APE1介导的功能核酸生物传感器研究进展

脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(Apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)是一种广泛存在于生物体内、在碱基切除修复(Base excision repair,BER)过程中能够在碱基缺失位点(AP site)处识别并切割DNA的蛋白酶,其作用效率高且特异性强。同时,APE1在一些癌症细胞中的活性较正常细胞明显偏高,因此其自身也是一种癌症生物标志物。目前,通过在DNA上人工设计AP位点,利用APE1的切割能力生成理想的功能核酸链,并结合不同的信号输出及放大方式,研究者已经建立了一些APE1介导的电化学、荧光功能核酸生物传感技术,实现了对DNA糖基化酶等的酶活性的检测。另外,也有一些针对APE1自身活性的功能核酸生物传感技术被建立起来。综述了近年来APE1介导的功能核酸生物传感技术以及以APE1为靶物质的功能核酸和免疫生物传感技术的研究状况,讨论了与APE1相关的生物传感技术的意义及存在的问题,并对未来利用APE1实现更多靶物质的检测的发展趋势进行了展望,以期促进APE1成为一种功能核酸生物传感技术中常用的酶工具。

基于逻辑门的单核苷酸多态性荧光分型方法的研究

建立了一种基于逻辑门的单核苷酸多态性(SNPs)荧光分型新方法。某一单核苷酸基因片段中某一碱基发生突变后可能涉及2~4种基因型,以一定浓度的基因型为输入信号,以荧光小分子2-氨基-7-甲基-1,8-萘啶的相对荧光强度变化为输出信号,构建了3种SNPs分型分子逻辑门。以实验结果获得的输出信号的相对值设定判断的值,当输出信号大于阈值时,定义为有(1),否则为无(0)。结果表明,利用所构建的荧光检测体系和所设计的3种逻辑门,能够对二等位或四等位SNPs基因型进行逻辑区分,判断样品中是否存在突变型及突变型数。