磁分离酶联免疫测试分析仪的研制

给出了磁分离酶联免疫测试分析仪测试中成色物的吸光度与人体被测抗原的浓度之间的函数关系 .通过试剂测试反应产物酚酞的吸光度与光的波长之间的函数关系 ,给出了磁分离酶联免疫测试分析仪的测试原理 .讨论了根据非线性拟合所得到的参数 ,由测量得到的实际标本吸光度反算实际标本浓度的方法 .给出了磁分离酶联免疫测试分析仪硬件电路的工作原理 .

磁分离酶联免疫法测定多囊卵巢综合征患者血清性激素的结果分析

目的 :研究磁分离酶联免疫测定 ( MAIA)技术在临床诊断多囊卵巢综合征 ( PCOS)中的应用价值 ,建立我科生殖内分泌的临床正常参考值范围。方法 :采用 MAIA技术检测 72例 PCOS患者及 10 0例对照的血清性激素水平 ,并对其结果进行分析。结果 :早卵泡期性激素 6项的 95 %正常参考值范围 :促卵泡生成素 ( FSH) :3 .3 9～ 11.3 5 IU/L ,促黄体生成素 ( LH) :1.62 IU/L～ 5 .18IU/L 泌乳素 ( PRL) :3 .62 μg/L～ 2 3 .72 μg/L,雌二醇 ( E2 ) :10 .61ng/L～ 3 4.5 3 ng/L ,孕激素 ( P) :0 .3μg/L～ 2 .82μg/L ,睾酮 ( T) :0 .0 2μg/L～ 0 .5 2μg/L ,PCOS患者与对照组比较 ,血清 LH、T水平明显增高。结论 :用 MAIA法检测血清性激素水平 ,对 PCOS的诊断有较高的可靠性。

MAGIMUZYME型磁分离酶联免疫分析系统

介绍了磁分离酶联免疫分析系统的测量原理 ,给出了仪器的测量框图和硬件软件框。本系统具有测量项目多、分析速度快、准确度高、操作简便等特点。临床应用表明 。

磁分离酶联免疫分析与ELISA法在梅毒抗体筛检中的应用

目的比较磁分离酶联免疫分析法(MAIA)与ELISA法在无偿献血者梅毒抗体筛检中的应用价值。方法以卫生部临床检验中心梅毒抗体临床科研血清盘标本40份及随机抽取西安市无偿献血者梅毒抗体阴性血清100份为评价标本。分别采用MAIA及ELISA法对评价标本作盲法筛检,以临检中心梅毒抗体已知阳性和阴性作为金标准。分析真实性与可靠性,并评价2种试剂的Cut-off值的合理性。结果MAIA及ELISA法的灵敏度分别为92.3%,100.0%,特异度分别为99.1%,100.0%,约登指数分别为0.91和1.00,重复试验符合率均为100.0%。结论提高MAIA法的灵敏度与特异度,将具有更大的临床应用价值。

磁微粒分离酶联免疫法在日本血吸虫抗体检测中的应用

目的探讨磁微粒分离酶联免疫法(MPAIA)用于检测日本血吸虫病血清抗体的效果。方法用MPAIA测定日本血吸虫病血清中特异性抗体。结果用MPAIA检测384例非血吸虫病流行区阴性血清,均为阴性;检测61例急性血吸虫病人血清、788例慢性血吸虫病人血清、32例晚期血吸虫病人血清其阳性率分别为100%、94.2%、90.6%;检测14例并殖吸虫病人、13例囊虫病人、9例旋毛虫病人血清,均未发现交叉反应。结论MPAIA检测日本血吸虫血清抗体有较高的灵敏度和特异度,可用于日本血吸虫病的临床诊断和现场疫情监测,该方法具有广阔应用前景。

应用磁分离酶联免疫技术检测抗日本血吸虫虫卵抗体

目的建立检测日本血吸虫病患者血清中特异性虫卵抗体的磁微粒分离酶联免疫法(MPAIA)。方法采用异硫氰酸荧光素(FITC)标记日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Sj-SEA)为检测抗原,标记羊抗FITC抗体的磁微粒为固相载体,碱性磷酸酶(ALP)标记羊抗人免疫球蛋白G(IgG)作为酶标二抗,以单磷酸酚酞溶液为底物,检测日本血吸虫病患者血清中虫卵特异性抗体。结果用磁微粒分离酶联免疫法检测日本血吸虫虫卵抗体,阳性检出率为96.7%(116/120),与旋毛虫、并殖吸虫、嚢尾蚴等其他寄生蠕虫抗体无交叉反应现象,检测试剂4℃可保存12个月。灵敏度参考品的灵敏度为1∶1600,精密度参考品的精密度(CV)<10%。结论磁微粒分离酶联免疫法具有灵敏度高、特异性强、技术先进,试剂保存时间长等特点。

全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪使用中应注意的几点要素

我院检验科于2008年5月购置一台产自日本东曹株式会社的全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪AIA360,用于肿瘤标志物、甲状腺激素、性腺激素、糖尿病、心脏关联标志物、传染病等系列近30个项目的检测。经过3年多来的临床实验使用，收到了良好的效果，为了尽量减少实验操作中的各种误差，提高检测效率和结果的准确性。通过几年来的实践经验，总结出使用全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪AIA360应注意的几点要素，供同道们参考。

磁分离酶联免疫法检测IL-4方法的建立

建立磁分离酶联免疫法定量检测人白细胞介素 4 (IL - 4 )的方法。用异硫氰酸荧光素 (FITC)和碱性磷酸酶(AP)分别标记识别不同表位的两种抗IL - 4单克隆抗体 (mAb) ,用抗FITC多抗或mAb包被免疫磁珠。结果显示 :检测标准品浓度在 0 - 3ng/mL范围内线性关系良好 ,敏感性达 10pg/mL ,平均回收率为 10 1.7% ,批内批间CV均为 3.6 % ,与ELISA比较相关系数为 0 .912 4。此法所需样本量少 ,方法稳定 ,敏感性高和特异性强 ,又无放射性污染 ,在临床检验和基础研究中有较大应用价值。

磁分离酶联免疫法检测AFP

目的建立检测甲胎蛋白(AFP)的磁分离酶联免疫法(Magnetic affinity immunoassay,MAIA)。方法采用双抗体夹心法,用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)分别标记识别不同表位的两种抗AFP单克隆抗体(mAb)4A3和5H7,以偶联羊抗FITC mAb包被的免疫磁珠作为固相载体,单磷酸酚酞(phenolphthalein monophosphate,PMP)做显色底物,建立检测AFP的MAIA法。结果成功实现了用MAIA法对AFP的定量检测,其检测灵敏度0.2 IU/ml,线性范围0.2-510 IU/ml,批内CV5.5%-9.3%,批间CV1.6%-9.7%。添加回收率101.4%-104.9%,稀释回收率78.3%-123%。与雅培AxSYM及i2 000的检测结果对比,相关系数分别为0.984和0.985。结论MAIA法的性能优于现有的ELISA和RIA试剂盒,接近进口同类试剂的水平,有助于为市场提供一种高质量而价廉的AFP测定试剂盒。

磁分离酶联免疫测定男性生殖激素方法性能评价

目的 :对磁分离酶联免疫测定 (MAIA)法测定男性生殖激素的方法学性能作临床和实验室评价。方法 :将本法与放射免疫测定 (RIA)法进行对比研究。结果 :MAIA法测定促卵泡生成激素 (FSH)、促黄体生成素 (LH)、睾酮 (T)和催乳素 (PRL)的线性分别为 0～ 15 0IU L、0～ 2 0 0IU L、0 .5～ 5 5ng L、0～ 2 5 0ng L ;最小检测量分别为 0 .3mIU ml、0 .2 5mIU ml、4 μIU ml、4 μIU ml;批内CV <4 % ,批间CV <8% ,平均回收率偏差 <5 % ,互感率 <3% ;与RIA法比较 ,两法相关系数分别为 0 .982 6、0 .85 5 0、0 .85 12、0 .9831。临床质控观察 6 0d ,质控稳定 ;成年健康男性 (n =95 )血清FSH、LH、T、PRL的参考范围分别为 :0 .2 5～ 10 .18IU L、0 .33～ 8.95IU L、0 .5 4～ 11.11ng L和 8.77～ 33.4 3ng L。结论 :用MAIA法测定男性生殖激素 ,方法灵敏 ,结果可靠 ,符合临床要求。

磁分离酶联免疫法检测SCC-Ag的方法学研究

目的 ：建立检测鳞状上皮细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen,SCC-Ag）的磁分离酶联免疫法（magnetic affinity immunoassay,MAIA）。方法：采用双抗体夹心法,用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AP）分别标记识别不同表位的两种抗SCC-Ag单克隆抗体（mAb）T17和H390,以耦联羊抗FITCmAb包被的免疫磁珠作为固相载体,APS-5作为显色底物,建立检测SCC-Ag的磁分离酶联免疫法。结果：成功实现了用磁分离酶联免疫法对SCC-Ag的定量检测,其检测灵敏度为0.22μg/mL,线性范围0-50μg/mL,批内CV 7%-8%,批间CV 6%-9%。添加回收率为97%。与雅培AxSYM微粒子化学发光检测结果对比,相关系数为0.973。结论：磁分离酶联免疫法的检测结果接近进口同类试剂的检测结果,为开发一种高质量的SSC-Ag测定试剂盒提供实验数据。

半自动生化仪在磁分离均相酶联免疫分析技术中的应用

本文对近年来兴起的磁分离均相酶联免疫分析技术(MAIA)中使用的Serono测定仪与半自动生化仪在测定性能上做了系统比较，尝试了用半自动生化仪开展MAIA技术的可能性。结果显示：如果对半自动生化分析仪比色方式做合理调整，完全可以替代Seronp专用测定仪开展MAIA技术，并且，在准确性上，很可能优于Serono仪，这对无Serono仪而需开展此项技术的实验室具有指导意义。

氯霉素磁分离酶联免疫(MEIA)检测方法的建立

目的：采用磁分离酶联免疫分析法（MEIA）建立定量检测氯霉素（CAP）的一种高灵敏度方法。方法：采用免疫竞争法,用异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗CAP抗体,碱性磷酸酶（AP）标记CAP,以羊抗FITC抗体包被的免疫磁珠作为固相分离载体,单磷酸酚酞做显色底物,建立检测CAP的MEIA法。结果：成功建立了检测CAP的MEIA法,检测时间为40 min,检测灵敏度为0.03μg/L,线性范围为0.1~8.1μg/L,批内变异系数（CV）3.9%~5.3%,批间CV 4.8%~8.1%,回收率为97%~101.5%,与国标方法液相色谱-串联质谱法的检测结果对比,相关系数r=0.9817。结论：检测CAP的MEIA法的灵敏度及准确率高、检测时间短,为食品中氯霉素残留的监测提供了一种新的免疫分析方法。

磁分离酶联免疫技术检测血清胰岛素、C肽的临床应用研究

目的 引进磁分离酶联免疫测定(MAIA)新技术,应用于糖尿病的临床诊断和治疗监控。方法 对年龄在18～70y之间的Ⅱ型糖尿病患者312例和非糖尿病患者2 78例用MAIA测定其血清基础胰岛素(Ins)和C 肽(C P)水平。结果 MA IA批内变异系数CV为3 .3% ;批间变异系数CV为5 .8% ;MAIA结果与放射免疫(RIA)之间呈显著直线相关(P <0 .0 1)。健康人空腹INS和C P分别为4 .0 3～2 3 .4 6mIU/L和0 . 5 6～3 .73ng/ml。结论 MAIA方法稳定可靠,灵敏度高,特异性强,重复性好,无放射污染,优于RIA法,在糖尿病领域临床检测中有较大的应用价值。