复合磷脂脂质体的研究进展

脂质体是药剂学中的一类常规释药系统,可以用作难溶性药物的给药剂型,提高其生物利用度。但以往的普通脂质体存在包封率低、不稳定、长期贮存时药物易产生泄漏等问题,导致脂质体制剂产品研发受到一定限制。近年来,一种新型脂质体——复合磷脂脂质体开发出来。同传统脂质体相比,复合磷脂脂质体具有包封率和载药量较高、稳定性较好、长期贮存时药物不产生泄漏等优点,具有较好应用前景。本文主要介绍了复合磷脂脂质体的组成、结构、制备方法、作用特点以及近年在药剂学中的应用进展。

卵磷脂脂质体对老龄高脂兔动脉粥样硬化的影响

目的 了解口服卵磷脂脂质体对老龄高脂兔动脉粥样硬化的影响。方法 选择 5 0只新西兰兔 ,按体重、♀♂平均原则分为老龄用药组 (高脂食 +卵磷脂脂质体 ,A组 )、成年用药对照组 (高脂食 +卵磷脂脂质体 ,B组 )、老龄高脂对照组 (C组 )、成年高脂对照组 (D组 )、老龄空白对照组 (E组 )。每组 10只 ,老年兔龄 30mon ,成年兔龄 13mon。喂养15d后 ,A、B组分别隔日经口灌入卵磷脂脂质体溶液 ,C、D、E组灌入等量生理盐水 ,3mon后抽血 ,测定血清总胆固醇、甘油三脂、脂蛋白胆固醇、游离脂肪酸及主动脉条粥样硬化面积。结果 与C、D组比较 ,A、B组兔高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C及HDL2 C )浓度明显增加 ;极低密度脂蛋白胆固醇 (VLDL C )、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、总胆固醇(TC)、甘油三脂 (TG)、游离脂肪酸 (FFA)浓度明显降低 (P<0 0 5～ 0 0 1) ,主动脉粥样硬化面积显著缩小 (P <0 0 5～0 0 1)。A、B两组间比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 口服卵磷脂脂质体能改善老龄高脂兔脂代谢 ,减轻动脉粥样硬化。

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体HPLC指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法建立马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的HPLC指纹图谱,并考察制剂工艺稳定性,为其质量控制提供新方法。方法以LicrospherC18(4.6 mm×300 mm,5μm)柱为色谱柱,流动相为乙腈(A)-水∶0.2%乙酸∶0.2%三乙胺(B),梯度洗脱,检测波长为254 nm;采用指纹图谱相似度软件进行数据分析。结果确定了马钱子总生物碱复合磷脂脂质体8个共有峰,通过方法学考察,精密度、稳定性、重现性试验RSD均小于3%,10批马钱子复合磷脂脂质体相似度均高于0.95。结论马钱子总生物碱复合磷脂脂质体制剂工艺稳定,指纹图谱技术适用于马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的质量评价。

大豆磷脂脂质体对培养的缺血心肌细胞膜损伤保护作用的电镜观察

用培养乳鼠心肌细胞的缺血模型，观察了大豆磷脂脂质体抗心肌缺血膜损伤的效应。结果显示，大豆磷脂脂质体具有明显减轻心肌缺血所致的心肌细胞质膜缺损、线粒体肿胀、线粒体无定形颗粒沉积及心肌细胞膜酶（Ｃａ^（＋＋）、Ｍｇ^（＋＋）－ＡＴＰ_（ａｓｅ））活性降低的作用。本研究提示，大豆磷脂脂质体具有保护心肌膜完整性及维护其功能的作用。

不同剂量卵磷脂脂质体对高血脂兔脂代谢的影响

目的:探讨不同剂量卵磷脂脂质体对高脂兔脂代谢的影响。方法:选择40只新西兰兔,各组兔体重、雌雄平均分为低剂量治疗组(高脂饲料+卵磷脂脂质体400 mg·kg-1)、高剂量治疗组(高脂饲料+卵磷脂脂质体1 500 mg·kg-1)、高脂对照组(单纯高脂饲料)、正常对照组(非高脂饲料),每组10只。喂养7 d后,低剂量治疗组及高剂量治疗组,隔日分别经口灌入不同浓度卵磷脂脂质体,同时各对照组经口灌入等量0．9％氯化钠溶液。3个月后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C、HDL2-C)、游离胆固醇(FC)。结果:低剂量及高剂量治疗组实验兔血清TC、TG浓度均明显降低(P<0．05-0．001),而低剂量治疗组HDL-C,HDL2-C浓度明显低于高剂量治疗组(P<0．05～0．001)。结论:不同剂量卵磷脂脂质体调整脂代谢作用不同,加大剂量有明显增加高脂兔HDL-C和HDL2-C浓度作用。

包裹天然骨架CpG ODN和HBsAg的非磷脂脂质体疫苗的免疫效果

非磷脂脂质体NovasomeR○(Np )是由Brij5 2、胆固醇和油酸组成 ,可作为同时传递佐剂和抗原的载体。我们将HBsAg与天然骨架CpGODN (phosphodiesterCpGODN ,pdCpGODN )包裹于Np后免疫BALB/c小鼠 ,检测其免疫效果。结果显示 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np在小鼠中诱导了很高滴度的抗 HBs抗体产生并诱生了HBsAgS2 8 3 9特异性的CTL ,而铝佐剂组和仅包裹HBsAg的Np组诱生的抗体滴度较低 ,未检测到CTL活力。抗体亚类分析结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np诱生的免疫应答类型与pdCpGODN剂量有关 ,较低剂量 (2 4 μgpdCpGODN )诱生的为IgG2a为主的Th1型应答 ,而较高剂量(4 7μgpdCpGODN )诱生的是Th1/Th2混合型应答。铝佐剂和仅包裹HBsAg的Np组诱生的是以IgG1为主的Th2型应答。此外 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np免疫小鼠脾淋巴细胞在体外HBsAg刺激培养后特异性增殖并分泌高水平的IFN γ。这些结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np能增强HBsAg的免疫原性 ,诱生体液 /细胞免疫均衡应答 。

维生素E和维生素C对大豆磷脂脂质体的抗氧化作用

利用分光光度法，研究了不同含量维生素Ｅ或维生素Ｃ对大豆磷脂脂质体的抗氧化保护作用及维生素Ｃ的存在和温度的变化对维生素Ｅ抗氧化作用的影响．结果表明，适量维生素Ｅ可明显抑制磷脂脂质体的氧化，含量越高，抑制作用越强；大量维生素Ｃ虽可起到抗氧化作用，但少量维生素Ｃ在铁离子的存在下却可起到促氧化作用；维生素Ｃ的存在对维生素Ｅ的抗氧化作用具有明显的协同作用；

非磷脂脂质体佐剂在免疫血清制备中的应用研究

目的研究非磷脂脂质体在免疫血清制备中的佐剂效应。方法用无菌人血清、人血清+完全福氏佐剂(CFA)、人血清+非磷脂脂质体(NPL)分别经背部皮下多点注射免疫家兔制备免疫血清,采用双向免疫扩散和EL ISA间接法检测免疫血清抗体效价。结果①人血清+CFA组和人血清+NPL组血清抗体效价均明显高于无菌人血清组;②在免疫血清的制备中NPL的佐剂作用与CFA的作用相当,但其毒性作用明显低于CFA。结论在免疫血清制备中,NPL佐剂可以代替CFA。

丹参总酚酸复合磷脂脂质体制备工艺研究

目的采用复合磷脂脂质体技术以氢化大豆磷脂(HSPC)和大豆磷脂(SPC)为膜材制备丹参总酚酸复合磷脂脂质体,并研究其最佳制备工艺。方法采用逆向蒸发法制备复合磷脂脂质体,测定其粒径与粒径分布,以脂质体的成型性与包封率等为评价指标,研究丹参总酚酸脂质体的制备工艺。结果磷脂与胆固醇质量比为3∶1、有机相与水相体积比为4∶1、药脂比为1∶15、磷脂质量浓度为12.5 mg·mL^(-1)时得到的丹参酚酸B与丹参总酚酸的平均包封率分别为60.08%和69.45%,其中载药量以丹参总酚酸计达2.92%。结论该复合磷脂脂质体制备方法准确可靠,工艺合理稳定。

HPLC-ELSD法同时测定复合磷脂脂质体中SPC、HSPC、胆固醇含量的方法及其应用

目的:考察同时检测复合磷脂脂质体中大豆卵磷脂(SPC)、氢化大豆磷脂(HSPC)、胆固醇含量的方法。方法:利用HPLC-ELSD法测定脂质体中各组分的含量:C18色谱柱,流动相:A:4 mM乙酸铵缓冲液(pH=4.0),B:4 mM乙酸铵甲醇溶液;梯度洗脱:10%A^90%B 10 min,100%B 40 min,10%A^90%B 5 min,ELSD检测器。结果:精密度及回收率实验表明,HSPC、SPC、胆固醇的RSD值分别为1.9%、2.0%、1.5%,回收率分别为98.6%、99.3%、98.5%,由此可知本方法精密度、回收率高,符合样品检测要求。用本方法考察复合磷脂脂质体在制备过程中各组分含量的变化可知,脂质体各组分比例变化不显著,说明复合磷脂脂质体在蒸发成膜、探头超声和高压均质挤出的工艺下稳定;同时考察不同储存温度下脂质体中各组分含量的变化,可知样品于4℃条件储存各组分比例变化不明显。结论:所建立的检测方法可快速、高效、准确、同时测定脂质体中SPC、HSPC、胆固醇的含量,适用于脂质体制备工艺的验证与产品质量的检查。

大豆磷脂脂质体对四氯化碳致培养肝细胞损害的保护作用

目的 观察不同浓度大豆磷脂脂质体对四氯化碳(CCl4)导致肝细胞损伤的保护作用。方法 采用终浓度为8mmol/L四氯化碳作用于培养的小鼠肝细胞3h ,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)以及细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果 大豆磷脂脂质体可使由四氯化碳导致损伤的肝细胞培养液中的LDH释放明显减少(P <0 . 0 1) ,肝细胞中SOD含量明显升高(P <0 .0 1) ,MDA含量明显减少(P <0 . 0 1)。结论 大豆磷脂脂质体对四氯化碳致肝细胞损伤具有明显的保护作用。

卵磷脂脂质体开发与应用进展

卵磷脂脂质体作为一种优良的载体可携带多种物质,在医药行业用作药物载体和免疫佐剂,在日用 化妆品行业用作美容化妆品原料和皮肤病治疗。本文介绍了卵磷脂脂质体的性能、制备、应用现状与 发展趋势。

卵磷脂脂质体对高脂血症兔动脉成形术后狭窄的影响

为了解口服卵磷脂脂质体对动脉粥样硬化兔动脉成形术后再狭窄的影响 ,将 5 0只新西兰兔随机分为五组。观察组、高脂组、假手术组进食高脂饲料 ,手术组和对照组进食普通饲料。观察组、手术组及高脂组分别行左侧髂动脉成形术 ,观察组在动脉成形术后给予卵磷脂脂质体溶液干预。结果发现 ,与高脂组比较 ,观察组左侧髂动脉内径显著增大 ,血管壁增厚 ,胆固醇含量明显减少 ,主动脉粥样硬化面积明显减小 ,高密度脂蛋白胆固醇浓度明显增加 ,极低密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇及甘油三酯浓度明显降低 (P均 <0 .0 5 )。结果提示 。

大豆磷脂脂质体对缺血再灌注家兔中性粒细胞及心肌梗塞的作用

本研究观察了阻断家兔冠脉左室支45min后再灌注3h可导致中性粒细胞(PMN)百分比升高,心肌梗塞加重直至功能下降。补充大豆磷脂脂质体后,使中性粒细胞下降,心梗范围减小,实验表明脂质体在心肌缺血再灌注中使心梗范围减小,可能与抑制PMN升高有关。

携硒、锌、维生素E的大豆磷脂脂质体对心肌缺血大鼠治疗作用的探讨

研究表明,静注大豆磷脂脂质体(SPL)对缺血_再灌注心肌膜损伤具有明显的保护作用.其口服制剂是否仍具有相同的效应尚未展开研究.2002年4月至2003年7月,我们以异丙肾上腺素(ISO)复制大鼠心肌缺血模型,以SPL包裹硒、锌、维生素E制成口服液(下称SPL混合液)灌服,以探讨其对实验性心肌缺血的保护效应及机制,为临床研究应用提供实验依据.

大豆磷脂脂质体对再灌注家兔白细胞及心功能的影响

实验性阻断家兔冠脉左室支45分钟后再灌注三小时可致白细胞升高,中性粒细胞百分比上升,左室功能降低.补充大豆磷脂脂质体可抑制上述变化并改善左室功能.大豆磷脂脂质体对左室功能的改善可能与抑制白细胞升高有关.

大豆磷脂脂质体对缺血十二指肠肌膜酶活性的影响

目的：研究大豆磷脂脂质体对缺血十二指肠肌膜酶活性的影响。方法：利用十二指肠缺血模型，观察大豆磷脂脂质体对十二指肠肌膜酶活性的影响。结果：在缺血时补充大豆磷脂脂质体，可抑制Na+－K+ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶活性的降低，提高起氧化物歧化酶的活性。结论：大豆磷脂脂质体对缺血十二指肠肌膜酶活性的损伤具有一定的保护作用，作用机制与大豆磷脂时膜的修饰作用有关。

大豆磷脂脂质体对谷氨酸所致体外神经细胞损伤的保护作用

目的:观察大豆磷脂脂质体对谷氨酸引起培养神经细胞兴奋毒性损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:①实验于2004-11/2005-06在锦州医学院生化实验室完成。选用清洁级新生0～1dSD大鼠12只,取大脑皮质神经细胞进行原代培养8～10d后,随机分为3组:正常对照组、损伤组和大豆磷脂脂质体保护组。损伤组加入谷氨酸(终浓度1×10-4mol/L)作用3h,造成神经细胞的损伤,大豆磷脂脂质体保护组在谷氨酸损伤处理的同时加入0.2,0.4,0.8,1.6g/L的大豆磷脂脂质体。②参照由南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书测定培养液中乳酸脱氢酶活力和一氧化氮含量。培养神经细胞中丙二醛含量、超氧化物歧化酶及一氧化氮合酶活力测定参照由南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书进行,蛋白质定量用考马斯亮兰试剂盒测定。③多样本均数检验采用方差分析的方法,方差分析差异有显著性后再进行样本的两两比较(Q检验)。结果:①培养上清液中乳酸脱氢酶活力、一氧化氮含量及培养神经细胞一氧化氮合酶活力:损伤组明显高于正常对照组(P<0.01),大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显低于损伤组(P<0.01)。②培养神经细胞丙二醛含量:损伤组明显高于正常对照组(P<0.01),大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显低于损伤组(P<0.01)。③培养神经细胞超氧化物歧化酶活力:损伤组明显低于正常对照组(P<0.01),大豆磷脂脂质体各质量浓度保护组明显高于损伤组(P<0.01)。大豆磷脂脂质体保护作用随着其质量浓度增加(0.2～0.8g/L)而增强,但当剂量达到一定浓度(1.6g/L),该保护作用不再随着浓度的升高而增强。结论:大豆磷脂脂质体对谷氨酸引起的培养神经细胞兴奋毒性损伤具有显著的保护作用,且存在大豆磷脂脂质体质量浓度依赖性;该种保护作用发生机制可能与大豆磷脂脂质体抗脂质过氧化作用有关。

培养心肌细胞内的SDH图象分析——大豆磷脂脂质体对缺血再灌心肌膜损伤的影响

琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性在判断心肌缺血,再灌性损伤中起重要作用。本文通过IBAS图象分析系统对缺血再灌的培养心肌细胞内的SDH定量评估,以求探讨大豆磷脂脂质体对心肌缺血再灌性损伤的保护作用。结果表明,在缺血及再灌组的心肌细胞内出现较强的SDH损伤性反应,大豆磷脂脂质体能明显减轻这种反应,提示大豆磷脂脂质体对缺血及缺血/再灌心肌具有明显的保护作用。

响应曲面法优化姜黄素-原花青素复合磷脂脂质体的制备

目的筛选具有协同增效的天然抗氧化剂——姜黄素-原花青素,运用响应曲面法优化姜黄素-原花青素复合磷脂脂质体(curcumin-proanthocyanidins composite phospholipid liposome,Cur-PCCPL)的制备工艺。方法考察大豆卵磷脂(soya phosphatidylcholine,SPC)与氢化大豆卵磷脂(hydrogenated soya phosphatidylcholine,HSPC)的质量比、卵磷脂与胆固醇质量比和药脂质量比对CurPC-CPL包封率的影响,采用Box-Behnken设计实验对逆相蒸发法制备复合磷脂脂质体处方工艺进行优化分析,最后对其形态、粒径、稳定性、抗氧化性进行评价。结果最优的工艺条件为∶SPC与HSPC质量比为8. 73∶1. 00、卵磷脂与胆固醇质量比为7. 10∶1. 00、药脂质量比为1. 00∶30. 65、姜黄素与原花青素的质量比为1∶3。理论包封率:姜黄素为82. 68%、原花青素为68. 65%。在此条件下的实际包封率:姜黄素为81. 74%、原花青素为66. 96%,接近理论预测值。结论复合磷脂脂质体对姜黄素和原花青素的包载提高了复合天然抗氧化剂的稳定性,为协同抗氧化在实际中的应用提供理论依据。