仿生信号转导体系的构建:囊泡表面磷脂信号分子诱发的乳酸脱氢酶的激活

以细胞肌醇磷脂信号转导途径为原型 ,在合成肽脂囊泡 (人工细胞膜模型 )上 ,利用天然磷脂为信号分子 ,成功地激活了处于囊泡表面的乳酸脱氢酶 .为此 ,将 1,2 二 -十四烷基磷脂酰乙醇胺等天然磷脂嵌入合成肽脂N ,N 二 -十六烷基 Na 6 三甲胺基己酰基 L 甘氨酰胺囊泡中 ,制备了稳定的混合双层膜囊泡 ,用透射电子显微照相、动态光散射及差示扫描量热等手段确认了混合囊泡的形态及粒径分布 .以磷酸吡哆醛等维生素B6类化合物为信号分子激活剂 ,利用它们与天然磷脂形成复合体 ,进而与Cu2 + 形成强的金属配合物的性质 ,实现了对处于囊泡表面、被Cu2 + 抑制的乳酸脱氢酶的激活 ,构建了一个新的仿生信号转导体系 .紫外 -可见光谱实验证实了以上结果 .此外 ,结果还表明囊泡表面的疏水作用和静电引力是促进天然磷脂 -磷酸吡哆醛复合体形成的主要因素 .

溶血磷脂酸——一种具有多种生物学功能的磷脂信号分子

溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)是迄今发现的一种最小、结构最简单的磷脂,它是真核细胞磷脂生物合成早期阶段的关键性前体,甘油磷脂代谢的中间产物。60年代初,Vogt等人在实验中观察到,LPA能够引起免离体肠平滑肌收缩。这一现象使人们认识到LPA不仅仅是生物膜的组成成分可能还具有某些生物学功能。随后越来越多的研究表明:LPA作为一种细胞间的磷脂信使,可以激活G蛋白偶联受体,引起生长激素样作用,从而产生广泛的生物学效应。LPA对细胞的生长、增殖、分化及细胞内信息传递产生多种影响,在维持机体正常的生理功能。

合成肽脂与天然磷脂混合囊泡的制备及表征

将天然磷脂1,2-二-十四烷基磷脂酰乙醇胺(DMPE)与合成肽脂N,N-二-十六烷基-Nα-6-三甲胺基己酰基-L-甘氨酰胺混合,制得了混合双层膜囊泡,对制备过程中的超声条件进行了探讨.用透射电子显微照相、动态光散射及差示扫描量热等手段表征了混合囊泡的形态及粒径大小,确认了混合囊泡的稳定性.

磷脂酶C信号转导分子在肺炎链球菌触发人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排中的作用

目的 研究肺炎链球菌是否可触发肺Ⅱ型上皮细胞(A549)微丝肌动蛋白F-actin重排,进而导致对A549细胞的侵袭及其与磷脂酶C信号转导分子的关系。方法 采用F-actin特异性FITC-phalloidin荧光染料,观察肺炎链球菌作用A549细胞前后的F-actin细胞骨架重排情况,依照重排百分率得分标准以(％)表示;用F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D预处理A549细胞,观察肺炎链球菌对A549细胞的侵袭数;使用PLC信号转导分子抑制剂U73122预处理A549细胞,观察其与F-actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系。结果 肺炎链球菌作用A549细胞后,经FITC-phalloidin荧光染色,F-actin细胞骨架呈亮黄色圆形聚集;F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低肺炎链球菌对A549细胞的侵袭,在其浓度为0.25μg/ml时,未得到可测的细菌数;PLC信号转导分子抑制剂U73122可部分抑制A549细胞F-actin细胞骨架重排,并与F-actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系,其相关系数为rPLC=-0.98(P<0.05)。结论 肺炎链球菌可通过激活A549细胞PLC信号转导分子而触发A549细胞F-actin细胞骨架重排,而侵袭A549细胞。