磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位β蛋白在结直肠癌组织中的表达及预后影响因素分析

目的 探讨磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位β(PIK3CB)蛋白在结直肠癌组织中的表达及预后影响因素分析。方法 选取153例结直肠癌患者,取结直肠癌组织及相应癌旁组织,采用免疫组化法检测PIK3CB蛋白表达情况,比较不同临床特征结直肠癌患者结直肠癌组织中PIK3CB蛋白的表达情况。结直肠癌患者预后的影响因素采用二元Logistic回归分析。结果 结直肠癌组织中PIK3CB蛋白阳性表达率为75.16%,明显高于癌旁组织的26.14%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。分化程度为低中分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴转移、有远处转移结直肠癌患者结直肠癌组织中PIK3CB阳性表达率分别高于分化程度为高分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。截至随访结束,153例结直肠癌患者中,预后不良41例,预后良好112例。二元Logistic回归分析结果显示,TNM分期为Ⅲ期、淋巴结转移及PIK3CB阳性表达均是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论 PIK3CB蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率较高,且PIK3CB阳性表达是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素。

miRNA-375靶向磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨miRNA-375靶向磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α(PIK3CA)对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响。方法选取宫颈癌细胞系Si Ha,分别转染mi RNA-375模拟基因、mi RNA-375抑制剂、对照模拟基因及对照抑制剂,采用RT-PCR法检测mi RNA-375表达,Western blot检测PIK3CA蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力。双荧光素酶报告基因实验验证mi RNA-375与PIK3CA的靶向关系。结果转染miRNA-375模拟基因后miRNA-375表达上调,PIK3CA蛋白表达降低(P<0.05);转染miRNA-375抑制剂后miRNA-375表达降低,PIK3CA蛋白表达增强(P<0.05)。转染miRNA-375模拟基因后SiHa细胞增殖活性、迁移能力降低(P<0.05);转染miRNA-375抑制剂后SiHa细胞增殖活性、迁移能力增强(P <0.05)。miRNA靶基因预测软件检测结果显示,miRNA-375能作用于PIK3CA 3'-UTR。与转染对照模拟基因比较,共转染miRNA-375模拟基因与PIK3CA-WT可使SiHa荧光素酶活性降低(P <0.05)。结论 miRNA-375可抑制宫颈癌细胞增殖及迁移,其机制可能与靶向调控PIK3CA有关。

大肠癌转移和复发与KRAS及磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α基因突变的关系

目的 检测大肠癌组织中KRAS与磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位oα（PIK3CA）突变,探讨其与大肠癌转移、复发之间的关系.方法 收集大肠癌标本94例,提取DNA后行KRAS和PIK3CA基因测序,分析其临床病理特征,探讨两者之间的关系;并对患者进行为期3年的随访,分析基因突变与转移、复发的关系.结果 KRAS基因突变31例,远处转移率高于野生型（61.3％比34.9％）;PIK3CA基因突变15例,远处转移率高于野生型（73.3％比38.0％）;两者共同突变7例,均未突变55例,共同突变者转移率高于均未突变者（71.4％比29.1％）;术后3年随访KRAS基因突变型转移率和复发率均高于野生型（93.1％比69.5％,65.5％比39.0％）,PIK3CA基因突变型转移率和复发率亦均高于野生型（93.3％比74.0％,73.3％比42.5％）;上述结果差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 大肠癌组织中KRAS和PIK3CA基因突变型远处转移率和复发率高,对大肠癌的远处转移和复发可能有一定的预测价值.

肺鳞癌组织中表皮生长因子受体和磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α基因突变分析及其与临床病理特征的关系

肺癌是当今世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，其中约80％-85％的肺癌为非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC），主要为鳞癌和腺癌两种亚型。40％～80％的NSCLC过表达表皮生长因子受体（epidermal growth factorreceptor，EGFR），其激活酪氨酸激酶，使肿瘤细胞增殖分裂并永生化。近年来，随着分子靶向治疗的发展，

磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ基因的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ（PIK3CD）基因编码催化亚基p110δ，其在经典通路磷酸肌醇3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）中具有重要的作用，日益受到人们的关注和有关学者的重视。但是目前国内对PIK3CD基因的研究不多，因此本文就近年来PIK3CD基因的研究进展进行综述，旨在加深人们对PIK3CD基因的认识和理解。

非小细胞肺癌MET、KRAS、PIK3CA和BRAF基因突变状态与临床特征的关系分析

目的分析非小细胞肺癌原癌基因(MET)、Kirsten鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)、鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1(BRAF)基因突变状态与临床特征的关系。方法选择719例非小细胞肺癌患者,通过二代测序(NGS)检测患者的MET、KRAS、PIK3CA、BRAF,分析基因突变状态与临床特征的关系。结果MET基因突变的临床特征:男性患者13例,女性患者12例;<60岁患者8例,≥60岁患者17例;腺癌11例,非腺癌14例。KRAS基因突变的临床特征:男性患者15例,女性患者11例;<60岁患者8例,≥60岁患者18例;腺癌14例,非腺癌12例。PIK3CA基因突变的临床特征:男性患者12例,女性患者10例;<60岁患者9例,≥60岁患者13例;腺癌15例,非腺癌7例。BRAF基因突变的临床特征:男性患者11例,女性患者12例;<60岁患者13例,≥60岁患者10例;腺癌12例,非腺癌11例。结论非小细胞肺癌MET、KRAS、PIK3CA、BRAF基因突变状态与临床特征存在一定关系。

PI3K/Akt相关基因多态性与胃癌含铂化疗方案疗效的关系分析

目的探讨PI3K/Akt信号通路中第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)和磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α(PIK3CA)的单核苷酸多态性(SNPs)与晚期胃癌含铂化疗方案疗效的关系。方法采用Haploview软件从国际人类基因组单体型图计划(Hap Map)公布的北京汉族人群基因型数据库中筛选出PTEN基因的4个标签SNPs(rs532678、rs926091、rs11202609、rs17431184)及PIK3CA基因的3个标签SNPs(rs2459693、rs3729679、rs12494623)。收集2012年1月至2015年12月158例晚期胃癌患者外周血标本并采用Sequenom Mass Array质谱阵列技术对待检样本的以上7个SNPs进行基因分型;采用RECIST 1.1版标准评价以上患者接受含铂化疗方案2个周期的近期疗效,以CR+PR为敏感组、SD+PD为不敏感组,分析化疗敏感情况与以上SNPs位点基因型、等位基因的关系。结果 158例晚期胃癌患者PTEN及PIK3CA基因7个SNPs的基因型及等位基因分布均符合Hardy-Weinberg平衡。158例患者经2个周期化疗后共有化疗敏感者83例(CR 3例、PR 80例)和不敏感者75例(SD 42例、PD 33例)。PIK3CA rs3729679、rs12494623 SNPs与晚期胃癌含铂化疗方案的敏感性有关,其中携带突变等位基因者(rs3729679 G,rs12494623 T)的化疗敏感率较低,且化疗不敏感的风险显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);其余PIK3CA SNPs和PTEN SNPs位点基因分布与化疗敏感率及不敏感风险均无关(P>0.05)。结论 PIK3CA rs3729679、rs12494623 SNPs与晚期胃癌含铂方案化疗敏感性有关,且携带rs3729679 G或rs12494623T等位基因者的化疗不敏感风险较高,对于预测晚期胃癌含铂化疗方案的疗效有一定价值。

ARID1A､PIK3CA､Ki-67在不同病变级别､浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达及对肿瘤复发的影响

目的探讨AT丰富结合域1 A(ARID1 A)､磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α基因(PIK3 CA)､细胞增殖核抗原67(Ki-67)在不同病变级别､浸润性膀胱尿路上皮癌(BUC)中的表达情况及对肿瘤复发的影响。方法选取2018年5月至2019年8月保定市第二医院收治的107例BUC患者作为研究对象。均通过手术或膀胱镜活检取癌组织,并取其中28例患者的癌旁正常组织标本(距癌旁>2cm)作为对照。对比不同组织中ARID1 A､PIK3 CA､Ki-67蛋白表达。治疗后随访6个月,根据是否复发将患者分为复发组(n=27)和未复发组(n=80),分析BUC复发的影响因素,以及ARID1 A､PIK3 CA､Ki-67蛋白表达与病变分级､临床分期的关系。结果BUC患者癌组织ARID1 A蛋白阳性率低于癌旁正常组织,PIK3 CA､Ki-67蛋白阳性率高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05);复发组年龄､病变级别､临床分期､病灶个数､PIK3 CA蛋白阳性表达率与未复发组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);两组ARID1 A､Ki-67蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);随着年龄､病变级别､临床分期､病灶个数､PIK3 CA蛋白阳性表达率升高,BUC患者复发风险增加(P<0.05);BUC患者病变级别､临床分期越高,PIK3 CA､Ki-67蛋白阳性表达率越高,ARID1 A蛋白阳性表达率越低(P<0.05)。结论BUC患者癌组织中ARID1 A､PIK3 CA､Ki-67蛋白表达明显异常,且与病变级别､临床分期密切相关,其中PIK3 CA蛋白阳性表达可明显增加复发率。

电针水沟穴对大脑中动脉闭塞大鼠脑缺血后微小RNA-126及靶基因的影响

目的观察电针水沟穴对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠脑缺血后微小RNA-126（miR-126）及其靶基因磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚单位（PIK3R2）mRNA、出芽相关蛋白-1（SPRED1）mRNA表达的影响，从血管新生角度探讨电针治疗脑缺血的可能机制。方法将20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组、治疗组，每组5只。参照改良Longa线栓法复制MCAO大鼠模型，假手术组不插入线拴。制模后治疗组于水沟穴（大鼠唇裂鼻尖下1mm中处，向上斜剌1mm）与右耳根部皮肤接G6805—1A型治疗仪进行电针治疗，1mA电流、2Hz，持续留针30min，连续治疗3d；正常组、假手术组、模型组制模后不进行处理。采用Berderson评分评价大鼠神经功能缺损程度；用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-126及PIK3R2、SPRED1的mRNA表达。结果与正常组比较，模型组大鼠有不同程度的神经功能缺损，Berderson评分明显增高（分：11．20±1．64比0，P〈0．01），治疗后Berderson评分较模型组明屁降低（分：7．20±1．48比11．20±1．64，P〈0．01）。模型组miR-126、PIK3R2及SPRED1的mRNA表达均较正常组明显升高[miR-126（2^-△△Cr）：1．13±0．48比0．16±0．12．PIK3R2mRNA（2^-△△Cr）：12．03±6．09比0．42±0．33，SPRED1mRNA（2^-△△Cr）：8．77±3．85比0．21±0．40，均P〈0．01]；治疗组miR-126表达较模型组明显升高（2^-△△Cr：1．93±0．81比1．13±0．48），PIK3R2、SPRED1的mRNA表达较模型组明照明显降低[PIK3R2mRNA（2^-△△Cr）：5．78±3．61比12．03±6．09，SPRED1mRNA（2^-△△Cr）：3．90±3．24比8．77±3．85，P〈0．05或JP〈0．01]。结论电针水沟穴能促大鼠脑缺血后神经功能体征的恢复，其机制可能与其调控miR-126及其靶基因从而促进了脑血管新生有关.

子宫内膜异位症相关性卵巢癌组织PIK3CA基因变异情况及蛋白表达变化

目的观察子宫内膜异位症相关性卵巢癌组织磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α基因(PIK3CA基因)基因变异情况和蛋白表达变化。方法收集30例子宫内膜异位症相关性卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织。采用PCR-单链构象多态性法检测PIK3CA基因的热点变异区是否存在变异;采用免疫组化SP法检测癌组织及癌旁组织的PIK3CA蛋白表达情况。结果癌组织和癌旁组织的第1、9和20外显子的构象无显著性差异(提示癌组织PIK3CA基因正常,并未出现变异)。癌组织PIK3CA蛋白阴性12例、弱阳性4例、阳性9例、强阳性5例,PIK3CA蛋白阳性表达率60.00%,癌旁组织分别为26、4、0、0例和13.33%,癌组织PIK3CA蛋白阳性表达率高于癌旁组织,P<0.05。结论子宫内膜异位症相关性卵巢癌患者癌组织PIK3CA基因无变异,但PIK3CA蛋白表达升高。

磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002对人胶质瘤U251细胞中HIF-1α表达和细胞生长的影响

目的:探讨低氧环境下磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositide3kinase,PI3K)抑制剂LY294002对人胶质瘤U251细胞中PI3K/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)信号通路下游缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA和蛋白的表达以及细胞生长、细胞凋亡、细胞黏附和侵袭能力的影响。方法:应用LY294002作用于低氧环境中的人胶质瘤U251细胞(低氧+LY294002组),以低氧环境中未加LY294002的细胞作为对照(低氧组)。CCK-8试剂盒检测U251细胞生长,FCM检测细胞凋亡百分比,黏附实验检测细胞黏附能力,侵袭实验检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法检测p-Akt蛋白的表达,RT-PCR和蛋白质印迹法检测HIF-1αmRNA及蛋白的表达。结果:LY294002能明显抑制p-Akt蛋白以及HIF-1αmRNA和蛋白的表达,与低氧组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。LY294002能抑制低氧环境中U251细胞的增殖,抑制效果在药物作用后第2～6天时最为明显(P<0.05)。低氧+LY294002组中细胞凋亡百分比明显高于低氧组(P<0.01),而细胞黏附和侵袭能力明显低于低氧组(P<0.01)。结论:LY294002能抑制低氧环境中PI3K/Akt信号通路下游HIF-1αmRNA及蛋白的表达,抑制人胶质瘤U251细胞的生长,促进细胞凋亡,并抑制细胞黏附和侵袭能力。

PIK3CA基因突变及PTEN表达缺失在乳腺癌中的临床意义

目的 :通过研究磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)突变和类脂磷酸酶(PTEN)蛋白表达缺失与临床病理指标间的关系,进一步探讨其在乳腺癌发生、发展中的意义。方法:收集86例经病理确诊的乳腺癌石蜡标本,检测PIK3CA基因第9、20外显子的突变以及PTEN的蛋白表达。分析上述两者之间的关系,以及与乳腺癌肿块大小、雌/孕激素受体(ER/PR)状态、表皮生长因子受体-2(Her-2)状态、淋巴结转移之间的关系。结果:PIK3CA基因突变为28例(占32.6%),突变与肿瘤大小无相关性(x2=0.104,P=0.747)。在ER/PR阳性、Her-2阳性、淋巴结转移阳性患者中PIK3CA突变发生率高,对比阴性者差异有统计学意义(x2=9.022,P=0.003;x2=5.752,P=0.016;x2=4.599,P=0.032)。在淋巴结阳性患者中,20号外显子的突变率为64.7%(11/17),与淋巴结阴性患者比差异有统计学意义(x2=4.809,P=0.028)。PTEN表达阴性者38例(占44.2%),而在PTEN阳性表达的48例中,ER/PR阳性患者明显高于ER/PR阴性患者(x2=17.667,P=0.000);有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(x2=12.884,P=0.000)。PTEN表达缺失与肿瘤大小、Her-2状态无关。结论:PIK3CA基因的突变及PTEN蛋白表达缺失是乳腺癌中常见的事件,PIK3CA突变多发生于激素受体阳性患者中,而PTEN表达缺失多发生于激素受体阴性患者。这些改变表明不同基因型肿瘤其发生发展的不同途径,同时提示不良的临床预后。

PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌细胞的促凋亡作用

探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达联合5-FU对大肠癌LoVo细胞的促凋亡作用。方法复苏培养PI3K p85α干扰组LoVo细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-LoVo)和LoVo对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,MTT法检测5-FU对两组细胞的半数抑制浓度(IC50),Annexin-FITC标记法检测细胞凋亡。结果 Western blot结果显示LoVo干扰组细胞PI3K p85α蛋白抑制率为59%,MTT结果显示干扰组细胞5-FU的IC50值(4.57±0.16)μmol/L明显低于对照组细胞5-FU的IC50值(8.07±0.30)μmol/L(P=0.000),细胞凋亡实验显示,干扰组细胞对5-FU诱导凋亡的敏感性增加(P=0.000)。结论 PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU可促进大肠癌LoVo细胞凋亡,为基因治疗和化学药物联合治疗大肠癌提供新的策略。

体外siRNA靶向抑制PI3Kp85α基因对人胃癌AGS细胞株的作用

目的探讨小干扰RNA(siRNA)技术沉默PI3Kp85α基因表达对人胃癌细胞株AGS增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法设计3条靶向抑制PI3Kp85α基因的siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3),分别转染人胃癌AGS细胞,并设阴性对照组及空白组。Western blotting检测siRNA序列对PI3Kp85α蛋白表达的影响。利用MTT实验、划痕迁移实验和Transwell侵袭实验检测下调PI3Kp85α水平对AGS细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果转染siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3的AGS细胞中PI3Kp85α蛋白水平均低于阴性对照组及空白组(P<0.05)。转染siRNA-3的AGS细胞PI3Kp85α蛋白表达降低最明显,抑制率达80%,故选择siRNA-3进行后续实验。转染24h后,PI3Kp85αsiRNA转染组细胞增殖能力明显低于对照组细胞(P<0.05)。24h体外划痕实验显示,PI3Kp85αsiRNA转染组的划痕愈合能力明显低于对照组(P<0.05)。Transwell实验显示,PI3Kp85αsiRNA转染组细胞的细胞穿膜数明显低于对照组(P<0.05)。结论通过siRNA能明显下调PI3Kp85α蛋白在胃癌细胞AGS中的表达,并抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

PIK3CA及GST-π在人骨肉瘤多药耐药细胞株MG-63/ADM中的表达

目的探讨人骨肉瘤MG-63细胞及多药耐药细胞株MG-63/多柔比星(ADM)中磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位(PIK3CA)和谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)的表达水平,探讨其与多药耐药的关系。方法体外培养MG-63细胞并通过ADM大剂量间隙作用法建立人骨肉瘤多药耐药MG-63/ADM细胞株,噻唑蓝(MTT)法检测两种细胞的耐药性;采用蛋白质印迹法(Western blot)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞中PIK3CA和GST-π的蛋白及mRNA表达水平,分析PIK3CA与GST-π蛋白表达的相关性。结果 MTT检测结果显示,MG-63/ADM细胞株对ADM明显耐药,IC50为(1.97±0.56)μg/ml,耐药指数为(11.35±2.40),均明显高于MG-63细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Western blot检测结果显示,MG-63/ADM细胞中PIK3CA和GST-π蛋白的相对表达量均明显高于MG-63细胞(P﹤0.01)。RT-PCR检测结果显示,MG-63/ADM细胞中PIK3CA mRNA和GST-πmRNA的相对表达量均明显高于MG-63细胞(P﹤0.01)。相关性分析结果表明,MG-63/ADM细胞中PIK3CA与GST-π蛋白的表达呈正相关(r=0.866,P﹤0.01)。结论 MG-63/ADM细胞较MG-63细胞的耐药性明显增强,人骨肉瘤耐药细胞株MG-63/ADM中PIK3CA和GST-π的mRNA和蛋白表达水平均明显高于人骨肉瘤MG-63细胞,提示PIK3CA及GST-π可能参与骨肉瘤多药耐药过程。

PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制

目的:探讨PI3Kp85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌SW480细胞促凋亡作用的机制。方法:复苏培养PI3Kp85α干扰组SW480细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480)和SW480对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,采用Western blot方法比较两组细胞中凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim表达的差异。结果:Western blot结果显示SW480干扰组细胞PI3Kp85α蛋白抑制率为84%,5-FU刺激48h后,PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480细胞组凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim的表达较SW480对照组细胞显著增加(P=0.000)。结论:PI3Kp85α蛋白表达缺失联合5-FU可通过增加促凋亡蛋白的表达促进大肠癌SW480细胞凋亡,为进一步阐明大肠癌细胞恶性增值的分子机制打下基础。

miRNA-375对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制研究

目的研究微小RNA-375(miR-375)对宫颈癌细胞系SiHa增殖能力和迁移能力的影响及相关机制。方法收集宫颈癌细胞系SiHa,将细胞随机分为A组(转染对照抑制剂)、B组(转染对照模拟基因)、C组(转染miR-375抑制剂)、D组(转染miR-375模拟基因)。通过实时荧光定量PCR法对SiHa细胞中miR-375的表达水平进行检测,并用免疫蛋白印迹法对磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α(PIK3CA)蛋白的表达水平进行检测;采用MTT法对SiHa增殖活性进行检测,并用划痕实验对细胞迁移能力进行检测;采用双荧光素酶报告基因实验对miR-375与PIK3CA的靶向关系进行验证。结果采用生物学信息软件检测结果发现,miR-375与PIK3CA 3’-UTR存在结合位点。双荧光素酶报告基因检测结果可见,miR-375模拟基因+PIK3CA-Mut共转染组荧光素酶活性与对照模拟基因+PIK3CAMut共转染组比较,并无显著差异(P>0.05);而相比对照模拟基因+PIK3CA-WT共转染组,共转染miRNA模拟基因和PIK3CA-WT后细胞荧光活性明显下降(P<0.05)。相比A组,C组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显下降(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞中miR-375的相对表达量明显增高(P<0.05)。经免疫蛋白印迹法检测结果可见,相比A组,C组SiHa细胞中PIK3CA蛋白的表达水平明显增高(P<0.05);相比B组,D组PIK3CA蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。细胞培养后1 d、2 d、3 d,相比A组,C组SiHa细胞增殖活性明显升高(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。划痕实验结果可见,相比A组,C组SiHa细胞迁移能力明显增强(P<0.05);相比B组,D组SiHa细胞迁移能力明显减弱(P<0.05)。结论miR-375具有阻滞宫颈癌细胞增殖和迁移的作用,其作用机制可能与靶向调控PIK3CA密切相关。

二代测序检测乳腺癌PIK3CA、TP53、PTEN基因突变及其临床意义

目的:研究二代测序(NGS)检测乳腺癌磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)、肿瘤蛋白p53基因(TP53)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的突变及临床意义。方法:收集2015年7月—2018年12月苏州大学附属第一医院的81例乳腺癌组织。使用基于NGS的108基因panel对PIK3CA、TP53、PTEN这3个突变率最高的基因进行基因状态检测,再结合患者病理及临床资料进行分析。结果:在81例乳腺癌标本中,PIK3CA基因突变率为58.02%,TP53基因突变率为60.49%,PTEN基因突变率为11.11%。3个基因总突变率为87.65%。PIK3CA基因突变率与乳腺癌患者相关临床病理因素无明显相关(P>0.05)。ER阴性或PR阴性或HER-2阳性的患者更容易出现TP53基因突变(P=0.001、0.002、0.028);组织学分级差的患者更易伴随TP53突变(P<0.001);Ki67≥15%的患者更容易伴随TP53突变(P=0.022)。PTEN基因突变率与PR阴性有关(P=0.025)。结论:TP53突变与ER或PR阴性、组织学分级较差、Ki67较高有关,提示预后较差。NGS作为近两年发展起来的一种比较先进的测序方法,可有效筛选乳腺癌相关基因突变,为临床医师提供有效信息,由此促进乳腺癌迈入精准治疗,改善患者预后。