状腺 功能正常（Ａ组）和甲状腺功能减退（甲减，Ｂ组）两组，每组又分别随机分成对照组、缺血组、单纯灌注液组、Ｔ３灌注液 组；建立高体心工作模型；测定各组心肌细胞ＳＥＲＣＡ活性。结果甲减状态下大鼠心肌细胞ＳＥＲＣＡ活性下降４３．２％ （Ｐ＜０．０１）。缺血３０ｍｉｎ时，Ａ、Ｂ两组的ＳＥＲＣＡ活性均显著降低，并随着复灌进一步下降。但在复灌２０ｍｉｎ时，Ｔ３ 灌注 液组的酶活性较单纯灌组显著提高，Ａ组分别为（１１．２０±１．０７）和（７．３３±０．５６）μｍｏｌ·ｍｇ－１·ｈ－１（Ｐ＜０．０１） ；Ｂ组分别为 （６．８９±０．５２）和（５．２３±０．７１）μｍｏｌ．ｍｇ－１·ｈ－１（Ｐ＜０．０５），甚至高于缺血组。结论甲减状态及Ｉ／Ｒ过程中，心肌细胞ＳＥＲＣＡ活 性受到严重损害，可导致胞浆中Ｃａ２＋超负荷。Ｔ３可显著提高ＳＥＲＣＡ活性，降低胞浆中Ｃａ２＋?

三碘甲腺原氨酸对斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼消化道发育和存活的影响

运用放射免疫测定方法检测了斜带石斑鱼早期发育过程中三碘甲腺原氨酸(T3)的变化,并用T3处理卵黄囊期仔鱼,研究其对发育、生长和存活的影响。斜带石斑鱼受精卵中含有相当量的T3,T3随发育而逐渐下降,到仔鱼开口时已经检测不到,提示甲状腺激素可能被胚胎和卵黄囊仔鱼所利用而参与其发育进程。在孵化后24h内,T3促进发育的作用不明显;在孵化24h后,T3对仔鱼消化道的发育有促进作用。在孵化72h后,0.01mg.L-1T3处理组仔鱼直肠管径明显比对照大,而小肠管径和全长与对照相比差异均不明显;0.1mg.L-1和1mg.L-1T3处理组仔鱼小肠和直肠管径显著比对照大,而全长显著比对照短。1mg.L-1T3显著加速了仔鱼卵黄囊的吸收,但对油球的吸收无影响。在孵化后第8天,0.01mg.L-1T3处理组仔鱼存活率明显比对照组高。结果表明,甲状腺激素促进卵黄囊期仔鱼消化道发育的作用与发育时期密切相关,孵化后24h内,消化道对T3不敏感,此后则变得敏感;0.01mg.L-1T3能提高仔鱼存活率。

急性心肌梗死患者的临床特点与低游离三碘甲腺原氨酸的相关性研究

目的探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者的临床特点与低游离三碘甲腺原氨酸（freetriiodothyronine,FT3）的关系。方法选择2012年10月～2013年3月中日友好医院收治的AMI并行冠状动脉造影（coronary angiography,CAG）的患者共106例。收集研究对象的临床和CAG资料,对其进行回顾性研究。结果 106例患者中54例（50.9%）FT3减低,52例（49.1%）FT3正常。低FT3组和正常FT3组糖尿病的发生率分别为40.74%、19.23%（P=0.000）;左室射血分数分别为（50.00±11.90）%、（56.67±12.84）%（P=0.045）;血红蛋白分别为（129.27±19.31）、（139.64±17.99）g/L（P=0.041）;与正常FT3组比较,低FT3组心功能差,KillipⅠ级患者比例少,KillipⅣ级患者比例多,梗死相关动脉多为前降支（left anterior descending,LAD）,右冠状动脉病变少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AMI患者发生低FT3比例高,低FT3组糖尿病发生率高、心功能差、血红蛋白低、冠脉LAD病变多。

三碘甲腺原氨酸对离体大鼠缺血后心肌左心功能的恢复作用

目的 :观察三碘甲腺原氨酸 (T3)对缺血后心肌左心功能的恢复作用。 方法 :制作离体大鼠心脏常温缺血模型 ,应用 KH液灌流 30分待心脏活动稳定后 ,分为未缺血组 (n=6 ) ,未缺血 +T3组 (n=6 ) ,缺血再灌注组 (n=7) ,缺血再灌注 + T3组 (n=7)。比较缺血再灌注组与缺血再灌注 + T3组心功能指标。 结果 :对缺血心肌加入 T3灌流 30分后 ,左心室压差与心率乘积 [(L VSP- L VDP)× HR]、收缩期左心室内压上升速度峰值 (+ dp/ dtmax)和舒张期左心室内压下降速度峰值 (- dp/ dtmax)恢复百分率均明显改善。 结论

应用FITC系统建立非均衡竞争三碘甲腺原氨酸化学发光法

目的制备抗人三碘甲腺原氨酸(T3)多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测总三碘甲腺原氨酸(TT3)的方法。方法以T3-牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化特异性的抗人T3多克隆抗体并连接辣根过氧化物酶(HRP)。用FITC标记T3类似物,采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,固相抗原与T3校准品或样本中的T3非均衡竞争结合T3-HRP抗体,建立标准曲线,血清中TT3通过标准曲线计算浓度。由此建立TT3化学发光检测方法进行方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(BGG)包被(非FITC系统)的检测系统进行比较。将该方法应用于临床100份血清标本的检测,定量结果与德国Roche2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elecsys2010)结果进行比较。结果抗体对T3具有高度特异性,线性相关系数r>0.99,线性范围为0.1～8ng/mL,分析灵敏度为0.1ng/mL,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的结果有很好的相关性,相关系数为0.9619,临床符合率良好。结论该方法精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,适用于临床标本的检测。

视黄酸和三碘甲腺原氨酸在减轻睡眠剥夺损害认知功能中的作用

目的:探讨外源性补充视黄酸(RA)或三碘甲腺原氨酸(T3)在减轻睡眠剥夺(SD)损害认知功能中的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=6):即对照组(C组),睡眠剥夺组(SD组),睡眠剥夺+RA组(SD+RA组)和睡眠剥夺+T3组(SD+T3组)。利用旷场实验观察大鼠的神经行为,在体脑立体定位电生理法测量大鼠海马齿状回长时程增强(LTP),Western blot法检测海马Ng蛋白表达量。结果:与SD组比较,SD+RA和SD+T3组大鼠在旷场中穿行格数显著增加(P<0.05),海马齿状回PS峰升幅显著增高(P<0.05,P<0.01),海马Ng蛋白表达水平也显著升高(P<0.05),且均与C组无显著性差异。结论:RA和T3可以通过上调海马中Ng蛋白的水平,从而有效缓解SD所致的神经系统的抑制状态。

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素（SA）,T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T3）生物素-亲合素酶联免疫分析（T3-BA-EL1SA）方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%－8.3%和6.5%－10.5%,回收率为98.1%－107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。

三碘甲腺原氨酸免疫分析工作标准品的研制

制备供免疫分析用的 3,5 ,3 -三碘甲腺原氨酸 (T3 )工作标准品并标定其免疫效价。用每升含 193.2 7mgT3的 4 0mol/LNaOH溶液和去激素血清 ,配制浓度为 10 0 μg/L的T3 溶液。将该溶液按每 1mL分装 ,冻干。以国产现行标准品为对照品 ,标定配制的T3 工作标准品免疫效价为 91.4ng/安瓿 ,95 %的可信限为 88- 95ng/安瓿。并从T3 药盒工作标准曲线上 ,读出本所 16 0 1- 970 3批低、中、高质控血清的T3 值。在以相应的参考值为参照时 ,测定值的偏倚均小于 10 %。总之 ,配制的T3 工作标准品适用于国产T3

三碘甲腺原氨酸(T_3)第三次免疫测定用国家标准品的建立

目的:建立三碘甲腺原氨酸(T3)第三次定量免疫测定用国家标准品。方法和结果:精确称取高纯T3原料,用含0.5%BSA的0.02M PBS缓冲液配制成100ng/ml溶液,经无菌过滤处理后,分装、冻干制成候选品。以T3第二次国家标准品(150550-0004)为对照品,经协作标定,候选品中T3免疫活性为50ng/支。结论:候选品各项指标均符合要求,可作为T3第三次免疫测定用国家标准品使用。本标准品的建立,为T3免疫测定用试剂盒的标准化提供定量基础。

“寒热并见”大鼠模型血清三碘甲腺原氨酸、甲状腺素含量变化研究

目的观察"寒热并见"模型大鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的含量变化,探讨其作为"寒热并见"动物模型寒证指标的意义。方法采用丙硫氧嘧啶和寒凉中药灌胃配合冷冻的多因素复合造模法制作虚寒证模型,在此基础上,皮下注射干酵母混悬液致大鼠发热,造成约40 h的"寒热并见"动物模型。检测甲状腺激素T3,T4含量。结果与正常组比较,"寒热并见"模型大鼠血清T3,T4含量显著下降。结论 "寒热并见"模型大鼠血清T3,T4含量下降,表明机体表现出虚寒状态,虽然"寒热并见"模型大鼠表现为发热,但实际为表热里寒。

^125 I-3，3’-二碘甲腺原氨酸标记物的制备和鉴定

目的建立3，3＇-二碘甲腺原氨酸（3，3＇T2）的^125 I标记方法，并对标记产物进行鉴定。方法用氯胺T法以^125I标记3，3’T2；用Sephadex LH-20柱层析和下行纸层析纯化分离；以3，3’-T2纯品作为标准，通过下行纸层析、放射自显影、茚三酮显色等方法对标记产物进行鉴定。结果3，3＇-T2的^125 I标记率为26．57％，放化纯度为95．24％，比放射性为116μCi/μg，经Sephadex LH-20柱分离出现2个峰；标记产物下行纸层析分离后经放射自显影鉴定可见^125 I-rT3、^125I-3，3＇-T2、游离^125I，计算其Rf值分别为0．33、0．46、0．74；经下行纸层析、放射自显影、茚三酮显色的联合应用及标准品的对照证明Rf值0．46位置的物质就是^125I-3，3’T2。结论成功建立了3，3＇T2^125。I标记方法。

甲状腺疾病患者血清抗三碘甲腺原氨酸抗体的研究及其临床意义

采用放免法检测165例Graves病（GD）患者，105例桥本氏甲状腺炎（HT）患者及107例正常人血清抗三碘甲状腺原氨酸抗体（T3Ab）。结果显示，GD未治组、缓解组和HT组T3Ab的阳性率分别为0.036、0．069和0．019，其中GD缓解组中2例T3Ab阳性者，其临床表现与血清T3和／或FT3不相符合。正常人T3Ab皆为阴性。所有T3Ab阳性的病人血中均可检出甲状腺球蛋白抗体（TGAb）。提示部分甲状腺疾病患者血中存在抗甲状腺激素抗体，此抗体可干扰血清甲状腺激素的放免测定结果。

急性脑梗死患者胱抑素C、游离脂肪酸和游离三碘甲腺原氨酸的临床变化分析

目的:探讨急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA和游离三碘甲腺原氨酸FT3的变化。方法:采用全自动生化仪Aeroset和雅培发光仪ARCHITECT检测145例急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA、FT3和FT4,随机取健康体检者100例作为实验正常对照组。结果:急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA与对照组比较均存在差异有显著意义(P<0.05),且高于正常对照组。FT3与对照组比较存在差异有显著意义(P<0.05),且低于正常对照组,FT4与对照组比较差异无显著意义。结论:联合检测cysC、FFA和FT3对脑梗死的预防、治疗和预后提供一定的临床参考价值。

老年住院患者反三碘甲腺原氨酸水平与病情及预后的相关性研究

目的分析老年住院患者反三碘甲腺原氨酸(reverse triiodothyronine,rT_2)水平与病情及预后的相关性,为老年住院患者预后的早期评估提供参考指标。方法选取本院2012年5月至2015年5月收治的304例老年住院患者为研究对象,分别检测患者血清甲状腺激素、清蛋白、胆固醇水平,并按照rT_3水平进行分组,比较不同rT_3水平,不同清蛋白、胆固醇水平患者一般资料、死亡率、病情、血清学指标差异,分析rT_3水平与患者病情及预后的相关性。结果304例老年住院患者中,甲状腺功能异常137例(45.07%)。rT_3水平升高87例(28.62%),其余217例(7I.38&%名)患者rT_3水平正常。rT_3水平升高组与rT_3水平正常组患者年龄、性别比例比较差异均无显著性(P>0.05),rT_3水平升高组患者死亡率、急性重症疾病构成比均显著高于rT_3水平正常组,血清清蛋白、胆固醇、游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)水平均显著低于rT_3水平正常组(P<0.05)。随着rT_3水平升高程度的增加,患者死亡率显著上升(P<0.05),Pearson相关分析示,rT_3水平与患者死亡率变化呈显著正相关(r=0.719,P<0.05)。低清蛋白、胆固醇水平患者游离甲状腺素(FT_4)、FT_3水平均显著低于高清蛋白、胆固醇水平患者,rT_3水平显著高于高清蛋白、胆固醇水平患者(P<0.05):不同清蛋白、胆固醇表达水平患者血清促甲状腺激素(TSH)水平比较差异具有显著性(P>0.05)。结论血清rT_3水平升高提示老年住院患者营养状态差、病情危重、死亡率较高,应加强对老年住院患者rT_3水平的定期监测,为制订治疗方案与评估预后提供参考。