目的:探讨机械牵拉后人肺微血管内皮细胞(human pul monary microvascular endothelial cells,HPMVECs)单层通透性、F-肌动蛋白(F-actin)的变化及它们之间的关系,并探讨Rho激酶抑制剂Y27632对上述变化的影响。方法:体外培养HPMVECs,磁...目的:探讨机械牵拉后人肺微血管内皮细胞(human pul monary microvascular endothelial cells,HPMVECs)单层通透性、F-肌动蛋白(F-actin)的变化及它们之间的关系,并探讨Rho激酶抑制剂Y27632对上述变化的影响。方法:体外培养HPMVECs,磁扭力刺激(magnetic twisting sti mulation,MTS)实施机械牵拉,随机分为3组,对照组(C组):细胞不经MTS,在细胞培养箱中培养1h、2h;机械牵拉组(M组):MTS1h、2h;抑制剂组(Y组):细胞与Rho激酶抑制剂Y27632(10μmol/L)孵育2h后给予MTS1h、2h;用FITC标记的右旋糖苷在transwell模型中的通透率检测HPMVECs单层通透性,用免疫荧光染色检测HPMVECs的F-actin分布。结果:M组的HPMVECs单层通透性较C组显著增加(P<0.05),且MTS2h后HPMVECs单层通透性较MTS1h高(P<0.05);Y组则较M组显著降低(P<0.05)。C组细胞F-actin主要分布在细胞边缘;而MTS引起F-actin聚合形成应力纤维,而以刺激2h明显;而Y组应力纤维形成较M组明显减少。结论:机械牵拉可引起HPMVECs的单层通透性增高,F-actin聚集形成应力纤维,且HPMVECs单层通透性增高的机制可能与F-actin聚集成应力纤维密切相关。Y27632可通过抑制应力纤维形成而减轻机械牵拉对HPMVECs单层通透性的影响。展开更多
文摘目的:探讨机械牵拉后人肺微血管内皮细胞(human pul monary microvascular endothelial cells,HPMVECs)单层通透性、F-肌动蛋白(F-actin)的变化及它们之间的关系,并探讨Rho激酶抑制剂Y27632对上述变化的影响。方法:体外培养HPMVECs,磁扭力刺激(magnetic twisting sti mulation,MTS)实施机械牵拉,随机分为3组,对照组(C组):细胞不经MTS,在细胞培养箱中培养1h、2h;机械牵拉组(M组):MTS1h、2h;抑制剂组(Y组):细胞与Rho激酶抑制剂Y27632(10μmol/L)孵育2h后给予MTS1h、2h;用FITC标记的右旋糖苷在transwell模型中的通透率检测HPMVECs单层通透性,用免疫荧光染色检测HPMVECs的F-actin分布。结果:M组的HPMVECs单层通透性较C组显著增加(P<0.05),且MTS2h后HPMVECs单层通透性较MTS1h高(P<0.05);Y组则较M组显著降低(P<0.05)。C组细胞F-actin主要分布在细胞边缘;而MTS引起F-actin聚合形成应力纤维,而以刺激2h明显;而Y组应力纤维形成较M组明显减少。结论:机械牵拉可引起HPMVECs的单层通透性增高,F-actin聚集形成应力纤维,且HPMVECs单层通透性增高的机制可能与F-actin聚集成应力纤维密切相关。Y27632可通过抑制应力纤维形成而减轻机械牵拉对HPMVECs单层通透性的影响。
