激活的细胞外调节激酶及磷酸酶在房颤中的作用研究

目的 :研究心房颤动患者心房肌细胞外调节激酶及磷酸酶基因表达的改变 ,探讨房颤发生时细胞信号转导途径的变化。方法 :30例接受开胸手术者 (包括房颤 2 0例、窦性心律患者 10例 ) ,手术时取左心房组织约2 0 0mg,采用RT -PCR、Westernblot技术 ,检测心房肌钙调磷酸酶调节亚单位 (calcineurinB)、丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶 - 1(MKP - 1)mRNA表达量 ,细胞外调节激酶 1(ERK1)、磷酸化细胞外调节激酶 1(P -ERK1)蛋白表达量的改变。结果 :房颤者calcineurinB、MKP - 1mRNA、P -ERK1蛋白表达量显著高于窦性心律者 ,而ERK1蛋白表达无差异。结论 :房颤患者心房肌细胞外调节激酶及磷酸酶呈激活状态 。

活性氧簇及抗氧化剂对钙调神经磷酸酶作用的研究

目的:研究活性氧簇(ROS)及抗氧化剂对钙调神经磷酸酶的作用。方法:测定并比较对照黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶ROS生成系统作用下及与超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶、甘露醇或二巯基苏糖醇(DTT)共同作用下钙调神经磷酸酶的活性。结果:黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统产生的ROS使钙调神经磷酸酶活性下降33.1%。SOD、过氧化氢酶、DTT可显著减少ROS对钙调神经磷酸酶活性的抑制。结论:钙调神经磷酸酶受氧化还原作用调节。

血清协同刺激分子B7家族3、磷酸酪氨酸衔接蛋白1水平与乙肝肝硬化患者Child-Pugh分级的相关性

【目的】探讨血清协同刺激分子B7家族3(B7-H3)、磷酸酪氨酸衔接蛋白l(APPL1)水平与乙肝肝硬化患者Child-Pugh分级的相关性。【方法】回顾性分析2019年12月至2020年11月本院收治的78例乙肝肝硬化患者(观察组)的临床资料,选择同期于本院健康体检的70例健康志愿者(对照组)。比较两组研究对象血清B7-H3、APPL1、胆碱酯酶(CHE)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平,分析乙肝肝硬化的相关影响因素,并比较观察组不同Child-Pugh分级患者的血清B7-H3、APPL1水平,分析血清B7-H3、APPL1水平与Child-Pugh分级的相关性。【结果】观察组饮酒史、营养不良、胆汁淤积等发生率显著高于对照组,血清B7-H3、APPL1水平高于对照组,CHE、TG、TC水平低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。logistic回归分析显示,饮酒史、营养不良、胆汁淤积及血清CHE、TG、TC、APPL1、B7-H3水平均为乙肝肝硬化的影响因素(P<0.05)。观察组Child-Pugh分级A级患者血清APPL1、B7-H3水平低于E级患者,B级患者低于C级患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,Child-Pugh分级与血清B7-H3、APPL1存在明显正相关关系(r=0.573.0.690,均P<0.05)。【结论】血清B7-H3、APPL1水平同乙肝肝硬化患者Child-Pugh分级呈正相关,动态监测B7-H3、APPL1水平对临床评估患者病情进展、制定针对性治疗方案具有积极作用,值得临床推广应用。

癫痫鼠外周血磷酸化S6蛋白检测及意义

目的:明确癫痫发作后外周血与脑组织中核糖体磷酸化S6蛋白( P-S6 )含量变化的相关性。方法:取出生后5~6周龄的C57BL/6小鼠30只和SD大鼠22只,采用红藻氨酸腹腔注射诱导癫痫发作。建立P-S6蛋白的流式细胞术检测方法用以检测小鼠及大鼠外周血中mTOR信号通路下游P-S6蛋白的变化,同时采用蛋白质印迹法检测其脑组织中P-S6的变化。采用Pearson相关性分析法分析脑组织与外周血中P-S6蛋白表达的相关性,并对大鼠外周血P-S6蛋白的表达与癫痫发作等级进行相关性分析。结果:癫痫小鼠外周血和脑组织中 P-S6 的含量明显增高,其表达量分别升高至对照组的(1.49±0.45)倍( P <0.05)和(2.55± 0.66 )倍( P <0.01);外周血中P-S6的阳性表达率和平均荧光强度均明显升高(均 P <0.01),与脑组织中P-S6蛋白表达具有一致性( r = 0.8474 , P <0.01)。大鼠自身致痫前后外周血中P-S6含量明显增加,由14.89±9.75增加至52.35±21.72( P <0.01),与大鼠脑组织P-S6蛋白表达变化一致( r =0.9385, P <0.01),且外周血P-S6含量的变化与癫痫发作等级呈正相关。结论:癫痫鼠外周血mTOR信号通路的变化与脑组织中的变化具有良好的相关性,提示通过检测外周血P-S6的表达水平可准确反映脑组织中mTOR信号通路的变化。

蛋白酪氨酸磷酸酶调控血小板功能的研究现状

血小板为血液重要组成成分,在止血及血栓形成过程中发挥关键作用。血小板行使功能涉及多种信号通路,蛋白磷酸化作用能够特异性调控血小板信号通路的激活。蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)参与调控血小板的蛋白磷酸化及去磷酸化过程。既往研究已发现多种血小板蛋白激酶,但对发挥负向调控作用的PTP研究较少。笔者拟从血小板生理功能及其活化、血小板内信号蛋白的磷酸化调控、PTP在血小板功能调控中的作用和靶向血小板PTP的临床应用方面,对PTP调控血小板功能的研究现状进行阐述,旨在为新靶向药物的研发提供依据。

蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子在小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨小细胞肺癌组织中蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2008年1月至2013年2月行手术切除或支气管镜活检、临床资料完整的94例小细胞肺癌组织及40例癌旁组织（距病灶≥2cm的组织）标本，分析CIP2A在小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。结果CIP2A mRNA在94例小细胞肺癌组织中的表达水平为7．605±1．893，与40例癌旁组织（1．041±0．786）比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。CIP2A蛋白在小细胞肺癌组织中的阳性表达率为82．8％，与癌旁组织（13．3％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。CIP2A高表达患者的中位无病生存时间为9.88个月，低于低表达患者（20．92个月），差异有统计学意义（P〈0．001）。CIP2A的表达与肿瘤分期、化疗药物敏感性和生存时间均有关（均P〈0．05）。结论CIP2A的表达情况与小细胞肺癌的发生发展有关，CIP2A检测有望作为小细胞肺癌的预后指标。

蛋白磷酸酶2A催化亚基α显性负性突变体表达载体对肝癌细胞生长的影响

目的构建肝癌组织特异性启动子驱动的蛋白磷酸酶2A催化亚基Ⅸ显性负性突变体（DN—PP2Acca表达载体，研究其对肝癌细胞生长的影响。方法将甲胎蛋白（AFP）基因的增强子和磷酸甘油酸激酶（pgk）基因的启动子组合形成的肝癌组织特异性AFpg启动子。采用定点突变将野生型蛋白磷酸酶2A催化亚基仅（PP2AcⅨ）突变为DN—PP2Aca将AFpg启动子和DN—PP2Ac。编码序列构建成AFpg启动子调控的DN—PP2Aca 表达载体pGL3-Basic—AFpg—PP2Acc。荧光素酶报告基因实验检测AFpg启动子的转录活性。质粒pcDNA3．1（＋）、pGL3-BaSic、pcDNA3．1（＋）-DN—PP2Ac0a、pGL3-Basic-AFpg、pGL3-Basic-AFpg-PP2AcGa分别转染L02、SK—Hep-1、HepG2和Hep3B细胞，Westernblot检测PP2Ac蛋白表达水平，四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞生长情况。成组t检验分析不同处理组间的细胞活力差异。结果L02、SK-Hep-1、HepG2和Hep3B细胞中，AFpg启动子相对荧光素酶活性分别为3．61±1．07、3．46±0．66、98．70±18．60、88．70±19．53，AFpg启动子在表达AFP的细胞中具有高转录活性。pGL3-Basic—AFpg—PP2AcⅨ可特异性地使DN—PP2AcⅨ表达于AFP阳性肝癌细胞HepG2和Hep3B，并抑制其生长，转染72h后，HepG2细胞活力下降42．65％±3．99％，Hep3B细胞活力下降39．87％±3．91％，与0h时比较，差异均有统计学意义（t值分别为13．0563和12．9920，P值均〈0．01）。pGL3-Basic-AFpg—PP2Ac0a对AFP阴性细胞的生长无明显影响。结论AFpg启动子调控的DN—PP2Aca表达载体特异性地抑制AFP阳性肝癌细胞的生长，可用于肝癌组织特异性基因治疗。

低钙透析液联合骨化三醇的应用对钙磷水平的影响

目的 对比不同钙浓度透析液联合骨化三醇治疗后血Ca、P、钙磷乘积（Ca×P）及甲状旁腺激素（PTH）水平的变化。方法 维持性血液透析（MHD）患者随机分为DCa 1.25与DCa 1.5组，每组18例。依PTH水平不同，给予不同剂量的骨化三醇冲击治疗，记录2组治疗前、治疗1、3、6个月血清Ca、P、Ca×P、PTH及骨碱性磷酸酶（BAP）水平，并观察收缩压（SBP）、舒张压（DBP）的变化。结果2组血Ca、P及Ca×P处理效应与时间效应间存在交互作用（P〈 0.05），随治疗时间的延长，DCa 1.25与DCa 1.5组分别呈逐渐降低和增高的趋势，并均于治疗3~6个月趋于稳定。2组在血PTH、BAP指标中处理效应与时间效应不存在交互作用；单纯处理效应和时间效应亦无统计学意义。血清PTH水平随治疗时间的延长，DCa1.5组呈逐渐升高趋势；DCa1.25组于治疗3个月基本趋于稳定并呈逐渐降低趋势。SBP处理效应与时间效应存在交互作用，DBP的处理效应与时间效应无交互作用；2组不同处理效应治疗前后SBP水平差异有统计学意义，DCa 1.25组随着治疗时间的延长，SBP缓慢降低，治疗3、6个月减低趋势显著。结论DCa1.25透析液联合骨化三醇的长期应用可降低血Ca水平并维持在正常低限，增加MHD患者对活性维生素D3及碳酸钙的耐受性，使SBP降低。

高效抗逆转录病毒治疗对人类免疫缺陷病毒感染者骨代谢的影响

目的：评价长期不同高效抗逆转录病毒治疗（HAART）方案对HIV感染者骨代谢的影响及发生时间。方法：选取2012年1月至2016年5月在浙江大学医学院附属第一医院进行HAART的82例HIV感染者的临床资料，按照HAART方案中含替诺福韦（tenofovirdisoproxil）或叠氮胸苷（azidothymidine）的不同分为替诺福韦组（41例）和叠氮胸苷组（41例），分析两组在服药后6、12、18、24、30个月患者肾小球滤过率（GFR）和血钙、血磷、血ALP浓度变化趋势，比较两组的差异。结果：两种方案均能提高患者CD4＋T细胞数，差异无统计学意义（P〉0．05）。相比治疗前，替诺福韦组患者在治疗6个月时GFR[（120．71±62．85）mL／min与（110．08±39．18）mL／min]、血磷浓度[（1．25±0．19）mmoL／L与（1．22±0．21）mmol／L]差异均无统计学意义（均P〉0．05），而血钙浓度[（2．32±0．12）mmol／L与（2．25±0．17）mmol／L]、血ALP浓度[99．0（79．5～124．0）U／L与80．0（60．5～96．0）U／L]增加均有统计学意义（均P〈0．05）；随着治疗时间延长，GFR、血钙浓度、血磷浓度逐渐下降，血ALP浓度继续升高。替诺福韦组患者在治疗30个月后比治疗前血钙浓度[（2．16±0．15）mmol／L与（2．25±0．17）mmol／L]、血磷浓度[（1．06±0．17）mmol／L与（1．22±0．21）mmol／L]、GFR[（98．13±30．43）mL／min与（110．08±39．18）mL／min]减少、血ALP浓度[110．0（98．5～120．5）U／L与80．0（60．5～96．0）U／L]增加均有统计学意义（均P〈0．05）。叠氮胸苷组患者随HAART时间延长血钙浓度、血ALP浓度增加，GFR减少，差异均有统计学意义（均P〈0．05），而血磷浓度变化差异无统计学意义（P〉0．05）。与叠氮胸苷组比较，替诺福韦组GFR、血钙浓度、血磷浓度减少和血ALP浓度增加更明显。结论：我国目前的免费抗病毒治疗药物对患者疗效显著，含替诺福韦的HAART方案会影响患者的骨代谢，导致GFR、血钙和血磷浓度减少，血ALP浓度增加。临床治疗过程中要密切监测，及时干预和尽早调整方案。

普罗布考对高密度脂蛋白亚组分与抗氧化功能的影响

目的研究普罗布考对动脉粥样硬化(AS)兔HDL亚组分及氧化功能的影响,探讨普罗布考抗AS机制。方法选择18只新西兰大白兔随机分为:对照组6只,饲以普通饲料;AS组6只,饲以高脂饲料;普罗布考组6只,饲以高脂饲料基础上给予普罗布考400 mg/(kg·d)。1 2周后酶法检测血脂;分光光度计法检测血清对氧磷酶1(PON1)活性;采用化学沉淀法检测HDL_2/HDL;组织切片和HE染色检测主动脉内膜中层厚度(IMT)和动脉斑块/血管面积。结果实验12周后,与AS组比较,普罗布考组血清TC、LDL-C、HDL-C水平明显下降(P<0.01);PON1活性明显升高(P=0.000);HDL_2/HDL明显降低(P=0.000),主动脉IMT明显减小(P=0.000),斑块面积/血管腔面积明显降低(P=0.002)。结论普罗布考通过提高PON1活性,降低HDL_2/HDL而改善HDL功能,减少主动脉IMT及斑块面积/血管腔面积,延缓AS进展。

蛋白磷酸酶2AB5613全酶调控氯化镉诱导肝细胞毒性的作用研究

目的探讨蛋白磷酸酶2A（proteinphosphatase2A，PP2A）B56β全酶调控CdCl2诱导肝细胞毒性的作用及其机制。方法采用改良四甲基偶氮唑盐（M啊比色法检测CdCl2对人正常肝细胞（L-02）、黄曲霉素诱导转化细胞（L-02RT—AFB1）及肝肿瘤细胞（Bel7402）的毒性，利用病毒感染法在L．02或Bel7402上构建丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B（AKT）低表达（L-02SHAKT）、B56p低表达（L．02SHB5613）和B56p高表达（L-02RT-AFB1-B5613、Bel7402．B56p）的细胞株。在浓度为0、20、40、80、160μmol/L的CdCl2处理下，检测人正常肝细胞、转化的肝细胞和肝肿瘤细胞的相对细胞活力。在2．5、5．0μmol/L的渥青霉素和40μmol／LCdCl3共同作用下检测L-02细胞中各蛋白相对表达量。采用Westemblot法检测这些细胞株中B56B、金属硫蛋白（metallothionein，MT）、AKT、AKT磷酸化（P．AKT）的表达水平。结果在40μmol／LCdCl：作用下，L．02RT。AFB，和Bel7402细胞中MT表达水平分别为0．12±0．02、0．06±0．06，低于对照组（0．92±0．14）（F=I148．16，P〈O．001）。在40μmol／LCdCl2作用下，AKT干扰细胞株L．02SHAKT-1、L-02SHAKT．2中p-AKT水平分别为0．08＋0．02、0．08±0．05，低于对照组（0．18±0．15）（F=724．70，P〈O．001）；两种细胞MT的表达水平均为0．62±0．16，高于对照组（0．22±0．14）（F=94．73，P〈O．001）。在2．5、5．0μmol／L渥青霉素和40μmol／LCdCl：共同作用下，L-02细胞中D．AKT的表达水平分别为0．28±0．07、0．15±0．11，低于未用渥青霉素处理组（0．52±0．11）（F=578．57，P〈0．001）；MT的表达水平分别为1．62±0．80、1．08±0．15，高于未用渥青霉素处理组（0．69±0．18）（F=12．34，P〈O．001）。在40μmol／LCdCl2作用下，B56p低表达细胞株L．02SHB5613．1、L-02SHB5613—2中β—AKT的表达水平分别为0．57±0．13、0．59±0．02，高于对照细胞L-02SHGFP（0．32±0．02）（F=87．16，P〈0．001）；MT的表达水平分别为0．35±0．07、0．20＋0．03，低于对照细胞L．02SHGFP（1．51±0．13）（仁2457．10，P〈0．001）。在40μmol／LCdCl：作用下，B56B高表达细胞株L．02RT—AFB1-B56B、Bel7402．B56B中p-AKT的表达水平分别为0．10±0．11、0．09±0．01，低于对照细胞L．02RT—AFB。（0．36±0．01）、Bel7402（0．43±0．11）（F=877．62，P〈0．001）；MT的表达水平分别为0．92±0．13、0．95±0．08，高于对照细胞L．02RT—AFB，（0．44±0．12）、Bel7402（0．77±0．06）（F=51．97，P〈O．001）。结论特异的PP2AB56β全酶介导AKT的去磷酸化调控MT的表达，最终影响重金属CdCl2诱导的肝细胞毒性。本研究揭示了一条PP2A参与CdCl2诱导肝细胞毒性的关键信号通路。

司维拉姆治疗对慢性肾脏病患者IL-6、TNF-α及钙磷代谢的影响

目的分析司维拉姆治疗对慢性肾脏病患者白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及钙磷代谢的影响。方法选取自2019年9月至2022年12月期间宣城市中心医院收治的慢性肾脏病患者92例作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(常规治疗+醋酸钙片口服)和观察组(常规治疗+司维拉姆口服)各46例。对比两组治疗效果及不良反应。结果观察组临床总有效率(93.48%)显著高于对照组(78.26%),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血清IL-6、TNF-α及CRP水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血清ALP、PTH水平均低于对照组,Alb水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血清磷水平及钙磷乘积均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较无统计学意义(χ^(2)=0.806,P=0.369)。结论司维拉姆治疗可更好地控制慢性肾脏疾病患者炎性反应,更有利于改善患者Alb及钙磷代谢,临床疗效更佳,且具有一定安全性,值得临床推广使用。

二苯乙烯苷对慢性脑缺血大鼠学习记忆的影响

目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血致痴呆模型。术前2周起,分别给TSG30,60及120mg·kg-1·d-1,ig,连续11周。术后8周时,分别用Morris水迷宫实验和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力。术后9周时,采用生化方法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,免疫组化方法检测海马蛋白磷酸酶2A(PP-2A)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达。结果慢性脑缺血模型组大鼠空间和被动回避学习记忆能力明显降低,海马AChE活性显著升高,PP-2A和MAP-2表达明显减少。TSG给药10周可显著改善慢性脑缺血引起的学习记忆能力降低;给药11周明显抑制海马AChE活性增高,并增加PP-2A和MAP-2的表达。结论TSG可改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马AChE活性,增加海马PP-2A和MAP-2的表达有关。

他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响(英文)

背景:目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多,而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用。目的:通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量,探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响。设计:随机分组,平行对照(自我前后对照、相互对照)实验。单位:大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科。材料:实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成。选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD 大鼠24只为观察对象,体质量(200±20)g,用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组8只。干预:伤前24h 以20g/L 戊巴比妥钠(40m g/kg)腹腔麻醉,损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon 建立的大鼠脑液压损伤模型,打击能量为151.95～172.21kPa,相当于中度颅脑损伤,对照组只埋管不打击。治疗组伤后5m in 以1mg/kg 腹腔注射他克莫司,1次/d,连续7d。损伤组和对照组腹腔注射生理盐水。伤前、伤后3d 和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验。于伤后1周全部大鼠断头取脑,分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测,图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布,用流式细胞仪检测凋亡细胞计数。主要观察指标:①各组动物于伤前、伤后3d 和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩。②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果。③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率。结果:24只大鼠全部进入结果分析。①治疗组伤后3d 和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组犤行走试验成绩:(7.5±2.5)s,(5.5±2.1)s,(10.5±2.5)s,(8.2±2.5)s。平衡试验成绩:(3.4±0.5)分,(2.5±0.2)分,(5.7±0.2)分,(5.0±0.5)分,P <0.05～0.01犦,治疗组伤后3d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组犤(4.9±1.7)s,(6.2±2.3)s,(4.0±1.5)s,(4.4±2.6)s,P <0.05～0.01犦。②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组(140.36±3.87,45.52±2.16,31.67±2.35,96.25±2.85,24.35±2.47,20.49±2.08,P <0.01);对照组显著高于治疗组(162.24±3.52,50.58±2.31,42.69±2.53,P <0.01)。③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组犤(10.37±2.12)%,(18.39±2.87)%,(12.78±2.45)%,(21.14±4.85)%,(38.57±3.78)%,(21.18±4.59)%,P <0.01犦。损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组犤(3.85±2.56)%,(4.96±2.15)%,(3.52±2.17)%,P <0.01犦。结论:他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达,减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡,对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用。

TURBT术联合化疗治疗T2期肌层浸润性膀胱癌的临床疗效及其对血清DKK、CIP2A水平的影响

[目的]探讨经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)联合化疗治疗T2期肌层浸润性膀胱癌的临床疗效及其对血清Dickkopf蛋白(DKK)、蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)水平的影响.[方法]回顾性分析2018年1月至2021年1月本院收治的130例T 2期肌层浸润性膀胱癌(MIBC)患者临床资料,根据治疗方法的不同分为观察组(采用TURBT手术方案联合化疗治疗,n=75)和对照组[采用开放根治性膀胱切除术(ORC)治疗,n=55].记录两组患者手术时间、术中出血量、术后留置导管时间及手术并发症发生情况,比较两组患者手术前后血清DKK、CIP2A水平.[结果]观察组患者术中出血量、手术时间及留置导尿管时间均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).术后,两组血清CEA、CA19-9、CA125水平均低于术前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血清DKK、CIP2A水平均低于术前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组并发症总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组复发率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).[结论]相较于ORC治疗,采用TURBT对膀胱癌患者治疗后可显著提高临床疗效,并降低血清DKK、CIP2A水平,且创伤更小.

接骨续筋丸促进大鼠骨折愈合的作用机制研究

目的:探讨接骨续筋丸促进大鼠骨折愈合的作用机制。方法:将72只3月龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组,每组18只。截断模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组大鼠股骨干中段,制作股骨开放性骨折模型;假手术组仅暴露股骨干,不做截骨。造模后第2天开始灌胃,接骨续筋丸组以3 g·kg^(-1)剂量的接骨续筋丸混悬液灌胃,接骨七厘胶囊组以0.52 g·kg^(-1)剂量的接骨七厘胶囊混悬液灌胃,模型对照组和假手术组给予蒸馏水灌胃;每天灌胃1次,各组连续灌胃21 d。分别于药物干预7 d、14 d、21 d后取材,各组随机选取6只大鼠从腹主动脉抽血,经静置、离心后吸取上层血清,保存待检;抽血完成后,取出大鼠左侧股骨干,制备骨折端股骨石蜡标本。分别采用钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)、血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)测试盒测定大鼠血清Ca、P、ALP含量,采用苏木精-伊红(HE)染色观察骨组织形态学变化,采用免疫组化法检测骨折端骨组织中骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果:(1)药物干预后血清Ca含量。药物干预7 d、14 d、21 d后,4组大鼠血清Ca含量比较,组间差异均无统计学意义[(1.80±1.03)mmol·L^(-1),(1.88±0.80)mmol·L^(-1),(1.91±0.68)mmol·L^(-1),(1.83±0.62)mmol·L^(-1),F=0.023,P=0.995;(1.77±0.89)mmol·L^(-1),(1.77±0.73)mmol·L^(-1),(1.88±1.18)mmol·L^(-1),(1.74±0.89)mmol·L^(-1),F=0.025,P=0.095;(1.72±0.98)mmol·L^(-1),(1.74±0.61)mmol·L^(-1),(1.80±0.90)mmol·L^(-1),(1.69±0.79)mmol·L^(-1),F=0.019,P=0.996]。(2)药物干预后血清P含量。药物干预7 d后,4组大鼠血清P含量比较,差异有统计学意义[(1.89±0.56)mmol·L^(-1),(1.97±0.53)mmol·L^(-1),(3.23±0.90)mmol·L^(-1),(4.24±0.68)mmol·L^(-1),F=16.041,P=0.000];组间两两比较,假手术组与模型对照组的差异无统计学意义(P=0.846),假手术组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.003),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.005),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.018)。药物干预14 d后,4组大鼠血清P含量比较,差异有统计学意义[(1.81±0.48)mmol·L^(-1),(2.65±0.36)mmol·L^(-1),(3.73±0.77)mmol·L^(-1),(4.37±0.93)mmol·L^(-1),F=16.998,P=0.000];组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.045,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.012),接骨七厘胶囊组与接骨续筋丸组的差异无统计学意义(P=0.116)。药物干预21 d后,4组大鼠血清P含量比较,差异有统计学意义[(1.82±0.40)mmol·L^(-1),(2.15±0.50)mmol·L^(-1),(3.35±0.62)mmol·L^(-1),(4.21±0.70)mmol·L^(-1),F=22.663,P=0.000];组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.036,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.002),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.016)。(3)药物干预后血清ALP含量。药物干预7 d后,4组大鼠血清ALP含量比较,差异有统计学意义[(49.71±14.67)U·L^(-1),(93.75±15.11)U·L^(-1),(125.00±22.89)U·L^(-1),(145.49±20.79)U·L^(-1),F=29.797,P=0.000];组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000,P=0.001),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.001,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.009)。药物干预14 d后,4组大鼠血清ALP含量比较,差异有统计学意义[(41.57±10.69)U·L^(-1),(91.13±10.76)U·L^(-1),(111.77±19.66)U·L^(-1),(149.42±12.71)U·L^(-1),F=62.354,P=0.000];组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.019)。药物干预21 d后,4组大鼠血清ALP含量比较,差异有统计学意义[(42.73±14.94)U·L^(-1),(77.33±15.54)U·L^(-1),(95.49±26.12)U·L^(-1),(124.85±25.34)U·L^(-1),F=15.847,P=0.000];组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000,P=0.010),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.026,P=0.001);接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.015)。(4)药物干预后骨折端骨组织形态。药物干预7 d后,模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组骨折端骨组织中可见少量成骨细胞聚集;药物干预14 d后成骨细胞显著增多,且接骨续筋丸组及接骨七厘胶囊组的成骨细胞数量较模型对照组明显增多;药物干预21 d后成骨细胞开始减少;3组破骨细胞在药物干预21 d后出现增长趋势。(5)药物干预后骨折端骨组织中BMP-2的表达量。药物干预7 d后,4组大鼠骨折端骨组织中BMP-2表达量比较,差异有统计学意义(0.10±0.01,0.14±0.02,0.23±0.03,0.27±0.03,F=59.960,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.018,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.015)。药物干预14 d后,4组大鼠骨折端骨组织中BMP-2表达量比较,差异有统计学意义(0.12±0.02,0.15±0.02,0.24±0.03,0.28±0.03,F=47.588,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.047,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.006)。药物干预21 d后,4组大鼠骨折端骨组织中BMP-2表达量比较,差异有统计学意义(0.11±0.02,0.15±0.02,0.24±0.03,0.28±0.02,F=80.017,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.004,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.004)。(6)药物干预后骨折端骨组织中VEGF的表达量。药物干预7 d后,4组大鼠骨折端骨组织中VEGF表达量比较,差异有统计学意义(0.11±0.02,0.14±0.02,0.26±0.01,0.27±0.04,F=69.567,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.015,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组与接骨续筋丸组的差异无统计学意义(P=0.905)。药物干预14 d后,4组大鼠骨折端骨组织中VEGF表达量比较,差异有统计学意义(0.11±0.02,0.15±0.02,0.25±0.03,0.28±0.02,F=72.334,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.026,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组与接骨续筋丸组的差异无统计学意义(P=0.071)。药物干预21 d后,4组大鼠骨折端骨组织中VEGF表达量比较,差异有统计学意义(0.11±0.02,0.15±0.02,0.24±0.02,0.27±0.05,F=39.739,P=0.000);组间两两比较,假手术组低于模型对照组、接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),模型对照组低于接骨七厘胶囊组、接骨续筋丸组(P=0.000,P=0.000),接骨七厘胶囊组低于接骨续筋丸组(P=0.029)。结论:接骨续筋丸促进大鼠骨折愈合的作用机制可能是通过提高大鼠血清P、ALP的含量,促进其骨组织中BMP-2及VEGF的表达,从而促进成骨细胞增殖,但其具体作用机制有待进一步深入研究。

miR-21对口腔鳞状细胞癌恶性生物学表型的影响及其机制探讨

目的观察微小RNA-21(miR-21)对口腔鳞状细胞癌恶性生物学表型的影响,并探讨其机制。方法口腔鳞状细胞癌UT-SCC-15细胞传代培养后随机分为3组,A、B组分别转染反义miR-21、无义序列48 h,C组不予处理。采用Real-time PCR法检测各组miR-21,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell和流式细胞术检测细胞增殖率、穿过率、周期分布及凋亡率。荧光素酶活性实验鉴定磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)是否为miR-21的靶基因,Western blot法检测PTEN、磷酸化蛋白激酶B(p Akt)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、抗凋亡基因Bcl-2、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)。结果与B组和C组比较,A组miR-21相对表达量、细胞增殖率、细胞穿过率、MMP2、Bcl-2、Cyclin D1表达均降低,G1期细胞比例、凋亡率和PTEN均升高,P均<0.05;B组与C组比较,P均>0.05。A组荧光素酶活性值高于B、C组,P均<0.05;B组与C组比较,P>0.05。结论反义miR-21可逆转口腔鳞状细胞癌的恶性生物学表型,可能与上调其靶基因PTEN表达、抑制Akt通路有关。

前列腺癌中CIP2A的表达及意义

目的探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)在前列腺癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法收集2011年12月至2014年11月该院泌尿外科前列腺癌(80例)和前列腺增生(25例)组织标本进行研究。应用RT-PCR和免疫组织化学分别检测标本组织中CIP2A m RNA和蛋白表达情况。结果 CIP2A在前列腺癌组织中的阳性表达率(70%,56/80)明显高于前列腺增生组织(16%,4/25),差异有统计学意义(P<0.01),CIP2A在前列腺癌中表达与高Gleason评分、高T分期、淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P<0.05),但CIP2A表达与前列腺特异性抗原(PSA)水平无明显相关性(P>0.05)。结论 CIP2A在前列腺癌的发生发展中可能起促进作用,与前列腺癌的发生、分化和淋巴结转移有一定关系,有可能成为判断前列腺癌预后的新标志和临床治疗的新靶点。

调控豚鼠心房肌细胞毒蕈硷能钾通道的新机制(英文)

心肌钾离子通道分两类 ,一类是电压依赖型 ,另一类是内向整流型。前者包括瞬间外向钾通道ITO(相应与分子克隆Kv4.2 / 4.3) ,慢迟缓性钾通道IKS(KvLQT1+MinK) ,快迟缓性钾通道IKR(HERG + ?) ,超快迟缓性钾通道IKur (Kv1 5 )。去极化动作电位激活这些钾电流触发和加速细胞膜复极化。后者包括ATP -敏感性钾通道IK ,ATP(相应与分子克隆KIR6 .2+SUR2A) ,静息内向整流钾通道IK1(KIR2 .2 ?) ,乙酰胆碱 /腺苷激活性钾通道IK ,ACh或IK ,ADO(KIR3 1/ 3 4)。IK ,ATP在心肌缺氧或缺血 ,细胞内ATP/ADP比值降低时被激活 ,导致动作电位缩短 ,钙离子内流减少 ,细胞超极化 ,兴奋性降低 ,起到保护心肌的作用。IK1的主要作用是维持静息膜电位。兴奋迷走神经引起的心律减慢主要是通过激活IK ,ACh,降低窦房结自律性及房室传导。限于篇幅和作者近年的研究发现 ,本文将重点讨论心肌乙酰胆碱或腺苷激活性钾通道IK ,ACh的信息传递。目前膜限性理论 (membrane -delimitedpathway)广为接受 ,即乙酰胆碱或腺苷刺激其相应受体 (M2或A1) ,激活与其偶合的G -蛋白 ,继而产生的游离βγ双体直接与KACh蛋白结合 ,从而激活KACh通道。然而 ,新近的研究发现表明由第二信使为中介的去磷酸化酶活性增加 ,也可以激活KACh通道。此外 。

肝功能相关指标联合甲胎蛋白对原发性肝癌诊断的意义

目的:探讨肝功检测项目中的α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)联合甲胎蛋白(AFP)检测对提高原发性肝癌(PHC)检出率和早期诊断的价值。方法:对50例PHC患者、50例肝炎患者及50例健康人进行AFU、GGT、TBA、ALP、AFP检测。结果:病例组与对照组的AFP水平差异有统计学意义(P<0.01)。对肝癌诊断的敏感性依次为GGT>ALP>AFP>TBA>AFU,特异性依次为AFP>AFU>GGT>ALP>TBA。AFP与其他4项参数联合检测的敏感度提高,特异度则有所下降。结论:AFP、AFU、GGT、TBA、ALP进行联合试验对肝癌诊断有意义,可提高敏感度,适用于高危人群的肝癌筛检和临床诊断工作。