山东省聊城地区耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌黏菌素耐药基因mcr-1相关感染的分子机制及临床特征

目的 探讨携带mcr-1耐药基因的耐碳青酶烯类肠杆菌目细菌(CRE)相关感染的分子机制及临床特征,为该类菌株感染的临床诊疗及预防区域内传播与暴发流行提供参考依据。方法 收集聊城市第二人民医院2016年1月—2022年12月分离自临床的非重复CRE,采用乙二胺四乙酸碳青霉烯酶失活试验(eCIM)与改良碳青霉烯酶失活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶表型;采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)扩增并测序分析与黏菌素耐药相关的mcr-1基因及碳青霉烯类耐药基因;采用多位点序列分型技术(MLST)确定菌株的序列分型(ST)。收集mcr-1基因阳性菌株感染患者的病历资料,统计相关信息并进行分析。结果 共分离CRE菌株127株,包括65株大肠埃希菌,52株肺炎克雷伯菌,3株阴沟肠杆菌,3株产酸克雷伯菌,2株奇异变形杆菌,以及产气肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌各1株。所有CRE菌株中有6株携带mcr-1基因,且同时为blaNDM-5基因阳性。携带mcr-1的6株CRE仅对替加环素具有较高的敏感性,表现为低水平耐药。MLST分型结果显示有4种不同的ST型别,其中2株为ST167,2株为ST410,其余2株分别株为ST48和ST361。6例患者的性别、年龄、抗菌药物使用史、基础疾病及病情严重程度均不同,各项感染指标有不同程度的升高,患者最终均治愈出院。结论 黏菌素耐药基因mcr-1在聊城地区临床分离的CRE中检出率较低且呈低水平耐药,但已发现该基因与碳青霉烯酶耐药基因共存的现象,需引起临床重视并加强监测。

检测多药耐药鲍氏不动杆菌的碳青酶烯酶及整合酶基因

目的检测多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAba)的碳青酶烯酶及整合酶基因。方法从70株对耐亚胺培南鲍氏不动杆菌中用PCR方法测定碳青酶烯酶OXA23类、OXA24类、OXA51类和OXA58类基因及Ⅰ类和Ⅱ类整合酶基因,对扩增阳性的碳青酶烯酶基因进行测序分析;抗菌药物敏感试验采用琼脂稀释法。结果获得OXA-23类基因阳性56株,占80.0%,OXA-58类基因阳性1株,仅1株菌OXA51类基因阴性;Ⅰ类整合酶基因阳性61株,占87.1%,未测得OXA24类碳青酶烯酶和Ⅱ类整合酶基因;序列分析提示分离的CRAba为OXA-23型和OXA-58型,所测菌株对环丙沙星、头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦高度耐药,对多黏菌素B一致性敏感。结论新近出现的CRAba菌株主要是以Ⅰ类整合子携带的OXA-23型碳青酶烯酶。

铜绿假单胞菌耐碳青酶烯类抗菌药物机制分类检测的研究

目的 研究铜绿假单胞菌(PA)耐碳青酶烯类抗菌药物机制的分布。方法 应用多底物 多抑制剂协同法检测34株耐碳青酶烯类抗菌药物PA临床分离株,推测其耐药机制并分析其分布。结果 D2 缺乏、外排泵和产金属酶分别占3种机制的14 7%、35 3%和50 0%。结论 产金属酶是PA耐碳青酶烯类抗菌药物最主要机制。

头孢吡肟与舒巴坦对耐碳青酶烯类不动杆菌属的联合药敏研究

目的评价头孢吡肟与舒巴坦对临床分离耐碳青酶烯类不动杆菌属病原菌的体外联合抗菌效应。方法采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对24株临床分离的耐碳青酶烯类不动杆菌属病原菌的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FIC指数)判定联合效应。结果头孢吡肟与舒巴坦联合应用后,其MIC50明显降低,FIC指数≤0.5占33.3%,0.5<FIC≤1,占62.5%,1<FIC≤2占4.2%,FIC>2为0。结论头孢吡肟与舒巴坦联合用药对临床分离耐碳青酶烯类不动杆菌属体外联合抗菌效应主要表现为协同和相加作用。

耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌医院感染危险因素分析

目的：探讨住院患者耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌耐药性与医院感染的危险因素。方法该院2011年1月至2012年12月所有发生耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌医院感染的住院患者进行细菌耐药分析与1：1匹配的病例对照研究，并采用条件Logistic回归分析。结果耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌对碳青酶烯类抗菌药物耐药性为3．6％～79．2％，感染相关的危险因素有多联抗菌药物使用天数（OR＝4．252）、使用碳青酶烯类抗菌药物（OR＝9．729）、ICU住院天数（OR＝5．228）。结论合理使用抗菌药物，缩短住院时间，针对危险因素采取相应的防护措施将有利于预防和控制耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌感染发生。

4种酶抑制剂分类检测碳青酶烯酶的研究

目的 研究联合应用EDTA、二巯基乙酸 ( 2MA)、克拉维酸 (CLAV)和舒巴坦 (SUL) 4种 β 内酰胺酶抑制剂建立分类检测碳青酶烯酶 (CHBls)的简便实用方法。方法 采用多底物纸片 多抑制剂协同法 (MDMIST)分类检测 4 6株碳青酶烯类抗生素耐药的临床分离株 (铜绿假单胞菌 2 0株 ,嗜麦芽寡养单胞菌 12株 ,黄杆菌属 7株 ,不动杆菌属 5株 ,普罗威登斯菌属 2株 )的CHBls。结果 对多数菌 ,2MA检出率最高 ,但在铜绿假单胞菌以EDTA最高 ;CLAV、SUL检出率没有 2MA、EDTA高 ;2MA在嗜麦芽寡养单胞菌、普罗威登斯菌属、黄杆菌属中检出率最高 ,EDTA在铜绿假单胞菌中最高 ,SUL在不动杆菌最高 ;不同底物间 ,一般IMP检出率最高 ,但在黄杆菌属 ,CAZ最高 ;在 3种细菌 ,存在IMP敏感 /MER耐药表型 ,该表型多为SCHBLs ,少数为其他机制。结论 MDMIST简便实用 ;不同酶抑制剂在不同种菌间及同种菌中的检出率不同 ;不同菌所产的CHBLs的优势类型不同 ;不同底物检出率不同。

新型碳青酶烯类抗生素——艾他培南

艾他培南是同类结构中唯一非胃肠道给药的碳青酶烯类抗生素,有广泛的抗菌活性,包括革兰阳性与阴性需氧菌和厌氧菌。对临床分离菌,如铜绿假单胞菌、耐酶葡萄球菌和耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和肠球菌有效。临床上用于治疗成人中度至重度敏感菌引起的感染,如:腹腔内感染、皮肤软组织感染、肺炎、复杂的尿路感染、肾盂肾炎和急性盆腔炎。对头孢菌素耐药的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和AmpC型β内酰胺酶及青霉素耐药的肺炎球菌有较强活性。艾他培南蛋白结合率高,血清半衰期为4h,每日1次给药,耐受性好。

磷霉素治疗耐碳青酶烯-肺炎克雷伯菌感染的疗效观察

目的评价磷霉素治疗ICU医院获得性感染危重患者耐碳青酶烯类-肺炎克雷伯菌(CRKP)的安全性和有效性。方法对诊断为ICU医院获得性CRKP,经临床药师会诊建议采用静脉磷霉素治疗的患者11例,经中心静脉导管滴注磷霉素钠,根据药敏结果联用敏感抗菌药物,以病死率为主要结局指标,以临床疗效、细菌学疗效、不良事件发生率为次要结局指标。结果 11例患者均取得细菌微生物清除或假定清除,临床疗效评价为临床治愈。有2例患者死亡,病死率为18.2%,无患者因CRKP导致感染复发。所有患者均能耐受磷霉素,没有发现肝或肾功能检查异常。结论磷霉素可能成为成人患者CRKP感染治疗的一种选择,特别是联用其他抗菌药物时可获得更好的临床疗效。

耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌的检出和抗菌活性的分析

目的通过对耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)和碳青酶烯类敏感鲍曼不动杆菌(carbapenem sensitive Acinetobacter baumannii,CSAB)的分离结果和耐药性分析,指导临床合理用药。方法回顾性对比分析2015年1月—2017年6月分离出的729株CRAB和170株CSAB的标本来源、病区分布和耐药性。数据分析采用Whonet5.6统计软件,差异显著性分析使用IBM SPSS Statistics 20软件,耐药率比较采用χ2检验。结果 CRAB的分离率为81.09%。病区分布主要为ICU病房、神经内科、呼吸内科、神经外科和干部保健病房,构成比分别为35.53%、17.28%、14.54%、12.48%和10.43%。从ICU病房检出CSAB(6.47%)的构成比明显低于CRAB(35.53%),二者比较差异有显著性(P<0.05)。CRAB的标本来源主要为痰液,构成比为80.90%。CRAB耐药率较高,除对左氧氟沙星和复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为36.76%和66.67%外,对其他10种抗菌药物的耐药率大于92.04%;而CSAB耐药率较低,对所有12种抗菌药物的耐药率小于15.88%。CSAB对12种抗菌药物的耐药率均低于CRAB,且差异有显著性(P<0.05)。CRAB对左氧氟沙星的中介的比率为60.08%;CSAB对头孢曲松的中介的比率为67.06%。结论 CRAB的分离率和耐药性较高,CRAB的耐药率明显高于CSAB,实验室应及时报告CRAB的分离和耐药性结果,做好细菌耐药监测工作。

碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染继发二重感染危险因素分析

目的探讨碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染继发二重感染的高危因素,为临床预测并减少二重感染提供参考。方法汇总重症下呼吸道感染经碳青酶烯类治疗5d以上者的临床资料,分析与二重感染相关的危险因素。结果本组入选53例,碳青酶烯类治疗后病情明显改善43例,占81.1%,38例存在二重感染危险因素,其中11例发生二重感染,感染率28.9%。经Pearson相关分析,与二重感染相关的5个变量分别为年龄(r=0.412,P=0.010)、机械通气(r=0.673,P=0.000)、低蛋白血症(r=-0.769,P=0.000)、碳青酶烯类治疗时间(r=0.843,P=0.000)、危重患者急性生理学与慢性健康评定标准Ⅱ(APACHEⅡ)评分(r=0.815,P=0.000)。结论机械通气、低蛋白血症、碳青酶烯类治疗时间、APACHEⅡ评分是碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染后继发二重感染的高危因素。

碳青酶烯类抗生素耐药弗劳地枸橼酸杆菌KPC-2基因的检测

目的研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法采用琼脂对倍稀释法检测弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南以及其他常见药物的最低抑菌浓度(MIC)。等电聚集电泳分析其β-内酰胺酶类型,聚合酶链反应(PCR)和DNA序列分析检测β-内酰胺酶基因型,接合试验分析其耐药质粒传递情况。结果弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均为64 mg·L-1,对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南和氨基糖苷类均耐药。转移接合结果显示对亚胺培南和美罗培南的耐药性可以通过质粒转移。等电聚焦电泳结果显示转移接合子具有等电点(PI)约为5.0、7.5的2种β-内酰胺酶。PCR检测及序列分析结果显示该菌产生KPC-2基因。结论 KPC-2型碳青酶烯酶的产生是引起弗劳地枸橼酸杆菌对碳青酶烯酶耐药的主要原因,并且该耐药性能通过质粒进行转移。

耐碳青酶烯类铜绿假单胞菌相关耐药基因及Ⅰ型整合酶基因研究

目的研究耐碳青酶烯类铜绿假单胞菌的相关耐药基因及Ⅰ型整合酶基因。方法采用聚合酶链反应(PCR)法对铜绿假单胞菌碳青酶烯类耐药相关的金属β-内酰胺酶IMP、VIM、SPM、GIM基因和外膜蛋白oprD2基因及Ⅰ型整合酶基因等6种主要耐药基因进行检测与分析。结果51株耐亚胺培南和美罗培南铜绿假单胞菌SPM、GIM金属酶基因检测均阴性,16株IMP和5株VIM型金属酶基因阳性,14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌oprD2基因阳性,其余37株铜绿假单胞菌oprD2基因阴性,7株产金属酶并同时伴有膜孔蛋白oprD2基因缺失,49株Ⅰ型整合酶基因intⅠ1阳性。结论膜孔蛋白oprD2基因缺失是铜绿假单胞菌对碳青酶烯类抗菌药物耐药的主要原因,其次是产生金属酶,Ⅰ型整合酶基因广泛存在于铜绿假单胞菌中,提示要加强对耐药基因在病原菌种属间传播和扩散的监测工作。

碳青酶烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵机制的初步研究

目的研究外排泵在碳青酶烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌中的表达情况,为进一步研究其多重耐药机制奠定基础。方法采用M-H琼脂稀释法,测定添加和不添加抑制剂MC207110时铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的MIC值。结果 MC207110最佳使用浓度为20μg/ml。198株多重耐药铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的MIC值下降4倍以上的菌株分别有55.49%和67.15%。结论外排泵机制是导致美罗培南和亚胺培南对铜绿假单胞菌耐药的主要机制之一。MC207110可以作为研究细菌外排泵机制的一种较好抑制剂。

碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染继发二重感染危险因素分析

目的探讨碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染继发二重感染的高危因素,为临床预测并减少二重感染提供参考。方法汇总重症下呼吸道感染经碳青酶烯类治疗5 d以上者的临床资料,分析与二重感染相关的危险因素。结果本组入选53例,碳青酶烯类治疗后病情明显改善43例,占81.1%,38例存在二重感染危险因素,其中11例发生二重感染,感染率28.9%。经Pearson相关分析,与二重感染相关的5个变量分别为年龄(r=0.412,P=0.010)、机械通气(r=0.673,P=0.000)、低蛋白血症(r=-0.769,P=0.000)、碳青酶烯类治疗时间(r=0.843,P=0.000)、危重患者急性生理学与慢性健康评定标准Ⅱ(APACHEⅡ)评分(r=0.815,P=0.000)。结论机械通气、低蛋白血症、碳青酶烯类治疗时间、APACHEⅡ评分是碳青酶烯类治疗重症下呼吸道感染后继发二重感染的高危因素。

565株铜绿假单胞菌对碳青酶烯类药物耐药性分析

目的:分析我院近年来铜绿假单胞菌对碳青酶烯类药物的耐药特点及变迁,为指导临床用药提供依据。方法:收集2006年1月至2009年12月间临床各标本中分离的铜绿假单胞菌,使用Vitek-32微生物分析系统进行细菌鉴定(GNI+卡)和药敏试验(GNS448卡),对结果进行回顾性分析。结果:所有临床标本中分离出铜绿假单胞菌565株,对亚胺培南和美洛培南的药敏情况有4种:亚胺培南和美洛培南均敏感,占78.58%;前者敏感、后者耐药,占9.03%;前者耐药、后者敏感,有3株,占0.53%;两者均耐药占11.85%。且两种药物耐药率逐年升高。结论:亚胺培南和美洛培南对铜绿假单胞菌抗菌活性有不同,临床应根据药敏结果用药,同时应注重碳青酶烯类药物耐药性变化。

铜绿假单胞菌耐碳青酶烯类抗菌药物机制分类检测的研究

目的研究铜绿假单胞菌(PA)耐碳青酶烯类抗菌药物机制的分布。方法应用复合纸片法检测47株临床分离的耐碳青酶烯类抗菌药物PA临床分离株,据表型推测其耐药机制并分析其分布。结果产金属酶、D2缺失、外排泵出分别占29.8%、31.9%、31.9%,产其他β-内酰胺酶占6.4%。结论产金属酶是PA耐碳青酶烯类抗菌药物最主要机制之一,准确的实验室检测不仅可以帮助临床合理选用抗菌药物并可减少细菌耐药性的传播。

改良Hodge试验阳性肠杆菌科细菌对碳青酶烯类药物的耐药性比较

目的探讨改良Hodge试验阳性肠杆菌科细菌对碳青酶烯类药物的耐药性比较。方法本次研究选择的研究对象为60株,均为2012年1~6月分离的初筛试验阳性的具体肠杆菌科细胞,对碳青酶烯酶相关产生的情况进行检测。结果采用改良Hodge行确证试验后,检出共有4株阳性结果菌株,其中费劳地枸橼酸杆菌1株,大肠埃希菌1株,肺炎克雷伯菌2株。美罗培南和亚胺培南抑菌圈均在16~22mm直径内,三和四代头孢菌素均耐药。结论即使行体外碳青霉烯类药物药敏实验呈敏感性,但其产碳青烯类酶已被证明,临床尚不能确定用于肠杆菌科细胞引起的感染治疗中的效果。细菌行表型确证试验为阳性中,若需对亚型行准确辨别,需对其基因序列采用分子生物学方法进行检测,以确保临床应用准确性。

铜绿假单胞菌耐碳青酶烯类抗菌药物机制分类检测的研究

目的研究铜绿假单胞菌(PA)耐碳青酶烯类抗菌药物机制的分布。方法应用复合纸片法检测47株临床分离的耐碳青酶烯类抗菌药物PA临床分离株,据表型推测其耐药机制并分析其分布。结果产金属酶、D2缺失、外排泵出分别占29.8%、31.9%、31.9%,产其他β-内酰胺酶占6.4%。结论产金属酶是PA耐碳青酶烯类抗菌药物最主要机制之一,准确的实验室检测不仅可以帮助临床合理选用抗菌药物并可减少细菌耐药性的传播。

铜绿假单胞菌耐碳青酶烯类抗菌药物机制分类检测的研究

目的研究铜绿假单胞菌(PA)耐碳青酶烯类抗菌药物机制的分布。方法应用复合纸片法检测47株临床分离的耐碳青酶烯类抗菌药物PA临床分离株,据表型推测其耐药机制并分析其分布。结果产金属酶、D2缺失、外排泵出分别占29.8%、31.9%、31.9%,产其他β-内酰胺酶占6.4%。结论产金属酶是PA耐碳青酶烯类抗菌药物最主要机制之一,准确的实验室检测不仅可以帮助临床合理选用抗菌药物并可减少细菌耐药性的传播。