全反式维甲酸联合小剂量阿糖胞苷对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶信号通路的作用机制研究

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用机制。方法:选取人急性髓系白血病细胞HL-60,分为空白对照组(未经任何处理的HL-60细胞)、Ara-C组(加入0.5μmol/LAra-C)、ATRA组(加入2μmol/LATRA)、ATRA+Ara-C组(加入2μmol/LATRA和0.5μmol/LAra-C),继续培养24、48、72h,采用CCK8检测HL-60细胞活力,AnnexinV双染法检测HL-60细胞凋亡,qRT-PCR检测PI3K、AKT-mRNA表达,Westernblot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,并进行细胞形态学观察。结果:空白对照组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组、Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。Ara-C+ATRA组HL-60细胞凋亡率高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞凋亡率高于空白对照组(均P<0.05)。HL-60细胞胞体多呈圆形,可见瘤状突起,胞核多为类圆形,Ara-C组、ATRA组染色质凝聚,颜色变深,部分胞核变小,Ara-C+ATRA组染色质凝聚,颜色变深,可见核固缩、核碎裂。空白对照组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。空白对照组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。结论:Ara-C+ATRA能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,促进HL-60细胞凋亡。

辛开苦降法对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗患者卵巢功能、子宫内膜容受性及磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶通路的影响

目的 观察辛开苦降法对多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)患者卵巢功能、子宫内膜容受性及磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase/serine threonine protein kinase,PI3K/AKT)通路的影响。方法 选取2018年11月—2020年1月期间四川中医药高等专科学校附属绵阳市中医医院收治的PCOS-IR患者83例,按随机数字表法分为对照组41例和治疗组42例。对照组采用炔雌醇环丙孕酮联合二甲双胍治疗,治疗组采用中医辛开苦降法(中药),均连续治疗12周。观察比较两组患者治疗前后体质量指数(Body mass index,BMI)、卵巢功能[卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、LH/FSH与抗缪勒管激素(Anti-mullerian hormone,AMH)]、血糖[空腹胰岛素(Fasting insulin,FIN)、空腹血糖(Fasting blood glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2 hours postprandial blood glucose,2 h PBG)与胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessmentinsulin resistance,HOMA-IR)]、子宫内膜容受性[收缩期峰值流速(Vmax)、搏动指数(Pulse index,PI)、阻力指数(Resistance index,RI)、血流参数血管化指数(Vascularity index,VI)、血流指数(Flow index,FI)与血管化血流指数(Vascularity flow index,VFI)]、外周血PI3K/AKT通路(PI3K、AKT mNRA),治疗期间不良反应情况。结果 治疗后两组患者BMI、FPG、FIN、2 h GLU、HOMA-IR水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组BMI、FPG、FIN、2 h GLU、HOMA-IR水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者AMH、LH、LH/FSH水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);FSH较治疗前无显著变化,差异无统计意义(P>0.05);且治疗组AMH、LH、LH/FSH明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者子宫内膜厚度、子宫容积、Vmax、VI、FI、VFI均较治疗前明显升高,PI、RI均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组子宫内膜厚度、子宫容积、Vmax、VI、FI、VFI均明显高于对照组,PI、RI均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者PI3K、AktmRN表达均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组PI3K、AktmRN表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者均未发生严重不良反应。结论 中医辛开苦降法不仅能改善PCOS-IR患者胰岛素抵抗,还可改善其卵巢功能、子宫内膜容受性,激活PI3K/AKT通路,安全性高。

富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸缓解环磷酰胺导致的小鼠肾损伤机制

目的:研究富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸(docosahexaenoic acid-enriched phosphatidylserine,DHAPS)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导小鼠肾损伤的改善作用及其机制。方法:32只雄性ICR小鼠随机分为正常组(CON组)、模型组(MOD组)、50 mg/kg mb DHA-PS组(50 DHA-PS组)和100 mg/kg mb DHA-PS组(100 DHA-PS组),每组8只。腹腔注射80 mg/kg mb CTX建立小鼠肾损伤模型,5 d后,MOD组和DHA-PS组分别灌胃等量生理盐水或DHA-PS,7 d后处死小鼠。测定各组小鼠肾脏指数、血清生化指标、肾脏氧化应激和炎症因子表达水平,分析组织病理变化及肾脏组织非靶向代谢组学。结果:与MOD组相比,DHA-PS可显著降低小鼠肾脏指数以及肌酐、尿素氮、胱抑素C和肾损伤分子-1水平(P<0.05);显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶等抗氧化酶活性(P<0.05),并显著降低丙二醛含量(P<0.05);显著下调白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α等促炎细胞因子的表达(P<0.05),显著上调抗炎细胞因子IL-10的含量(P<0.05)。染色结果显示,DHA-PS组小鼠肾脏组织结构明显恢复。此外,肾脏组织代谢组学分析结果表明,DHA-PS主要通过影响甘油磷脂代谢、嘌呤代谢及其代谢物缓解CTX导致的小鼠肾脏代谢紊乱。结论:DHAPS可通过减轻氧化应激和炎症反应、调节甘油磷脂代谢和嘌呤代谢等途径缓解CTX导致的小鼠肾损伤。

用于炎症治疗的磷脂酰丝氨酸修饰胞外囊泡纳米递药系统的初步构建与评价

目的:初步构建与评价递送槲皮素(quercetin,Que)的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)修饰的巨噬细胞源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)纳米载体(PS-EVs@Que),并研究PS-EVs@Que在炎症治疗中的作用。方法:利用超速离心法从巨噬细胞提取EVs,采用超声法将Que载入EVs中(EVs@Que),最后将PS加入EVs@Que溶液中孵育后制备得到PS-EVs@Que,并对其形貌、粒径、载药量和包封率进行制剂学评价;通过免疫荧光观察EVs及PS修饰的EVs的细胞摄取情况。分别设置LPS组、LPS+EVs@Que组、LPS+PS-EVs@Que组以及对照组作用于巨噬细胞,蛋白质印迹实验检测巨噬细胞表面标志物iNOS的表达情况;ELISA法检测炎性因子TNF-α与IL-6的表达情况。结果:制备得到的PS-EVs@Que呈类圆形囊泡结构,平均粒径为(118.45±0.97)nm,载药量为(8.59±0.16)%,包封率为(20.08±0.52)%。摄取结果表明,PS的修饰使EVs更好地被巨噬细胞吞噬,增强了巨噬细胞对EVs的摄取。与其他组相比,PS-EVs@Que组巨噬细胞iNOS蛋白表达减少(P<0.01),并且炎症因子TNF-α及IL-6的表达也受到了明显抑制(P<0.01)。结论:本研究成功构建了一种纳米药物递药系统,其能提高Que的生物利用度,抑制巨噬细胞的促炎M1表型极化,降低促炎因子的分泌,为新型纳米药物治疗炎症疾病提供了参考。

基于斑马鱼模型评价磷脂酰丝氨酸对记忆力及认知力的改善作用

利用斑马鱼模型评价磷脂酰丝氨酸(PS)对东莨菪碱所致的记忆力及认知力损伤是否有改善作用。采用成年斑马鱼做为试验模型,设置空白对照组、东莨菪碱模型组、多奈哌齐阳性药组及三个浓度(1、3、9 mg/L)的PS共处理组,药物干预培养6天,第7天时,记录斑马鱼行为学变化,检测学习记忆相关基因与抗氧化相关基因的表达变化,并做统计学分析。结果表明,与对照组相比,东莨菪碱模型组斑马鱼主要表现出记忆力下降和认知力丧失的行为现象,且各基因表达出现异常。与东莨菪碱模型组比较,阳性药组与三个浓度的PS共处理组的斑马鱼记忆力和认知力得到一定恢复,且各基因表达趋于正常。因此,浓度为1、3和9 mg/L的PS对东莨菪碱所致斑马鱼记忆力和认知力的损伤具有一定的改善作用。

高频超声评估肱动脉血流介导的血管舒张功能联合血清磷脂酰丝氨酸1磷酸盐预测脓毒症患者血管内皮功能的研究

目的:探讨高频超声评估肱动脉血流介导血管舒张功能(FMD)联合血清磷脂酰丝氨酸1磷酸盐(S1P)水平预测脓毒症患者血管内皮功能的价值。方法:选择2021年2月至2023年2月重庆市南川区人民医院收治的140例脓毒症患者纳入病例组,另选同期在医院进行健康体检的140名志愿者纳入健康对照组。采用高频超声测量两组受试者肱动脉FMD,检测两组血清S1P水平。分析FMD、S1P与脓毒症患者血管内皮功能的相关性,以及FMD、S1P评估脓毒症患者血管内皮功能的诊断效能,分析FMD和S1P水平与脓毒症患者的血管内皮功能评分(VEFS)的相关性。结果:病例组FMD(4.21±1.63)和S1P(0.82±0.24)及VEFS(0.42±0.15)水平均显著低于健康对照组(7.35±2.15,1.28±0.32,0.78±0.18),差异有统计学意义(t=-14.23、-13.56、-17.32,P<0.05),且病例组FMD和S1P水平与VEFS呈显著正相关(r=0.62、0.58,P<0.01),与血清C反应蛋白(CRP)水平呈显著负相关(r=-0.55、-0.51,P<0.01)。FMD和S1P水平作为预测脓毒症患者血管内皮功能的单因素指标,其受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.83和0.82,灵敏度分别为74.0%和77.0%,特异度分别为78.0%和75.0%。FMD和S1P联合作为预测脓毒症患者血管内皮功能的多因素指标,其AUC为0.90,灵敏度为88.0%,特异度为77.0%。结论:高频超声评估肱动脉FMD联合血清S1P水平可以有效预测脓毒症患者的血管内皮功能,对于脓毒症患者的诊断和治疗具有重要的临床意义。

汉黄芩素调节磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/核因子κB信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的探讨汉黄芩素(Wog)调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法2022年8-12月,大鼠采用随机数字表法分为Model组、低剂量Wog组(Wog-L组,50 mg/kg)、高剂量Wog组(Wog-H组,100 mg/kg)、阳性药物氨茶碱组(Ami组,2.3 mg/kg)、IGF-1(PI3K激活剂)组(1.33 mg/kg)、Wog-H+IGF-1组(100 mg/kg+1.33 mg/kg)、对照组(CK组),每组12只。除CK组外,其他组大鼠均需利用烟熏法联合气管滴注脂多糖(LPS)的方法构建COPD模型,建模成功24 h后,进行给药处理,每天1次给药,持续4周。检测呼气峰流量(PEF)、每分钟通气量(MV)、吸气峰流量(PIF);流式细胞术检测外周血中Th17/Treg;HE染色检测肺组织病理;酶联免疫吸附法检测大鼠肺组织中白细胞介素(IL)-17、IL-10水平;蛋白质印迹法检测肺组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白。结果与CK组比较,Model组大鼠PEF(12.56±0.47比8.72±0.39)、PIF(9.35±0.32比7.24±0.17)、MV(132.26±5.78比96.63±3.28)、Treg(31.18±2.62比15.52±1.01)比例、IL-10(23.35±1.16比8.85±0.27)明显降低(均P<0.05);Th17(3.14±0.13比18.86±1.67)比例、Th17/Treg(0.10±0.01比1.22±0.11)、肺泡间隔(33.36±1.48比49.78±1.73)、气道炎症评分(0比4.56±0.23)及IL-17(75.83±3.60比185.56±8.62)水平明显升高(均P<0.05)。与Model组比较,Wog-L组、Wog-H组PEF(9.66±0.40,11.49±0.51)、PIF(8.28±0.19,9.03±0.22)、MV(105.54±4.11,126.67±5.72)、Treg(19.93±1.18,27.73±2.05)比例、IL-10(11.56±0.33,20.72±0.59)水平明显升高(均P<0.05);Th17(3.14±0.13比18.86±1.67)比例、Th17/Treg(0.10±0.01比1.22±0.11)、肺泡间隔(43.45±1.26,35.78±1.12)、气道炎症评分(3.75±0.17,0.86±0.07)、IL-17(162.27±7.14,103.35±4.33)水平明显降低(均P<0.05)。与CK组比较,Model组大鼠RORγt(0.15±0.01比1.34±0.11)、p-PI3K(0.22±0.01比0.86±0.07)、p-Akt(0.18±0.01比0.75±0.06)、p-NF-κB p65(0.11±0.01比0.69±0.06)蛋白表达升高,Foxp3(1.45±0.27比0.35±0.02)蛋白表达降低(均P<0.05)。与Model组相比,Wog-L组、Wog-H组RORγt(1.08±0.10,0.36±0.02)、p-PI3K(0.71±0.06,0.35±0.03)、p-Akt(0.62±0.06,0.28±0.02)、p-NF-κB p65(0.52±0.05,0.26±0.02)蛋白表达明显降低,Foxp3(0.57±0.04,1.13±0.09)蛋白表达明显升高(均P<0.05)。Wog-H组与Ami组大鼠上述各指标水平近似,均差异无统计学意义(P>0.05)。IGF-1逆转了高剂量Wog对COPD大鼠Th17/Treg的影响。结论Wog促进COPD大鼠Th17/Treg平衡的机制可能与下调PI3K/Akt/NF-κB通路有关。

抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体与不明原因复发性流产的相关性分析

目的:探讨抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体及其IgG或IgM亚型是否与不明原因复发性流产相关。方法:选择2021年1月至2023年8月在北京大学第三医院就诊的年龄18~40岁且检测过抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体的283例至少一次不明原因流产患者的病例资料进行回顾性分析,使用卡方检验和Logistic回归分析抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体及其IgG或IgM亚型与不明原因复发性流产的相关性,使用四格表法计算抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体及其IgG或IgM亚型在不明原因复发性流产中的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:卡方检验表明,复发性流产组抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体及其IgM亚型阳性率高于非复发性流产组(P均<0.05),而抗PS/PT抗体IgG亚型阳性率在两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。以抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白抗体、狼疮抗凝物、抗核抗体以及年龄校正后,Logistic回归分析发现抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体阳性与复发性流产相关(OR=2.084,95%CI 1.045~4.155,P<0.05),抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体IgM亚型与复发性流产相关(OR=2.368,95%CI 1.187~4.722,P<0.05)。抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体诊断复发性流产的灵敏度为65.43%,特异度为48.51%,阳性预测值为33.76%,阴性预测值为77.78%。在经典抗磷脂抗体阴性的复发性流产患者中,抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体的灵敏度为59.09%,特异度为63.23%,阳性预测值为40.63%,阴性预测值为78.40%。抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体IgM亚型诊断复发性流产的灵敏度为65.43%,特异度为50.99%,阳性预测值为34.87%,阴性预测值为78.63%。结论:抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原抗体及IgM亚型阳性与至少一次不明原因流产患者的复发性流产相关,其在不明原因复发性流产诊断中是否有预测价值尚需要未来前瞻性研究确定。

磷脂酰丝氨酸对缺血性卒中神经保护作用的研究进展

缺血性卒中具有高发病率、高复发率、高致残率和病死率的特点。缺血半暗带组织是缺血性卒中患者再通治疗后临床获益的关键。减少缺血半暗带组织神经细胞的凋亡,可能改善缺血性卒中的预后。磷脂酰丝氨酸作为介导细胞凋亡最重要的“eat me”信号,或可成为神经保护的新靶点,为卒中后神经保护提供新思路。作者对磷脂酰丝氨酸对缺血性卒中的神经保护作用的研究进展进行综述。

1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷脂酰丝氨酸的全合成

(S)-2-[(苄氧羰基)氨基]-3-羟基丙酸苄酯(Ⅰ)经亚磷酸二苯酯处理得到了(S)-2-[(苄氧羰基)氨基]-2-(苄氧羰基)乙基膦酸酯(Ⅱ);化合物Ⅱ经新戊酰氯介导活化后,与(S)-(+)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醇(Ⅲ)缩合,并由碘氧化得到新化合物(R)-2,3-异亚丙基-sn-甘油基{(S)-2-[(苄氧羰基)氨基]-2-(苄氧羰基)-1-氧乙基}膦酸酯(Ⅳ);然后,化合物Ⅳ在三氟乙酸的作用下脱除异丙叉基得到(R)-2,3-二羟基丙基-sn-甘油基{(S)-2-[(苄氧羰基)氨基]-2-(苄氧羰基)-1-氧乙基}膦酸酯(Ⅴ);在1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)的作用下,中间体Ⅴ与硬脂酸进一步乙酰化,以85.8%的产率得到了(R)-2,3-双(硬脂酰基)丙酰基{(S)-2-[(苄氧羰基)氨基]-2-(苄氧羰基)-1-氧乙基}膦酸酯(Ⅵ);中间体Ⅵ经氢解得到了1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷脂酰丝氨酸(Ⅶ)。对主要合成步骤的反应条件进行了优化,并进行了验证和放大实验。产物Ⅶ共经历5步反应,总产率为57.1%。采用FTIR、HRMS和NMR对产物Ⅶ的结构进行了确证。

固定化磷脂酰胆碱水相酶催化合成磷脂酰丝氨酸

本文构建了一种固定化底物磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)水相催化体系,磷脂酶D转化PC合成磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)新技术。探讨了沉淀剂种类、载体类型和底物初始添加量等主要因素,对固定化底物PC过程中PC吸附率的影响,获得了最佳工艺参数。在此基础上,进一步研究了固定化底物PC酶法合成PS的时间反应动力学和酶重复利用特性。结果表明,催化反应24 h后,PS得率为98.74%,磷脂酶D重复使用10次,PS得率仍然大于60%。文章还比较了固定化底物水相催化体系和双液相催化体系酶法合成PS效果,结果发现,固定化底物水相催化体系中PS得率和酶循环利用特性均优于双液相催化体系。本文研究结果为今后酶法改性PC合成PS提供了一种新的催化反应体系。

磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞的作用研究进展

近年来,呼吸道过敏性疾病已成为全球性疾病,尤其是变应性鼻炎和哮喘。嗜酸性粒细胞及其释放的炎症介质的作用是呼吸道过敏性疾病的主要发病机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞的存活、增殖、生长和代谢有多效性作用,也影响着炎症反应的进程。针对PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞作用的研究,有助于明确呼吸道过敏性疾病的发病机制。本文就PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中嗜酸性粒细胞的作用研究进展进行综述,以期对临床治疗呼吸道过敏性疾病提供理论参考。

氧化应激指标、血管内皮损伤与慢性肾病患者磷脂酰丝氨酸外翻的关系

目的探讨不同阶段的慢性肾病(CKD)患者磷脂酰丝氨酸(PS)外翻与氧化应激水平、血管内皮损伤的相关性。方法选取2019年1月—2021年12月在北京中医医院顺义医院收治的CKD 2~5期患者88例。根据CKD分期分为轻度(2~3期)20例、中度(4期)15例、重度(5期)53例3组,比较其临床资料,检测血液PS、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达,分析3组患者上述指标表达水平差异,并分析其中的相关性;另选取静脉血管标本40例,CKD5期患者行自体动静脉瘘(AVF)30例,肢体外伤手术正常10例,将血管内皮细胞进行免疫组化染色,观察超氧化物歧化酶1(SOD-1)、GPx、VEGF、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在静脉内皮细胞内的表达情况。结果3组CKD患者血清SCr、BUN、UA水平随病情加重而升高(F=61.316、43.258、5.044,P均<0.001);血清MDA、eNOS水平随病情加重而升高,SOD、GPx表达随病情加重而降低(F/P=6.984/0.030、4.155/0.020、14.937/<0.001、3.172/<0.001);血清VEGF、PS表达随病情加重而升高(F/P=29.871/<0.001、10.286/<0.001)。CKD5期患者PS、VEGF水平分别与SOD、GPx表达呈负相关(P<0.01),与MDA、eNOS表达呈正相关(P<0.01),PS暴露水平与VEGF表达呈正相关(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线表明,SOD、GPx、MDA、eNOS、VEGF对PS外翻预测的曲线下面积为0.819、0.818、0.735、0.824、0.892。SOD-1、GPx、VEGF、VEGFR2在AVF术CKD患者的静脉组织中呈高表达。结论氧化应激可加重患者血管内皮损伤与PS外翻,从而加重CKD 5期患者病情,血管内皮损伤指标对PS外翻具有预测价值,PS外翻有望成为CKD治疗的新靶点。

磷脂酰丝氨酸研究进展

综述了磷脂酰丝氨酸的结构、合成机理及其在改善老年人阿耳茨海默(氏)病、提高认知力、抗抑郁、缓解紧张压抑、辅助激活酶等方面的保健功效,同时对磷脂酰丝氨酸在食品、药品行业的应用前景进行了展望。

流式细胞术联合测定保存血小板表达的磷脂酰丝氨酸和CD62p

人类血小板通过不同的技术进行离体保存后 ,其特性改变差异较大。建立适用于各种保存血小板特性分析的流式细胞术 (FCM)对保存血小板的质量监测和新保存方法研究有重要意义。本研究通过对FCM分析方法主要条件的优化评估 ,建立了联合测定血小板膜表面包括磷脂酰丝氨酸在内的多参数FCM定量分析方法。在标本制作中 ,血小板不需要洗涤即可直接进行标记 ,减少了血小板离心洗涤过程中的激活。除了FCM常用的同型对照外 ,文中还将新鲜富含血小板血浆 (FPRP)、凝血酶激活FPRP和液氮处理FPRP作为血小板标准阴性、阳性对照 ,直接应用于FCM分析 ,且效果良好。该方法中Gly Pro Arg Pro乙酸盐 (GPRP)的选择应用 ,既防止了血小板聚集和纤维蛋白的形成 ,同时可稳定血小板 ,减少制备过程中人为激活 ,克服了在血小板、Ca2 + 和血浆共存条件下FCM定量分析血小板的困难 ,尤其是为深低温处理血小板包括PS在内的多参数分析提供了良好的方法基础。研究表明该方法标本处理简单 ,结果分析简便、准确 ,重复性好。作者还通过低温、低渗或激活剂的方法制备了几种膜表面分子标记显著不同的血小板应用于FCM分析 ,不仅证实了所建立的FCM分析方法在各种不同膜表面分子标记的血小板分析中的实用性 ,又表明了文中制备的这 4种不同膜表面分?

ω-3脂肪酸及磷脂酰丝氨酸的益智作用研究进展

磷脂酰丝氨酸(PS)与ω-3脂肪酸在大脑中具有保护神经细胞及改善大脑信号传导功能的作用,但目前两者的作用机理尚不清楚。主要综述了DHA及磷脂酰丝氨酸在改善大脑功能方面的作用及相互协调作用,DHA可以促进大脑对磷脂酰丝氨酸的吸收,同时单纯服用DHA,不仅会增加胃肠的负担,而且也容易氧化,导致吸收效率下降,较有效的方法是将其与磷脂酰丝氨酸结合而相互发挥作用。

生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的研究进展

近年来的研究表明,磷脂酰丝氨酸具有预防老年痴呆症、改善记忆力等功能。但是天然存在的磷脂酰丝氨酸很少,提取工艺繁杂,并且产品安全性受到人们质疑。生物酶法制备磷脂酰丝氨酸具有反应条件温和、环境友好、产品质量好等优点,近年来受到越来越多的关注。从用于生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的酶和反应体系等方面综述了国内外生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的相关研究进展,并指出开发稳定高效的酶制剂和探寻绿色安全的新工艺等措施有助于促进生物酶法工业化生产磷脂酰丝氨酸。

Annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性

目的 :研究 annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性。方法 :在大肠杆菌中表达 annexin B1蛋白 ,经离子交换层析得纯品 ;选用 U937细胞 ,以过氧化氢诱导凋亡 ,制备小鼠洗涤血小板 ,凝血酶激活 ;以异硫氰酸荧光黄 (FITC)标记的 annexin B1检测凋亡细胞和活化血小板。结果 :FITC标记的 annexin B1既能与凋亡细胞特异性结合 ,又能与活化血小板特异性结合 ,结合活性接近 annexin 。结论 :研究表明 annexin B1可结合于凋亡细胞和活化血小板膜上的磷脂酰丝氨酸 (PS) ,而非其他膜成分 ,也进一步阐明 annexin

磷脂酰丝氨酸合成酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达

应用PCR技术从Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830)中扩增到大小为1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体pBES,获得重组质粒pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104。经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104(pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为52kDa,酶联比色法检测酶活力为1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础。

磷脂酶D催化大豆磷脂合成磷脂酰丝氨酸工艺

磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)是一种具备独特生理功能的稀有磷脂,自然界中含量稀少,分离提取难度大。利用磷脂酶D(PLD)催化大豆磷脂进行磷脂酰基转移反应合成PS具有条件温和、产品收率高等显著优点,受到广泛重视。本文研究采用固定化磷脂酶D催化合成PS的工艺。磷脂酶D催化大豆磷脂合成PS是油-水两相界面反应,通过采用吸附-交联法将PLD固定化于硅藻土载体上,取得了PS收率达57%的结果。采用硅胶柱色谱对粗产品进行分离纯化,PS纯度高达85%。