妊娠合并甲状腺功能减退患者血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4表达水平及与血脂代谢的关系

目的 探讨妊娠合并甲状腺功能减退患者血清白脂素(Asprosin)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(Glypican 4)表达水平及与血脂代谢的关系。方法 选取2019年2月至2021年2月信阳市中医院收治的82例甲状腺功能减退症孕妇为观察组,选取80例同期体检的甲状腺功能正常孕妇为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4水平,比较两组甲状腺功能指标、血脂指标、血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4水平,比较两组妊娠结局。采用Pearson相关性分析血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4与血脂指标、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性。结果 观察组血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4水平均高于NC组(P<0.05);观察组血清促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺激素(FT4)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平均高于NC组,游离三碘甲腺原氨酸(FT3)水平低于NC组(P<0.05);血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4与总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、HOMA-IR水平呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平呈负相关(P<0.05);观察组妊娠不良结局发生率(24.39%)高于NC组(3.75%)(P<0.05);血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4水平与妊娠不良结局发生率呈正相关(P<0.05)。结论 妊娠合并甲状腺功能减退患者血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4水平升高,血清白脂素、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4与血脂、妊娠不良结局呈正相关。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)与原发性肝癌发生发展的关系,以及能否作为一个新的肝癌预警分子。方法肝癌及癌旁组织取自160例术前未经放疗、化疗的原发性肝癌患者的手术切除标本,应用免疫组织化学SP法检测GPC3在癌及癌旁组织中的表达,分析GPC3表达与患者性别(男性89例,女性71例)、年龄(≤50岁102例,>50岁58例)、血清HBsAg(阳性102例,阴性58例)、甲胎蛋白(<300μg/L61例,≥300μg/L99例)、肿瘤大小(直径≤5cm104例,>5cm56例)、肿瘤分化程度(高分化48例,中分化55例,低分化57例)的关系。结果GPC3表达阳性率肝癌组织为74.4%(119/160),癌旁组织为43.8%(70/160),肝癌组织明显高于癌旁组织(χ2=17.21,P<0.05)。GPC3表达与血清HBsAg、肿瘤大小及分化程度有明显相关性。GPC3表达阳性率血清HBsAg阳性者为79.4%(81/102),阴性者为65.5%(38/58,P<0.05);肿瘤直径≤5cm者为69.2%(72/104),>5cm者为83.9%(47/56,P<0.05);肿瘤组织高分化者为60.4%(29/48),中分化者为80.0%(44/55),低分化者为80.7%(46/57),高分化组织明显低于中低分化组织(P<0.05)。结论GPC3可能在原发性肝癌发生、发展中起重要作用,并有可能成为肝癌的预警分子。

癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体的制备及应用

目的制备抗癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)单克隆抗体,并初步应用。方法利用PCR方法,将GPC3基因重组到原核表达载体pET16b中,在大肠杆菌中表达,纯化后的GPC3融合蛋白对Balb/c小鼠脾内包埋免疫,取小鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合,应用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)和Western blot法筛选及鉴定分泌特异性抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,间接免疫荧光检测肝癌细胞中GPC3表达。结果成功构建了GPC3原核表达载体,在大肠杆菌中的诱导表达重组GPC3蛋白。应用单克隆抗体杂交瘤技术成功制备1株稳定分泌抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过Western blot鉴定具有高度的特异性,间接免疫荧光实验显示单克隆抗体能与HepG2细胞内GPC3特异性结合。结论成功制备出特异性抗人GPC3单克隆抗体。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝癌治疗中的应用进展

肝癌是常见恶性肿瘤之一,传统的肝癌治疗方法各自存在局限性。磷脂酰肌醇蛋白聚糖(GPC)3是一种细胞膜表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖,参与调控个体发育、细胞增殖和分化等过程,是一种肝癌特异性癌胚抗原。GPC3在肝癌发生、发展中的作用机制已成为研究热点。GPC3不仅在肝癌诊断方面有独特价值,在肝癌治疗方面更有重要作用。介绍了应用GPC3瘤苗、GPC3抗体、GPC3基因及靶向等治疗手段,为肝癌治疗提供了新的思路。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3和甲胎蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的通过联合检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)、甲胎蛋白(AFP)在原发性肝癌患者血清及组织中的表达情况,探讨对原发性肝癌的诊断价值。方法分别采用ELISA和免疫组织化学法检测57例肝癌、74例肝炎后肝硬化患者和47例正常血清和肝组织GPC3、AFP表达水平,根据不同临床病理指标进行分组比较。结果 (1)肝癌患者、肝炎后肝硬化及正常对照者血清中GPC3水平分别为(212.6±137.5)、(60.9±27.8)、(39.5±18.7)ng/ml;肝癌患者血清GPC3浓度显著高于正常及肝炎后肝硬化患者(t=4.503,P<0.05;t=6.045,P<0.05);血清GPC3、AFP联合检测原发性肝癌的敏感性和特异性为84.2%和95.7%,均显著高于任一单项检测(t=4.132,P<0.05;t=6.514,P<0.05);(2)GPC3在肝癌组织表达高于癌旁和正常肝组织(t=3.724,P<0.05;t=15.799,P<0.05);GPC3与肿瘤大小、肿瘤数目、HBsAg及AFP水平无明显相关,而与病理分级和临床分期有关;(3)AFP阳性肝癌血清GPC3阳性率为91.4%,而在AFP阴性肝癌中GPC3阳性率为59.1%。结论 GPC3联合AFP检测有助于提高原发性肝癌的确诊率,检测GPC3有助于提高AFP阴性患者肝癌的确诊率。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3和α-岩藻糖苷酶在原发性肝癌中的表达及其诊断意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)和α-岩藻糖苷酶(AFU)联合检测对诊疗原发性肝癌的效果。方法收集2010年5月至2011年1月,在该院确诊的原发性肝癌患者100例,肝硬化患者50例,健康体检者50人,将其分为原发性肝癌组(PHC)、肝硬化组和健康对照组。用酶联免疫法分别检测GPC3、AFU的浓度,用放射免疫法测出AFP的浓度。然后分别按照检测项目统计分析,各组阳性率比较采用χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结果 (1)PHC组与肝硬化组和对照组比较,GPC3和AFU的检测值差异有统计学意义(P<0.01)。肝硬化组与对照组比较,GPC3、AFU的检测值差异有统计学意义(P<0.01)。(2)100例PHC患者中GPC3阳性86例,阳性率为86.0%(86/100);肝硬化患者中阳性7例,阳性率为14.0%(7/50);健康对照组中阳性有1例,阳性率为2.0%(1/50)。PHC组的阳性率明显高于肝硬化组和健康对照组(χ2=73.344、96.551,P<0.01);肝硬化组的阳性率与健康对照组的差异无统计学意义(χ2=3.3967,P>0.05)。(3)100例PHC患者中AFU阳性82例,阳性率为82.0%(82/100);肝硬化患者中阳性14例,阳性率为28.0%(14/50);健康对照组中有2例,阳性率为4.0%(2/50)。PHC组的阳性率明显高于肝硬化组和健康对照组(χ2=42.187、82.305,P<0.01);肝硬化组的阳性率与健康对照组的差异有统计学意义(χ2=10.714,P<0.01)。(4)GPC3和AFU两者联合检测时,诊断PCH的敏感度为97.0%(97/100),特异度为88.0%(88/100),准确度为92.5%(185/200),优于任何单项和联合检测的敏感度和准确度。结论 GPC3和AFU联合检测优势互补,从而提高PHC诊断的敏感度、特异度和准确度。

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨shRNA干预磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3基因转录对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将GPC-3-shRNA插入pGPU6/GFP/Neo质粒,转染人肝癌HepG2细胞,以Western Blot和荧光定量PCR分别分析GPC-3蛋白和mRNA表达;以MTT法分析HepG2细胞增殖;以流式细胞术、Annexin-V-PE/7-AAD及细胞凋亡-DNA ladder等分析细胞周期及细胞凋亡率。结果 shRNA1转染HepG2细胞,GPC-3 mRNA沉默效率为89.3%,与GPC-3蛋白下调一致;以shRNA转染HepG2细胞,增殖抑制率为71.1%;细胞周期阻滞在G1期,细胞凋亡率达65.6%。结论资料显示shRNA干预GPC-3基因转录,可显著抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡。

磷脂酰肌醇蛋白多糖3对胆道闭锁患儿的诊断价值及与肝纤维化的关系

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖3(GPC3)在胆道闭锁(BA)患儿中表达水平及其与肝纤维化的关系。方法收集BA患儿41例(BA组)、胆总管囊肿(CC)患儿9例(CC组)、肝功能正常无其他肝胆疾病的体检健康婴儿12例(NC组)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组血清GPC3水平,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估GPC3对BA的辅助诊断价值。留取BA组和CC组肝组织样本,通过免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测GPC3在患儿肝组织中表达水平,分析BA患儿GPC3与肝纤维化分级的关系。结果(1)BA组GPC3水平高于CC组和NC组(χ2=24.170,P<0.01)。BA组内日龄≤30 d(21例)及>30 d的患儿(20例)血清GPC3水平差异无统计学意义,但均高于CC组和NC组(χ2=24.210,P<0.01)。BA组内Ⅰ~Ⅱ级与Ⅲ~Ⅳ级患儿GPC3水平差异无统计学意义,但均高于CC组和NC组(χ2=24.390,P<0.01)。GPC3诊断BA的ROC曲线下面积为0.878(95%CI:0.792~0.965,P<0.01),敏感度为82.93%,特异度为80.95%,最佳临界值为0.639μg/L。(2)肝组织免疫组织化学检测结果显示,BA组肝组织中GPC3表达较CC组明显升高(Z=3.565,P<0.01);肝组织中GPC3的含量与肝纤维化分级呈正相关(rs=0.619,P<0.01)。BA组GPC3 mRNA表达较CC组上调(Z=7.361,P<0.05)。结论血清GPC3对BA的诊断及鉴别诊断有一定临床价值;BA肝组织中GPC3表达上调,其表达量与胆道闭锁的肝纤维化分级呈正相关。

干预磷脂酰肌醇蛋白多糖3基因转录联合抗肿瘤药物抑制肝癌细胞增殖的协同作用

目的探讨干预磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)3基因转录和联合抗肿瘤药物对肝癌细胞增殖的抑制效果。方法构建4种GPC-3-shRNA质粒转染肝癌HepG2细胞,以realtime-PCR、Western Blot法观察GPC-3基因及蛋白表达水平,分析其与肝癌细胞增殖、凋亡的关系。计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 4种转染质粒中shRNA1转染HepG2细胞效率>85%,在mRNA水平的沉默效率为89.3%,GPC-3蛋白表达显著抑制(P<0.01)。shRNA1干扰组72 h HepG2细胞抑制率71.1%,与阴性组比较差异有统计学意义(t=18.092,P<0.001);shRNA1干扰组肝癌细胞发生生物学特性改变,迁移抑制率为89.1%,明显慢于阴性组,差异有统计学意义(t=8.326,P<0.001);HepG2细胞运动抑制率为53.6%、侵袭抑制率60.1%,与阴性组比较差异均有统计学意义(t值分别为52.400、48.245,P值均<0.001)。shRNA1干扰组β-catenin mRNA抑制率为46.9%,Gli1 mRNA上调率为7.4%,与对照组比较差异均有统计学意义(t值分别为30.108、-3.551,P值分别为<0.001、0.009)。在24 h时,10μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞抑制率为52.6%,100μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞的抑制率为79.5%,与对照组比较差异有统计学意义(t值分别为23.314、50.352,P值均<0.001)。索拉非尼对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC_(50))值为(4.67±1.20)μmol/L、雷帕霉素为(7.85±2.00)nmol/L、厄洛替尼为(18.36±0.56)μmol/L,与shRNA1联合使用后HepG2细胞抑制率达95.11%。结论特异性shRNA干预GPC-3转录可抑制肝癌细胞增殖、迁移运动和侵袭能力,并诱导肝癌细胞凋亡,与抗肿瘤药物协同抑制癌细胞增殖,提示GPC-3可能是肝癌治疗有效靶点,联合靶向治疗将为肝癌提供更佳治疗策略。

磷脂酰肌醇3激酶调节亚基基因对HepG2细胞增殖的影响

目的：初步探讨磷脂酰肌醇3激酶调节亚基（PIK3R1）在肝癌发生发展中的生物学作用及其机制.方法：首先通过蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测p85α（PIK3R1所编码的蛋白）在肝癌组织标本中的表达情况;接着利用脂质体转染法将PIK3R1的小分子干扰RNA（siRNA）和含有PIK3R1 cDNA的重组质粒转染入HepG2细胞中,并利用实时定量PCR检测其干扰效率和过表达效率;采用MTT法和集落形成实验检测PIK3R1对细胞增殖的影响,应用流式细胞术分析PIK3R1对细胞周期的影响;最后蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路下游效应分子的表达变化.结果：p85α在肝癌组织中的表达高于其癌旁组织,差异有统计学意义（P ＜0.05）;PIK3R1被干扰后,HepG2细胞增殖速度减慢,集落形成率减少,差异有统计学意义（均P ＜0.05）;PIK3R1过表达后,HepG2细胞增殖速度加快,集落形成率增多,差异有统计学意义（均P＜0.05）;PIK3R1提高了HepG2细胞中S期细胞的比例（P＜0.01）;且PIK3R1可提高PI3 K/A KT通路下游效应分子p-AKT的水平,并降低p53的水平.结论：PIK3R1在肝癌组织中表达上调,PIK3R1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进HepG2细胞的增殖.

甲胎蛋白糖类抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单独或联合检测在原发性肝癌诊断中的研究

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原(CA199)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)三种血清肿瘤标志物单独和(或)联合检测对原发性肝癌(PHC)的互补诊断价值及对肝癌早期诊断的意义。方法对2009年8月至2011年7月收治的55例PHC患者(PHC组)和30例肝硬化患者(肝硬化组)进行单独和(或)联合检测AFP、GPC3和AFU,并同期选择30例正常人作为对照组。采用电化学发光法测定AFP水平,速率法检测CA199水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测GPC3水平。结果 PHC组患者血清GPC3、CA199和AFP水平均明显高于肝硬化组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PHC组患者血清GPC3、AFP和CA199阳性率分别为81.8%、74.5%和67.3%,AFP联合CA199和(或)GPC3可使检出率分别提高至78.2%和92.7%,三项指标联合检测PHC的阳性率可高达98.2%。AFP阴性的39例PHC患者中,血清GPC3、CA199阳性率分别为76.9%(30/39)、74.4%(29/39),表明二者对AFP阴性的PHC患者具有较高的诊断互补作用。结论血清肿瘤标志物AFP、CA199和GPC3对PHC有一定的诊断价值。血清GPC3和AFP联合检测可明显提高PHC的诊断率,优于单项检测,特别是对AFP阴性或AFP呈低浓度PHC更具有诊断价值。

益气续骨方调节PI3K/Akt信号通路对激素性股骨头坏死大鼠骨代谢的影响

目的探究益气续骨方调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对激素性股骨头坏死大鼠骨代谢的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、益气续骨方低剂量组、益气续骨方高剂量组、益气续骨方+LY294002组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠右臀肌肉注射醋酸泼尼松龙注射液4周建立激素性股骨头坏死模型。造模结束后,益气续骨方低、高剂量组大鼠分别给予益气续骨方0.5 mL(含生药0.285 g/mL)和1 mL(含生药0.57 g/mL)灌胃,益气续骨方+LY294002组大鼠给予益气续骨方1 mL灌胃并腹腔注射6 mg/kg的LY294002,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,连续干预8周。ELISA检测大鼠血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血钙、血磷、骨保护素(OPG)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)水平,Micro-CT检测观察股骨头形态,HE染色观察股骨头组织病理形态,TRAP染色观察破骨细胞生成情况,Western blot法检测股骨头组织中骨特异性转录因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、裂解半胱天冬酶-3(Cleaved-Caspase-3)、PI3K、Akt蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-4、IL-6、TNF-α、OPG、ALP水平和骨小梁分离度(Tb.Sp)、空骨陷窝率及股骨头组织中Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),血钙、血磷、OCN水平和骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)及股骨头组织中Runx2、BMP-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),破骨细胞数量增多,股骨头破坏、骨小梁空间结构紊乱;与模型组比较,益气续骨方低、高剂量组大鼠血清IL-4、IL-6、TNF-α、OPG、ALP水平和Tb.Sp、空骨陷窝率及股骨头组织中Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),血钙、血磷、OCN水平和BV/TV、Tb.N、Tb.Th及股骨头组织中Runx2、BMP-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),破骨细胞数量减少,股骨头破坏程度减轻,骨小梁空间结构形态改善;LY294002可减弱益气续骨方对上述指标的改善作用,各指标与益气续骨方高剂量组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论益气续骨方可改善激素性股骨头坏死大鼠骨代谢,降低炎症因子水平,减少破骨细胞数量,减轻大鼠股骨头坏死,机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。

原发性肝癌中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3水平及其临床意义

目的探讨原发性肝癌患者血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)和甲胎蛋白(AFP)水平及其对肝癌的诊断价值。方法收集2018年6月至2019年1月于山西省肿瘤医院就诊的原发性肝癌患者277例、胃癌患者108例、单纯肝炎患者40例、肝炎合并除肝癌以外其他癌症患者19例及健康对照54名,取所有研究对象的血清样本。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清GPC3水平,电化学发光法检测AFP水平。比较GPC3和AFP单独及二者联合对肝癌的诊断价值,并分析GPC3与AFP的关系。结果原发性肝癌、胃癌、单纯肝炎、肝炎合并除肝癌以外其他癌症患者及健康对照者血清GPC3水平[中位数(四分位距)]分别为0.079 ng/ml(0.198 ng/ml)、0.048 ng/ml(0.044 ng/ml)、0.073 ng/ml(0.053 ng/ml)、0.050 ng/ml(0.018 ng/ml)、0.023 ng/ml(0.011 ng/ml);原发性肝癌患者GPC3水平高于胃癌、肝炎合并除肝癌以外其他癌症患者及健康对照者(均P<0.05),与单纯肝炎患者间差异无统计学意义(P=0.520)。GPC3诊断原发性肝癌的灵敏度及特异度分别为69.5%和94.4%,AFP诊断的灵敏度及特异度分别为63.9%和94.0%,两者联合检测的灵敏度和特异度分别为80.2%和94.3%,GPC3、AFP单独及二者联合诊断肝癌的阳性似然比与阴性似然比的比值(DOR)分别为38.42、27.73和67.01。血清GPC3与AFP表达间有相关性(r=0.34,P<0.01)。结论GPC3与AFP联合检测能提高原发性肝癌的检出率,在原发性肝癌的早期筛查、诊断方面具有一定的临床意义。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的表达在肝细胞癌诊断中的意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（ GPC3）免疫组织化学染色在肝细胞癌病理诊断的应用价值。方法 制作14个含731例肝肿瘤和肿瘤旁肝组织芯片，其中肝细胞癌357例、胆管癌26例、肝细胞癌癌旁肝组织包括肝硬化171例、血管瘤旁肝组织93例、肝转移癌84例。全部病例采用免疫组织化学检测GPC3（1G12克隆）蛋白表达，实验设阳性对照。结果 72.0％的肝细胞癌（257/357）GPC3呈阳性反应，其余374例非肝细胞癌病例均为阴性，包括胆管癌、肝转移癌、肝细胞癌癌旁肝组织（包括肝硬化和血管瘤旁肝组织）。GPC3阳性率在不同的肝细胞癌组织学分级的差异有统计学意义（P＜0.01），阳性率高低排列为Ⅲ级（77.1％，64/83）、Ⅱ级（73.3％，187/255）、Ⅰ级6/12和Ⅳ级（0）为阴性。结论 GPC3免疫组织化学检测是肝细胞癌诊断的良好指标，敏感性达72.0％；也是区别瘤旁肝组织和肝转移癌的鉴别诊断指标，其特异性达100％。

精氨酸酶-1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3联合检测在肝细胞癌鉴别诊断中的应用

目的 探讨精氨酸酶-1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）联合检测在肝细胞癌与肝脏转移性癌、肝内胆管细胞癌（ICC）鉴别诊断中的应用价值。方法选取2005年1月至2011年12月肝细胞癌患者54例，其中高分化10例，中分化25例，低分化19例。另选取同期肝脏转移性癌患者25例，ICC患者20例。以3i份正常肝组织标本为对照。用免疫组织化学法检测上述肝组织中精氨酸酶-1和GPC-3的表达情况，分析其诊断肝细胞癌的敏感度和特异度。计数资料行卡方检验。结果精氨酸酶-1在肝细胞癌、肝脏转移性癌、ICC、正常肝组织中的阳性表达率分别为87．0％（47／54）、4．0％（1／25）、5．0％（1／20）、100．0％（31／31），其在肝细胞癌中的阳性表达率高于非肝细胞癌的肿瘤组织，差异有统计学意义（X^2==66．98，P〈0．05）。GPC-3在肝细胞癌、肝脏转移性癌、ICC、正常肝组织中的阳性表达率分别为70．4％（38／54）、12．0％（3／25）、5．0％（1／20）、0（0／31），其在肝细胞癌中的阳性表达率高于非肝细胞癌的肿瘤组织，差异有统计学意义（X^2=37．98，P〈0．05）。精氨酸酶-i或GPC-3中任意-项阳性即诊断肝细胞癌的敏感度和特异度分别为92．6％（50／54）和86．7％（39／45）。以精氨酸酶-1和GPC-3皆阳性诊断肝细胞癌的敏感度和特异度分别为64．8％（35／54）和100．0％（45／45）。结论 联合检测精氨酸酶-i和GPC-3在肝细胞癌诊断，以及肝细胞癌与ICC、肝脏转移性癌的鉴别诊断中具有重要价值。

血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3蛋白测定在肝细胞癌诊断中的价值

目的检测血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)的浓度,探讨其对原发性肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法用酶链免疫吸附试验(ELISA)对67例HCC患者、41例肝硬化患者、30例健康者血清中GPC3进行测定,化学发光法检测甲胎蛋白(AFP)。结果 HCC患者血清GPC3平均浓度为(10.85±0.58)μg/L;肝硬化患者血清GPC3平均浓度为(2.45±0.61)μg/L;健康者血清GPC3平均浓度为(1.14±0.22)μg/L。HCC患者血清GPC3浓度明显高于肝硬化患者和健康者(H=327.000,P=0.0001),肝硬化患者与健康者差异无统计学意义(Z=0.792,P=0.429)。当以3μg/L为诊断界值时,GPC3对HCC的敏感性和特异性分别为88.1%和85.9%。当AFP以20μg/L为诊断界值时,其对HCC的敏感性和特异性分别为65.7%和76.2%。GPC3对HCC的敏感性显著高于AFP(χ2=10.995,P=0.001)。在23例AFP阴性的HCC患者中有17例GPC3阳性,阳性率为73.9%(17/23)。GPC3的ROC曲线下面积大于AFP(0.898vs0.814)。结论血清GPC3对HCC有很高的敏感性和特异性,可作为一种新的肿瘤标志物用于HCC的诊断。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3特异性抗体对肝细胞癌临床诊断的初步应用

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)对肝细胞癌(HCC)的诊断具有很高的敏感性和特异性,是具有前景的肿瘤标志物.本文的目的是应用抗人-GPC3单克隆抗体7D11(7D11McAb),通过免疫组化(IHC)的方法检测HCC组织中的GPC3蛋白,并初步评价其诊断HCC的临床应用价值.通过对HCC病理组织、正常肝脏组织和胆管细胞癌(ICC)病理组织进行免疫组化染色来评价7D11McAb的可应用性.同时,应用7D11McAb作为检测抗体对40例HCC,7例ICC和50例正常人的血清GPC3进行检测.免疫组化结果显示,GPC3蛋白在85%(34/40)HCC组织高表达,而在正常人和ICC病人的组织中阳性率均为0%(0/50和0/7).血清学检测结果显示,GPC3在HCC,正常人和ICC病人的血清中阳性率分别为:42.5%(17/40),0%(0/50%)和0%(0/7).7D11McAb的制备为GPC3能大规模应用于临床奠定了基础.

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、热休克蛋白70和谷氨酰胺合成酶在肝细胞癌变中的表达及临床价值

目的探讨免疫组织化学套餐磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）、热休克蛋白70（HSP70）和谷氨酰胺合成酶（GS）在肝细胞癌（HCC）诊断中的临床价值。方法应用免疫组织化学检测86例高分化HCC、100例低分化HCC、38例高级别异型增生结节（H-DN）、22例低级别异型增生结节（L—DN）、66例肝硬化结节、10例局灶性结节状增生（FNH）及22例正常肝组织中GPC3、HSP70和GS的表达情况。结果GPC3、HSP70和GS在HCC中的阳性表达率明显高于H．DN中的表达率（P〈0．05）。任何两个标志物的联合应用可提高高分化HCC的检出率，其中以GPC3和GS的联合应用最能提高诊断的敏感性和特异性，3个标志物联合应用时，检出率可达89．5％。结论GPC3、HSP70和GS3个标志物联合应用可进一步提高HCC诊断的可靠性。

血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝癌临床诊断中的应用价值

用酶链免疫吸附试验（ELISA）测定60例原发性肝细胞癌（HCC）患者，30例肝内胆管癌（ICC）患者，30例乙肝后肝硬化（LC）患者，30例转移性肝癌（MCA）患者，30例健康者血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白的含量。采用化学发光法检测血清甲胎蛋白（AFP）的含量。 HCC组患者血清GPC3蛋白、AFP含量均显著高于其他组，差异有统计学意义（ P＜0.05），当以3.5μg/L为诊断界值时，GPC3对HCC的敏感性和特异性分别为83.3％和76.7％。 AFP联合GPC3后能将HCC的检出率由73.3％提高到88.3％。血清GPC3的浓度与患者HBV感染情况以及肿瘤大小有关，而与患者年龄、性别、肝功能、肿瘤数目以及门脉癌栓无关。血清GPC3对HCC的诊断有一定的敏感性和特异性，联合AFP检测可以提高HCC的检出率，具有临床应用价值。