磷脂分子调控畜禽肉品质研究进展

磷脂是一类结构复杂、功能多元的极性脂质分子,包括甘油磷脂和鞘磷脂2类。作为细胞膜的重要组成部分,磷脂分子参与生命体细胞信号传导、脂滴形成、细胞凋亡等多种生理活动,磷脂分子的代谢、水解及氧化赋予肉类食品独特的质地、风味和营养品质。磷脂分子的功能特性因其连接的极性基团和sn-1/sn-2位点脂肪酸种类不同而有所差异,脂质组学为磷脂分子结构确证与表征提供了强大技术支撑。本文介绍了肌内磷脂分子的结构与功能、检测及分析方法,重点综述了磷脂分子参与畜禽肉肌内脂肪沉积、调控宰后生鲜肉品质及加工肉制品品质的研究进展,以期为精准调控畜禽肉品质提供参考借鉴。

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1在肿瘤中作用的研究进展

溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1作为磷脂胆碱代谢途径中的关键代谢酶,可通过脱酰基-再酰化来介导磷脂酰胆碱的合成,使细胞膜磷脂组成成分发生改变,导致细胞膜骨架发生重塑。溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶1可通过加速肿瘤细胞膜磷脂成分的改变、或与表皮生长因子受体、细胞周期相关等肿瘤驱动基因相互作用影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,以及肿瘤细胞的耐药性,促进肿瘤的发展。

寿胎丸合当归散治疗非典型产科抗磷脂综合征对妊娠结局及抗磷脂抗体、血栓弹力图指标的影响

目的:研究寿胎丸合当归散治疗非典型产科抗磷脂综合征对妊娠结局及抗磷脂抗体、血栓弹力图指标的影响,为临床治疗提供理论基础。方法:将温州市中医院2020年5月~2022年5月收治的74例非典型产科抗磷脂综合征患者纳入研究,通过随机数字表法分为观察组与对照组,各37例。对照组给予低分子肝素治疗,观察组给予低分子肝素+寿胎丸合当归散治疗,两组疗程均为孕5~11周,共7周。观察记录两组临床疗效、治疗前后中医症状积分以及妊娠结局等。比较两组治疗前后抗磷脂抗体[抗心磷脂抗体免疫球蛋白A(ACA-IgA)、ACA-IgG、ACA-IgM、抗β2蛋白I抗体-IgM(β2GPI-IgM)]水平、血栓弹力图指标[反应时间(R值)、凝血时间(K值)、血栓最大弹力度(MA)、凝固角(α角)]以及凝血-纤溶指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)]水平,观察两组不良反应。结果:观察组疗效优于对照组。治疗后,两组各项中医症状积分均低于治疗前(P<0.05),且观察组各项症状积分均低于对照组(P<0.05);其良好妊娠结局人数比例也高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组ACA-IgA、ACA-IgG、β2GPI-IgM水平均低于治疗前(P<0.05),而其ACA-IgM水平无明显差异(P>0.05);对照组ACAIgA水平低于治疗前(P<0.05),而ACA-IgC、ACA-IgM、β2GPI-IgM水平无明显差异(P>0.05);观察组ACAIgA、ACA-IgC、β2GPI-IgM水平低于对照组(P<0.05),ACA-IgM水平组间比较无明显变化(P>0.05);观察组R值、K值水平高于治疗前(P<0.05),α角水平低于治疗前(P<0.05),MA水平无差异(P>0.05);对照组R值水平高于治疗前(P<0.05),K值、MA、α角水平无差异(P>0.05),且治疗后观察组R值、K值水平高于对照组(P<0.05),α角水平低于对照组(P<0.05),两组MA水平比较无差异(P>0.05)。治疗后,观察组与对照组PT、APTT水平均高于治疗前(P<0.05),FIB、D-D水平均低于治疗前(P<0.05),观察组PT、APTT水平均高于对照组(P<0.05),FIB、D-D水平均低于对照组(P<0.05)。两组不良反应比较无差异(P>0.05)。结论:寿胎丸合当归散对非典型产科抗磷脂综合征有较好疗效,能够明显减轻患者症状,改善妊娠结局、抗磷脂抗体、血栓弹力图指标水平及凝血功能,同时安全性较高,能够用于治疗非典型产科抗磷脂综合征。

大豆磷脂酶D的固定化及其催化功能

目的:单因素试验研究大豆磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的固定化工艺以及固定化PLD催化合成大豆磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)的最佳工艺。方法:首先通过非极性溶剂辅助Stober法制备纳米级介孔二氧化硅作为固定化酶的载体,通过吸附-沉淀-交联方式将PLD固定,单因素试验优化固定化条件,并对固定化后的PLD进行结构表征和热稳定性及贮存稳定性研究;然后利用固定化PLD以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物催化合成PS,并通过单因素试验确定最佳合成工艺;最后对固定化PLD的循环使用性能进行研究。结果:非极性溶剂辅助Stober法制备的介孔二氧化硅BET比表面积为948 m^(2)/g,气孔体积为1.35 cm^(3)/g,孔径为8.20 nm,平均粒径为335.10 nm,扫描电镜确定载体的形貌为近球形结构;当加入5.00 mL乙醇、1.00 mL酶液(温度为35℃、pH为6.50)、0.40 mL戊二醛时,固定化PLD的相对酶活达到最大值(88.39%±1.00%),蛋白固定化率为80.76%±1.30%;70℃时游离PLD的相对酶活剩余15.30%,而固定化PLD的相对酶活仍然有66.40%,且游离PLD被固定化后半衰期由20 d延长到50 d;当乙酸乙酯与乙酸钠/醋酸缓冲溶液的比为6∶1,卵磷脂与L-丝氨酸的质量比为1∶8,反应温度为40℃,pH为6.50,固定化PLD的加入量为40%,反应时间为12 h时,PS的产率达86.60%±1.40%,纯度为90.30%,且固定化PLD循环使用7次PS的产率仍有61.70%±1.60%,而游离PLD循环使用4次PS的产率只剩余21.60%±1.80%。结论:介孔二氧化硅固定化PLD的稳定性、催化性能均显著提高,实现了PLD的回收重复使用,降低了生产成本;同时为PS的固定化酶法工业化生产提供技术支持。

抗磷脂综合征中非标准抗磷脂抗体的诊断价值和风险预测

目的分析非标准抗磷脂抗体(aPLs)与抗磷脂综合征(APS)患者临床症状的相关性,探讨抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体(aPS/PT)、抗磷脂酰肌醇抗体(aPI)、抗磷脂酸抗体(aPA)和抗磷脂酰乙醇胺抗体(aPE)检测在APS的诊断价值和风险评估能力。方法收集2018年1月至2021年12月在北京协和医院门诊就诊的146例APS患者,包括98例原发性APS(PAPS组),41例继发性APS(SAPS组),7例血清阴性APS(SNAPS组),以及同期SLE患者138例(SLE组),健康对照者55例(HC组)。采用化学发光免疫试验(CLIA)检测血清抗心磷脂抗体(aCL)、抗β_(2)糖蛋白I抗体(aβ_(2)GPI);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测aPS/PT、aPI、aPA和aPE。分析比较各指标在不同组间的差异以及与临床事件的相关性。结果APS组间比较结果显示,SAPS组IgG型aPS/PT(37.80 U/mL)、aPE(6.64 U/mL)和IgA型aPE(7.23 U/mL)水平均高于PAPS组(5.10、2.89、5.07 U/mL),差异有统计学意义(P=0.000、0.016、0.023);SAPS组IgG型aPS/PT(37.80 U/mL)、aPI(13.66 U/mL)和aPA(4.48 U/mL)水平均高于SNAPS组(5.10、2.09、0.95 U/mL),差异有统计学意义(P=0.002、0.025、0.009)。与SLE组比较结果显示,PAPS组IgM型aPS/PT(26.61 U/mL)、aPI(5.93 U/mL)、aPA(3.21 U/mL)和aPE(20.08 U/mL)均高于SLE组(5.10、1.94、1.30、8.79 U/mL),而IgA型aPE(5.07 U/mL)低于SLE组(7.53 U/mL),差异均有统计学意义(P=0);SAPS组IgG型aPS/PT(37.80 U/mL)、aPI(13.66 U/mL)、aPA(4.48 U/mL),aPE(6.64 U/mL)以及IgM型aPS/PT(48.67 U/mL)和aPI(5.55 U/mL)均高于SLE组(5.10、3.86、1.75、3.65、5.10、1.94 U/mL),差异有统计学意义(P=0、0、0、0.004、0.022、0)。与HC组比较结果显示,PAPS组的aPI(IgG 5.68 U/mL,IgM 5.93 U/mL)、aPA(IgG 2.44 U/mL,IgM 3.21 U/mL)、aPE(IgG 2.89 U/mL,IgM 20.08 U/mL)和IgG型aPS/PT(5.10 U/mL)均高于HC组(1.13、0.79、1.22、0.51、1.73、8.60、5.10 U/mL),差异有统计学意义(P值分别为0、0、0、0、0、0.006、0.002);SAPS组的aPS/PT(IgG 37.80 U/mL,IgM 48.67 U/mL)、aPI(IgG 13.66 U/mL,IgM 5.55 U/mL)、aPA(IgG 4.48 U/mL,IgM 2.14 U/mL)以及aPE(IgG 6.64 U/mL,IgA 7.23 U/mL)水平高于HC组(5.10、21.12、1.13、0.79、1.22、0.51、1.73、3.62 U/mL),差异有统计学意义(P值分别为0、0.022、0、0、0、0、0、0)。aPS/PT IgG/M、aPI IgG/M、aPA IgG/M和aPE IgG/M/A在APS患者的阳性率为56.20%、43.80%、29.50%和58.90%。IgG型和IgM型aPS/PT是血栓事件(P=0.046和P=0.04)、血小板减少(P=0.016和P=0.004)的危险因素;IgM型aPS/PT是中风(P=0.018)、子痫前期早产(P=0.023)的危险因素;IgG型aPS/PT是非中风神经系统症状(P=0.029)的危险因素。IgG型aPI和aPA是APS相关肾病(P=0.035和P=0.02)和子痫前期早产(P=0.046和P=0.09)的危险因素,IgM型aPI和aPA是溶血性贫血(P=0.006和P=0.024)和大血管狭窄/闭塞(P=0.038和P=0.027)的危险因素;IgA型aPE是静脉事件(P=0.032)的危险因素。结论将非标准抗磷脂抗体aPS/PT IgG/M、aPI IgG/M、aPA IgG/M和aPE IgG/M/A作为APS的生物学标志物,不仅有助于提高诊断APS的能力,还有助于评估APS的发展,预测不良事件。

南极磷虾磷脂的组成及其抗氧化活性

为研究南极磷虾磷脂的组成及抗氧化活性,采用硅胶柱层析法分离制备南极磷虾磷脂,对其磷脂组成和磷脂脂肪酸组成进行分析,通过测定自由基清除能力和还原能力系统评价南极磷虾磷脂的抗氧化活性。结果表明,纯化获得的南极磷虾磷脂的磷脂含量为(93.78±3.18)g/100 g;南极磷虾磷脂主要为磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺,分别占比(90.60±1.03)%和(5.08±1.10)%;南极磷虾磷脂中多不饱和脂肪酸含量丰富,且主要为二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA),分别占总脂肪酸含量的(31.75±0.24)%和(19.35±0.10)%。南极磷虾磷脂具有良好的自由基清除能力和还原能力,其清除ABTS+自由基和DPPH自由基的IC_(50)值分别为15.78 mg/mL和14.87 mg/mL,且其还原能力呈浓度依赖效应。南极磷虾磷脂的抗氧化能力明显优于大豆磷脂和卵黄磷脂。

磷脂酶A1对大豆毛油脱胶效果的影响

以大豆毛油为原料,研究磷脂酶A1添加量、柠檬酸溶液添加量、脱胶温度和脱胶时间对脱胶效果以及中性油脂肪酸和甘油酯组成的影响。结果表明,磷脂酶A1脱胶的最佳反应条件为20 mg/100 g油的磷脂酶A1、0.15 mL 45%柠檬酸溶液、50℃脱胶温度、4 h反应时间。在最佳的脱胶工艺条件下,磷脂酶A1脱胶中性油中含磷量降至0.47 mg/kg,油脂得率(95.55%)高于酸化脱胶中性油的得率(92.94%)。酶法脱胶中性油与毛油的脂肪酸和甘油酯组成相比,酶法脱胶中性油的脂肪酸组成没有明显变化,甘油酯组成中的甘一酯和甘二酯相对含量减少、甘三酯相对含量增加;与酸化脱胶油脚相比,磷脂酶A1脱胶油脚中溶血磷脂(溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰肌醇)的相对含量增加至48%。

糖脂代谢指标联合抗磷脂抗体对动脉粥样硬化患者预后的预测价值

目的探讨糖脂代谢指标联合抗磷脂抗体与动脉粥样硬化患者预后的相关性。方法选取2021年4月至2023年3月在河北省人民医院进行治疗128例动脉粥样硬化患者分为观察组,另外选取48例体检健康者作为对照组,对比两组糖脂代谢指标、抗磷脂抗体水平,ROC分析糖脂代谢指标、抗磷脂抗体及联合检测对动脉粥样硬化患者预后的预测价值。结果观察组TC、TG、ACL、抗β2-GP1水平高于对照组(P<0.05)。观察组动脉粥样硬化患者预后不良组TC、TG、ACL、抗β2-GP1表达水平高于预后良好组(P<0.05)。TC、TG、ACL、抗β2-GP1水平与动脉粥样硬化患者预后不良呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,6项联合检测对动脉粥样硬化患者预后的预测价值高于TC、TG、ACL、抗β2-GP1单项预测价值(P<0.05)。结论TC、TG、ACL、抗β2-GP1联合检测对动脉粥样硬化患者预后的预测价值较高。

磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇-3-激酶对原发性肝癌TACE治疗反应的预测作用

目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)治疗的原发性肝癌患者磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇-3-激酶(PIK3CA)的表达及其与TACE治疗反应的相关性。方法从TCGA数据库下载425例肝癌患者PIK3CA的表达量。利用GSE104580数据集内TACE治疗敏感和不敏感患者癌组织PIK3CA表达量,分析两组基因表达差异,绘制ROC曲线分析TACE治疗敏感性与PIK3CA表达的相关性。从GSE14520数据集下载具有完整临床资料、接受TACE治疗的肝细胞癌27例,基于PIK3CA的表达量最佳截断值,分成PIK3CA高表达组和PIK3CA低表达组,比较两组患者的临床资料。应用“survminer”R包进行Kaplan-Meier生存分析。结果肝癌组织PIK3CA表达明显高于癌旁组织;TACE不敏感患者癌组织PIK3CA表达量高于TACE敏感患者,TACE治疗敏感性与PIK3CA表达相关性的ROC曲线下面积(AUC)为0.645;生存分析显示PIK3CA表达量越低,患者生存时间越长,且1、2、3年的AUC分别为0.765、0.713、0.633。结论PIK3CA对于肝细胞癌有一定的诊断价值,有可能作为TACE治疗敏感性的预测指标。

磷脂酶A_2氨基末端衍生肽的合成及其抗细菌活性的研究

目的 探讨磷脂酶A_(2)(PLA_(2))氨基末端衍生肽的合成及抗菌活性。方法 根据PLA_(2)氨基末端氨基酸残基的顺序合成为多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20),将其分别与2种细菌(大肠埃希菌、枯草杆菌)在特定条件下培养,并以生理盐水作为对照,分析抗菌活性。结果 与对照比较,多肽不同作用浓度时PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性更强,各多肽间比较,差异有统计学意义(P<0.05);当多肽作用浓度为500μg/ml时,PLA_(2)N_(15)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性可达99.8%,高于PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05)。与对照比较,各多肽不同作用浓度时对大肠埃希菌杀菌活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);多肽作用浓度为7.81、125.00、500.00μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性均高于PLA_(2)N_(11)和PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05);多肽作用浓度为31.25μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性低于PLA_(2)N_(11)的杀菌活性,且高于PLA_(2)N_(20)的杀菌活性(P<0.05)。结论 多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对枯草杆菌、大肠埃希菌有很强的杀菌作用。

抗磷脂抗体损害子宫蜕膜血管内皮细胞血管形成的机制研究

目的:研究抗磷脂抗体(aPL)对蜕膜组织血管内皮细胞(DVEC)增殖、迁移与血管形成能力的影响。方法:采用细胞免疫荧光鉴定DVEC细胞;CCK-8法检测aPL对DVEC细胞增殖的影响;细胞划痕实验与血管形成实验检测aPL对DVEC细胞迁移与血管生成的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测aPL对DVEC细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响;Western blot检测aPL对DVEC细胞中p-ERK、t-ERK、VEGF与MMP-2蛋白表达的影响。结果:aPL能抑制DVEC细胞增殖、迁移与血管形成能力;aPL能抑制DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2表达水平,加ERK激动剂后DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2表达水平明显升高。结论:aPL可通过调控ERK通路减少DVEC细胞中VEGF与MMP-2表达,进而抑制DVEC的增殖、迁移与血管形成能力。

非标准抗磷脂抗体对抗磷脂综合征的临床应用价值

目的探讨抗磷脂酰胆碱抗体(aPC)、抗磷脂酰甘油抗体(aPG)和抗鞘磷脂抗体(aSM)检测在抗磷脂综合征(APS)的临床应用价值。方法共纳入98例原发性APS患者(PAPS组),41例继发性APS患者(SAPS组),138例系统性红斑狼疮患者(SLE组)和55例健康体检者(HC组)。采用化学发光免疫试验(CLIA)检测血清抗心磷脂抗体(aCL)、抗β_(2)糖蛋白I抗体(aβ_(2)GPI);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测aPC、aPG和aSM。比较分析组间各指标的差异以及其与临床表现的相关性。结果PAPS组的aPC IgM(1.47 U/mL)、aPG IgM(1.82 U/mL)、aSM IgM(20.97 U/mL)、aPG IgG(1.22 U/mL)、aSM IgG(14.56 U/mL)浓度高于SLE组(0.91、0.67、10.83、0.88、9.54 U/mL),差异有统计学意义(均P<0.05);SAPS组aPC IgM(2.00 U/mL)、aPG IgM(1.59 U/mL)、aSM IgM(17.29 U/mL)、aPC IgG(3.30 U/mL)、aPG IgG(2.81 U/mL)浓度较SLE组高(0.91、0.67、10.83、1.42、0.88 U/mL),差异有统计学意义(均P<0.05);PAPS组aPC IgG(1.39 U/mL)、aPC IgM(1.47 U/mL)、aPG IgG(1.22 U/mL)、aPG IgM(1.82 U/mL)和aSM IgG(14.56 U/mL)浓度高于HC组(0.44、0.70、0.57、0.64和6.22 U/mL),差异有统计学意义(均P=0);SAPS组aPC IgG(3.30 U/mL)、aPC IgM(2.00 U/mL)、aPG IgG(2.81 U/mL)、aPG IgM(1.59 U/mL)和aSM IgG(9.84 U/mL)浓度均较HC组高,差异有统计学意义(均P<0.05)。非标准aPLs在APS患者的阳性率分别为IgG/M aPC 23.00%,IgG/M aPG 25.90%,IgG/M aSM 61.20%。aPC IgG和aPG IgG与卒中事件(均P=0.009)、子痫前期早产(P=0.034和P=0.021)相关;aPG IgG与血小板减少(P=0.025)相关;aPC IgM和aPG IgM与溶血性贫血相关(P=0.008和P=0.004);IgG型和IgM型aSM与病态妊娠相关(P=0.012和P=0.018);aCL IgA和aβ_(2)GPI IgA与子痫前期早产相关(P=0.007和P=0.006)。结论增加aCL IgA、aβ_(2)GPI IgA、aPC IgG/M、aPG IgG/M/A和aSM IgG/M检测不能进一步提高APS的实验室诊断价值,但是非标准aPLs与卒中、子痫前期早产、血小板减少等临床症状密切相关。

以急性肺栓塞为首发表现的原发性抗磷脂综合征1例

1病例介绍患者男,56岁。主因气短1周,间断发热6d于外院给予抗感染治疗,住院期间活动后突发晕厥,意识不清,伴大小便失禁,遂于秦皇岛市第一医院急诊就诊。实验室检查:血气分析:pH7.44,PO_(2) 57mmHg,PCO_(2) 35mmHg;血常规:WBC 6.06×10^(9)/L,RBC 4.62×10^(12)/L,PLT 121×10^(12)/L,CRP 18.16mg·L^(-1);生化:ALT 186.5U·L^(-1),AST 66.4 U·L^(-1),GGT 247.4 U·L^(-1);BNP 61.76pg·mL^(-1),cTnI 0.255ng·mL^(-1);凝血:FDP 19.19μg·mL^(-1),D-二聚体10.28 mg·L^(-1),APTT 50.4s。余未见明显异常。

产科抗磷脂抗体综合征临床观察的研究进展

抗磷脂抗体综合征(Antiphospholipid syndrome, APS)是一种实验室检查以抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody, APL)持续阳性,临床标准以病态妊娠、血栓形成为主要特征的非炎性自身免疫性疾病。近年来,随着对APS的逐渐研究及认识的增加,临床上产科抗磷脂抗体综合征的患者越来越多见,APS孕妇的围产期的不良妊娠结局发生率也越来越高,早期且全程合理应用药物治疗可以有效改善妊娠结局及胎儿结局,所以APS患者的妊娠管理问题一直是风湿科和产科的难点和重点。由此可见,产科APS及其相关临床观察及母婴预后相关研究是临床研究者探讨的热点,下文就对目前研究进行详细阐述。

泰它西普治疗SLE合并抗磷脂抗体综合征患者的疗效观察

目的:本研究旨在评估泰它西普(Telitacicept, TA)、贝利尤单抗(Belimumab, BEL)与传统治疗在系统性红斑狼疮(SLE)合并抗磷脂抗体综合征(APS)患者中的临床效果与安全性。方法:通过随机分配30名SLE-APS患者到TA组、BEL组及传统治疗组,比较治疗3个月及6个月后的SLEDAI-2000评分、外周血抗ds-DNA、外周血BLYS水平、外周血APRIL水平、抗磷脂抗体水平及B、T淋巴细胞绝对值变化。结果:治疗后TA组与传统治疗组相比,在SLEDAI-2000评分、外周血抗ds-DNA、外周血β2GPI-IgG、B淋巴细胞绝对计数以及外周血BLYS水平、外周血APRIL水平方面差异均有统计学意义(P β2GPI-IgG、外周血APRIL水平方面也显示出统计学差异(P < 0.05)。三组患者的不良反应差异无统计学意义。结论:泰它西普对于SLE-APS患者具有良好的临床疗效,为SLE-APS个体化治疗策略提供了新选择。

无载体复合酶固定化技术提取革胡子鲶下脚料中的磷脂酰胆碱

鱼类废弃物中含大量的磷脂酰胆碱,为提高磷脂酰胆碱的回收提取率,本研究设计构建了无载体复合酶固定化技术对革胡子鲶鱼内脏中磷脂酰胆碱的提取。该提取体系包含复合酶和戊二醛,研究对戊二醛的浓度、交联pH、交联温度、该固定化复合酶的重复利用次数、该固定化酶的保存时间进行的探索研究。单因素实验结果表明,提取体系最佳交联浓度为5%、最佳交联温度为30℃、最佳交联pH为6.5;该固定化酶基本可以重复使用3~4次,保存25天以后提取率就比较低了。另外,通过三因素三水平的正交实验得出酶固定化的最佳组合工艺条件,即交联浓度为7%、交联温度为35℃、交联pH为7.5时的提取率最高。该工艺可为鱼类废弃物提取磷脂酰胆碱积累新技术的经验,为其实现工业化提供有力支持。

磺达肝癸钠联合寿胎丸加减方治疗肾虚血瘀型抗心磷脂抗体阳性复发性流产的临床效果

目的探讨磺达肝癸钠联合寿胎丸加减方治疗肾虚血瘀抗心磷脂抗体阳性复发性流产(RSA)的效果。方法选取2021年1月至12月江西省妇幼保健院收治的105例RSA患者作为研究对象,按随机数字表法分为单纯中药组、对照组和观察组,各35例。单纯中药组用寿胎丸加减方,对照组用依诺肝素+寿胎丸加减方,观察组用磺达肝癸钠+寿胎丸加减方。观察三组的疗效、抗心磷脂抗体转阴率、凝血指标及不良反应。结果观察组和对照组患者孕12周时总有效率均高于单纯中药组,差异有统计学意义(P<0.017),但观察组和对照组患者总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。观察组和对照组抗心磷脂抗体转阴率高于单纯中药组,差异有统计学意义(P<0.017);观察组患者抗心磷脂抗体转阴率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.017);三组抗心磷脂抗体转阴率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者孕12周时血清D-二聚体水平、凝血指数和最大振幅均低于本组治疗前,且观察组和对照组患者指标低于单纯中药组,差异有统计学意义(P<0.05);但观察组和对照组患者凝血相关指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗期间,单纯中药组无不良反应发生;观察组患者注射部位皮肤反应、转氨酶升高发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论磺达肝癸钠联合寿胎丸加减方治疗肾虚血瘀抗心磷脂抗体阳性RSA患者的效果显著,可有效改善临床症状、凝血状态,促进抗心磷脂抗体转阴,且安全性更好。

不动杆菌磷脂酶D基因的表达、生物信息学及底物选择性分析

微生物来源磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)因其较高的催化活性和广泛的底物选择谱而成为磷脂合成应用中的热点。本研究以Acinetobacter sp.DUT-2来源的PLD(ADPLD)为研究对象,首先通过生物信息学分析蛋白序列特征,然后构建重组质粒并在大肠杆菌中实现异源表达,进一步纯化酶蛋白并分析ADPLD对不同酰基链长磷脂酰胆碱(PC)的底物选择性,最后通过分子对接和分子模拟探究ADPLD的底物识别机制。通过对ADPLD和其他微生物来源的PLD多序列比对和进化树分析表明,ADPLD与链霉菌来源PLD序列相似度低于30%,且只有一个保守的HKD基序,这表明ADPLD的催化机制可能与传统认知中需要两个HKD基序完成PLD催化过程的反应机制有所不同。ADPLD主要以可溶性蛋白形式表达,仅通过Ni^(2+)亲和层析在50 mmol/L的低浓度咪唑下便能纯化出较为均一的蛋白,以大豆PC为底物时的比活性约为4.09 U/mg。ADPLD对中和短链PC(C6~C14)的活性相对较高,其中ADPLD对8:0/8:0-PC的比活性高于其它酰基链长的PC底物,为13.2 U/mg。当PC的酰基链长从C14增加至C16时,ADPLD对PC的活性明显降低。分子模拟和分子对接结果显示ADPLD的氨基酸残基Thr205、Pro209、Phe293、Ala324、Lys329和Phe453能够分别与PC形成疏水相互作用。Arg383和Gly326能够与PC形成氢键,其中Arg383(N)、Gly326(N)与PC(P)之间的距离<3Å。这些结果表明,ADPLD能够与磷脂分子形成一个稳定的酶与底物的中间体。研究结果为ADPLD的分子改造和进一步工业应用奠定了基础。

抗磷脂抗体与狼疮肾炎的关联及其肾脏致病机制

全球系统性红斑狼疮(SLE)发病率估计为5.14/10万例年,全球每年约40万新诊断的SLE患者,我国每年新诊断SLE患者人数为10.7万/年,居全球之首^([1])。狼疮肾炎(LN)是SLE最严重的器官表现之一,随着年龄的增长,LN患者足细胞和肾单位逐渐丢失,大部分SLE患者5年内可发生LN,LN 5年后进展到终末期肾脏病(ESRD)的比例约为10%~30%^([2])。

二草清肝合剂联合多烯磷脂酰胆碱治疗非酒精性脂肪性肝病临床研究

目的:观察二草清肝合剂联合多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)湿热蕴结证的临床疗效。方法:选取104例NAFLD湿热蕴结证患者,按随机数字表法分成对照组和治疗组,每组52例。对照组给予多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗,治疗组在对照组基础上给予二草清肝合剂治疗。2组均治疗3个月。比较2组临床疗效、生化指标、中医证候评分、氧化应激指标。结果:治疗后,治疗组总有效率94.23%,高于对照组78.85%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平均较治疗前降低,治疗组血清AST、ALT、TC、TG水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组中医证候评分均较治疗前降低,治疗组中医证候评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组血清正五聚体蛋白3 (PTX3)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平均较治疗前升高,治疗组血清PTX3、SOD、GSH-Px水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:二草清肝合剂联合多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗NAFLD湿热蕴结证临床疗效较好,能改善肝功能、血脂状况,缓解临床症状,减轻氧化应激反应。