mCIM联合eCIM试验检测产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的临床应用

探讨mCIM联合eCIM在碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌耐药表型筛选中的应用,选择住院患者标本中分离的76株亚胺培南或厄他培南耐药的肺炎克雷伯菌,按照CLSI推荐的mCIM和eCIM方法试验,以PCR方法检测其碳青霉烯酶基因作为参考依据,评估mCIM联合eCIM试验对CRKP的筛选效能及不同底物的筛选水平。结果从76株CRKP中检测出73株阳性,与PCR方法检测碳青霉烯酶基因阳性结果一致。统计学分析mCIM与eCIM联合试验检测碳青霉烯酶的结果与PCR基因检测比较有高度一致性。因此,采用mCIM联合eCIM检测CRKP中的碳青霉烯酶表型,具有操作简单,成本较低,结果易于判读,与PCR基因检测结果具有高度一致性等特点,在临床微生物检验中具有广泛的应用前景,尤其适合在基层实验室中开展。

过表达碳青霉烯酶OXA-48对菌株耐药性、适应性及宿主细胞Toll样受体信号通路的影响

目的探讨过表达OXA-48对菌株耐药性、适应性及宿主细胞Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的影响。方法将重组质粒pET32a(+)-OXA-48转化至E.coli BL21(DE3)中,获得的重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)进行菌落PCR及测序鉴定。以A_(600)(0.3、0.5、0.7)、IPTG终浓度(0.4、0.6、0.8 mmol/L)及诱导时间(2、4、6 h)为变量,mRNA转录水平为响应值,设计3因素3水平正交试验,优化质粒的诱导表达条件。纸片扩散法检测重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)对亚胺培南(Imipenem,IPM)、美罗培南(Meropenem,MEM)、头孢曲松(Ceftriaxone,CRO)、头孢吡肟(Cefepime,FEP)的耐药性;通过生物膜形成试验和血清抵抗力试验检测重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)的适应性。将pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)、pET32a(+)-BL21(DE3)和E.coli BL21(DE3)菌株分别感染小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,qRT-PCR法检测细胞中TLR2、TLR4和NF-кB(p65)基因mRNA转录水平,ELISA法检测细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达情况。结果经菌落PCR及测序鉴定,重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)构建正确。最佳诱导条件:A_(600)为0.3,IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导时间为2 h。与pET32a(+)-BL21(DE3)菌株比较,重组菌pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)对IPM、MEM、CRO和FEP 4种抗生素的耐药性明显降低(t=7.14~22.32,P均<0.05),形成的生物膜明显增多(t=15.69,P<0.05),在血清中的存活率显著升高(P<0.05);pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)感染MH-S细胞24 h后,TLR2基因mRNA转录水平显著增加(t=5.77,P<0.05),感染12及24 h后,TLR4、NF-кB(p65)基因mRNA转录水平显著增加(t=3.71~10.06,P<0.05)。与正常细胞组相比较,pET32a(+)-OXA-48-BL21(DE3)感染MH-S细胞6、12和24 h后,IL-6及TNF-α的表达水平显著升高(t分别为7.90~13.44及5.40~6.32,P均<0.01),IL-10表达水平显著下降(t=3.15~4.08,P均<0.05),TGF-β的表达水平差异无统计学意义(t=0.013~1.41,P均>0.05);感染12和24 h时,IL-6表达水平显著高于pET32a(+)-BL21(DE3)组(t分别为2.92和3.79,P均<0.05)。结论过表达OXA-48可降低细菌的耐药性,提高适应性及宿主细胞TLRs信号通路相关因子的转录水平,还可影响宿主细胞下游细胞因子的表达水平。

大肠埃希菌的临床分布、耐药性及碳青霉烯耐药株基因序列分析

目的分析大肠埃希菌的临床分布、耐药性及碳青霉烯耐药株基因序列。方法选取2021年1月至2023年12月山东省潍坊市中医院送检标本中分离的1837株大肠埃希菌为研究样本,分析大肠埃希菌的临床科室分布、样本类型分布、抗菌药物耐药情况、碳青霉烯类耐药情况以及碳青霉烯类耐药基因检测结果。结果1837株大肠埃希菌主要分布在泌尿外科(13.4%),主要样本类型为尿液(43.3%)。大肠埃希菌对阿米卡星、呋喃妥因、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南的敏感性较高,对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率较高。1038(56.5%)株为产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性,有57株(3.1%)为耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)。基因序列分析发现,耐药基因存在碱基序列的缺失和/或增加,可能对菌株的抗菌药物敏感性产生影响。结论大肠埃希菌广泛分布于医院各科室,其对青霉素和β-内酰胺类抗菌药物呈现出一定的耐药性。

台州地区耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌的基因型和药敏表型分析

目的探讨台州地区流行的耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌(CRECC)的碳青霉烯酶耐药基因及其体外药敏分布,为临床有效抗感染治疗提供依据。方法回顾性分析2015年1月至2022年11月送检于台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院、路桥医院的47株CRECC,采用NG-Test Carba 5测定碳青霉烯酶酶型,Carba-R Xpert检测碳青霉烯酶耐药基因,并检测常见药物体外药敏分布。结果47株CRECC共检出27株产碳青霉烯酶,其中24株产新德里金属β内酰胺酶(NDM)型,1株同时产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)和NDM型,2株产亚胺培南酶(IMP)型;另有1株CRECC基因型为NDM型而未检出NDM酶型。CRECC对多黏菌素B敏感性最高(95.7%),其次为替加环素(93.6%)、磷霉素(61.7%)和头孢他啶/阿维巴坦(40.4%)。产碳青霉烯酶的CRECC对多黏菌素B、磷霉素和氨曲南敏感性高于非产酶株。结论台州地区CRECC菌株以NDM型为主,对多黏菌素B、替加环素和磷霉素敏感性较高。NG-Test Carba 5不能覆盖部分不产碳青霉烯酶或碳青霉烯酶发生突变的菌株。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中OXA-48家族碳青霉烯酶分子流行病学研究进展

1引言碳青霉烯类抗生素对超广谱β内酰胺酶(ESBL)和头孢菌素酶具有高度的稳定性,但可被碳青霉烯酶水解、灭活,随着临床治疗药物的广泛应用,产生了耐碳青霉烯类的菌株,这给临床抗感染治疗带来了严峻的挑战[1]。近年来,耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的比率增加,特别是耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)比率增加。

重症监护病房碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌5种耐药基因检测及同源性研究

目的探讨重症监护病房碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)碳青霉烯酶的基因型及同源性,为临床诊断和治疗、防治提供理论基础。方法收集武汉市第六医院2022年1月至12月重症监护病房支气管-肺泡灌洗液标本中分离的非重复CRAB 40株,利用VITEK 2 Compact系统,配合N533药物敏感性试验卡进行药敏试验,PCR检测5种常见碳青霉烯酶基因(bla OXA-23-like、bla OXA-24-like、bla OXA-48-like、bla OXA-51-like、bla OXA-58-like),多位点序列分型对菌株同源性进行分析。结果40株CRAB对替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、亚胺培南、美罗培南等的耐药率为100%,而对黏菌素和替加环素的耐药率分别为5%和2.5%。40株CRAB菌株全部携带bla OXA-23-like和bla OXA-51-like基因,均未检出bla OXA-24-like、bla OXA-48-like和bla OXA-58-like基因。多位点序列分型得到7种序列类型(ST)型,分别为ST450型18株(45%)、ST208型6株(15%)、ST195型6株(15%)、ST369型4株(10%)、ST381型、ST191型和ST457型各2株(各占5%)。结论从武汉市第六医院重症监护病房分离出来的CRAB对临床常用抗菌药物具有严重的抗药性,携带bla OXA-23-like和bla OXA-51-like基因为主要耐药机制。流行的CRAB菌株以ST450型和ST208型为主,菌株之间存在同源相关性,临床医生应规范使用抗菌药物,并强化对细菌的耐药性监测及医院感染防控,以遏制耐药菌的进一步传播。

多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析

探究多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析。方法 在2021年1月至2023年11月期间,本研究对黄河中心医院采集的78株肺炎克雷伯菌(一种多重耐药菌)进行深入研究。为了探究这些菌株中是否存在碳青霉烯酶基因,进行碳青霉烯酶表型试验。随后,为了进一步验证这些基因的存在,利用聚合酶链反应对它们进行检测,并对扩增产物进行DNA测序,确保能够准确地确定它们的基因型。经分析发现这78株肺炎克雷伯菌中,有48株被明确鉴定为超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性菌,而另外30株则为ESBL阴性菌。这一研究结果对肺炎克雷伯菌的耐药机制提供了更为精确的认识,对于指导临床用药和防控耐药菌的传播具有重要意义。结果 经过严格的检测,发现所检测的菌株中,产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的阳性率高达61.54%。药敏分析结果显示,产ESBL菌株对第一,二代头孢菌素及青霉素类抗菌药物具有较高的耐药性。特别是针对单环类氨曲南,耐药率达到惊人的100.00%。值得注意的是,除了亚胺培南、厄他培南、美罗培南及左氧氟沙星外,产ESBL菌株相较于非产ESBL菌株具有更高的耐药性。在78株肺炎克雷伯菌中,Hodg试验阳性菌共有10株,占比12.82%;阴性菌68株,占比87.18%。在10株Hodg试验阳性菌中,仅有1株金属酶试验呈阳性。通过PCR扩增技术,成功确认10株阳性菌中的4株,其中3株为KPC型,阳性率为3.85%,另1株为IMP型,阳性率为1.28%。进一步的PCR产物测序分析显示,3株产KPC型菌株均携带KPC-2基因亚型,而产IMP型菌株携带的基因亚型为MP4。这些数据为研究和应对肺炎克雷伯菌的抗药性提供宝贵的线索和依据。结论 碳青霉烯酶在克雷伯菌中的检出率较高,尤其以KPC-2为最高,因此,在临床用药时应给予足够的关注,合理应用碳青霉烯,尽量减少耐药株,提高治疗效果,具有一定的意义。

鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性与OXA-碳青霉烯酶基因型研究

目的研究我院鲍曼不动杆菌耐药性与OXA-碳青霉烯酶基因之间的关系。方法2005年1月至2006年6月我院临床分离出的共120株鲍曼不动杆菌采用琼脂对倍稀释法进行常用抗菌药物的敏感性研究;根据耐药表型对耐亚胺培南/西司他丁(IMP)菌株进行碳青霉烯酶基因blaOXA-23、blaOXA-24的PCR检测及基因序列分析。结果120株临床分离鲍曼不动杆菌对11种抗菌药物的耐药率均超过50%,对IMP的耐药率低于50%(44.4%)。多重耐药常见,对3种以上抗菌药物耐药者达91.67%。对IMP耐药的50株鲍曼不动杆菌中,PCR检测13株阳性,序列分析证实均为blaOXA-23;未发现blaOXA-24。结论我院鲍曼不动杆菌多重耐药常见,blaOXA-23是主要的OXA-碳青霉烯酶基因型,可能是医院感染的主要基因型。

美国2010-2015年产OXA-48样碳青霉烯酶的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）中，携带编码碳青霉烯酶质粒的CRE备受关注，因为这些菌株可能在全球快速播散。肠杆菌科细菌中新出现的耐药菌，例如最近中国检测到质粒介导的对多黏菌素耐药、美国发现1株产KPC酶的肺炎克雷伯菌对新抗菌药物头孢他啶-阿维巴坦耐药，显示如何延缓CRE的播散迫在眉睫。

鲍曼不动杆菌OXA-23型碳青霉烯酶基因的研究

目的分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其产OXA-23型碳青霉烯酶基因的核苷酸序列。方法用自动微生物分析仪测定常用抗菌药的M IC50;对OXA-23型碳青霉烯酶基因进行PCR扩增,产物纯化测序。结果15株产ESBL s鲍曼不动杆菌中有12株携带OXA-23型碳青霉烯酶;PCR产物纯化后测序表明与鲍曼不动杆菌(AY 795964.1)blaOXA-23基因序列100%同源。结论携带OXA-23型碳青霉烯酶基因的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药的耐药率高,其编码基因为blaOXA-23。

产OXA-23型碳青霉烯水解酶鲍曼不动杆菌基因研究

目的 了解临床分离 12株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的耐药情况、耐药株来源以及产碳青霉烯酶的类型。方法 收集本院对碳青霉烯类药中介或耐药的鲍曼不动杆菌 12株 ,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC) ,脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分析其同源性 ,并用聚合酶链反应 (PCR)检测分析其耐药基因。结果 12株细菌均为多重耐药株 ,有 9株对亚胺培南耐药 ,6株对美罗培南耐药。对青霉素类、头孢菌素类、复方磺胺甲唑均耐药 ,对氟喹诺酮类和酶抑制剂复合物耐药率最低。 12株PFGE图谱分为A、B(B1、B2 ) 2型 ,以A型为主要流行株 (9株 ) ,主要集中在重症监护病房 (ICU)。PCR检出 12株菌株均携带OXA 2 3基因 ,未能检出OXA 2 4基因。结论 本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行主要为医院感染所致 ,该流行株呈多重耐药 ,12株菌株均产OXA 2 3型碳青霉烯酶。

重症监护室产OXA-23碳青霉烯类酶的鲍曼不动杆菌的分子流行病学研究

目的:研究重症监护病房中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征,为临床预防和控制医院感染暴发提供分子流行病学依据。方法:本研究收集了重症监护病房自2006年10月～2010年1月,从患者分离的40株耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌,琼脂稀释法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度,设计通用引物多重PCR扩增D类碳青霉烯酶基因blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58并测序。EDTA纸片法检测金属酶表型,PCR检测基因型blaIMP、blaVIM、blaSIM,脉冲凝胶电泳分析其同源性。结果:所有耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌对阿米卡星、庆大霉素和左氧氟沙星等保持有一定敏感性,但对其余抗菌药物耐药率均为100%。所有耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,在blaOXA-23上游连接有ISAba1启动元件,未检测到blaOXA-24、blaOXA-58碳青霉烯酶基因;金属酶表型及基因型均为阴性。PFGE分为4种克隆型,以A、D型为主。所有耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌感染患者中,34例(85.0%)为呼吸道感染,5例(12.5%)为伤口感染,1例(2.5%)为血流感染。经临床治疗后,21例(52.5%)存活,12例(30.0%)死亡,7例未出院。结论:本研究重症监护病房流行的40株耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,以A型和D型克隆为主要流行株,随着抗菌药物选择性压力的作用,出现了全耐药菌株。

一株同时产OXA-23型碳青霉烯水解酶和PER-1型超广谱β-内酰胺酶的鲍曼不动杆菌

目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌对 β 内酰胺耐药的原因及其耐药基因的转移方式。 方法 用等电聚焦电泳试验和三维试验分析多重耐药鲍曼不动杆菌临床菌株所产 β 内酰胺酶 ,并进行初步分类 ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增和产物测序方法确认 β 内酰胺酶基因 ,用PCR扩增整合子全可变区和质粒接合实验来判定其耐药基因的转移方式。结果 该临床菌株产超广谱 β 内酰胺酶 ,经分子生物学方法证实有blaPER 1基因 ,同时还有blaOXA 2 3 基因和aacA4基因。结论 发现一株产OXA 2 3型碳青霉烯酶和可转移的PER 1型超广谱 β 内酰胺酶的鲍曼不动杆菌 ,blaPER

鲍曼不动杆菌OXA-23型碳青霉烯酶相关耐药基因分析

目的:分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其产碳青霉烯酶的类型。方法:收集南京医科大学第一附属医院对碳青霉烯类药物中介或耐药的鲍曼不动杆菌22株及敏感菌3株,用琼脂纸片扩散法(KB法)及肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)检测分析其耐药基因。结果:22株细菌均为多重耐药株,PCR检出22株耐药菌株中18株携带OXA-23基因,未能检出OXA-24基因,3株敏感株均未检出OXA-23及OXA-24基因,PCR产物纯化后测序表明与鲍曼不动杆菌(AY795964.1)blaOXA-23基因序列100%同源。结论:携带OXA-23型碳青霉烯酶基因的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药的耐药率高,其编码基因为blaOXA-23。

OXA-50型碳青霉烯酶基因在铜绿假单胞菌中分布的初步研究

目的研究铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。方法收集非重复34株铜绿假单胞菌临床株,PCR扩增blaOXA-50基因、测序、在GenBank上比对、提取质粒DNA、对该基因进行PCR扩增。结果PCR检测出34株铜绿假单胞菌中有15株含OXA-50型基因,其中30株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中有12株阳性,4株敏感菌中亦有3株阳性;随机选取1株阳性菌PCR产物送测序,测序结果在GenBank上进行blast比对,显示有两个突变点;blaOXA-50基因扩增阳性的15株铜绿假单胞菌,提取质粒DNA扩增该基因,结果为阴性。结论本次实验检测了34株铜绿假单胞菌临床株,OXA-50型基因的检出率为44.10%,其中1株发现有两个位点突变;检测到的blaOXA-50编码基因位于染色体上。

免疫层析技术在肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶快速检测中的应用

目的比较两种免疫层析技术在快速检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)产碳青霉烯酶中的应用价值。方法收集390株临床分离的肠杆菌目细菌,以聚合酶链反应(PCR)方法作为金标准,采用两种免疫层析法同步进行CRE菌株的碳青霉烯酶基因型检测。结果采用碳青霉烯酶的表型检测390株临床分离肠杆菌目细菌,213株为CRE菌株,177株为碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌(CSE)菌株。经PCR基因型检测,213株CRE菌株中,207株产碳青霉烯酶,6株CRE菌株碳青霉烯类耐药机制不明确;207株产碳青霉烯酶菌株中,119株产KPC酶、71株产NDM酶、9株产IMP酶、7株产OXA-48-like酶和1株复合酶(KPC酶+NDM酶)。同步采用两种免疫层析法(丹娜DMK和NG-Test®CARBA5)进行检测,检测与PCR结果符合率均为100%。两种免疫层析法检测5种碳青霉烯酶的灵敏度均为100%(95%CI:97.7%~100%),特异度均为100%(95%CI:97.4%~100%)。结论免疫层析法操作简便、快速,可应用于检测临床分离的碳青霉烯类耐药菌株产碳青霉烯酶的分型。

黄芩消除产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药质粒的研究

目的研究中药黄芩对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae,CRKP)的抑菌及质粒消除作用。方法用肉汤稀释法测得黄芩、亚胺培南对CRKP的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);用质粒消除试验测定黄芩对CRKP的质粒消除率;用质谱检测系统对质粒消除菌株的菌种进行鉴定,用K-B纸片琼脂扩散法(Kirby-Bauerdiscagar diffusion method,K-B法)确认消除子对亚胺培南、美罗培南的敏感性,用碳青霉烯灭活试验/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(mCIM/eCIM)确认消除子是否产碳青霉烯酶,用聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测消除子是否携带blaKPC基因。结果黄芩对CRKP的MIC值为6.25mg/mL,在24、48、72h的质粒消除率分别为0%、0.3%、1%;消除子经全自动微生物质谱检测系统鉴定为肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN),对亚胺培南、美罗培南敏感,mCIM/eCIM实验阴性,PCR未检测到blaKPC基因。结论黄芩对CRKP有一定的抑菌作用及质粒消除作用。

158例碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌的临床特点、酶型和耐药分析

目的探讨碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床特点、产碳青霉烯酶型和耐药情况。方法回顾性选取台州市立医院2016年1月至2023年6月临床标本中分离出155例患者的158株CRE菌株,对其标本来源、科室分布、耐药情况进行分析。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验,对158株CRE菌株进行酶型分析。结果158例CRE菌株主要来源于痰液,占51.8%。主要分布在ICU(46.2%)、神经外科(12.0%)及泌尿外科(8.2%)。菌株中排名前3位分别为肺炎克雷伯菌(65.8%)、阴沟肠杆菌(12.0%)、产酸克雷伯菌(5.1%)。药敏试验显示,对替加环素(4.4%)和多黏菌素(9.4%)耐药率低,其次为头孢他啶/阿维巴坦(22.8%)。158株CRE菌株中产A类丝氨酸碳青霉烯酶110株(69.6%),产B类金属酶33株(20.9%),同时产A类丝氨酸碳青霉烯酶和B类金属酶7株(4.4%),其他酶型8株(5.1%)。结论CRE耐药性强,对多黏菌素和替加环素的敏感性高,以产A类丝氨酸碳青霉烯酶为主。头孢他啶/阿维巴坦对产A类丝氨酸碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌有较好抗菌活性,不良反应少,效果好,敏感性较高,尤其肺炎克雷伯菌感染时推荐使用。

2021-2023年某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性和产酶表型分析

目的:分析某三甲医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem-Resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的临床分布、耐药特点和碳青霉烯酶表型,为制定有效的CRKP控制策略提供参考。方法:回顾性分析2021—2023年某三甲医院住院患者标本中分离的非重复CRKP菌株的分布、常用抗菌药物的耐药性变迁和产酶表型。结果:2021—2023年共检出183株CRKP,主要来源于痰液(65.0%)、尿液(11.5%)和血液(10.4%)。科室分布以ICU(33.3%)为主,其次是呼吸科(24.0%)和神经外科(15.3%)。其中,神经外科构成比呈逐年下降趋势(P<0.05),而康复科构成比则呈逐年上升趋势(P<0.05)。药敏检测结果显示CRKP对β-内酰胺类、氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物高度耐药,对替加环素、多黏菌素B和头孢他啶/阿维巴坦较敏感;对左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均呈上升趋势(P<0.05)。大多数CRKP产生碳青霉烯酶,以丝氨酸酶为主,其中产D类丝氨酸酶的(OXA-48)菌株呈逐年下降趋势(P<0.05)。结论:该院临床分离的CRKP菌株主要分布在ICU病房,以肺部感染最为常见。这些菌株对多数常用抗菌药物表现出较高的耐药性,主要与产丝氨酸酶有关。医院需加强重点科室的监控,优化抗菌药物的使用策略,实施精准的防控措施,以有效遏制CRKP的传播。

外科ICU与内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌耐药性、碳青霉烯酶基因检测及流行病学研究

目的分析外科ICU和内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性、常见的碳青霉烯酶基因及菌株之间的亲缘性关系。方法收集2019年1月至2020年12月从某三甲医院外科ICU和内科ICU分离鉴定的CRKP非重复菌株,采用自动仪器法对菌株进行药物敏感性试验;采用mCIM联合eCIM试验进行碳青霉烯酶表型检测,并通过PCR技术联合DNA测序检测碳青霉烯酶基因;利用多位点序列分型(MLST)方法对碳青霉烯酶阳性菌株进行同源性分析。结果共收集15株CRKP菌株,其中外科ICU 8株,内科ICU 7株。CRKP菌株对临床多数抗菌药物表现高耐药性,仅对替加环素表现较高敏感性。mCIM联合eCIM试验并经PCR验证,共有14株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中7株单纯携带KPC⁃2基因,主要来源于内科ICU;5株单纯携带NDM⁃5基因,来源于外科ICU;1株携带KPC⁃2基因合并少见金属酶基因来源于内科ICU;1株携带NDM⁃1基因合并OXA⁃181基因来源于外科ICU。MLST结果显示,医院ICU分离的CRKP菌株为ST11、ST15、ST163个序列型别。内科ICU优势序列为ST11(6/6),全部携带KPC⁃2基因;外科ICU优势序列为ST15(5/8),主要携带NDM⁃5基因。结论医院外科ICU和内科ICU分离的CRKP菌株耐药性高,其携带的耐药基因和优势流行菌株存在差异。应加强多重耐药菌的监测及流行病学研究,及时采取有效治疗方案和防控策略,防止耐药菌株产生和流行播散。