癫痫鼠外周血磷酸化S6蛋白检测及意义

目的:明确癫痫发作后外周血与脑组织中核糖体磷酸化S6蛋白( P-S6 )含量变化的相关性。方法:取出生后5~6周龄的C57BL/6小鼠30只和SD大鼠22只,采用红藻氨酸腹腔注射诱导癫痫发作。建立P-S6蛋白的流式细胞术检测方法用以检测小鼠及大鼠外周血中mTOR信号通路下游P-S6蛋白的变化,同时采用蛋白质印迹法检测其脑组织中P-S6的变化。采用Pearson相关性分析法分析脑组织与外周血中P-S6蛋白表达的相关性,并对大鼠外周血P-S6蛋白的表达与癫痫发作等级进行相关性分析。结果:癫痫小鼠外周血和脑组织中 P-S6 的含量明显增高,其表达量分别升高至对照组的(1.49±0.45)倍( P <0.05)和(2.55± 0.66 )倍( P <0.01);外周血中P-S6的阳性表达率和平均荧光强度均明显升高(均 P <0.01),与脑组织中P-S6蛋白表达具有一致性( r = 0.8474 , P <0.01)。大鼠自身致痫前后外周血中P-S6含量明显增加,由14.89±9.75增加至52.35±21.72( P <0.01),与大鼠脑组织P-S6蛋白表达变化一致( r =0.9385, P <0.01),且外周血P-S6含量的变化与癫痫发作等级呈正相关。结论:癫痫鼠外周血mTOR信号通路的变化与脑组织中的变化具有良好的相关性,提示通过检测外周血P-S6的表达水平可准确反映脑组织中mTOR信号通路的变化。

CIP2A在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

目的:探讨膀胱尿路上皮癌(UCCB)组织中CIP2A的表达及其在膀胱尿路上皮癌发生发展中的意义。方法:应用免疫组化法及逆转录聚合酶链反应法,对48例临床分期为Tis^T1期的膀胱癌组织标本中CIP2A的表达进行检测。病理分级G1级23例,G2级17例,G3级8例;复发性膀胱癌17例;15例非肿瘤膀胱组织作对照应。结果:15例非肿瘤膀胱组织CIP2A表达均为阴性;48例膀胱癌组织中有19例可见CIP2A表达;复发的膀胱癌组织中CIP2A阳性表达率(58.82%,10/17)明显高于初发的膀胱癌组织(29.03%,9/31),两组CIP2A表达阳性率有显著性差异(P<0.05);CIP2A表达率在不同分级的肿瘤组织中无明显差异(P>0.05)。两年随访发现:CIP2A表达阳性的肿瘤病人复发率高(13/19,68.42%),与CIP2A表达阴性者的复发率(11/29,37.93%)相比有显著性差异(P<0.05)。结论:CIP2A与膀胱癌复发有关,检测膀胱癌组织中CIP2A表达有望作为膀胱癌诊断的一种指标,在膀胱肿瘤的预后判断中起重要作用。

他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响(英文)

背景:目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多,而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用。目的:通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量,探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响。设计:随机分组,平行对照(自我前后对照、相互对照)实验。单位:大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科。材料:实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成。选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD 大鼠24只为观察对象,体质量(200±20)g,用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组8只。干预:伤前24h 以20g/L 戊巴比妥钠(40m g/kg)腹腔麻醉,损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon 建立的大鼠脑液压损伤模型,打击能量为151.95～172.21kPa,相当于中度颅脑损伤,对照组只埋管不打击。治疗组伤后5m in 以1mg/kg 腹腔注射他克莫司,1次/d,连续7d。损伤组和对照组腹腔注射生理盐水。伤前、伤后3d 和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验。于伤后1周全部大鼠断头取脑,分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测,图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布,用流式细胞仪检测凋亡细胞计数。主要观察指标:①各组动物于伤前、伤后3d 和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩。②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果。③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率。结果:24只大鼠全部进入结果分析。①治疗组伤后3d 和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组犤行走试验成绩:(7.5±2.5)s,(5.5±2.1)s,(10.5±2.5)s,(8.2±2.5)s。平衡试验成绩:(3.4±0.5)分,(2.5±0.2)分,(5.7±0.2)分,(5.0±0.5)分,P <0.05～0.01犦,治疗组伤后3d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组犤(4.9±1.7)s,(6.2±2.3)s,(4.0±1.5)s,(4.4±2.6)s,P <0.05～0.01犦。②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组(140.36±3.87,45.52±2.16,31.67±2.35,96.25±2.85,24.35±2.47,20.49±2.08,P <0.01);对照组显著高于治疗组(162.24±3.52,50.58±2.31,42.69±2.53,P <0.01)。③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组犤(10.37±2.12)%,(18.39±2.87)%,(12.78±2.45)%,(21.14±4.85)%,(38.57±3.78)%,(21.18±4.59)%,P <0.01犦。损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组犤(3.85±2.56)%,(4.96±2.15)%,(3.52±2.17)%,P <0.01犦。结论:他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达,减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡,对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用。