大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽脱盐效果的研究

采用DA201-C型大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽(CNPPs)进行脱盐处理。采用脱盐率,回收率和血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性为指标考察脱盐效果。结果表明:CNPPs的脱盐率达到95.40%,回收率达到85%以上,ACE抑制活性得到提高,半抑制浓度(IC_(50))由0.35mg/mL下降到0.21mg/mL。本研究表明,采用大孔吸附树脂进行CNPPs的脱盐处理是一种简便有效的方法。

大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽的脱盐和色谱分离

利用DA201 C大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽脱盐并进行分离分级.结果表明,大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽的脱盐率在97%以上,酪蛋白非磷肽的回收率约在95%,同时用不同体积分数的乙醇对酪蛋白非磷肽进行阶段洗脱,酪蛋白非磷肽均可以分离出3个组分.

Alcalase水解酪蛋白制备磷酸肽和非磷肽的研究

研究了Alcalase水解酪蛋白制备磷酸肽和非磷肽的作用条件,同时分析了酪蛋白磷酸肽(CPPs)和酪蛋白非磷肽(CNPPs)的相对分子质量分布和氨基酸组成。结果表明,Alcalase水解酪蛋白的最佳条件是:底物浓度5%,加酶量0.03mL/g蛋白质,温度60℃,pH9.0。乙醇浓度和酪蛋白的水解度(DH)对CPPs的得率和N/P(摩尔比)均有影响:当乙醇浓度为70%,DH为18%时,CPPs得率达到最高,为23.94%,N/P(摩尔比)是9.61,CNPPs得率为76.06%。CPPs和CNPPs的相对分子质量都分布在200～5000之间,其中低于700的肽含量最高,分别为61.52%和67.26%。CNPPs中疏水性氨基酸含量远高于CPPs。

大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽吸附性的研究

从12种大孔吸附树脂中筛选出一种对酪蛋白非磷肽(NPP)吸附性能强的树脂DA201-C,利用这种树脂研究了从缓冲液中纯化酪蛋白非磷肽。研究结果表明,NPP溶液的pH、NPP溶液流过吸附柱的速度、洗脱剂乙醇的浓度等因素都对NPP的回收率有影响。采用DA201-C大孔吸附树脂纯化NPP,回收率可达95.51%。

酪蛋白非磷肽抗生物氧化活性的研究

采用D-半乳糖致衰小鼠模型检验了酪蛋白非磷肽(CNPPs)的抗生物氧化能力。结果表明:小鼠给予CNPPs30d后,与模型对照组相比,血清中丙二醛(MDA)的含量显著降低(P<0.01),全血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力显著增加(P<0.01),血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活力显著增加(P<0.01)。CNPPs具有显著的抗氧化效果,可以延缓衰老。

酪蛋白磷肽的制备

报道枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白的最适酶反应系统。当以ＣａＣｌ２－乙醇沉淀法沉淀磷肽时，比较了不同ｐＨ条件对磷肽产品得率、纯度、Ｎ／Ｐ比及含磷量的影响。

酪蛋白非磷肽分子组成及其抑制血管紧张素转换酶活性的研究

测定了酪蛋白非磷肽（CNPP）的分子组成，并对酪蛋白非磷肽抑制血管紧张素转化酶（ACE）的活性进行了研究，研究结果表明：酪蛋白非磷肽的相对分子质量分布在226～8314之间，其中数均相对分子质量253的肽含量最多，约占26.54％，其次是数均相对分子质量603的肽，含量约占25.69％；CNPP具有较强的疏水性，其中碱性氨基酸Lys、His和Arg的含量为11.29％，芳香族氨基酸Tyr和Phe的含量为13.03％；CNPP对ACE活性具有抑制作用，且具有一定的量效关系，IC50是0.63μmol／L。

固定化胰蛋白酶水解酪蛋白及亲和吸附提取磷肽

磷肽与钙离子结合成可溶性的磷肽钙，是最易为人体吸收的磷钙营养素．又是无毒有效的龋齿防治剂．本文用固定化胰蛋白酶在ｐＨ８．０的硼酸缓冲液中，４０℃条件下水解酪蛋白，经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳及葡聚糖Ｇ—１５０凝胶层析分析，其最适水解时间为１０ｈ．用硫氨络铁凝胶珠在ｐＨ４．０醋酸缓冲液含０．５ｍｏｌ／ＬＫ２ＳＯ４条件下亲和吸附磷肽，用ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ缓冲液洗脱，磷肽的吸附量为１．７ｍｇ／ｍＬ湿珠．每克磷肽含磷量为５５．５ｍｇ．每克酪蛋白的含磷量为６．９ｍｇ．磷肽的含磷量是酪蛋白的８倍．

酪蛋白非磷肽中一种ACE活性抑制肽的分离和鉴定

酪蛋白经碱性蛋白酶Alcalase水解后,加入乙醇提取出的酪蛋白非磷肽(CNPPs)对血管紧张素转化酶(ACE)的活性有很强的抑制作用。采用凝胶过滤色谱Sephadex G-15和反相高效液相色谱(RP—HPLC)对CNPPs进行分离纯化,通过高效液相色谱/电喷雾电离质谱联用分析和氨基酸组成分析鉴定出一种抑制ACE活性肽,其氨基酸序列为Ser-Trp,ACE半抑制浓度为92.8μmol/L。

体积排阻色谱分离酪蛋白非磷肽的研究

利用SephadexG 2 5 (2 .0× 2 0 0cm)分离酪蛋白非磷肽(CNPP) ,探讨了不同波长、不同上样浓度以及不同流动相对CNPP分离效果的影响。结果证明波长为 2 2 0nm ,流动相为pH3.6 ,0 .2MHAc NaAc时 2 0ml 30 %CNPP可以被分为五个组分。

酪蛋白非磷肽Na2SeO3的制备、表征及总抗氧化能力的测定

为探究酪蛋白非磷肽Na2SeO3的表面及其总抗氧化能力(TEAC)的特性,以酪蛋白为原料,选用碱性蛋白酶(Alcalase)对其进行水解,分离提取出酪蛋白非磷肽和酪蛋白磷酸肽,然后与Na2SeO3反应。通过氢化物原子荧光光谱法(HG-AFS)对酪蛋白非磷肽和酪蛋白磷酸肽与Na2SeO3的反应产物进行检测,结果表明,酪蛋白非磷肽与Na2SeO3反应产生的酪蛋白非磷肽Na2SeO3是富含硒元素的红色物质。采用透射电镜(TEM)测试酪蛋白非磷肽Na2SeO3的表面结构,得出该物质多为纳米级的颗粒物。同时采用总抗氧化能力测试法(ABTS)测试分析不同反应产物TEAC的变化,结果显示,不同反应物与Na2SeO3结合后其抗氧化能力都有所提升,且酪蛋白非磷肽Na2SeO3总抗氧化能力的提升最为显著。

乳钙和干酪素磷肽的钙强化功能

钙是非常重要的营养素,能够预防骨质疏松症。但是,据有关研究显示,全球各地尤其是亚洲地区的居民,普遍存在缺钙的情况,大大影响了其国民的身体素质。有鉴于此,营养权威专家正积极讨论和复审膳食钙的需求量(RDA),并制定新的推荐钙摄入量(RDI),例如,美国最近就提高了其推荐钙摄入量的新标准,其他国家也将仿效这种做法。 为人体补充钙的有效方法,是在我们日常进食的食品中进行钙强化。提取自牛奶的乳钙,具有优良的感官性质,而且极具营养性,是理想的天然食品级钙源。另一方面,营养科学界普遍认为,钙源的溶解性决定了钙能否良好地被人体吸收。

固定化胰蛋白酶水解酪蛋白及亲合吸附提取磷肽的研究

采用固定化胰蛋白酶水解酪蛋白，在ｐ Ｈ８ ．０ 的硼酸缓冲液中４０° Ｃ 恒温水浴２０ ｈ ，得到含有磷肽的溶液；然后用壳聚糖交联珠在ｐ Ｈ３ ．６ 的 Ｈ Ｃｌ—甘氨酸缓冲液中亲和吸附磷肽，再用ｐ Ｈ８ ．０ 的 Ｔｒｉｓ － Ｈ Ｃｌ 缓冲液洗脱，计算平均磷肽吸附量。结果显示，壳聚糖交联珠亲合吸附法与常规的硫氨络铁琼脂糖珠提取法的磷肽吸附量基本相同，但壳聚糖交联珠亲合吸附法操作简便，特异性高，价格低廉。

卵黄高磷蛋白肽-亚铁螯合物的制备及其稳定性分析

目的优化卵黄高磷蛋白肽螯合亚铁的制备工艺,筛选结合亚铁含量最高的卵黄高磷蛋白肽制备肽-亚铁螯合物,并分析该螯合物的耐温、耐盐、耐酸碱稳定性。方法响应面法优化亚铁螯合物的制备工艺,超滤分离得到不同分子量大小的肽组分,采用邻菲罗啉法测定亚铁结合含量,采用Ferrozine法测定温度、盐浓度、pH对游离铁释放量的影响。结果最优螯合工艺条件为肽-亚铁质量比4:1、温度63℃、pH 4.8、时间43 min,该条件下小于3 kDa卵黄高磷蛋白肽的亚铁结合含量最高,为(96.13±2.86)μg Fe^(2+)∕mg,该螯合物耐温、耐盐、耐酸碱、稳定性较好。结论优化工艺的亚铁螯合率高,既能够节约亚铁离子的用量,还能够提高肽-亚铁的结合含量。小于3 kDa卵黄高磷蛋白肽-亚铁螯合物的亚铁含量高、稳定性好,是一种潜在的铁补充剂。

亚铁结合卵黄高磷蛋白肽的制备及活性分析

亚铁结合多肽有利于提高人体对铁离子的吸收。本研究以卵黄高磷蛋白(phosvitin,PV)为原料,制备具有良好亚铁离子结合能力和抗氧化活性的卵黄高磷蛋白肽(phosvitin peptide,PP)。通过单一酶和复合酶的酶解工艺优化,确定了最佳酶解工艺条件:先碱性蛋白酶酶解(添加量6000 U/g、50℃、pH10、3 h),再胰蛋白酶酶解(添加量4000 U/g、37℃、pH8、2 h)。超滤分离PV水解产物,获得不同相对分子质量范围的组分,测定亚铁结合量、ABTS和FRAP抗氧化活性,结果表明相对分子质量<3000的多肽组分最佳,亚铁结合量为(96.14±2.86)μg/mg、ABTS抗氧化能力为(955.61±79.74)μmol/mg、FRAP抗氧化能力为(62.30±3.94)μmol/mg,是一种潜在的铁补充剂。

酪蛋白非磷酸肽对大豆多肽的修饰及复合物的乳化性表征

通过Plastein反应利用酪蛋白非磷酸肽(casein non-phosphopeptides,CNPPs)对大豆多肽进行修饰,对制备出的CNPPs-大豆多肽复合物进行电泳、乳化性质和微观结构分析。结果表明:反应最佳工艺参数为:反应温度42℃、pH 4.8、时间3 h、凝乳酶添加量5 g/100 mL,该最优条件下产物的产率为(45.26±0.62)%,电泳结果证实CNPPs和大豆多肽发生了组合。对复合物功能性评价发现,CNPPs-大豆多肽复合物乳化性为0.28±0.02,乳化稳定性为(13.44±0.47)min,均高于大豆多肽的乳化性和乳化稳定性。微观结构较未修饰的大豆多肽呈现出更多的、均一的球形乳化微粒,证实通过CNPPs对大豆多肽的修饰可以有效提高蛋白质的乳化性和乳化稳定性。

酪蛋白非磷肽的理化性质及ACE抑制活性

对酪蛋白非磷肽的溶解性、相对黏度、相对分子质量分布和氨基酸组成进行分析,并验证其具有较强的ACE抑制活性。经体外消化实验发现,CNPPs在消化道酶作用后,ACE抑制活性从52.05%提高到57.49%;肽谱分析显示出CNPPs中肽的种类和组成非常复杂。

5-氟尿嘧啶-1-基磷三肽化合物的合成及抗癌活性研究

以 DCC(二环己基碳二酰亚胺 ) /Bt OH(1 -羟基苯并三氮唑 )为偶联剂 ,通过液相偶联法合成了 1 4个新型 5 -氟尿嘧啶 -1 -基磷三肽化合物 ,收率为 5 2 %～ 83 % .所有化合物经 1 H NMR,31 P NMR,IR光谱和元素分析证实 .提出了合成中间体 5 -氟尿嘧啶 -1 -基乙酸的方法 ,其优点是操作简便且产率高 .对部分化合物进行了抗癌活性测试 ,结果表明该类化合物对 HL-60和

离体牙短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的:评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(complex of casein phosphopeptide and amorphous calcium phosphate,CPP-ACP)(商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质片再矿化的功效。方法:将正畸需要拔出的离体前磨牙15颗从冠根向一分为二,共30个实验样本,用自凝材料包埋于塑料圈内,根据扫描电镜样品的要求打磨抛光,抛光后的牙釉质面积为3mm×3mm。用数字随机表的方法随机分成4个实验组和1个对照组,每组6个。对照组是用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2 min后不用护牙素浸泡,实验组均用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2min后分别用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,置于蒸馏水中浸泡。每组浸泡的时间逐步累加,A、B、C、D实验组分别浸泡时间为1、5、10、20h。每组待第2天在同一时间涂搽护牙素及在蒸馏水中浸泡的步骤同第1天,每天更换蒸馏水一次。每组连续作用5次。扫描电镜观察及用能谱检测钙的质量分数,统计分析各组釉柱再矿化与浸泡时间的关系。结果:A、B、C、D实验组釉质表面钙质量分数是(67.38±0.89、67.63±0.56、67.71±0.52、69.11±0.27)和酸蚀组65.74±0.74之间的差异有统计学意义(F=21.568,P=0.000<0.01);用(Student-Newman-Keuls)法做多组间样本均数的两两统计比较分析,A、B、C组间差异均无统计学意义(P>0.05);D实验组与A、B、C组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Tooth Mousse护牙素体外实验在蒸馏水环境中多次短时间每天20h浸泡离体牙釉质在减少脱矿和促进再矿化方面较实验其余3组作用显著。

离体年轻恒牙片短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(CPP-ACP;商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质再矿化的效果。方法将离体前磨牙制成牙釉质牙片作为标本,天平称重后用37.5%磷酸酸蚀浸泡2 min,吹干5 min后用天平称重。再将酸蚀后的牙片用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,在蒸馏水中浸泡1 h,吹干5 min后用天平称重。依据作用时间的不同分为A^L等12个组。统计分析各实验组与酸蚀组浸泡后重量与时间的关系。结果经统计分析各组浸泡后的平均重量与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),各组组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 Tooth Mousse护牙素的再矿化作用不是直线上升的而是呈曲线上升。