磁性阿霉素白蛋白纳米粒的研制

目的 :制作具有稳定磁性、能够携带化疗药物的白蛋白纳米粒 ,并对白蛋白纳米粒的磁性、药物含量进行检测。方法 :将市售用Fe3 O4 粉末 ,经化学方法处理 ,制成纳米大小的Fe3 O4 泥糊 ,将Fe3 O4 泥糊、纯盐酸阿霉素、人体血清白蛋白按一定比例混合 ,通过在棉仔油中超声乳化、加热变性、乙醚洗涤等工艺制作出磁性阿霉素白蛋白纳米粒 ,用乙醇提取法提取磁性纳米粒中的阿霉素 ,并用荧光光度计测定含量。将纳米粒溶于生理盐水中 ,在光学显微镜下观察在磁场作用下磁性纳米粒的运动情况。通过检测溶液中的游离药物 ,观察在不同的加热温度下 ,磁性纳米粒的稳定性 ,并用电子显微镜观察纳米粒的内部结构。结果 :磁性白蛋白纳米粒阿霉素含量为 5 7.5 μg/ g ,阿霉素包含率为 98.3% ,磁性白蛋白纳米粒溶液在光学显微镜下观察 ,在磁场的作用下 ,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集 ,当磁铁与纳米粒的距离加大时 ,纳米粒运动速度减慢 ,并沿磁力线的方向形成串珠状聚集。电子显微镜下观察 ,Fe3 O4 颗粒均匀分布在白蛋白纳米粒中。结论 :磁性白蛋白纳米粒具有磁性稳定、靶向性强、药物包含率高、释药速率可控制的特点 ,为靶向药物治疗提供了可靠的载药工具。

交变磁场介导下半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的影响研究

目的探讨半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的磁介导热疗作用。方法将成模后的荷瘤白兔随机分成6组:A组,对照组,即生理盐水组;B组,游离阿霉素组;C组,半乳糖磁性阿霉素纳米粒组;D组,Fe3O4纳米粒组;E组,阿霉素磁性纳米粒组;F组,半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组化白蛋白。各组经肝动脉插管灌注药物(按2mg/kg阿霉素计算),除C组外,其它各组置交变磁场中作用30min,期间监测癌中心区、癌边缘区、正常肝组织和直肠的温度变化;观察治疗后14d的肝癌体积、肝癌的生长率、肝癌及正常肝组织的病理改变。结果D、E、F组癌中心区和边缘区温度显著高于正常肝组织和直肠(P<0.001);A、B、C组各部位的温度无明显升高。治疗后14d,F组肿瘤体积明显缩小,肿瘤生长率为-15%;肝癌细胞可见大面积坏死,平均在70%以上,癌灶及癌边缘可见栓塞的铁磁微粒,而右肝未见铁磁微粒的沉积;其它各组体积增大3.5～13倍,肿瘤生长率显著增加(127%～568%),肝癌细胞中至轻度坏死(0%～70%)。结论交变磁场下,A、B、C组癌组织升温达到42℃以上;半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌组织有独特的靶向作用,表现出明显的热化疗协同增效的治疗效果。

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在家兔体内的药物动力学研究(英文)

目的对家兔一次性颈静脉给药,检测自制药物与普通阿霉素在药动力学方面有无差异及了解新药的药动学特点。方法家兔12只,随机分为两组,每组6只,均予颈静脉置管、注射、抽血,一组按3.0mg/kg给予阿霉素;一组按63.2mg/kg给予半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒,每次抽血1ml,分离血清低温保存,以氯仿-甲醇液萃取阿霉素,在高效液相色谱仪下检测色谱峰高。根据阿霉素标准曲线求血清中阿霉素浓度。以“3P87”进行药动学分析。结果阿霉素与半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在家兔体内的药动学规律符合三室开放模型;与阿霉素相比,实验组药物的消除相半衰期延长了1.9～3.2倍,清除率是阿霉素的0.5369倍;血药浓度-时间曲线下面积(AUC)是阿霉素的1.3697倍。结论阿霉素经过与白蛋白、磁性微粒结合,并以半乳糖修饰,改变了原药的体内分布特性,延长了药物半衰期,增加了靶器官肝脏的药物浓度。

半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备及性质评价

目的制备具有半乳糖基和稳定磁性的半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒,并对半乳糖白蛋白磁性纳米粒的糖化比率、磁性及药物含量进行检测。方法将乳糖和白蛋白用还原胺法合成半乳糖基人血白蛋白(galactosylated human serum albumin,Gal-HSA);采用滴定水解法制备直径在70nm左右Fe3O4磁性纳米粒。再将半乳糖白蛋白、Fe3O4磁性纳米粒及纯盐酸阿霉素按一定的比率混合,通过在精制棉子油中超声乳化、加热固化变性、乙醚洗涤等工艺制备出半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒;用苯酚-硫酸比色法测定半乳糖白蛋白的糖化比率;用乙醇提取法提取半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中的阿霉素,并用液相色谱仪测定其含量。将纳米粒溶于生理盐水中,并在光学显微镜下观察在磁场的作用下,半乳糖基磁性纳米粒的运动情况,用激光粒度分析仪、原子力显微镜和透射电子显微镜观察纳米粒粒径的大小和内部结构。结果半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的糖化比率为32;Fe3O4纳米粒径在(70±30)nm左右,粒径均匀;阿霉素的含量为58.45μg/g,阿霉素的包含率为97.53%;半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向成串珠状聚集。透射电子显微镜下观察Fe3O4颗粒均匀分布在半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中。结论半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒具有较高糖化比率、稳定的磁性、靶向性强、药物包含率高以及释药速率可控制等特点,为靶向药物治疗,提供了可靠的载药工具。

磁性化疗纳米粒治疗大鼠移植性肝癌

目的 :通过对移植性肝癌模型大鼠肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒 ,并在肝肿瘤区加磁场 ,观察磁性阿霉素白蛋白纳米粒对移植性肝癌的治疗效果。方法 :建立大鼠移植性肝癌模型 ,将肿瘤模型大鼠分为 4组。肝动脉注射生理盐水 6只 ;肝动脉注射游离阿霉素 0 .5mg/kg 6只 ;肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒 (相当于 0 .5mg/kg阿霉素 ) 6只 ;肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒 (相当于 0 .5mg/kg阿霉素 ) ,肝肿瘤区加磁场 6只。各组动物肝动脉注药后 ,生存超过 1周者 ,记录生存天数 ,生存期满 6 0d者则处死 ,取肿瘤组织作病理切片观察 ,各组动物进行生存率分析。结果 :生理盐水治疗组 :生存期平均为 2 3.5d ;游离阿霉素治疗组 ,生存期为 2 2 .5d ;纳米粒不加磁场治疗组 ,生存期平均 36 .2d ;纳米粒加磁场治疗组有 3只动物到 6 0d仍存活 ,最短存活期为 48d。对各组动物进行生存率分析 ,并作Logrank检验发现 ,生理盐水治疗组与游离阿霉素治疗组生存期无统计学差异。磁性阿霉素白蛋白纳米粒治疗 ,肿瘤区不加磁场组动物较生理盐水治疗组和游离阿霉素治疗组生存期明显延长 ,但较肿瘤区加磁场组动物生存期明显缩短。治疗 36h后病理切片发现 ,纳米粒不加磁场治疗组动物 ,肿瘤组织除边缘极少许细胞存活外 。

磁性阿霉素白蛋白纳米粒在移植性肝癌模型中的磁靶向性

目的 观察磁性阿霉素白蛋白纳米粒在移植性肝癌模型中的磁靶向性 ,并观察磁性白蛋白纳米粒在各脏器中的分布特征。方法 建立大鼠移植性肝癌模型。大鼠正中开腹 ,胃十二指肠动脉插管固定。实验组 ,肝肿瘤区外加磁场 ,肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒 (相当于阿霉素0 5mg/kg) ,磁场应用 30min ,移去磁场后 ,动物立即处死。对照组肝肿瘤区不加磁场 ,肝动脉注射同样剂量的纳米粒后 30min处死。动物处死后 ,立即取肿瘤组织、非磁区正常肝组织、心、肾、脾、肺、小肠和胃作γ计数 ,肿瘤组织、肝组织送病理切片检查。结果 肝肿瘤区应用磁场 30min后 ,磁区肿瘤组织的放射活性较非磁区肝组织的放射活性明显增加 ,磁区肿瘤组织的放射活性为非磁区正常肝组织的放射活性的 8 7倍。对照组在没有磁场存在的情况下 ,肿瘤组织的放射活性为正常肝脏的 2 8倍。实验组肺的放射活性较对照组明显降低。肾、心、脾、小肠和胃两组之间无明显差异。另外 ,实验组脾、肺和胃与肿瘤组织的放射活性之比较对照组大为降低。注入纳米粒 80 %以上分布于肝脏。结论 在磁场的作用下 ,磁性阿霉素白蛋白纳米粒在大鼠移植性肝肿瘤中的聚集明显增加。即使肝肿瘤区没有外加磁场 ,由于肿瘤组织和正常肝组织血管密度的差异 ,磁性阿霉素白?

核素标记叶酸偶联白蛋白纳米微球对人卵巢癌细胞生长的影响

目的观察核素标记叶酸靶向白蛋白纳米微球对人卵巢癌细胞生长的影响。方法将体外培养的SKOV3人卵巢癌细胞分为八组:阴性对照组(只加RPMI-1640培养液),单纯化疗组(叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,不加磁场),单纯放疗组[188铼(188 Re)标记的叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,不加磁场],单纯热疗组(叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,加磁场),化疗联合放疗组(188 Re标记的叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,不加磁场),化疗联合热疗组(叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,加磁场),放疗联合热疗组(188 Re标记的叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,加磁场)和热疗、化疗、放疗联合治疗组(联合治疗组,188 Re标记的叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,加磁场)。48h后MTT方法测定各组细胞增殖率,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果阴性对照组对卵巢癌细胞增殖的抑制作用弱于其他各组,联合治疗组强于其他各组(P<0.05)。单纯热疗组、化疗联合放疗组、化疗联合热疗组、放疗联合热疗组和联合治疗组中细胞周期G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰;阴性对照组、单纯热疗组、化疗联合放疗组、化疗联合热疗组、放疗联合热疗组和联合治疗组的细胞凋亡率分别为0.08%、7.56%、17.14%、21.64%、33.94%和57.16%。结论磁感应热疗、化疗、核素靶向放疗的联合作用能有效抑制人卵巢癌细胞的生长。