丙泊酚甲磷酸钠盐的含量测定及其杂质检查

目的 建立测定原料药丙泊酚甲磷酸钠的含量及检查杂质的方法。方法 采用HPLC法和酸碱滴定法。结果 丙泊酚甲磷酸钠盐在0．82～4．04μg范围内，线性关系良好（r=0．9998），日内及日间精密度分别为0．26％、0．32％；丙泊酚检查的定量限为0．016ng（S／N=10），在6．73～323．4ng范围内，线性关系良好（r=0．9991）。结论 所建立的方法简便、灵敏、准确，可用于丙泊酚甲磷酸钠的含量测定及杂质丙泊酚的检查。

磷酸丙泊酸钠与镇静

磷酸丙泊酸钠（磷酸丙泊酸，fospropofot disodium，FPD）为新型镇静／催眠药，是一种水溶剂型的丙泊酚前体药，在体内通过代谢释放出活性的丙泊酚（f）发挥镇静效应。由于FPD在体内的水解过程．其药物动力学和药效学特性较脂肪乳剂型的丙泊酚有显著差异。已有的临床实验证实，FPD可安全有效的用于结肠镜、纤维支气管镜及小手术病人的镇静。随着研究的进一步进展，磷酸丙泊酸钠将有更为广阔的临床应用前景。

丙泊酚和地卓西平马来酸盐逆转抑郁大鼠电休克后的Tau蛋白过度磷酸化

目的比较丙泊酚和地卓西平马来酸盐(MK-801)对抑郁大鼠电休克(ECT)后Tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制。方法将嗅球切除抑郁模型大鼠分入6组,每组8只:对照组大鼠予5mL 0.9%氯化钠溶液腹腔内注射;MK-801组大鼠予5mL MK-801(10mg/kg)腹腔内注射;MK-801+ECT组大鼠予5mL MK-801(10mg/kg)腹腔内注射+施行1个疗程ECT;丙泊酚组大鼠予5mL丙泊酚(200mg/kg)腹腔内注射;丙泊酚+ECT组大鼠予5mL丙泊酚(200mg/kg)腹腔内注射+施行1个疗程ECT;ECT组大鼠予5mL0.9%氯化钠溶液腹腔内注射+施行1个疗程ECT。ECT后采用高效液相色谱法检测谷氨酸(Glu)在海马组织中的表达,免疫组织化学法和免疫印迹法检测p-AT8Ser202和糖原合成酶激酶(GSK)-3β1H8在海马组织中的表达。结果 ECT组、MK-801+ECT组和丙泊酚+ECT组的Glu含量分别显著高于对照组、MK-801组和丙泊酚组(P值均<0.01),丙泊酚组显著低于对照组(P<0.01),丙泊酚+ECT组显著低于ECT组(P<0.01),MK-801组与对照组间、MK-801+ECT组与ECT组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。ECT组、MK-801+ECT组和丙泊酚+ECT组的p-AT8Ser202和GSK-3β1H8蛋白表达分别显著高于对照组、MK-801组和丙泊酚组(P值均<0.01),MK-801组和丙泊酚组均显著低于对照组(P值均<0.01),MK-801+ECT组、丙泊酚+ECT组均显著低于ECT组(P值均<0.05)。结论丙泊酚和MK-801可减缓ECT后Tau蛋白的过度磷酸化程度。

磷酸丙泊酸钠用于结肠镜检查麻醉中的效果分析

目的探讨磷酸丙泊酸钠用于结肠镜检查麻醉中的效果。方法选取门诊就诊的ASA分级Ⅰ或Ⅱ级需要行结肠镜检查的患者120例,随机分为治疗组和对照组,每组60例。治疗组在使用磷酸丙泊酸钠麻醉下进行结肠镜检查,对照组在使用咪达唑仑麻醉下进行结肠镜检查。记录心率(HR)、血压、平均动脉压(MAP)和血氧饱和度(Sa O2)等指标的变化,记录患者起效、苏醒、离院时间和不良反应发生情况。结果治疗组患者HR、MAP、Sa O2的检查中最低值和对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的起效时间、苏醒时间、离院时间与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的躁动呻吟、恶心呕吐、患者满意率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论磷酸丙泊酸钠对呼吸循环系统的抑制弱,可以降低患者躁动,减轻患者的痛苦,并且具有很高的安全性和满意度,适用于结肠镜检查麻醉,在临床上有较高的应用价值。

丙泊酚对神经元缺血再灌注损伤的保护与磷酸化蛋白激酶信号通路的关系

目的:探讨丙泊酚在脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)中的作用及可能机制。方法:采用氧糖剥夺再灌注(OGD/RP)法体外构建缺血/再灌注细胞模型,将细胞分为对照组、OGD/RP组和丙泊酚+OGD/RP联合组。采用MTT法检测皮质神经元存活率,Annexin V-PI检测细胞凋亡情况,RT-PCR方法检测碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)的m RNA表达,Western blot检测丙泊酚对皮质神经元内b FGF、磷酸化蛋白激酶B(p PKB)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p ERK1/2)表达。采用小干扰RNA构建b FGF沉默的细胞。结果:丙泊酚能够显著促进CI/RI后神经元的存活,抑制其凋亡,OGD/RP处理组神经元凋亡率为43.2%,以10 mg/L的丙泊酚预处理后细胞的凋亡率即降为19.5%(P<0.05)。与对照组(1.02±0.03)相比较,OGD处理后细胞中b FGF的含量(0.78±0.06)显著下调(P<0.05),丙泊酚处理的皮质神经元中b FGF含量(1.43±0.04)显著高于OGD处理组(P<0.05)。沉默的b FGF或者施加蛋白激酶B(PI3K-p PKB)以及p ERK1/2信号通路抑制剂都会导致细胞存活率显著下降(P<0.05),抑制PI3K-p PKB以及ERK1/2的激活。结论:丙泊酚可以通过上调b FGF的表达,激活PI3K-p PKB和ERK1/2的信号通路,减轻体外培养神经元凋亡/再灌注损伤,从而增加皮质神经元的存活。

丙泊酚通过组蛋白脱乙酰酶2/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/N-甲基-D-天冬氨酸-2B受体信号通路对子代大鼠学习和记忆功能的影响

目的探讨孕早期母体丙泊酚暴露对子代大鼠学习和记忆功能的影响。方法选取孕5-7 d的SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为A、B、C、D组,每组各10只。A组为对照组,B、C和D组妊娠大鼠分别注射0.25%、0.5%和0.75%的丙泊酚。子代大鼠出生后,根据是否给予组蛋白脱乙酰酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)抑制剂将其分为CS组(A组子代大鼠给予HDAC2抑制剂)、I0.25S组(B组子代大鼠给予HDAC2抑制剂)、I0.5S组(C组子代大鼠给予HDAC2抑制剂)、I0.75S组(D组子代大鼠给予HDAC2抑制剂)、CN组(A组子代大鼠不给予HDAC2抑制剂)、I0.25N组(B组子代大鼠不给予HDAC2抑制剂)、I0.5N组(C组子代大鼠不给予HDAC2抑制剂)和I0.75N组(D组子代大鼠不给予HDAC2抑制剂),每组各10只。比较各组子代大鼠Morris水迷宫实验结果、海马HDAC2、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)、N-甲基-D-天冬氨酸-2B受体(N-methyl-D-aspartate receptor 2B subunits,NR2B)mRNA及NR2B蛋白表达水平。结果第1-4天I0.25N组、I0.5N组、I0.75N组子代大鼠的逃避潜伏期均显著长于CN组(均P<0.05),I0.75S组大鼠平台穿越次数显著少于CS组(P<0.05),I0.25S组、I0.5S组、I0.75S组子代大鼠目标象限停留时间分别显著长于I0.25N组、I0.5N组、I0.75N组(均P<0.05)。当丙泊酚的暴露剂量增加,细胞出现线粒体空泡和高尔基体肿胀,HDAC2抑制剂可减轻丙泊酚暴露引起的子代海马功能障碍。I0.25N组、I0.5N组、I0.75N组子代大鼠海马HDAC2 mRNA表达水平均显著低于CN组(均P<0.05),CS组、I0.25S组、I0.5S组、I0.75S组子代大鼠海马HDAC2 mRNA水平分别显著低于CN组、I0.25N组、I0.5N组、I0.75N组(均P<0.05);CS组、I0.25S组、I0.5S组、I0.75S组子代大鼠海马CREB mRNA水平分别显著高于CN组、I0.25N组、I0.5N组、I0.75N组(均P<0.05);I0.25S组、I0.5S组和I0.75S组子代大鼠海马NR2B mRNA和NR2B蛋白表达水平分别显著高于I0.25N组、I0.5N组和I0.75N组(均P<0.05)。结论孕早期母体丙泊酚暴露损害子代大鼠学习和记忆功能,机制与其调节子代大鼠海马HDAC2/CREB/NR2B蛋白表达有关。

丙泊酚对仔鼠海马磷酸化tau蛋白及β-淀粉样蛋白_(1-42)表达的影响

目的探讨怀孕大鼠注射丙泊酚对其后代空间认知探索能力及海马磷酸化tau蛋白(P-tau)、β-淀粉样蛋白(1-42)[Aβ(1-42)]沉积表达的影响。方法 3个月龄24只雌鼠与8只雄鼠按雌雄比3∶1合笼受孕。怀孕后按随机数字表法将孕鼠分为早期组(E组)、中期组(M组)、晚期组(L组)和对照组(C组),各6只。E组、M组、L组经腹腔注射丙泊酚80 mg·kg-1·d-1,连续注射7 d。C组注射同体积的0.9%氯化钠溶液代替丙泊酚。在孕鼠子代30日龄时进行Morris水迷宫实验,取其海马分别采用免疫组织化学和酶联免疫吸附实验,检测丝氨酸202位点磷酸化tau蛋白及Aβ(1-42)表达情况。结果与C组(65.60±7.23)s相比,E组(51.20±8.11)s、M组(36.00±6.44)s、L组(47.20±12.30)s,仔鼠空间学习记忆能力下降,均差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测显示M组仔鼠海马Aβ(1-42)和P-tau含量较E组、L组、C组高[Aβ(1-42):(27.38±5.90)比(12.65±2.08),(13.79±3.37),(65.60±7.23);P-tau:(26.35±5.83)比(13.65±3.46),(14.56±3.82),(8.49±1.20)]。酶联免疫吸附实验检测亦显示M组仔鼠海马Aβ(1-42)和P-tau含量较E组、L组、C组高[Aβ(1-42):(88.6±7.43)比(71.60±6.79),(13.79±3.37),(65.80±6.28);P-tau:(230.13±8.22)比(210.42±2.20),(210.95±1.75),(200.65±1.57)],均差异有统计学差异(P<0.05)。结论孕期多次注射丙泊酚损伤仔鼠空间学习记忆能力,孕中期暴露致损伤最为明显,其机制可能与海马P-tau、Aβ(1-42)沉积过度表达有关。

丙泊酚与七氟烷麻醉对老年肺癌患者心肌肌钙蛋白Ⅰ、肌酸磷酸激酶同工酶和皮质醇的影响

目的探讨七氟烷和丙泊酚麻醉对老年肺癌患者肌酸磷酸激酶同工酶（CK—MB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）和皮质醇（COR）的影响。方法按照随机数字表法将88例老年肺癌患者平均分为研究组和对照组，两组患者均选择咪达唑仑、罗库溴铵及依托咪酯等静脉诱导麻醉，研究组患者行七氟烷持续吸入麻醉，对照组患者行丙泊酚持续静注麻醉，比较两组患者不同时间点CK—MB、cTnI和COR水平。结果两组患者在T2、T3、T4、T5时的cTnI、COR含量均显著高于同组T1时，在T3、T4、T5时的CK—MB含量均显著高于同组T1时，差异有统计学意义（P〈0．05）；研究组在T2、T3、T4、T5时的cTnI含量显著低于对照组，在T4、T5时的CK—MB含量显著低于对照组，在T2、T3、T4时的COR含量显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论七氟烷吸入麻醉在老年肺癌患者手术治疗中对患者心肌损伤较小，值得临床应用与推广。

不同基质丙泊酚麻醉下患者血清甘油三酯与血清肌酸磷酸激酶变化观察

目的探讨不同基质丙泊酚麻醉下患者血清肌酸磷酸激酶变化,分析血清肌酸磷酸激酶水平与术后并发丙泊酚输注综合征(PIS)的关系。方法选择不同基质丙泊酚麻醉诱导的手术患60例者,根据麻醉用药不同分为丙泊酚组(A组)、中长链丙泊酚组(B组)和七氟烷组(C组),各20例。比较三组患者手术前(T_1)、术后即刻(T_2)、术后24 h(T_3)、术后48 h(T_4)及术后72h(T_5)的TG和CK水平,观察术后并发PIS情况。结果三组患者的TG水平均逐渐减低,至T_3点最低,之后逐渐升高;与A组相比,其余两组患者各时间点的TG水平均明显较低(P<0.05);三组患者的CK水平均逐渐升高,再逐渐降低至T_1时水平;T_2、T_3、T_4、T_5时,B组患者的CK水平明显高于另外两组(P<0.05)。结论中长链丙泊酚可以一定程度改善患者的CK以及TG水平,对于术后并发PIS的影响仍需进一步研究。

丙泊酚或依托咪酯对大鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察丙泊酚或依托咪酯对出生28 d大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic pro-tein,GFAP)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP response elementbinding protein,CREB)表达的影响。方法选取雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、丙泊酚组和依托咪酯组,每组20只。丙泊酚组腹腔注射丙泊酚总量为200 mg/kg,依托咪酯组腹腔注射依托咪酯总量为60 mg/kg,对照组不注射任何药物。血气分析仪检测大鼠动脉血呼吸和代谢指标的变化,免疫组织化学染色法检测大鼠海马组织中GFAP的表达,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠海马组织中PKA和CREB mRNA的表达。结果各组大鼠动脉血pH值、氧分压、二氧化碳分压、HCO3-、BE、氧饱和度之间比较差异无统计学意义(P>0.05);丙泊酚组与依托咪酯组GFAP的平均积分光密度值均高于对照组(P<0.05),而丙泊酚组与依托咪酯组比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,丙泊酚组与依托咪酯组PKA和CREB mRNA的表达均降低(P<0.05),丙泊酚组与依托咪酯组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚或依托咪酯可能通过抑制PKA-CREB信号通路而损害大鼠海马神经元,使星形胶质细胞反应性增生、GFAP表达增加。

cAMP/CREB信号通路对丙泊酚麻醉致大鼠认知功能损伤、记忆功能的影响及其机制

目的探究环腺苷酸/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP/CREB)信号通路对丙泊酚麻醉致大鼠认知功能损伤、记忆功能的影响及机制。方法2021年12月—2022年2月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院动物实验室进行实验。将30只大鼠按随机数字表法分为对照组、丙泊酚组、8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)+丙泊酚组各10只,8-Br-cAMP+丙泊酚组大鼠注射信号通路激动剂8-Br-cAMP+丙泊酚,丙泊酚组注射丙泊酚,对照组注射0.9%氯化钠。麻醉1 d后观察大鼠认知记忆功能变化。结果与对照组比较,丙泊酚组大鼠逃避潜伏期时间延长,穿越平台次数下降(P均<0.01);与丙泊酚组比较,8-Br-cAMP+丙泊酚组大鼠逃避潜伏期时间缩短,穿越平台次数上升(P均<0.01)。与对照组比较,丙泊酚组理毛次数、跨格次数、站立次数下降,中央格停留时间延长(P均<0.01);与丙泊酚组比较,8-Br-cAMP+丙泊酚组理毛次数、跨格次数、站立次数上升,中央格停留时间缩短(P均<0.01)。与对照组比较,丙泊酚组MDA水平上升,SOD水平下降(P均<0.01);与丙泊酚组比较,8-Br-cAMP+丙泊酚组MDA水平下降,SOD水平上升(P均<0.01)。与对照组比较,丙泊酚组cAMP、CREB mRNA表达量均下降(P均<0.01);与丙泊酚组比较,8-Br-cAMP+丙泊酚组cAMP、CREBmRNA表达量均上升(P均<0.01)。与对照组比较,丙泊酚组cAMP、CREB蛋白相对表达量均下降(P均<0.01);与丙泊酚组比较,8-Br-cAMP+丙泊酚组cAMP、CREB蛋白相对表达量均上升(P均<0.01)。结论激活cAMP/CREB信号通路可缓解丙泊酚麻醉造成认知功能损伤及记忆功能下降,其机制可能与氧化应激反应受到调节有关。

大鼠丘脑酪氨酸羟化酶调控丙泊酚诱导的镇静作用

目的通过定量磷酸化蛋白质组学研究丙泊酚诱导大鼠丘脑镇静作用的新型调节机制。方法①采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对丙泊酚(100 mg·kg-1,ip)诱导镇静模型SD大鼠丘脑差异磷酸化蛋白质进行标记和定量分析;基因本体(GO)富集分析差异磷酸化蛋白质的生物进程、细胞组分及分子功能;Western印迹法检测大鼠丘脑酪氨酸羟化酶(TH)第19位丝氨酸磷酸化表达水平。②利用TH抑制剂甲基酪氨酸(20 mg·kg-1,提前30 min ip给药),考察其对丙泊酚诱导C57BL/6J小鼠翻正反射消失的诱导时间、持续时间和翻正反射消失率的影响。结果质谱结果显示,与正常对照组相比,丙泊酚组SD大鼠丘脑中共92个磷酸化蛋白质表达水平发生改变,其中TH第19位丝氨酸磷酸化水平显著下调(P<0.01);与Western印迹法结果一致(P<0.05)。丙泊酚(70~120 mg·kg-1)剂量依赖性地增加小鼠的翻正反射消失率,TH抑制剂甲基酪氨酸预处理可使丙泊酚诱导小鼠翻正反射消失率的半数有效剂量(ED50)由92.32 mg·kg-1(95%CI:90.60~94.08,R2=0.9969)降至85.38 mg·kg-1(95%CI:81.30~89.67,R2=0.9768),量效曲线左移。与单用丙泊酚组比较,甲基酪氨酸预处理组可显著延长丙泊酚(90,100和120 mg·kg-1)诱导的C57BL/6J小鼠翻正反射消失持续时间(P<0.05)。结论本研究筛选出大鼠丘脑中多种磷酸化蛋白质参与调控丙泊酚诱导的镇静效应,抑制TH的活性可显著增强丙泊酚的镇静作用。

丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注损伤后海马线粒体ATP含量和ATP酶活性的影响

目的观察丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注损伤后海马线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量、ATP酶活性、脂质过氧化和超微结构的影响。方法采用大鼠全脑缺血-再灌注损伤模型。40只Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血-再灌注对照组(B组)和缺血-再灌注丙泊酚预处理组,后者按丙泊酚用量又分为50 mg/kg(C1组)1、00 mg/kg(C2组)和150 mg/kg(C3组)三个亚组。观察全脑缺血10 min再灌注60 min时海马线粒体的超微结构、ATP和丙二醛(MDA)的含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)和谷光甘肽(GSH)活性的变化。结果与B组比较,丙泊酚各处理组海马线粒体的ATP含量、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD和GSH的活性均有不同程度的增高(P<0.05或0.01),MDA含量有不同程度的降低(P<0.05或0.01),线粒体超微结构的损伤程度亦明显减轻。结论丙泊酚对脑缺血-再灌注损伤的保护效应可能与其抑制线粒体脂质过氧化反应,减轻线粒体的损伤,促进线粒体ATP含量和ATP酶活性的恢复有关。

丙泊酚与七氟醚单用或联用对缺血-再灌注心肌功能的影响

目的研究七氟醚、丙泊酚单用或联用对缺血-再灌注心肌功能的影响。方法选择2011年9月至2014年12月医院行二尖瓣置换术的风湿性心脏病患者168例,按随机数字表法分为A组、B组和C组,各56例。3组常规麻醉诱导后,A组采用七氟醚1.0～1.5最低有效肺泡浓度（MAC）全程吸入维持,B组采用丙泊酚1.5～2.0 mg/L维持,C组给予丙泊酚0.5～1.0 mg/L全程靶控输注＋七氟醚0.5 MAC维持;所有患者持续静脉泵注瑞芬太尼镇痛,间断追加维库溴铵维持肌松。结果 3组患者血流动力学指标心率（HR）、平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）稳定,各时间点肌钙蛋白I（c Tn I）和肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）均明显高于诱导前（P〈0.05）;A组c Tn I水平在T1,T2,T3,T4各时间点,CK-MB活性在T2,T3,T4各时间点明显低于B、C组（P〈0.05）;A组术后心脏自主复跳率、气管导管拔除时间及心肌收缩力评分均优于B、C组,复跳后心律失常发生率低于B、C组（P〈0.05）;3组住院时间无明显差异（P〉0.05）。结论七氟醚、丙泊酚单用或联用在体外循环直视下瓣膜置换手术麻醉中均可维持血流动力学稳定,满足手术需求。其中七氟醚单用在体外循环转流期间对心肌具有保护作用,且术后恢复好,复跳后心律失常发生率低。

丙泊酚对颅内动脉瘤夹闭术患者术后认知障碍的机制研究

目的探讨丙泊酚对颅内动脉瘤夹闭术患者术后脑脊液氧化应激标记物和tau蛋白的影响,探讨术后认知障碍发生机制。方法择期拟行颅内动脉瘤夹闭术患者40例,随机分为两组:丙泊酚组(P组)和七氟烷组(S组),每组20例。两组全麻诱导气管插管后行机械通气,麻醉维持:P组靶控输注(TCI)丙泊酚,血浆浓度为2~4μg/mL,S组吸入七氟烷(MAC 1.0~2.0),两组同时TCI瑞芬太尼,血浆浓度为2~4 ng/mL,阿曲库铵(肌松监测下使用)维持麻醉平稳。分别于麻醉前(T0)、术后6 h(T1)、24 h(T2)、48 h(T_3)、72 h(T4)时收集脑脊液2 mL,测定脑脊液8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)、超氧化物歧化酶(SOD)、总tau(T-tau)蛋白、磷酸化tau蛋白(P-tau)的浓度。结果与T0时比较,两组T_1,T_2,T_3,T4时的PGF2α、T-tau、P-tau蛋白浓度均有明显升高,SOD活性P组无明显变化,而S组明显降低;与S组比较,P组T_1,T_2,T_3,T4时8-iso-PGF2α、T-tau和P-tau蛋白水平均降低,SOD活性升高。结论丙泊酚可通过抗氧化作用降低颅内动脉瘤夹闭术患者脑脊液内8-iso-PGF2α及tau蛋白磷酸化水平。

右美托咪定抑制丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡

目的探讨右美托咪定抑制丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡的机制。方法体外原代培养7d的大鼠皮层神经元,给予500μmol/L丙泊酚和(或)不同浓度右美托咪定处理12h后,分为丙泊酚组、右美托咪定+丙泊酚组,对照组给予同溶剂的20%脂肪乳,用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各组神经元存活率的变化,Hoechst33258核染色法检测神经元调亡,蛋白质印迹法(Western blotting)测定神经元磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)和细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平。结果与对照组比较,丙泊酚组神经元存活率明显下降,神经元凋亡率明显增加,pCREB蛋白水平明显降低,Cyt-C蛋白水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。与丙泊酚组比较,右美托咪定+丙泊酚组神经元存活率明显增加,神经元凋亡率明显下降,pCREB蛋白水平明显增加,Cyt-C蛋白水平明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论右美托咪定可对抗丙泊酚引起的原代培养皮层神经元凋亡,其机制可能与增加pCREB蛋白水平,降低Cyt-C蛋白水平有关。

长时间输注丙泊酚对兔心肌酶、线粒体细胞色素C和ATP的影响

目的:探讨长时间输注丙泊酚对兔心肌酶、线粒体细胞色素C和ATP的影响。方法:18只成年新西兰兔随机分为空白对照组、丙泊酚组和脂肪乳组,每组6只。空白对照组持续输注0.9%生理盐水,丙泊酚组持续输注1%丙泊酚,脂肪乳组持续输注10%脂肪乳。试验过程中分别在0,8,16 h和实验终点采集动脉血检测肌酸激酶(creatine kinase,CK)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB),实验结束取心肌组织,用差速离心法分离心肌线粒体,高效液相色谱法测量线粒体细胞色素C含量和ATP含量。结果:与空白对照组相比,丙泊酚组和脂肪乳组细胞色素C从线粒体的释放增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);丙泊酚组和脂肪组两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);3组间线粒体内ATP含量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与同组0 h点比较,丙泊酚组和脂肪乳组在输注8,16和24 h的CK升高(均P<0.05);与空白对照组比较,丙泊酚组和脂肪乳组在输注8,16和24 h的CK升高(均P<0.05);与脂肪乳组比较,丙泊酚组CK在输注8,16和24 h升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组比较,丙泊酚组在持续输注丙泊酚24 h时CK-MB升高明显(P<0.05);与同组0 h点比较,丙泊酚组在持续输注24 h后CK-MB升高明显(P<0.05)。结论:长时间输注丙泊酚和脂肪乳均可使血清CK升高,但丙泊酚可使CK-MB升高。丙泊酚和脂肪乳均能使心肌线粒体细胞色素C释放增加,但不影响心肌线粒体ATP产量。

丙泊酚对高脂血症大鼠空间学习记忆功能的影响及机制

目的:研究丙泊酚对高脂血症大鼠空间学习记忆功能和海马神经元Tau蛋白磷酸化表达水平及老年斑沉积的影响。方法:将成模大鼠随机分成4组:P10、P30、P75组分别腹腔注射丙泊酚(10,30,75mg/kg·d-1),对照组(G组)给予生理盐水75mg/kg·d-1,连续注射5d。Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆功能。取海马组织行刚果红和免疫组织化学染色,ipwin32软件分析Tau蛋白磷酸化表达阳性细胞平均光密度值。结果:定位航行实验及附加实验:P30、P75组逃避潜伏期较P10、G组明显延长(P<0.05);空间搜索实验:P30、P75组穿越平台次数较P10、G组明显减少(P<0.05);免疫组织化学染色:P30、P75组平均光密度值与P10、G组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。刚果红染色:P30、P75组可见老年斑沉积物。结论:镇静或麻醉剂量丙泊酚可损害高脂血症大鼠空间学习记忆能力。其机制可能与海马老年斑沉积增多和Tau蛋白过度磷酸化相关。

丙泊酚复合不同浓度七氟醚麻醉对老年术后认知障碍的影响

目的 探讨丙泊酚复合七氟醚不同配伍麻醉对老年术后认知障碍的影响。方法 选取平顶山市第一人民医院2020年1月至2021年6月收治的股骨颈骨折需行手术治疗的老年病人135例,根据麻醉方法不同分为低浓度七氟醚组(n=67)和高浓度七氟醚组(n=68)。低浓度七氟醚组采用靶控输注丙泊酚血浆靶浓度0.6 mg/L和吸入浓度为1.2%的七氟醚进行麻醉维持;高浓度七氟醚组采用靶控输注丙泊酚血浆靶浓度0.6 mg/L和吸入浓度为1.7%的七氟醚进行麻醉维持。比较两组病人简易智力状态检查量表(MMSE)评分、载脂蛋白J(ApoJ)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经生长因子(NGF)水平,氧化应激反应指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛和总抗氧化能力(T-AOC)水平和生命体征指标心率、平均动脉压(MAP)、血氧饱和度(SpO2)以及不良反应发生率。结果 术后6、24、72 h高浓度七氟醚组MMSE评分[(25.61±2.16)分、(27.41±2.38)分、(28.02±1.22)分]高于低浓度七氟醚组[(23.47±2.23)分、(25.46±2.08)分、(27.13±2.15)分](P<0.05);术后1、3、7 d时ApoJ水平[(145.36±14.27)mg/L、(139.57±12.78)mg/L、(130.39±12.62)mg/L]、NSE水平[(9.66±2.54)μg/L、(7.38±2.12)μg/L、(5.88±1.58)μg/L]高于低浓度七氟醚组[(130.64±10.58)mg/L、(125.37±11.21)mg/L、(123.11±11.34)mg/L、(7.22±1.48)μg/L、(6.11±1.71)μg/L、(4.22±1.24)μg/L],NGF水平[(290.46±37.38)μg/L、(315.11±39.16)μg/L、(358.39±43.44)μg/L]低于低浓度七氟醚组[(327.23±40.25)μg/L、(345.44±40.66)μg/L、(395.23±38.48)μg/L](P<0.05);高浓度七氟醚组术后MAP(78.28±6.43)mmHg、心率(85.36±6.42)次/min、SpO2(96.52±4.22)%水平均高于低浓度七氟醚组(74.28±6.21)mmHg、(78.16±6.32)次/min、(94.25±4.18)%(P<0.05);术后1、6 h高浓度七氟醚组丙二醛水平[(5.87±0.54)mmol/mL、(2.65±0.32)mmol/mL]低于低浓度七氟醚组[(7.14±0.46)mmol/mL、(4.09±0.47)mmol/mL],而SOD水平[(87.22±13.59)U/mL、(66.69±10.58)U/mL]和T-AOC水平[(20.53±4.20)U/mL、(22.24±3.38)U/mL]高于低浓度七氟醚组[(73.44±14.31)U/mL、(57.41±9.78)U/mL、(18.49±3.48)U/mL、(20.14±3.01)U/mL](P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 靶控输注0.6 mg/L丙泊酚和吸入浓度为1.7%的七氟醚可有效促进老年病人认知功能的恢复,且不会增加不良反应。

丙泊酚后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

目的:探讨丙泊酚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的改善作用及其对脑线粒体损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丙泊酚后处理组,每组8只。模型组和丙泊酚后处理组大鼠采用结扎颈动脉法建立大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注模型,丙泊酚后处理组大鼠于再灌注即刻股静脉输注20 mg·kg-1·h-1丙泊酚2 h,假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水。各组大鼠于再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,采用HE染色法观察各组大鼠海马组织病理形态表现,采用相关试剂盒检测各组大鼠海马组织中氧化应激相关因子活性和水平,采用活性氧(ROS)荧光探针检测各组大鼠脑海马组织中ROS水平,采用TUNEL法检测各组大鼠海马组织中TUNEL阳性细胞率,采用Western blotting法检测各组大鼠海马组织中线粒体裂变、融合和生物发生相关蛋白及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯氧化酶4(Nox4)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组大鼠海马组织中Nrf2蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高(P<0.05),大鼠海马组织病理损伤明显,海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化力(T-AOC)水平明显降低(P<0.01),丙二醛(MDA)和ROS水平及TUNEL阳性细胞率明显升高(P<0.05),动力相关蛋白1(DRP1)、裂变蛋白1(Fis1)、Nox4和Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),视神经萎缩症蛋白1(OPA1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和线粒体转录因子A(TFAM)蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,丙泊酚后处理组大鼠神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),大鼠海马组织病理损伤明显改善,大鼠海马组织中SOD及GSH-Px活性和T-AOC水平明显升高(P<0.05),MDA水平、ROS水平和TUNEL阳性细胞率明显降低(P<0.05),DRP1、Fis1和Nox4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),OPA1、Mfn2、PGC-1α、TFAM和Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:丙泊酚后处理可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞凋亡和氧化应激,促进线粒体融合和生物发生并抑制线粒体裂变,改善大鼠神经功能损伤,其机制可能与调控Nox4/Nrf2信号通路有关。