梅州地区临床分离耐碳氢霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药机制及分子流行病学研究

目的：了解梅州地区临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药性，探讨其耐药机制及分子流行病学特征。方法收集梅州地区5所医院2012年1～12月临床分离的非重复耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌210株，采用K-B法检测药敏性，改良Hodge试验筛选耐碳青霉烯表型，PCR扩增IM P、VIM、OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58型碳氢霉烯酶基因，并测序。应用ERIC-PCR分型及同源性分析。结果药敏结果显示，17种药物除多粘菌素B耐药率为0．48％外，其他药敏耐药率都高于60％；改良 Hodge试验阳性菌株163株（77．62％）。扩增结果显示Bla-OXA-51的检出率为最高为94．29％（198/210），Bla-OXA-23的检出率次之为78．57％（165/210），Bla-VIM的检出率为4．29％（9/210），Bla-IM P、Bla-OXA-24、Bla-OXA-58均未被检出。210株菌株分为7个ERIC基因型，其中A型97株，B型44株，H型25株，为主要的流行克隆株。结论梅州地区临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药十分严重；产OXA-51、OXA-23和VIM 型碳氢霉烯酶是本地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制，且耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌存在克隆的流行。

产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药机制和临床特征

目的 探讨临床分离的产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药机制及携带blaNDM-1质粒的特征和基因环境.方法 连续收集2011年8月至2013年1月华南地区6家综合性医院临床非重复分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌48株,同时选择大肠埃希菌J53作为接合试验受体菌.对所有菌株进行碳青霉烯水解酶表型试验（改良Hodge试验）,用PCR法检测碳青霉烯类水解酶相关基因.通过脉冲场凝胶电泳（PFGE）观察携带blaNDM-1质粒的大小,通过对质粒进行酶切分析质粒的同源性及不相容群分型,并对临床上产NDM-1细菌感染患者的临床特征进行分析.结果 48株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中有43株改良Hodge试验阳性.碳青霉烯酶耐药基因检测结果示,48株肠杆菌科细菌bla VIM、blaGIM和blaSPM均为阴性,19株细菌blaNDM-1基因为阳性,分别为3株大肠埃希菌、5株肺炎克雷伯菌、6株阴沟肠杆菌、3株弗劳地柠檬酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株雷氏普罗威登斯菌.药敏试验结果显示,19株细菌均对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和哌拉西林/他唑巴坦耐药,对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为47.3％,但对阿米卡星的敏感率为68.4％.有13株产blaNDM-1细菌携带的blaNDM-1质粒均成功转移到大肠埃希菌J53中.接合子药敏试验结果显示,对亚胺培南、头孢他啶、头孢噻肟和哌拉西林/他唑巴坦仍耐药,但对阿米卡星、环丙沙星和左氧氟沙星均敏感.基因环境结果显示,接合子J-FR90（雷氏普罗威登斯菌）所有基因为阴性,其余12株细菌携blaNDM-1质粒blaSHV、aac-（6＇）-Ib基因均为阳性.PFGE显示,携blaNDM-1质粒大小基本一致,为50 kb左右.质粒之间有相似的酶切图谱,其相似度＞80％.质粒不相容群为IncX3型.菌株传代500代后,PCR检测显示所携带的blaNDM-1质粒均未丢失.19例产NDM-1细菌感染患者中6例死亡,13例存活.结论 华南地区已出现产NDM-1的肠杆菌科细菌,主要通过IncX3型质粒在肠杆菌中传播.感染此类细菌的患者预后良好.