磷酰化肽链中电子转移的ESR研究

Electron transfer (ET) is an important elementary step of chemical reaction.Phosphorus is the center of energy expression in biological system. As a result, the research on the ET of phosphoryl and nonphosphoryl peptides is very important for us to understand the role of phosphorus in life and reveal the secrets of life. In this paper, the ET in some phosphoryl and nonphosphoryl peptides are studied by ESR. It is observed that the electron transfers along the backbone of the peptide and that phosphoryl group takes part in the elementary process in the phosphoryl peptide first.

N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究

采用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-二异丙氧基磷酰化肽酯及小肽同20种蛋白氨基酸及3种D型氨基酸(D-Ala、D-Ser、D-Phe)的非共价相互作用。结果表明,可形成π-π共轭体系的芳香环,可显著增强磷酰化肽酯及小肽与氨基酸的相互作用力,π-π堆积力是首要的非共价相互作用力;可形成氢键的极性基团有利于形成复合物,但能否形成氢键还要受到分子柔顺性的影响;另外,分子大小、空间位阻对复合物的形成也有影响;而氨基酸的手性对它们的相互作用在质谱条件下没有表现出影响。

N-磷酰化肽酯及小肽与溶菌酶相互作用的ESI-MS研究

用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-磷酰化肽酯及小肽和溶菌酶的非共价相互作用,比较了磷酰化肽酯及小肽分子中的不同基团对相互作用的影响.结果表明—OH对其与溶菌酶的相互作用有较大贡献;芳香环由于位阻原因,对相互作用有促进和阻碍双重效应;当—OH与芳香环相连时会发生协同效应,可使相互作用显著增强.磷酰化肽酯及小肽的体积大小、空间位阻对相互作用亦有显著影响.磷酰化二肽中氨基酸残基的构型、顺序、碳链长短的变化(增加1～2个C)对其与蛋白溶菌酶之间的相互作用在质谱中没有表现出影响.分子结构较为伸展、分子柔顺性好、空间位阻较小的磷酰化小肽更容易使蛋白在溶液中的构象趋于收缩,而构象较为收缩的蛋白分子更易结合空间位阻较小的磷酰化小肽分子.

N-磷酰化叉肽结构与NMR波谱

测定了N 磷酰化叉肽 ( 2 5)在溶液中的NMR谱 .发现它们具有非对映异位 ,分子无规卷曲及氢键相互作用 .波谱分析表明 ,磷酰基的参与 ,主要影响其结合部位的氨基酸 .由于肽平面的生成及分子内、分子间氢键影响的改变 ,致使叉肽中支链的Dipp Ala磷酰基与 β位羰基的相对位置发生变化 .磷酰基与N Cα 基团仍处于反式位置 。

N-磷酰化二肽的分光光度法测定

利用双缩脲试剂，在可见光区建立了N-磷酸化二肽、二肽以及磷酸化多肽的分光光度定量分析方法。在经典的双缩脲分光光度法的实验条件下，观察到Ｎ－磷酸化二肽、二肽与双缩脲试剂的复合物的最大吸收波长均为 620 nm及 N-磷酰基对二肽有很强的增色作用。

Fmoc策略固相合成磷酰化肽研究进展

蛋白质的磷酰化和去磷酰化对多种生命活动的调节起着关键的作用,磷酰化肽是研究这些生命调节过程中一类非常重要的物质。自20世纪40年代人类首次成功地合成出磷酰化肽以来,磷酰化肽的研究就引起了化学家和生物学家的广泛关注。由于Fmoc固相合成策略在多肽的合成中被普遍应用,因此,Fmoc固相合成策略也已经成为目前磷酰化肽最主要的合成手段。该文对近年来采用Fmoc固相合成策略进行磷酰化肽合成的方法(包括整体磷酰化法和磷酰化单体合成法)进行了总结,并对各种合成方法的优缺点进行了讨论。

二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯诱导K562细胞凋亡

为寻找能特异性诱导肿瘤细胞凋亡的小分子诱导剂,研究了二异丙氧基磷酰化亮赖叉肽甲酯((DIPP-L-Leu)2-L-Lys-OCH3)对K562细胞的促凋亡作用。合成了(DIPP-L-Leu)2-L-Lys-OCH3,通过质谱、磷谱、氢谱和碳谱进行结构鉴定。通过MTT比色实验得到:该样品对K562细胞的半抑制浓度为22.66μmol.L-1。AO荧光染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和Annexin -FITC/PI双染实验表明:该样品对K562细胞的增殖抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的。Caspase活性分析实验证明该样品是通过线粒体途径启动细胞凋亡。