2种HPLC-柱后衍生化-荧光检测法测定远志中黄曲霉毒素的比较

对远志中测定黄曲霉毒素的2种柱后衍生化方法(碘衍生化和光化学衍生化)进行分析比较。样品经过免疫亲和柱净化,HPLC-柱后衍生化-荧光检测器检测;采用C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,荧光检测。柱后衍生化系统:(1)碘衍生化法,以甲醇-乙腈-水(25∶20∶55)为流动相;衍生溶液为0.05%碘溶液,流速为0.3 m L·min^(-1),衍生反应温度为70℃;(2)光化学衍生化法,以甲醇-乙腈-水(35∶15∶50)为流动相。碘衍生化方法中,黄曲霉毒素B_(2)、G_(2)在3.8~19 pg范围内线性关系良好,B_(1)在10.4~52 pg范围内线性关系良好,G_(1)在10.8~54 pg范围内线性关系良好;在光化学衍生化方法中,黄曲霉毒素B_(2)、G_(2)在1.9~45.6 pg范围内线性关系良好,B_(1)在5.2~124.8 pg范围内线性关系良好,G_(1)在5.4~129.6 pg范围内线性关系良好,r>0.9999;回收率在85%~105%之间。2种衍生化方法的测定结果比较接近,但是光化学衍生化方法更加灵敏,且操作简单、分析速度快。

免疫亲和柱净化-碘柱后衍生化-高效液相色谱荧光法检测斑蝥中黄曲霉毒素及其液质确证

目的：建立高效液相色谱-碘柱后衍生化-荧光检测器检测中药材斑蝥中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,并采用液质联用法进行确证。方法：样品以70%甲醇溶液提取,经免疫亲和柱净化后,利用碘柱后衍生化-HPLC-FLD进行分析测定。并进一步采用LC-MS/MS对阳性样品进行确证。结果：在优化条件下,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在0～0.525、0～0.1125、0～0.1875、0～0.1125μg的范围内线性关系良好,r〉0.9996,回收率82.5%～107.3%,RSD〈8.1%。检测了21批样品并通过LC-MS/MS确证,在与对照品相同的保留时间处,样品与对照品有相同的特征离子碎片,排除了样品假阳性的可能。结论：该方法简便快速,灵敏度高,重复性好,适用于斑蝥中黄曲霉毒素的检测。

高效液相色谱法柱后衍生法测定陈皮中黄曲霉毒素

目的考察医院药房中不同批次陈皮饮片中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的含量,为确保陈皮饮片的临床用药安全。方法采用高效液相色谱法（HPLC）-碘柱后衍生化-荧光检测方法测定陈皮样品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的含量,色谱柱为Diamonsil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-水（40∶18∶42）,流速为0.8 m L/min,荧光检测,激发波长360 nm,发射波长450 nm。柱后碘衍生化系统为衍生溶液为0.05%的碘溶液,流速为0.3 m L/min,衍生化反应器温度为70℃。结果药房现存5批次陈皮样品均未检出黄曲霉毒素;黄曲霉毒素G2,G1,B1,B2进样量分别在1081 085 ng,2172 171 ng,1911 913 ng,64644 ng范围内与峰面积线性关系良好,加样回收率在60%110%之间。结论该方法准确、可靠,可作为陈皮中黄曲霉毒素的含量测定方法。

2种HPLC-柱后衍生化-荧光检测法测定陈皮中黄曲霉毒素的比较

目的:对陈皮中黄曲霉毒素测定的2种柱后衍生化方法(碘衍生化和电化学衍生化)进行比较。方法:样品经过免疫亲和柱净化,HPLC-柱后衍生化-荧光检测器检测。采用Diamonsil ODS C18(5μm,4.6 mm×200 mm)色谱柱,荧光检测,激发波长360 nm,发射波长450 nm。柱后衍生化系统(1)碘衍生化:以甲醇-乙腈-水(25∶18∶57)为流动相,流速0.8 mL.min-1;衍生化溶液为0.05%碘溶液,流速0.3 mL.min-1,衍生化反应温度70℃;(2)电化学衍生化:以甲醇-乙腈-水(20∶20∶60)为流动相(每1 L流动相中加入溴化钾120 mg和4 mol.L-1硝酸350μL),流速1.0 mL.min-1。结果:碘衍生化,黄曲霉毒素G2、B2在2～36 pg,黄曲霉毒素G1、B1在2～120 pg范围内线性关系良好;电化学衍生化,黄曲霉毒素G2、B2在1.2～36 pg,黄曲霉毒素G1、B1在2～120 pg范围内线性关系良好,r>0.9997;回收率在60%～101%之间。结论:2种衍生化方法的测定结果比较接近,且电化学衍生化方法较灵敏,操作简单、分析速度快,也适用于陈皮中黄曲霉毒素的测定。

牛奶中6种黄曲霉毒素的3种液相色谱法比较

比较了牛奶中黄曲霉毒素测定的3种液相色谱分析方法。样品经直接稀释、免疫亲和柱净化,以乙腈-甲醇-水体积比（22︰22︰46）为流动相,分别经柱后光化学衍生化、未衍生化及碘衍生化-液相色谱-荧光法进行测定。柱后光化学衍生化,黄曲霉毒素M2,M1线性范围为0.02-20μg/L,G2,B2 0.005-20μg/L,G1,B1 0.01-20μg/L,相关系数≥0.999,定量限为0.000 5-0.002μg/kg,加标回收率79%-116%;柱后碘衍生化,M2,M1线性范围分别为0.02-20,0.05-20μg/L,其余4种均为0.01-20μg/L,相关系数≥0.999,定量限0.001-0.005μg/kg,回收率74-121%;未经衍生化直接进样,G2,B2线性范围0.005-20μg/L,其余4种为0.02-20μg/L,相关系数≥0.998,定量限0.000 5-0.003μg/kg,回收率82%-121%。结果表明,柱后光化学衍生测定6种黄曲霉毒素在线性范围、灵敏度和定量限等方面均具有优势。