骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

骨碎补柚皮苷对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性影响的实验研究

目的研究骨碎补柚皮苷对人牙周膜细胞(hPDLC)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法采用酶消化结合组织块法,体外培养人牙周膜细胞;运用MTT法测定不同质量浓度骨碎补柚皮苷在不同时间对hPDLC增殖的影响;采用IFCC推荐法测定不同质量浓度骨碎补柚皮苷作用后hPDLC的ALP活性,采用考马氏亮兰法,测定样本中蛋白量,从而测定每毫克冻融蛋白中所含的ALP比活性。结果10、1、0.1mg·L-1这3种质量浓度的骨碎补柚皮苷对hPDLC的增殖有促进作用;100、10、1、0.1mg·L-1的骨碎补柚皮苷均可促进hPDLC的ALP活性,其中以1mg·L-1组的促进作用最强。结论骨碎补柚皮苷对hPDLC具有促进增殖、促进碱性磷酸酶活性的作用。

辛伐他汀对骨髓基质细胞骨形成蛋白-2表达及碱性磷酸酶活性的影响

目的 研究辛伐他汀对原代培养的骨髓基质细胞骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )表达及碱性磷酸酶活性的影响 ,探讨其刺激成骨的作用机制。 方法 体外培养成年小鼠骨髓基质细胞 ,以不同浓度 (0、0 .1、 0 .2、0 .5和 1 .0μmol/L )的辛伐他汀、基因重组人 BMP- 2 (1 0 0 ng/ml)作用 72小时碱性磷酸酶活性的酶学测定 ;免疫细胞化学染色 ,Western Blotting检测 BMP- 2表达的变化。 结果 辛伐他汀作用 72小时后 ,细胞中的 BMP- 2表达水平增高 ,随浓度增加 ,表达量增加 ,对照组少量表达 ;碱性磷酸酶活性显著增加 ,呈剂量依赖关系 ,辛伐他汀 0 .5和 1 .0 μmol/L与对照组间具有统计学意义 (P<0 .0 5)。 结论 辛伐他汀可促进骨髓基质细胞中 BMP- 2的高表达 ,细胞自分泌或旁分泌BMP- 2增多 ,碱性磷酸酶活性增高 。

环境因子对湖泊沉积物碱性磷酸酶活性的影响

文章对云龙湖和骆马湖2种不同类型湖泊沉积物的碱性磷酸酶进行了测定,分析了水体理化特性、季节变化及水生植物对湖泊沉积物碱性磷酸酶活性的影响,结果表明:pH值、温度对沉积物碱性磷酸酶活性影响较大,呈显著正相关(r=0.220,P70.05;r=0.478,P70.01),而DO值的影响较小,相关不显著;随着季节的变化,云龙湖沉积物碱性磷酸酶活性变化较明显,其变化规律为夏季>秋季>冬季>春季,夏季最高,为330.27 mg/(kg·h),春季最低,为154.65 mg/(kg·h);随着季节的变化,水体pH、DO变化较小,分别为8.12～8.50、6.84～8.47 mg/L,温度变化较大,为3.3～26.5℃;水生植物对骆马湖沉积物碱性磷酸酶活性影响较大,有草区均大于无草区且有草区碱性磷酸酶活性随季节变化显著。因此,水体理化特性、季节变化及水生植物等环境因子对不同湖泊沉积物中碱性磷酸酶活性有重要影响。

长期施肥条件下栗褐土碱性磷酸酶活性及其与磷形态的关系

利用长期定位试验研究了长期不同施肥对土壤碱性磷酸酶活性的影响及碱性磷酸酶与土壤磷素形态间的相关关系。结果表明:与不施肥的对照处理相比,长期施肥特别是有机肥与化肥配施可以显著提高土壤碱性磷酸酶活性;碱性磷酸酶活性与土壤速效磷、有机磷总量、中活性有机磷、中稳性有机磷、Ca2-P和Ca8-P含量相关性均达到极显著水平(P<0.01,与Al-P、Fe-P和O-P相关性达显著水平(P<0.05;各形态磷对碱性磷酸酶活性直接影响的大小顺序为Ca8-P(-5.706 9)>Fe-P(4.180 5)>Ca2-P(2.760 4)>Ca10-P(0.980 0)>中稳性有机磷(0.892 4)>Al-P(-0.567 5)>O-P(-0.294 4)>活性有机磷(0.268 1)>中活性有机磷(0.210 3)>高稳性有机磷(-0.165 2)。

浅层湖泊沉积物碱性磷酸酶活性垂向特征初探

研究了福州市西湖沉积物中碱性磷酸酶活性(PAP)的垂向分布特征,探讨了其活性的来源及影响因素.初步的研究表明:西湖沉积物中的碱性磷酸酶活性和底泥中溶解性磷的变化趋势基本一致,但高浓度的溶解性磷对APA产生一定的抑制作用;活性的来源与水体中沉积下来生物的残体以及微生物代谢物有关.

钦州湾磷营养状态与浮游植物的碱性磷酸酶活性分析

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AP)是浮游植物在磷胁迫的情况下诱导表达的一种酶,其作用是能够将溶解有机磷(Dissolved organic phosphate,DOP)水解成浮游植物可以直接利用的正磷酸盐形式,因此碱性磷酸酶活性(Alkaline phosphatase activity,APA)可用来指示海区浮游植物的磷胁迫状态。本研究以2015-2016年钦州湾4个航次(春季、夏季、秋季、冬季)的调查资料为依据,研究了钦州湾海域表层无机及有机磷的空间分布特征、APA的分布及其与磷营养之间的调控关系。调查期间,钦州湾海域春季、夏、秋、冬的单位叶绿素APA的平均值分别为20.42±5.32 nmol/μg Chl a/h,138.17±94.32 nmol/μg Chl a/h,142.60±72.60 nmol/μg Chl a/h和29.48±18.52 nmol/μg Chl a/h。经分析,APA与无机磷之间存在显著的负相关(P<0.05),与N/P呈极显著负相关(P<0.01),该海区APA可以反映钦州湾浮游植物的磷胁迫水平。海区氮磷比平均值在除春季外的三个季节均高于35,存在潜在的磷限制,浮游植物在夏季和秋季遭受较严重的磷胁迫。夏季和秋季浮游植物大量表达AP,由此推测DOP可能在钦州湾浮游植物生物量的维持甚至赤潮发生期间的磷补给上起着重要作用。

三峡澎溪河高阳平湖高水位时碱性磷酸酶活性及其动力学特征

三峡水库汛末蓄水后易出现支流回水区磷累积现象,并在冬季末期常出现硅藻水华现象.为研究汛末蓄水的磷积累与冬季末期硅藻水华的相互关系,分析2013年1 3月三峡澎溪河高阳平湖库湾水体中碱性磷酸酶活性、磷形态的转化和藻类生长的协同过程.结果表明,总碱性磷酸酶活性(TAPA)及其最大反应速率(Vmax)、特异性碱性磷酸酶活性(PAPA/Chl.a)及PAPA与TAPA的比值(PAPA/TAPA)随着时间推移总体呈先增加后减小而后再增加减小的双峰趋势,分别在2月中旬和3月中旬达到峰值.根据冬季末期水华暴发程的特点将其分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个阶段.Ⅰ阶段为诱导期,水体活性磷主要来自藻类碱性磷酸酶分解的有机磷,藻类对磷过度摄取.Ⅱ阶段为过渡期,温度低,水体碱性磷酸酶活性相对较低.Ⅲ阶段为水华时期,水中碱性磷酸酶主要来源于细菌,叶绿素a浓度达到最大,溶解态反应性磷浓度达到最低;Ⅳ阶段为水华末期,水体叶绿素a浓度逐渐下降,溶解态反应性磷浓度回升,水中碱性磷酸酶主要来源于细菌.

三丁基锡暴露对褐菖鲉碱性磷酸酶活性的影响

研究了在实验室条件下,腹腔注射不同浓度(1.9、9.6、19.3、193μg/kg)的三丁基锡(tributyltin,TBT)对褐菖鲉肝脏、肾脏和脾脏碱性磷酸酶[alkalinephosphatase(AKP)]活性的影响.研究结果表明,在7d的曝污实验中,低剂量的TBT对碱性磷酸酶活性主要产生诱导作用,碱性磷酸酶活性随着TBT浓度的增大呈现先增大后减小的钟形曲线.这提示TBT暴露会影响褐菖鲉正常的代谢及其免疫功能.

人工湿地-池塘养殖复合系统水质影响因子及碱性磷酸酶活性研究

通过实验现场采样及室内测试方法,对复合垂直流人工湿地-池塘养殖复合系统中的物理、化学、生物和生化指标进行因子分析,并在养殖周期、日变化上对碱性磷酸酶活性进行了研究。结果表明,循环池的水质明显好于对照池,影响系统水质的主要因子在循环池和对照池中是不同的,其中循环池主要影响因子是生物指标细菌,对照池主要影响因子是氮、磷等化学因子;碱性磷酸酶存在明显的日变化规律,20时达到一天的最高;循环池和对照池的碱性磷酸酶活性以及叶绿素a含量等方面存在显著性差异,其中循环池碱性磷酸酶的日变化范围是2.81～6.83mmol·L-1·h-1,对照池是5.21～8.72mmol·L-1·h-1;循环池的叶绿素a浓度在11.67～25.11μg·L-1的范围内,对照池的浓度变化范围是66.97～231.61μg·L-1,说明湿地系统对于养殖水体水质改善具有显著效果。

三七总皂甙对大鼠骨髓基质细胞骨形成蛋白-2表达及碱性磷酸酶活性的影响

目的研究三七总皂甙(PNS)对大鼠骨髓基质细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)表达及碱性磷酸酶活性的影响,探讨其在骨髓基质细胞向成骨细胞增殖、分化中的作用机制。方法分离、纯化大鼠骨髓基质细胞(BMSCs),实验按不同质量浓度PNS分组(0、50、100、150、200mg.L-1),以0mg.L-1为对照组。均采用成骨诱导液培养,MTT法观察细胞增殖,ALP活性测定,Western Blotting检测细胞BMP-2表达。结果在第3、5天各组细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05),在第7、9天,50、100、150mg.L-1组高于对照组(P<0.05);BMP-2表达水平及ALP活性在50、100及150mg.L-1组高于对照组(P<0.05),对照组少量表达BMP-2;200mg.L-1组细胞增殖、BMP-2表达水平及ALP活性与对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论三七总皂甙可通过上调BMP-2的表达水平,增强碱性磷酸酶活性,促进骨髓基质细胞向成骨细胞增殖、分化。

热应激对蛋鸡肠道菌群结构、碱性磷酸酶活性及氨基酸转运载体mRNA表达丰度的影响

【目的】揭示热应激环境下蛋鸡肠道菌群结构、肠黏膜碱性磷酸酶活性和氨基酸转运载体mRNA表达量的变化机理。【方法】试验选择16周龄济宁百日鸡96只,随机分成对照组((24±1)℃;Ⅰ)和热应激((38±1)℃)组,各组设6个重复,每个重复8只,试验持续14 d。采用16S rDNA的PCR-DGGE技术和实时荧光定量PCR等手段,分析热应激2(Ⅱ)、7(Ⅲ)、14 d(Ⅳ)时,对十二指肠、空肠及回肠内容物菌群多样性和肠黏膜碱性磷酸酶活性以及氨基酸转运载体rBAT、y+LAT1、CATl mRNA基因表达的相对丰度变化规律。【结果】热应激7 d开始各肠段菌群多样性较为丰富,热应激7、14 d时空肠和回肠部位敏感乳杆菌(Lactobacillus agilis),回肠部位约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、不可培养细菌(uncultured bacterium)和不可培养的拟杆菌属(uncultured Bacteroidales bacterium)均末检测到;而热应激不同时间段空肠和回肠部位可检测到不可培养细菌、溃疡拟杆菌(Bacteroides helcogenes)、卵形拟杆菌(Bacteroides ovatus)、索氏志贺氏菌(Shigella sonnei);空肠和回肠部位黏膜上皮细胞表面的碱性磷酸酶活性与Ⅰ组比较显著下降(P<0.05);而空肠和回肠Ⅲ组的rBAT、y+LAT1mRNA表达丰度均最低,空肠在各热应激时段表达丰度变化幅度最大(P<0.05),回肠的CAT1mRNA表达丰度在Ⅲ、Ⅳ组与Ⅰ组比较影响更明显(P<0.01)。【结论】热应激对空肠和回肠部位微生物菌群影响较为明显,肠道微生物群落改变可导致肠道的消化吸收功能发生改变。

梅花鹿血清羟脯氨酸、碱性磷酸酶活性年周期变化及其相互关系

本文对酶花鹿血清羟脯氨酸、碱性磷酸酶活性年周期变化的研究结果表明：血清的羟脯氨酸含量和碱性磷酸酶活性变化，生茸期均极显著地高于非生茸期（Ｐ＜００１）。血清的羟脯氨酸含量（Ｘ）和碱性磷酸酶活性（Ｙ）在年周期变化上呈极显著正相关（Ｐ＜００１），其回归方程为Ｙ＝５．３４Ｘ＋１３．２６（ｒ＝０．５５，ｎ＝２５）。

降低日粮氮磷水平对仔猪血液指标、碱性磷酸酶活性及骨骼钙磷含量的影响

为研究降低日粮中氮磷水平对仔猪血液指标、碱性磷酸酶活性及骨骼钙磷含量的影响。挑选60头约20kg的杜长大三元杂交猪,随机分成3组,即对照组、低磷组、低氮低磷组,每组5个重复,每个重复4头猪,分别饲喂含17.5%粗蛋白+0.60%磷、17.5%粗蛋白+0.42%磷+0.1%植酸酶、15.10%粗蛋白+0.42%磷+0.1%植酸酶+合成氨基酸日粮,试验期47 d。结果表明,1)低磷组和低氮低磷组血糖含量显著低于对照组(P<0.05),低氮低磷组血磷、总蛋白和球蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),但与低磷组差异不显著(P>0.05)。2)低磷组和低氮低磷组血清和肋骨碱性磷酸酶活性均显著高于对照组(P<0.05),低磷组和低氮低磷组十二指肠碱性磷酸酶活性也均高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。3)试验各组间掌骨中钙磷含量无显著差异(P>0.05),这表明降低日粮中氮磷水平并不影响骨骼中钙磷含量,对骨骼强度无显著影响。

中性粒细胞碱性磷酸酶活性在血液病鉴别中的临床应用

目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性在血液病患者鉴别诊断中的临床应用。方法对260例血液系统疾病患者外周血涂片用化学染色法染色并作积分判断。并以50例健康体检者作正常对照。结果急性髓细胞白血病(AML),慢性粒细胞白血病(CML)慢性期,阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),骨髓增生异常综合征(MDS-RA)患者的NAP阳性率积分均明显低于正常对照组(P<0.01)。而急性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性疾病(如慢性中性粒细胞白血病、骨髓纤维化、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症),再生障碍性贫血(AA)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、类白血病反应患者的NAP阳性率积分均明显高于正常对照组(P<0.01)。特发性血小板减少性紫癜(ITP),骨髓增生异常综合征(MDS-RAS),缺铁性贫血与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论根据NAP活性特征可以用于血液病的鉴别和诊断。

正畸牙移动过程中龈沟液碱性磷酸酶活性的变化

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)被认为是成骨细胞分化和功能状态的重要标志,为评价正畸牙移动过程中ALP活性的变化趋势及其所起的作用,选择17颗需远中移动的正畸尖牙,分别在加力前与加力后1 h、24 h、7 d、14 d、21 d和30 d收集尖牙近远中侧龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF),生化分析ALP活性的变化．结果显示:加力后7 d、14 d和21 d,GCF-ALP活性均较受力前显著增加(p＜0．05),且在14 d达到峰值(p＜0．01);近、远中位点GCF-ALP活性存在差异,近中侧大于远中侧(p＜0．05)．表明GCF-ALP活性的变化趋势反应了正畸力作用下牙周骨组织改建模式,并与牙移动过程密切相关．ALP是反应正畸牙移动和牙周组织改建生物指标之一．

高效氯氰菊酯暴露下草鱼器官碱性磷酸酶活性的变化

研究了暴露在不同浓度高效氯氰菊酯下草鱼(Ctenopharyngodon idellas)鳃、肝胰脏和肾脏组织中碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)的活性变化。试验中高效氯氰菊酯浓度设5组(0、0.5、1.0、3.0和5.0μg/L),每组分别于1、5和12 d时取样,测定鳃、肝胰脏和肾脏组织中AKP的活性。结果表明,0.5μg/L高效氯氰菊酯暴露1 d时,鳃中AKP活性显著下降(P<0.05),肝胰脏和肾脏中的AKP活性无显著变化(P>0.05);暴露5 d时,鳃和肾脏中AKP活性显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01),肝胰脏中AKP活性无显著变化(P>0.05);暴露12 d时,鳃和肾脏中AKP活性极显著下降(P<0.01),肝胰脏中AKP活性无显著变化(P>0.05)。1.0μg/L高效氯氰菊酯暴露1 d,肝胰脏和肾脏中AKP活性无显著变化(P>0.05),鳃中AKP活性显著或极显著下降(P<0.05,P<0.01);暴露5 d时,肾脏中AKP活性显著或极显著下降(P<0.05,P<0.01),肝胰脏中AKP活性无显著变化(P>0.05);暴露12 d,鳃、肝胰脏和肾脏中AKP活性显著下降(P<0.01)。3.0μg/L和5.0μg/L高效氯氰菊酯显露1、5和12 d,所测定组织中AKP活性均显著或极显著下降(P<0.05,P<0.01)。

β_2肾上腺素能受体激动剂/拮抗剂对大鼠成骨细胞骨碱性磷酸酶比活性的影响

目的探讨β2肾上腺素能受体(ADRβ2R)激动剂/拮抗剂对大鼠成骨细胞(OB)骨碱性磷酸酶(bALP)比活性的影响。方法取24 h内新生SD大鼠的颅盖骨OB进行体外培养。将传至第3代的OB分成ADRβ2R激动剂组、ADRβ2R拮抗剂组和对照组,分别用不同浓度的ADRβ2R激动剂或ADRβ2R拮抗剂对OB处理24、72和96h,检测bALP比活性的变化。结果 ADRβ2R拮抗剂ICI-118551可以提高鼠OB bALP比活性;而ADRβ2R激动剂沙丁胺醇则降低鼠OB bALP比活性。两种调节作用均具有时间剂量依赖性。结论 ADRβ2R激动剂/拮抗剂可以通过调控OB骨形成指标bALP比活性变化,从而调节骨代谢。