菜籽油磷脂酶C脱胶工艺优化及效果分析

分别研究了柠檬酸添加量、酶加入量、温度、加水量和时间5个单因素对磷脂酶C(PLC)脱胶效果的影响,在单因素基础上,采用响应面试验设计,对主要脱胶工艺参数进行优化,得到最佳条件:柠檬酸添加量5.80m L/kg,加酶量12.60 m L/kg,酶解温度42.20℃,在该条件下验证,菜籽毛油磷含量由693 mg/kg降低至7.85mg/kg。采用棒状薄层色谱-氢火焰离子化检测器(TLC-FID)对毛油与脱胶油中甘油酯含量进行检测,结果表明:脱胶油中甘一酯的含量变化不明显,甘二酯含量从约2.5%增加到约6.5%,而甘三酯的含量从约93%下降到约89%;而同样采用TLC-FID对水化脱胶磷脂与PLC脱胶磷脂中的溶血磷脂进行检测,分析得知,PLC脱胶磷脂中溶血磷脂含量比水化脱胶磷脂中的高出约50%,酶法脱胶的酶解率显著升高。研究结果表明,磷脂酶C脱胶比常规水化脱胶更有效和彻底,可为油脂精炼提供了一定理论参考。

蛋白激酶C和磷脂酰肌醇4,5二磷酸之间相互调节作用的研究进展

蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一个多基因家族,包含多种同工酶,分布广泛且功能复杂,在许多信号转导通路发挥重要作用。磷脂酰肌醇(4,5)二磷酸(PIP2)是分布在细胞膜中的磷脂类信号分子,在细胞中的分布和含量处于动态变化中。PIP2的水解后生成DAG和IP3。DAG可以直接激活PKC,而IP3通过调节细胞内钙离子的浓度从而改变钙依赖型PKCs的活性。同时,PKC通过激活PI4K或PIP5K可以调节细胞膜PIP2水平。PKCs使离子通道蛋白发生磷酸化,改变通道蛋白与PIP2的亲和力,从而影响PIP2对离子通道的调节。该文对PKCs和PIP2在细胞信号转导过程中相互调节的相关研究进展进行综述。

马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的影响

目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内及培养的神经元磷脂酶Cβ1(PLCβ1)的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyte-conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化;运用免疫组织化学方法,观察大鼠大脑皮质、海马内PLCβ1免疫反应的变化;将培养的神经元随机分为2组:1.对照组(无血清培养基组),2.ACM组。各组细胞分别培养4、8、12h后,免疫细胞化学方法观察培养神经元内PLCβ1表达的变化,Western blot法检测各组培养神经元PLCβ1含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30 min出现癫痫行为,2 h恢复正常;免疫组织化学显示:ACM作用后4h,大鼠大脑皮质、海马PLCβ1免疫反应阳性神经元数和平均光密度值显著增高(P<0.05);培养神经元的免疫细胞化学染色证明ACM组在作用4h时PLCβ1免疫阳性反应产物明显增加,与对照组比较有明显差异(P<0.05);Western blot结果表明PLCβ1含量在ACM作用4h较对照组明显增多(P<0.05)。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可上调大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的表达,并导致动物痫性发作。

磷脂酶C的酶活及其脱胶研究

探索磷脂酶C酶活适宜条件,及其对菜籽油脱胶的优化方案。用卵黄琼脂平板法和NPPC法对磷脂酶C的酶活条件进行检测;在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken试验设计和响应面分析法探讨了反应温度、pH、时间和加酶量对菜籽油脱胶效果的影响。结果:确定磷脂酶C最佳反应温度和pH分别为57℃和7.0;酶法脱胶最佳优化方案为:温度60℃,加酶量0.05%,pH 6.9,反应时间3.5 h。在此方案下得出最终磷含量为9.6 mg/kg,脱胶率达94.75%。