垂穗披碱草根际促生菌的分离鉴定及促生作用研究

优良的根际生长促生菌(Plant growth-promoting rhizobacteria, PGPR)是生产优质微生物菌肥的重要物质基础。本研究以广布于青藏高原的垂穗披碱草(Campeiostachys nutans Griseb.)为材料,采用平板划线法分离其PGPR,探究菌株的促生特性,通过16S测序确定菌株的分类地位,并进行盆栽试验验证PGPR的促生效果。结果表明,从垂穗披碱草根际土筛选出14株促生特性优良的PGPR,其中,有11株兼具产IAA,ACC脱氨酶以及铁载体的能力。经16S rDNA鉴定,以假单胞菌属为优势菌属,6株属于假单胞菌属(Pseudomonas),2株属于芽孢杆菌属(Bacillus),2株属于葡萄球菌属(Staphylococcus),其他四株分别属于类节杆菌属(Paenarthrobacter)、微杆菌属(Microbacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)和考克氏菌属(Kocuria)。盆栽试验表明,接种14株菌株对多年生黑麦草具有良好的促生效果,并能够提高其光合效率。研究结果丰富了植物根际促生菌菌种资源库,为实现农业“绿色增产”提供优质菌肥种质资源。

紫花苜蓿与披碱草混合青贮对体外瘤胃发酵特征的影响

为探究不同比例的紫花苜蓿和披碱草的混合青贮效应对人工体外瘤胃发酵参数的影响,以紫花苜蓿单独青贮为对照,采用体外瘤胃发酵法对紫花苜蓿和披碱草按照不同比例进行混合青贮,分析6~24 h内青贮的体外产气量(GP)、甲烷产量(CH_(4))、氨态氮(NH_(3)-N)、体外干物质降解率(IVDMD)、pH、挥发性脂肪酸(TVFA)等体外消化参数,并通过计算多项指标综合指数(MFAEI)对各试验组进行综合评定。结果表明:各处理组的GP、CH_(4)、NH_(3)-N、IVDMD均随发酵时间而升高,pH在6.24~6.77之间且差异不显著(P>0.05)。混贮组的GP、CH_(4)、IVDMD、乙酸(AA)、TVFA和乙酸/丙酸(AA/PA)值在各时间段内均呈现A_(2)组>A_(3)组>A_(4)组的趋势,且显著高于A_(1)组(P<0.05);NH_(3)-N浓度随发酵时间呈A_(4)组>A_(3)组>A_(2)组的趋势且显著高于A_(1)组(P<0.05)。紫花苜蓿单贮(A_(1)组)时AA/PA<3,瘤胃内发酵类型属于丙酸发酵,随着混贮中披碱草含量的增加,AA/PA值在各时间段内显著增加(P<0.05),其中A_(2)组在6 h~24 h内AA/PA>3,瘤胃中发酵类型由丙酸发酵转变为乙酸发酵。根据瘤胃发酵的各项指标和多项指标综合指数后A_(2)组最高,30%紫花苜蓿+70%披碱草混合青贮的体外消化效果最佳。

川西北高原不同海拔高度披碱草与垂穗披碱草核型分析

目的:为研究不同海拔居群染色体核型变异及进化程度,为披碱草的分类及进化研究提供细胞学资料。方法:以川西北高原6个海拔梯度的披碱草居群和5个海拔梯度的垂穗披碱草居群为材料,采用滴片法制片对染色体进行核型分析。结果:披碱草居群D3057(海拔3057 m)、D2682(海拔2682 m)的核型公式为2n=6x=42=42m,为1B型;D2384(海拔2384 m)核型公式为2n=6x=42=42m(4sat),为1A型;D2143(海拔2143 m)、D1747(海拔1747 m)的核型公式为2n=6x=42=40m+2sm,为1B型;D1589(海拔1589 m)的核型公式为2n=6x=42=36m+6sm,为2B型。垂穗披碱草Y2126(海拔4050 m)、Y2117(海拔3800 m)、Y2291a(4150 m)居群的核型公式为2n=6x=42m,ZY3034(海拔3200 m)的居群核型公式为2n=6x=40m+2M,Y2122(海拔4800 m)核型公式为2n=6x=40m+2sm,5个居群的核型类型均为1B型。基于核型对称性与进化指数,披碱草居群D1589(海拔1598 m)进化程度最高,垂穗披碱草居群Y2117(海拔3800 m)的进化程度最高。结论:川西北高原不同海拔披碱草居群核型存在丰富的变异,提升了其环境适应能力。

巴青垂穗披碱草种子产量与农艺性状相关性分析

垂穗披碱草(Elymus nutans)既是优质牧草,也是生态修复的先锋植物。巴青垂穗披碱草是西藏第1个野生牧草驯化品种,为提高巴青垂穗披碱草种子产量,明确巴青垂穗披碱草种子产量与农艺性状的关系,本研究以3个种子产量指标与7个农艺性状指标为研究对象,采用主成分分析、典型相关分析以及逐步回归法分析了巴青垂穗披碱草种子产量与农艺性状的关系。结果表明:单株穗数和单株产量与分蘖数、平均旗叶长呈极显著正相关关系(P<0.01);综合农艺性状指标变量V1和V2,分蘖数和株高结构系数相对较大,可见分蘖数与株高是决定垂穗披碱草种子产量的主要因子。基于逐步回归法分析发现单株产量与单株穗数、平均穗粒数极显著相关(P<0.01);平均穗粒数与单株穗数、种子长度、平均拔节数、株高、平均旗叶长显著相关(P<0.05);单株穗数与种子长度、芒长、平均拔节数显著相关(P<0.05)。因此或可通过增加旗叶长来增加单株穗数与单株产量,进而提高巴青垂穗披碱草种子产量。

干旱胁迫下披碱草属种间杂种F1的DNA甲基化MSAP分析

为了研究披碱草属种间杂种抗旱性优势的遗传机理,以加拿大披碱草(J1)、老芒麦(L1)及其种间杂种F1为试验材料,经干旱胁迫处理,采用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)方法,探究干旱胁迫后亲本及种间杂种F1的DNA甲基化变化规律。结果表明,亲本材料L1和J1的DNA平均甲基化水平分别为45.41%和59.53%,杂种F1的DNA甲基化水平为44.24%,说明杂种在形成过程中发生了DNA去甲基化作用。全甲基化在杂交种的DNA甲基化模式中占主导地位。干旱胁迫前亲本L1、J1和杂种F1的DNA甲基化程度分别为32.73%、41.54%和28.00%,杂种F1甲基化水平为亲本材料的75.40%;干旱胁迫后各材料的DNA甲基化程度均增加,平均增幅分别为14.99、20.44和19.78个百分点,说明干旱胁迫对不同材料DNA甲基化水平均有明显影响,且具有特异性。杂种F1的抗旱性最强,其DNA甲基化水平低于亲本,说明杂交种的抗旱性与DNA甲基化水平存在一定的负相关。

高寒区披碱草属种质资源花序分支与种子产量的关系分析

披碱草属牧草生态适应性强,是青藏高原地区草地质量改善的主要种质资源。为探究披碱草属花序分支与未分支花序的种子产量差异及花序分支性状与种子产量的关系,本研究以来自青藏高原不同地区的75份披碱草属种质资源为试验材料,分析比较了发生分支和未发生分支的花序种子产量,同时对花序分支性状与种子产量进行相关性分析、主成分分析和通径分析。结果发现:花序分支种子产量均显著高于花序未发生分支的种子产量(P<0.05);分支穗种子重、总花序重、分支穗种子数、小穗数与种子产量关系密切,相关系数分别为:0.94,0.99,0.71和0.86。试验结果表明,在生产中可通过增加总花序重、分支穗种子数、主轴种子数来增加分支穗种子重,进而显著提高种子产量。披碱草属花序分支性状对种子产量影响较大,可为披碱草属牧草种质资源筛选利用和小麦族的育种提供帮助。

披碱草属真菌病害研究进展

披碱草属是青藏高原高寒草地的优势禾草,在我国甘肃、青海、西藏、新疆、四川等高寒牧区广泛种植。真菌病害是限制披碱草生长的重要因素,可直接影响披碱草的产量和品质,进而制约草地农业生态系统的生产力。本研究对国内外近年来披碱草属真菌病害的病原学、发生规律及防治措施等方面进行归纳,展望了病害的研究前景和研究思路。截至目前,共计16种真菌病害已在披碱草属上报道,主要包括锈病、黑粉病、白粉病、麦角病、香柱病和叶斑病等病害;这些病害可对披碱草的叶片、叶鞘、茎秆、穗和种子等造成不同程度的危害。目前国内外针对披碱草属真菌病害的防治方法主要有抗病品种选育、种子处理、生态和化学治理。此外,筛选或培育携带内生真菌(Epichlo?)的新品种将是披碱草抗病研究的突破口之一。

休牧时期对高寒草甸垂穗披碱草种子大小和萌发特性的影响

【目的】确定有利于垂穗披碱草(Elymus nutans)种子生长和提高种子萌发特性的休牧时期。【方法】在东祁连山天祝高寒草甸设置土壤解冻临界期—牧草枯黄期(RP1)、土壤解冻后期—牧草枯黄期(RP2)、牧草返青初期—牧草枯黄期(RP3)、牧草返青后期—牧草枯黄期(RP4)和当地传统休牧(优势牧草高5 cm—牧草枯黄期)(RP5)5个休牧时期,研究不同时期休牧对垂穗披碱草种子大小、萌发特性及二者之间相关关系的影响。【结果】RP1休牧垂穗披碱草种子面积、周长、长宽比和长度均最大,其中面积、周长和长度较RP5休牧分别增加了15.14%、10.22%和11.97%。RP4休牧千粒重显著高于RP1、RP2和RP5。与RP5相比,提前休牧显著提高了垂穗披碱草种子的发芽势、发芽指数、发芽率、芽长和活力指数,RP1、RP2、RP3和RP4休牧种子的发芽率较RP5分别提高了84.86%、121.23%、127.27%和127.27%。相关性分析表明,垂穗披碱草种子千粒重与发芽势、芽长呈极显著正相关。【结论】RP1休牧可提高垂穗披碱草种子面积、周长、长宽比和长度,且种子具有较好的萌发特性,有利于保护和恢复垂穗披碱草。

4种西藏野生垂穗披碱草种子萌发期的抗逆性评价

为评价西藏野生垂穗披碱草种子在干旱和盐胁迫下种子萌发的特性,以4种野生垂穗披碱草种子为试材,采用室内PEG-6000模拟干旱胁迫和NaCl模拟盐胁迫进行种子萌发试验,并对发芽指标进行主成分分析。结果表明,抗旱性综合评价指标中,鲜质量和发芽势可作为垂穗披碱草萌发期抗旱性的主要鉴定指标;安多县和羊八井垂穗披碱草种子为高抗旱品种。在耐盐性鉴定中,根长、发芽率可作为垂穗披碱草萌发期耐盐性的主要鉴定指标;羊八井和安多县垂穗披碱草种子为高耐盐品种。本研究对4种西藏野生重穗披碱草种子抗逆性进行综合评价,分别筛选了抗干旱和耐盐性强的西藏野生垂穗披碱草品种及其鉴定指标。

垂穗披碱草的研究进展

垂穗披碱草是青藏高原分布最广的优质牧草之一,作为高寒地区栽培利用、退化草地补播及改良的主要草种,具有重要的经济和生态利用价值,对人工草地建植和天然草地植被修复具有重要意义。对垂穗披碱草遗传多样性、种子萌发特性、农艺性状、栽培及利用、抗逆性等方面的研究现状进行综述,以期为下一步垂穗披碱草的研究和利用提供一定参考。

辽西半干旱区披碱草人工草地种植技术

辽西半干旱区气候环境较复杂,人工种草生态恢复技术在防治辽西水土流失、遏制科尔沁沙地南侵中有积极作用。披碱草是抗逆性强的优良水土保持植物,该文阐述了披碱草的生物学特性及用途,介绍了种子处理、整地、播种、施肥、灌溉、中耕除草、夏季管理、病虫害防治、收获等技术要点,以期有效保护当地生态环境,为可持续发展提供保障。

氮磷肥配施对同德短芒披碱草产量的影响

采用大田试验,以同德短芒披碱草为材料,分析氮磷肥配施对种子产量、饲草产量饲草品质和经济效益的影响。结果表明:随着氮肥用量的增加,披碱草种子产量先增加后减小,以120kgP_(2)O_(5)hm^(-2) 为肥底时的最佳氮肥施用量为59kgN·hm^(-2);饲草产量逐渐增加,以120kgP_(2)O_(5)hm^(-2)为肥底时的最佳氮肥施用量为129kgN·hm^(-2)。随着磷肥施用量的增加,披碱草种子产量增加,以60kgN·hm^(-2) 为肥底,最佳磷肥施用量为217kgP_(2)O_(5)hm^(-2);饲草产量逐渐趋于稳定,以60kgN·hm^(-2) 为肥底,最佳磷肥施用量为238kgP_(2)O_(5)hm^(-2)。粗蛋白含量随着氮肥施用量的增加而增加,随磷肥施用量的增加先增加后减少。经济效益随氮肥和磷肥施用量增加均表现先增加后减少,P_(180)处理经济效益最大,为11901元·hm^(-2),较P处理增收43.8%,较CK处理增收2.3倍。建议同类地区根据种植目的选择适宜的施肥方案。

披碱草与紫花苜蓿混贮发酵品质和营养价值研究

为探讨披碱草(Elymus dahuricus)与紫花苜蓿(Medicago sativa)不同比例混合青贮发酵质量与混贮料营养价值的差异,对披碱草与紫花苜蓿质量比分别为10∶0(A 10 B 0),6∶4(A 6B 4),5∶5(A 5B 5),4∶6(A 4B 6)和0∶10(A 0B 10)5个处理,青贮40 d后进行发酵质量和营养价值分析。结果表明:披碱草单贮pH为4.01,乳酸(LA)、可溶性碳水化合物(WSC)含量、中性洗涤纤维(NDF)显著高于其他组(P<0.05),氨态氮/总氮(AN/TN)和粗蛋白(CP)含量显著低于其他组(P<0.05),无丁酸(BA)产生,V-Score评分为92.38,具有优质的发酵品质;随着紫花苜蓿比例的增加,pH、乙酸(AA)、AN/TN、CP、粗灰分(Ash)含量逐渐升高,LA、WSC、NDF、酸性洗涤纤维(ADF)、粗脂肪(EE)含量逐渐下降。由此得出,披碱草单贮能得到发酵品质优良的青贮饲料,但营养价值不如混贮。紫花苜蓿与披碱草混合青贮后能有效弥补紫花苜蓿单贮不易成功的难题和披碱草青贮饲料粗蛋白含量值低的缺点。综上所述,披碱草与紫花苜蓿以6∶4比例混合青贮综合效果最优。

川西短芒披碱草生产试验报告

为进一步评价川西短芒披碱草在大田生产条件下的生产性能,课题组于2015~2018年,以国审品种同德短芒披碱草为对照,分别在四川红原县、道孚县和青海海晏县开展了川西短芒披碱草多年多点的大田生产试验。连续3年的生产试验结果表明,川西短芒披碱草在各试验点生长良好,生产性能表现优良,综合评价优于对照品种同德短芒披碱草。川西短芒披碱平均鲜草产量为17760kg/hm^(2),较对照增产14.7%,增产显著;干草产量平均为6469kg/hm^(2),较对照增产13.2%,增产极显著。川西短芒披碱草较对照同德短芒披碱草具有突出的丰产性和一定的稳定性,在四川省阿坝州红原县、甘孜州道孚县和青海省海北州海晏县均能很好的适应,适宜在类似生态区推广种植。

披碱草属4个牧草品种苗期抗旱性综合评价

以披碱草属的同德短芒披碱草、同德老芒麦、天水肥披碱草和甘南垂穗披碱草为材料,研究5 d持续干旱对其抗氧化酶活性、渗透调节物质积累量、光合作用和生物量等的影响,并通过隶属函数综合评价4个品种的抗旱性。结果显示:与对照组相比,干旱胁迫下4个供试材料的抗氧化酶活性、丙二醛含量呈上升趋势,净光合速率、株高呈下降趋势。干旱条件下,同德短芒披碱草可溶性糖和丙二醛积累量较对照组增幅最大,分别为180.55%和36.46%;相对电导率较对照组上升53.69%,增幅最小。同德老芒麦POD和CAT活性较对照组增幅最大,分别为202.78%和48.83%;净光合速率下降1.01%,降幅最小。干旱胁迫下,天水肥披碱草蒸腾速率和PSⅡ最大光化学效率降幅最小,分别为12.99%和8.47%;气孔导度降低了42.86%,降幅最大;游离脯氨酸含量较对照组上升76.72%,增幅最大。甘南垂穗披碱草地上部分鲜重和叶绿素含量较对照组分别下降3.62%和35.77%,降幅最小;PSⅡ潜在活性和PSⅡ光合电子传递效率降幅最大,分别为5.55%和30.44%。隶属函数综合评价结果表明,4个品种抗旱性表现为同德短芒披碱草>甘南垂穗披碱草=同德老芒麦>天水肥披碱草。

黄河源区不同禁牧年限对垂穗披碱草单根及其根-土复合体力学强度特征的影响

为研究黄河源区不同禁牧年限高寒草地植物根系力学特性及根系增强土体抗剪强度贡献特征,本研究以黄河源区河南县地区未禁牧、1 a禁牧、4 a禁牧、10 a禁牧4种工况下的高寒草地植物垂穗披碱草为研究对象,在野外调查、取样及室内单根拉伸试验和根-土复合体直剪试验的基础上,探讨了垂穗披碱草在不同禁牧年限下,单根抗拉力和根-土复合体抗剪强度指标变化特征及其影响因素。结果表明:1~4 a短期禁牧增加了垂穗披碱草生长量指标,而10 a长期禁牧其生长量指标则呈降低的变化特征。随着禁牧年限增加,垂穗披碱草单根抗拉力呈先增大后降低的变化规律,1和4 a禁牧单根抗拉力较未禁牧增幅分别为15.9%、14.8%;垂穗披碱草单根抗拉强度、根-土复合体黏聚力均呈降低趋势,其中10 a禁牧垂穗披碱草单根抗拉强度、根-土复合体黏聚力相对于未禁牧降低幅度最大,分别为57.3%、63.5%。进一步研究表明,根-土复合体黏聚力c值与根径、土体密度之间呈显著正相关关系,与含水率之间则呈显著负相关关系,且黏聚力c值随含根量的增加呈先增大后减小的变化规律。研究结果可为高寒地区开展草地退化、水土流失等灾害的有效防治提供理论支撑和实际指导。

21份披碱草农艺性状与产量形成的相关性分析

【目的】了解不同披碱草种质性状,为优良披碱草种质材料筛选提供依据。【方法】以21份不同来源的披碱草种质为材料,通过测定17个农艺指标,利用相关性分析、主成分分析、多元逐步回归分析、聚类分析等统计分析方法,研究披碱草主要农艺性状的变异特征,明确披碱草产量形成的主要影响因子。【结果】披碱草农艺性状变异丰富,变异系数在11.07%(花序长)~45.53%(基部茎长)。相关性分析表明,披碱草单株干草产量与基部茎长、旗叶长呈显著正相关(P<0.05),单株种子产量与分蘖数、千粒质量呈极显著正相关(P<0.01)。多元逐步回归与通径分析表明,株高、茎粗、基部茎长、穗下茎长、旗叶宽、倒二叶长、倒二叶叶鞘长、倒二叶宽、花序长、小穗长、茎叶比是影响单株干草产量的主要因子,其中茎粗、基部茎长、穗下茎长、旗叶宽、倒二叶叶鞘长、小穗长、茎叶比对单株干草产量的影响有直接效应;株高、倒二叶叶鞘长、小穗长、分蘖数、千粒质量是影响单株种子产量的主要因子,其中小穗长、分蘖数对单株种子产量的影响有直接效应。主成分分析表明,前5个主成分累积贡献率达79.304%。根据第1,2主成分筛选出PJC09、PJC14、PJC15、PJC17、PJC18、PJC26、PJC27共7份单株干草产量和单株种子产量表现均较高的披碱草种质材料,其平均单株干草产量为197.02 g,单株种子产量为21.39 g。聚类分析表明,21份披碱草种质材料被聚为3类,第Ⅰ类包含2份种质材料,可作为筛选单株种子产量高的种质利用,第Ⅱ类包含10份种质材料,可作为筛选单株干草产量和单株种子产量均高的种质利用,第Ⅲ类包含9份种质材料,可依据育种目标筛选特异性状的种质利用。【结论】确定了11个影响披碱草单株干草产量的主要因子和5个影响单株种子产量的主要因子,筛选出单株干草产量和单株种子产量均表现优异的7份披碱草种质材料。

青藏高原六种披碱草属牧草落粒性差异及农艺性状分析

为探究青藏高原地区披碱草属(Elymus)不同物种间落粒性的差异,明确影响披碱草属落粒的主要农艺性状,筛选低落粒性披碱草属资源,为披碱草属抗落粒性牧草育种提供育种材料和理论依据。本研究以采自于青海不同地区的披碱草属6种共18份资源为研究对象,对供试材料的落粒性和农艺性状进行了相关性分析、通径分析、主成分分析和聚类分析。结果表明:6种披碱草属牧草自然落粒率存在显著差异,垂穗披碱草(E.nutans)自然落粒率最高,达到49.54%;披碱草属牧草自然落粒率与小穗长、外稃长、芒长均呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)正相关关系,与单序籽粒数、小穗数、穗轴节数、株高均呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)负相关;单序籽粒数、小穗数、株高、穗轴节数是培育低落粒性披碱草属牧草的目标性状,芒长、小穗长和外稃长是影响披碱草属牧草落粒的关键农艺性状。

东祁连山灌丛凋落叶水浸提液对垂穗披碱草种子萌发和幼苗生长的影响

为了解灌丛凋落叶在灌草群落结构维持中可能存在的潜在化感作用,以东祁连山3种优势灌木和灌下优势草种垂穗披碱草(Elymus nutans)为供试材料,分析了不同浓度(0.01 g/L、0.025 g/L、0.05 g/L、0.075 g/L、0.1 g/L)的金露梅(Potentilla fruticosa)、川滇柳(Salix rehderiana)、头花杜鹃(Rhododendron capitatum)及灌间草本的凋落叶水浸提液,对垂穗披碱草种子萌发、幼苗形态和生理指标的影响。结果表明:(1)垂穗披碱草种子发芽率与发芽势在金露梅与川滇柳凋落叶浸提液处理下呈“低促高抑”的浓度效应,在灌间草本凋落叶浸提液处理时表现为先升后降,而头花杜鹃凋落叶浸提液处理时均下降,并在浓度超过0.075 g/L时种子不发芽。(2)灌丛凋落叶浸提液对垂穗披碱草幼苗根长与干重均表现出抑制作用,且随浓度增大而增强;金露梅、川滇柳与灌间草本凋落叶浸提液对垂穗披碱草幼苗苗高表现出“低促高抑”的浓度效应;而头花杜鹃凋落叶浸提液处理对垂穗披碱草幼苗鲜重与苗高均呈抑制作用。(3)垂穗披碱草幼苗CAT、SOD活性随着浸提液浓度升高均表现出先升后降的变化趋势;可溶性糖与可溶性蛋白在灌丛凋落叶浸提液浓度低于0.075 g/L时含量较高;MOD含量在金露梅凋落叶浸提液处理下随浓度升高而持续升高,而在川滇柳与灌间草本凋落叶浸提液处理下呈先升高后降低的趋势。综合来看,灌丛凋落叶浸提液对垂穗披碱草的化感作用由大到小依次为:头花杜鹃、川滇柳、灌间草本、金露梅,其中头花杜鹃对灌下草本植物影响较大,凋落叶化感作用是影响该地区灌草系统群落分布及灌草结构的重要因素。

加拿大披碱草与披碱草、圆柱披碱草2个种间杂种F_1及其亲本的AFLP分析

以加拿大披碱草（Elymus canadensis L.）与披碱草（E.dahuricus Turcz.）、圆柱披碱草（E.cylindricus（Franch.）Honda）2个种间杂种F1及其亲本为试材,利用AFLP分子标记技术,对2个杂种F1及其亲本的遗传差异性进行比较分析,以期为杂种鉴定及后代选育提供分子依据。结果表明：用筛选出的13个适宜引物共扩增出1247个AFLP位点,其中多态性位点1042个,多态性位点比率高达83.56%;各供试材料的遗传距离（GD）变动在0.4276～0.7486之间,以GD值0.65为基准,5个材料聚为2类,第1类为加拿大披碱草、圆柱披碱草和加拿大披碱草×圆柱披碱草杂种F1,第2类为披碱草、加拿大披碱草×披碱草杂种F1。