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甘蔗磷酸丙糖/磷酸转运蛋白基因ShTPT的克隆与表达分析
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作者 赵雪婷 赵婷婷 +7 位作者 冯翠莲 高利燕 林继山 冯小艳 王文治 沈林波 张树珍 王俊刚 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2269-2276,共8页
磷酸丙糖/磷酸转运蛋白(triose-phosphate/phosphate translocator,TPT)是一种磷酸丙糖转运蛋白,在植物碳代谢途径以及非生物胁迫中发挥重要作用。蔗糖具有广泛的食用价值和重要的经济价值,甘蔗是制糖的主要原料,蔗糖占中国产糖量的80%... 磷酸丙糖/磷酸转运蛋白(triose-phosphate/phosphate translocator,TPT)是一种磷酸丙糖转运蛋白,在植物碳代谢途径以及非生物胁迫中发挥重要作用。蔗糖具有广泛的食用价值和重要的经济价值,甘蔗是制糖的主要原料,蔗糖占中国产糖量的80%以上,因此实现甘蔗高产高抗目标至关重要。本研究以甘蔗品种新台糖22号(ROC22)为材料,克隆获得甘蔗磷酸丙糖/磷酸转运蛋白基因ShTPT,利用生物信息学方法对ShTPT进行蛋白理化性质、保守结构域、跨膜结构预测和蛋白序列比对。结果显示:ShTPT基因CDS全长1221 bp,编码406个氨基酸,蛋白分子量为43.63 kDa,等电点(pI)为9.80,富含丙氨酸、亮氨酸,不稳定系数为42.51,亲水系数为0.583,是一种不稳定的疏水性蛋白;ShTPT蛋白不含信号肽并具有9个跨膜结构域;保守结构域预测显示ShTPT含有1个TPT结构域,符合TPT家族特征;进化分析结果显示,ShTPT与高粱SbTPT(XP_002454867.1)、玉米ZmTPT(NP_001105497.1)聚在一起,同源性分别为97.04%和94.13%。进一步对ShTPT进行亚细胞定位分析发现ShTPT定位在叶绿体。甘蔗组织表达模式分析表明,ShTPT主要在叶片中表达,在根部和茎中的表达量极低。在PEG模拟的干旱胁迫条件下ShTPT的表达量表现出升-降-升的趋势,表明其响应干旱胁迫。该研究结果表明ShTPT是一个定位于叶绿体的跨膜转运蛋白,可能参与甘蔗叶片中的原初碳代谢化合物的转运,响应干旱胁迫。本研究初步确定甘蔗ShTPT基因在叶片中碳同化物的转运和非生物胁迫方面发挥重要作用,为进一步研究其功能提供理论依据。 展开更多
关键词 甘蔗 磷酸/磷酸转运蛋白(tpt) 亚细胞定位 干旱胁迫 表达分析
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菠菜磷酸丙糖转移蛋白在烟草中正义及反义表达及其对碳水化合物转运的影响 被引量:1
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作者 刘晗 赵恢武 +3 位作者 陈杨坚 胡鸢雷 高音 林忠平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期703-707,共5页
以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段... 以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段核苷酸序列与文献报道相比同源率为 99 9% ,只有 1个碱基发生改变。将得到的菠菜tptcDNA与CaMV 35S启动子和NOS 3′终止子融合 ,分别构建了正义及反义表达载体。通过根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导转化烟草 (NicotianatabacumL .) ,在含有卡那霉素的抗性筛选培养基上再生的植株经PCR及Southern杂交检测 ,证明tpt基因已整合到烟草基因组上 ,菠菜丙糖磷酸转移蛋白基因导入烟草后使叶绿体中TPT的含量表现出明显差异 ,并导致烟草光合作用产物分配的变化 ,表现在叶绿体中淀粉含量的改变。 展开更多
关键词 磷酸转移蛋白 转基因植物 碳水化合物 表达
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重组日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶蛋白质表达、纯化及特性分析 被引量:14
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作者 余传信 朱荫昌 +3 位作者 殷旭仁 华万全 司进 管晓虹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期31-33,共3页
磷酸丙糖异构酶(TPI)是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一,本研究将日本血吸虫中国大陆株TPI分子基因DNA片段定向克隆到表达载体pGEX-4T-3(编码26kDa的GST蛋白)中,构建重组表达质粒,然后转化大肠杆... 磷酸丙糖异构酶(TPI)是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一,本研究将日本血吸虫中国大陆株TPI分子基因DNA片段定向克隆到表达载体pGEX-4T-3(编码26kDa的GST蛋白)中,构建重组表达质粒,然后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,阳性克隆用IPTG诱导,阳性菌株可表达分子量约55kDa的融合蛋白(GST-TPI),此融合蛋白可与GlutathioneSepharose4B结合成复合物,用凝血酶切割融合蛋白复合物,获得分子量约28kDa的重组表达TPI分子。重组TPI分子具有磷酸丙糖异构酶活性,并能被日本血吸虫重感染兔血清,血吸虫病人血清所识别。重组TPI免疫家兔产生抗体的效价最高可达1∶25600,该血清抗体能识别日本血吸虫中国大陆株成虫抗原中分子量约28kDa的蛋白条带。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸异构酶 TPI蛋白
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西格列汀联合阿卡波糖对2型糖尿病患者肠道相关激素、血脂及葡萄糖转运蛋白4的影响 被引量:21
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作者 杨俊 杨建明 +1 位作者 刘燕群 代敏 《疑难病杂志》 CAS 2018年第11期1225-1228,共4页
目的观察磷酸西格列汀联合阿卡波糖治疗2型糖尿病对患者肠道相关激素、血脂以及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法选取2014年3月—2016年4月三峡大学人民医院/宜昌市第一人民医院内分泌科诊治2型糖尿病患者198例作为研究对象,采用随... 目的观察磷酸西格列汀联合阿卡波糖治疗2型糖尿病对患者肠道相关激素、血脂以及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法选取2014年3月—2016年4月三峡大学人民医院/宜昌市第一人民医院内分泌科诊治2型糖尿病患者198例作为研究对象,采用随机数表法分为对照组(n=98)和观察组(n=100)。对照组给予阿卡波糖治疗,观察组给予磷酸西格列汀联合阿卡波糖治疗。比较患者治疗前、治疗后空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA_(lc))、胃饥饿素、胃泌素、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、GLUT4水平变化,观察记录低血糖、胃肠道反应等不良反应发生情况。结果治疗后,2组患者FPG、2hPG、HbA_(lc)均降低,且观察组明显低于对照组(t=7. 070、3. 443、6. 379,P均=0. 000); 2组患者胃饥饿素、胃泌素等水平均降低,且观察组明显低于对照组(t=20. 843、6. 330,P均=0. 000)。治疗后,2组患者TC、TG、LDL-C水平均降低,HDL-C水平升高,且观察组明显优于对照组(t=7. 975、8. 593、3. 367、9. 661,P=0. 000)。治疗后,2组患者GLUT4水平提高,且观察组明显高于对照组(t=8. 238,P=0. 000)。观察组患者不良反应发生率低于对照组(5. 00%vs. 13. 26%,χ~2=3. 998; P=0. 045)。结论给予2型糖尿病患者磷酸西格列汀联合阿卡波糖治疗,可改善患者的血糖、血脂水平,调节肠道相关激素,提高血清GLUT4水平,降低不良反应发生率,效果显著。 展开更多
关键词 尿病 2型 磷酸西格列汀 阿卡波 血脂 葡萄转运蛋白4
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磷酸西格列汀联合阿卡波糖对老年2型糖尿病患者血糖、血脂及GLUT4水平的影响 被引量:74
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作者 敬仁芝 曹晓红 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第9期1204-1207,共4页
目的:观察磷酸西格列汀联合阿卡波糖对老年2型糖尿病患者血糖、血脂及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法:86例2型糖尿病老年患者随机分为对照组和观察组,每组43例。两组患者均给予饮食、运动、生活规律等方面的指导,并进行心理及用药... 目的:观察磷酸西格列汀联合阿卡波糖对老年2型糖尿病患者血糖、血脂及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法:86例2型糖尿病老年患者随机分为对照组和观察组,每组43例。两组患者均给予饮食、运动、生活规律等方面的指导,并进行心理及用药方面的护理。在此基础上,对照组患者给予阿卡波糖片50 mg/次,每日3次,餐时咀嚼服用;观察组患者给予阿卡波糖片(用法用量同对照组)+磷酸西格列汀片100 mg/次,每日1次,口服。两组疗程均为3个月。比较两组患者治疗前后的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、体质量指数(BMI)、空腹胰岛素(FINs)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛B细胞功能指数(HOMA-B)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标,同时记录治疗期间不良反应发生情况。此外,选取43名健康志愿者作为健康对照组,分别比较两组患者治疗前后血清GLUT4水平与健康对照组之间的差别。结果:治疗后,两组患者BMI、FBG、2 h PG、HbA_lc、HOMA-IR、FINs、TC、TG、LDL-C水平显著低于同组治疗前,且观察组显著低于对照组;两组患者HOMA-B、HDL-C水平显著高于同组治疗前,且观察组显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者血清GLUT4水平显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组患者血清GLUT4水平与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组患者血清GLUT4水平显著高于同组治疗前,亦显著高于同期对照组,但仍低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:磷酸西格列汀联合阿卡波糖治疗老年2型糖尿病能有效控制患者的血糖和血脂水平、改善胰岛B细胞的功能、提高血清GLUT4水平,且不增加不良反应的发生,安全性较好。 展开更多
关键词 磷酸西格列汀 阿卡波 老年 2型尿病 葡萄转运蛋白4
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葡萄糖转运蛋白的新进展 被引量:5
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作者 于洪馗 《临床和实验医学杂志》 2007年第8期155-157,共3页
关键词 葡萄转运蛋白 二型尿病 代谢障碍 胰岛素缺乏 代谢紊乱 磷酸途径 发病机理 进入细胞
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苹果果实糖代谢过程及其调控研究进展 被引量:28
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作者 邓丽莉 生吉萍 《保鲜与加工》 CAS 2012年第1期1-5,11,共6页
苹果果实的糖代谢对果实风味和色泽的形成以及其他营养成分的代谢具有重要的影响,是决定果实品质和商品价值的主要因素。本文综述了苹果果实生长和贮藏过程中糖的种类、数量和代谢途径的变化,以及激素、底物和蛋白磷酸化等对苹果果实糖... 苹果果实的糖代谢对果实风味和色泽的形成以及其他营养成分的代谢具有重要的影响,是决定果实品质和商品价值的主要因素。本文综述了苹果果实生长和贮藏过程中糖的种类、数量和代谢途径的变化,以及激素、底物和蛋白磷酸化等对苹果果实糖代谢过程的调控等方面的研究,为苹果果实品质的改善提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 苹果 代谢 转运 激素调控 蛋白磷酸
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丙泊酚通过上调纤维细胞生长因子的表达激活磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2信号通路抑制体外培养神经元缺血/再灌注损伤 被引量:3
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作者 周国强 巩晓洁 +1 位作者 傅蕊 周晓东 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2015年第3期198-203,共6页
目的探讨丙泊酚在脑缺血,再灌注损伤(ischemia/reperfusioninjury,I/RI)中发挥的作用及其具体机制。方法采用氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/RP)法体外构建缺血/再灌注细胞模型,将细胞分为对... 目的探讨丙泊酚在脑缺血,再灌注损伤(ischemia/reperfusioninjury,I/RI)中发挥的作用及其具体机制。方法采用氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/RP)法体外构建缺血/再灌注细胞模型,将细胞分为对照组、OGD/RP组、丙泊酚+OGD/RP组。采用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl tetrazolium,MTF)法检测皮质神经细胞存活率,AnnexinV-PI检测细胞凋亡情况,即时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的mRNA表达情况,免疫印迹法(Westernblot)检测丙泊酚对皮质神经细胞内bFGF,磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated proteinkinaseB,pAkt)以及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated extracellular signal-regulatedkinase1/2,pERKl/2)蛋白表达的影响;采用小干扰RNA构建bFGF沉默的细胞。结果OGD/RP处理组神经细胞凋亡率为43.2%,经10mg/L的丙泊酚预处理后,细胞的凋亡率降为19.5%。与对照组比较,OGD处理后,细胞中bFGF的含量显著下调(P〈0.05),丙泊酚处理的皮质神经元中bFGF含量显著高于OGD处理组(P〈0.05)。丙泊酚能够上调pAKT以及pERKI/2的表达,激活这两条信号通路。沉默bFGF或者施加磷酸肌醇3激酶.蛋白激酶B(phosphotylinosital3kinase-proteinkinaseB,P13K-Akt)以及pERK1/2信号通路抑制剂都会导致细胞存活率显著下降(P〈0.05),抑制P13K-Akt以及pERKl/2的激活。结论丙泊酚可以通过上调bFGF的表达,激活P13K-Akt和ERK1/2信号通路,增加皮质神经元的存活。 展开更多
关键词 泊酚 脑缺血 再灌注损伤 剥夺 碱性成纤维细胞生长因子 磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B 磷酸化细胞外信号调节激酶1/2
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两个新的前列腺癌相关分泌蛋白的鉴定和表达
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作者 钱晓龙 施庆国 +5 位作者 庞博 武瑞琴 俞岚 李山虎 王洪涛 周建光 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期235-241,共7页
为了获得代表不同前列腺癌进展阶段的细胞系的胞外蛋白表达谱,验证其中差异表达蛋白是否为分泌蛋白,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质,文章利用双向电泳寻找胞外蛋白中差异表达的点,并质谱鉴定其是何种蛋白质。应用RT-... 为了获得代表不同前列腺癌进展阶段的细胞系的胞外蛋白表达谱,验证其中差异表达蛋白是否为分泌蛋白,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质,文章利用双向电泳寻找胞外蛋白中差异表达的点,并质谱鉴定其是何种蛋白质。应用RT-PCR方法分析候选分子在8种细胞系中的表达和对雄激素刺激的应答,构建了候选分子的真核表达载体,瞬时转染293T细胞,应用标签抗体Western blotting方法检测验证细胞培养基中候选分子的表达。结果表明:筛选出两个C4-2胞外高表达的分子--磷酸丙糖异构酶-1(Triosephosphate isomerase1,TPI1)和多配体聚糖结合蛋白(Syndecan binding protein,syntenin,ST1);转录水平发现它们与前列腺癌恶性程度相关,并且后者受雄激素的作用下调;二者均为分泌蛋白。磷酸丙糖异构酶-1和多配体聚糖结合蛋白均有作为指示前列腺癌发展阶段的血清标志物的潜质。 展开更多
关键词 前列腺癌 血清标志物 分泌蛋白 磷酸异构酶-1 多配体聚结合蛋白
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基于有氧糖酵解的天然小分子抑制剂的研究进展 被引量:2
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作者 罗煜瑾 戴子琦 +1 位作者 徐冰 雷海民 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第1期171-181,共11页
有氧糖酵解作为恶性肿瘤最显著的能量代谢特征之一,肿瘤细胞中大约有50%的ATP是通过有氧糖酵解途径合成的,同时糖酵解过程中产生的各种中间代谢产物也是合成蛋白质等生物大分子重要的原料来源。此外酵解途径导致的乳酸增加为肿瘤细胞提... 有氧糖酵解作为恶性肿瘤最显著的能量代谢特征之一,肿瘤细胞中大约有50%的ATP是通过有氧糖酵解途径合成的,同时糖酵解过程中产生的各种中间代谢产物也是合成蛋白质等生物大分子重要的原料来源。此外酵解途径导致的乳酸增加为肿瘤细胞提供了一个酸性成长环境,有利于其浸润和转移,因此其在维持肿瘤细胞能量需求、合成代谢平衡和肿瘤浸润和转移方面发挥着重要作用。研究表明有氧糖酵解的过程与葡萄糖转运蛋白、己糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶等密切相关。目前靶向有氧糖酵解相关转运蛋白和关键限速酶已经成为抗肿瘤药物研发的有效途径,本文对目前天然产物中靶向有氧糖酵解相关蛋白的小分子抑制剂研究最新进展及作用机理进行总结,以期为相关领域药物研究人员提供新的思路和参考。 展开更多
关键词 有氧酵解 小分子抑制剂 葡萄转运蛋白 激酶 酮酸激酶 磷酸激酶
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日本血吸虫SjCTPI-Hsp70 DNA疫苗与白细胞介素12对水牛的联合免疫保护作用研究 被引量:3
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作者 喻鑫玲 何永康 +9 位作者 熊铁 赵雅琴 石孟芝 周杰 刘宗传 罗新松 付晓 贺宏斌 DA HARN 李岳生 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期433-436,共4页
目的探讨中国大陆株日本血吸虫磷酸丙糖异构酶-热激蛋白(SjCTPI-Hsp70)DNA疫苗联合佐剂白细胞介素-12(IL-12)质粒DNA对水牛的免疫保护作用。方法实验采用双盲法,所用疫苗及制剂均在实验结束后解码。将购自非血吸虫病流行区45头8~10月... 目的探讨中国大陆株日本血吸虫磷酸丙糖异构酶-热激蛋白(SjCTPI-Hsp70)DNA疫苗联合佐剂白细胞介素-12(IL-12)质粒DNA对水牛的免疫保护作用。方法实验采用双盲法,所用疫苗及制剂均在实验结束后解码。将购自非血吸虫病流行区45头8~10月龄健康水牛随机分为A组(SjCTPI-Hsp70+IL-12,300μg)、B组(SjCTPI+IL-12,300μg)和C组(空质粒pVAX+IL-12,300μg)等3组(每组15头),每头牛分别经肩部肌肉注射免疫3次,每次间隔28d。末次免疫后28d,每头牛经大腿内侧皮肤感染日本血吸虫尾蚴1000条。解剖前2d及当天分别收集粪便1次,用定量法计数虫卵和毛蚴。攻击感染后56d解剖,用生理盐水经胸主动脉灌冲法收集、计数成虫,检测每克肝组织虫卵数。结果A、B组减虫率分别为51.2%和41.5%(χ2=1.89,P>0.05),减雌虫率分别为48.9%和44.7%(χ2=0.35,P>0.05),减粪卵率分别为52.1%和38.3%(χ2=3.84,P<0.05),减毛蚴率为52.1%和33.2%(χ2=7.30,P<0.01)及减肝卵率为61.5%和42.0%(χ2=7.61,P<0.01)。结论用SjCTPI-Hsp70+IL-12免疫水牛可获得一定的免疫保护性作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸异构酶-热激蛋白 DNA疫苗 白细胞介素12 联合免疫 水牛 免疫保护
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日本血吸虫复合表位DNA质粒构建及鉴定 被引量:2
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作者 娄培安 赵松 +5 位作者 桑兴旺 王晓婷 宋强 何洪江 余传信 朱荫昌 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第5期333-337,共5页
目的用GeneSOEing技术构建含日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶及副肌球蛋白T、B细胞表位的复合表位DNA质粒。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1-linker。PCR法扩增磷酸丙糖异构酶表位基因... 目的用GeneSOEing技术构建含日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶及副肌球蛋白T、B细胞表位的复合表位DNA质粒。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1-linker。PCR法扩增磷酸丙糖异构酶表位基因片段(T)。人工合成副肌球蛋白表位的基因片段,退火成双链(P)。分别将T、P片段克隆入改建的载体pcDNA3.1中link-er的上游和下游,构建T-P融合基因;同时还将T、P片段分别克隆入linker的下游和上游,构建P-T融合基因。重组质粒分别转化E.coliXL1-blue,抽提质粒,酶切鉴定。结果两个目的基因片段分别按顺序克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建成复合表位DNA质粒。结论成功地构建了复合表位DNA质粒,为制备多价表位DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸异构酶 副肌球蛋白 DNA疫苗
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日本血吸虫复合表位DNA疫苗免疫保护作用的研究
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作者 娄培安 许永良 +5 位作者 李洪卫 王晓婷 桑兴旺 赵松 何洪江 朱荫昌 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第6期438-441,437,共5页
目的研究日本血吸虫复合表位DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法将40只雌性BALB/c小鼠随机分为4组:pcDNA3.1组(对照组),每鼠经两侧股四头肌注射100μg pcDNA3.1质粒DNA,每侧50μg;TPI组,每鼠肌注100μg pcDNA3.1-TP... 目的研究日本血吸虫复合表位DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法将40只雌性BALB/c小鼠随机分为4组:pcDNA3.1组(对照组),每鼠经两侧股四头肌注射100μg pcDNA3.1质粒DNA,每侧50μg;TPI组,每鼠肌注100μg pcDNA3.1-TPI质粒DNA;TP组,每鼠肌注100μg pcDNA3.1-T-linker-P质粒DNA;PT组,每鼠肌注100μg pcDNA3.1-P-linker-T质粒DNA。每隔2周加强免疫1次,剂量和方法相同,共免疫3次。末次免疫后4周每鼠经腹部皮肤攻击感染(45±1)条日本血吸虫尾蚴,45d后剖杀,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2 d及感染前2 d尾静脉采血,间接ELISA检测特异IgG及IgG1I、gG2a水平。末次免疫后3周,每组取2只小鼠制备脾细胞,双抗体夹心法检测脾细胞经ConA和rSjCTPI刺激后培养上清中的IL-2I、L-4和IFN-γ水平。结果TP组和PT组小鼠减虫率分别为34.76%和36.14%,显著高于TPI组(P<0.05)和对照组(P<0.01);减卵率分别为51.20%和50.79%,与TPI及对照组比较差异有显著性(P<0.05)。TP组和PT组小鼠血清特异性IgG水平均升高(P<0.05),IgG2a/IgG1的比值分别为4.23和4.34。脾细胞经ConA和rSjCTPI刺激后,IL-2水平TP组和PT组较对照组均升高。结论复合表位DNA疫苗能诱导小鼠产生抗血吸虫感染的免疫保护力,效果优于rSjCTPI疫苗。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 磷酸异构酶 副肌球蛋白 表位DNA疫苗
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日本血吸虫重组疫苗的研究概况
14
作者 唐小牛 汪学龙 《皖南医学院学报》 CAS 2003年第2期154-156,共3页
血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病.它威胁着全世界74个国家和地区约6亿人口的健康,估计感染人口约为2亿,患者2千万左右[1].世界卫生组织(WHO)认为该病是所有寄生虫病中分布范围最广、危害最严重的疾病之一.多年来,防治血... 血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病.它威胁着全世界74个国家和地区约6亿人口的健康,估计感染人口约为2亿,患者2千万左右[1].世界卫生组织(WHO)认为该病是所有寄生虫病中分布范围最广、危害最严重的疾病之一.多年来,防治血吸虫病一直是靠传统的吡喹酮药物化疗和杀灭钉螺的方法.但效果并非尽如人意,其原因包括多方面:首先,吡喹酮对已造成的损害组织作用甚微,且化疗药物的应用,还可能造成临床症状的不典型,使血吸虫的早期诊断难度加大,同时大规模使用吡喹酮治疗时有诱发某些虫株产生耐药性的可能;同时,血吸虫保虫宿主种类繁多,如牛、羊、鼠等哺乳动物,据统计全世界有54万头病畜,都可以作为其传染源;其次,作为血吸虫的中间宿主钉螺,其分布的水域面积广阔,有螺面积估计约34亿平方米,加之山区丘陵地形复杂等原因,使消灭钉螺具有相当难度;第三,血吸虫尾蚴感染速度非常之快及感染后不能获得持久性的免疫力,易重复感染等.因此,要从根本上控制和消灭血吸虫病应考虑借助于疫苗. 展开更多
关键词 日本血吸虫病 重组疫苗 谷胱甘肽-S转移酶 97ku副肌球蛋白 磷酸异构酶 23ku表膜蛋白
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血吸虫DNA疫苗的研究进展
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作者 杜幼芹 肖长义 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2004年第1期31-33,共3页
关键词 血吸虫 种类 血吸虫病 表膜蛋白DNA疫苗 磷酸异构酶DNA疫苗 混合DNA疫苗
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Characteristics of Triose Phosphate/Phosphate Translocator from Wheat and Its Role in the Distribution of Assimilates 被引量:6
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作者 SUNJin-Yue WANGQing-Mei CHENJia WANGXue-Chen 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2004年第3期294-301,共8页
In plants, triose phosphate/phosphate translocator (TPT) is the first regulation point forpartitioning of photosynthate between source and sink. Studies on the characteristic of TPT and itsregulation on the distributi... In plants, triose phosphate/phosphate translocator (TPT) is the first regulation point forpartitioning of photosynthate between source and sink. Studies on the characteristic of TPT and itsregulation on the distribution of assimilates are critical for improving the utilization rate of photosyntheticassimilates. Chloroplasts with intactness of more than 91% and high purity were isolated from wheat( Triticurn aestivurn L. cv. Jing 411) leaves. Analysis of SDS-PAGE and labeling with an irreversible specificinhibitor, [H3]2^-DIDS (4, 4'-diisothiocyano-2, 2'-stilbenedisulfonate, DIDS) demonstrated that wheat TPTwas a chloroplast membrane protein with a 35 kD molecular weight, which comprised about 15% of the totalmembrane proteins of chloroplasts. Western blotting analysis showed that wheat TPT is uniquelydistributed in the envelope membrane of chloroplasts, but not detected in the membranes of vacuoles andmitochondria. The silicone-oil-layer centrifugation system was employed to study the kinetic properties ofTPT. The results showed that the maximal transport activity of TPT was the highest for dihydroxyacetonephosphate (DHAP)/inorganic phosphate (Pi), then for phosphoenolpyruvate (PEP)/Pi and glucose-6-phosphate (G6P)/Pi. The Km value of TPT was the lowest for DHAP, followed by Pi, PEP and G6P,therefore the most preferred substrate of TPT is DHAP. The transport of wheat TPT to DHAP was stronglyinhibited by DIDS with a degree of 95%. Inhibition of TPT transport activity led to an obvious accumulationof starch in chloroplasts, therefore the TPT protein of wheat controls the export of TP out of chloroplastsinto cytosol. Except for the need of participating in the Calvin cycle, the ratio of TP exported out ofchloroplast to the one used for synthesizing starch was at least 93.6:6.4. The TPT protein from wheat hasmuch high transport efficiency, which plays an important role in the regulation of the distribution ofassimilates in wheat chloroplasts. 展开更多
关键词 小麦 磷酸转运 同化物 分配 调节 植物生理学
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薯蓣粥对2型糖尿病模型大鼠糖代谢及胰岛功能的影响 被引量:13
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作者 戴燕铃 陈雪花 +3 位作者 丁怀利 李绵利 庞书勤 刘蔚楠 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2021年第18期1628-1634,共7页
目的探讨薯蓣粥改善2型糖尿病糖代谢和胰岛素抵抗的可能作用机制。方法50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组8只和造模组42只。造模组给予高脂高糖饲料喂养6周后结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。造模成功的32只大鼠随... 目的探讨薯蓣粥改善2型糖尿病糖代谢和胰岛素抵抗的可能作用机制。方法50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组8只和造模组42只。造模组给予高脂高糖饲料喂养6周后结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。造模成功的32只大鼠随机分为模型组、薯蓣粥组、二甲双胍组、联合用药组,每组8只。薯蓣粥组给予薯蓣粥灌胃,其中山药含量12 g/(kg·d),二甲双胍组给予盐酸二甲双胍片100 mg/(kg·d)灌胃,联合用药组上午给予薯蓣粥,下午给予盐酸二甲双胍片灌胃(剂量同上),空白组、模型组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃,持续干预6周。检测干预前及干预第2、4、6周各组大鼠空腹血糖(FBG)水平,干预6周后各组大鼠进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),计算曲线下面积(AUC)、血清空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测大鼠骨骼肌单磷酸腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)mRNA表达,骨骼肌AMPK、磷酸化单磷酸腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)、GLUT-4蛋白水平。结果与模型组比较,薯蓣粥组、二甲双胍组、联合用药组干预2、4、6周AUC、FINS、HOMA-IR及干预第4、6周FBG水平均降低,p-AMPK/AMPK,GLUT-4蛋白及mRNA表达显著增加(P<0.05)。与薯蓣粥组比较,联合用药组AUC、FINS、HOMA-IR降低,GLUT-4蛋白及mRNA、AMPK mRNA表达升高,干预第4周、第6周FBG水平显著降低(P<0.05)。薯蓣粥组大鼠FBG水平从干预第2周开始至第6周逐渐降低(P<0.05);二甲双胍组和联合用药组大鼠FBG水平从干预前至第6周逐渐降低(P<0.05)。在OGTT试验中,模型组的血糖水平未见明显回落,薯蓣粥组、二甲双胍组、联合用药组在0.5 h时血糖出现高峰,1 h时开始明显下降。结论薯蓣粥能够改善2型糖尿病模型大鼠的糖代谢及胰岛素功能,且与二甲双胍联用效果更佳,其作用机制可能与调节骨骼肌的AMPK通路相关。 展开更多
关键词 2型尿病 薯蓣粥 二甲双胍 代谢 胰岛功能 胰岛素抵抗 磷酸腺苷酸激活蛋白激酶 葡萄转运蛋白4
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顺铂作用卵巢癌细胞株的蛋白质组学研究 被引量:8
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作者 李征宇 赵霞 +1 位作者 杨金亮 魏于全 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第3期254-261,共8页
应用蛋白质组学技术观察顺铂作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后蛋白质分子的表达差异, 探讨蛋白质组学方法在化疗药物抗肿瘤作用机制研究方面的应用. 用顺铂(6 mg/mL)作用人卵巢癌SKOV3细胞6 h, 分别收集实验组与对照组细胞, 裂解并提取细胞... 应用蛋白质组学技术观察顺铂作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后蛋白质分子的表达差异, 探讨蛋白质组学方法在化疗药物抗肿瘤作用机制研究方面的应用. 用顺铂(6 mg/mL)作用人卵巢癌SKOV3细胞6 h, 分别收集实验组与对照组细胞, 裂解并提取细胞内总蛋白; 以固相IPG胶条(17 cm, pH4~7)为载体, 进行第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳, 得到实验组与对照组双向电泳凝胶图; 经考马斯亮蓝染色后, 在PDQuest软件的辅助下进行实验组与对照组蛋白质表达的比较, 选择并切取明显差异点共11个, 经肽质量指纹谱(PMF)和串级质谱(MS/MS)分析, 检测出差异点中包含的主要蛋白. 通过质谱分析显示, 顺铂处理后表达明显上调的有原肌球蛋白家族、肌动蛋白家族、热休克蛋白60(HSP60)、磷酸丙糖异构酶(TIM)家族等; 表达下调的有烯醇酶家族等. 这几类蛋白质多参与细胞内能量代谢、细胞形态维持、细胞转化凋亡等生理过程, 提示顺铂的抗肿瘤机制可能与此有关. 展开更多
关键词 蛋白质组学 卵巢癌 细胞株 顺铂 考马斯亮蓝染色 PAGE电泳 肽质量指纹谱 蛋白质分子 抗肿瘤作用 蛋白质表达 原肌球蛋白 热休克蛋白 表达差异 机制研究 化疗药物 等电聚焦 双向电泳 质谱分析 肌动蛋白 磷酸 能量代谢
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湘雅医院肿瘤蛋白质组学研究取得国际领先成果
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《中华生物医学工程杂志》 CAS 2007年第3期155-155,共1页
湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室在肿瘤蛋白质组研究领域取得重大进展,通过对人体血清中成千上万种蛋白质进行筛选,发现肺鳞癌患者血液中特异性存在较高频率的磷酸丙糖异构酶和锰超氧化物歧化酶自身抗体和游离抗原,这两种蛋... 湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室在肿瘤蛋白质组研究领域取得重大进展,通过对人体血清中成千上万种蛋白质进行筛选,发现肺鳞癌患者血液中特异性存在较高频率的磷酸丙糖异构酶和锰超氧化物歧化酶自身抗体和游离抗原,这两种蛋白质极有可能成为肺鳞癌的血清标志物,用于指导肺鳞癌的诊断与治疗,具有重要学术价值和临床应用前景。蛋白质组学研究领域的国际顶尖杂志《Journal of Proteome Research》于近日发表了这一处于国际领先水平的重要研究成果。 展开更多
关键词 肿瘤蛋白质组学 蛋白质组学研 国际领先 湘雅医院 锰超氧化物歧化酶 磷酸异构酶 临床应用前景 重点实验室
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藻类和陆生植物中光合产物的运输对光合作用的调控机制 被引量:1
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作者 黄伟超 毕永红 《生命科学》 CSCD 2024年第10期1240-1249,共10页
光合生物通过光合作用的光反应将光能转化为化学能(NADPH和ATP),通过暗反应将大气中的二氧化碳同化,生成有机碳水化合物。光合产物(包括能量与有机碳)从叶绿体向胞质的运输是细胞内物质能量代谢的关键环节,使叶绿体和其他细胞区室间建... 光合生物通过光合作用的光反应将光能转化为化学能(NADPH和ATP),通过暗反应将大气中的二氧化碳同化,生成有机碳水化合物。光合产物(包括能量与有机碳)从叶绿体向胞质的运输是细胞内物质能量代谢的关键环节,使叶绿体和其他细胞区室间建立起关联关系,并对光合效率以及物质能量分配具有调控作用。本文从叶绿体光合产物的分子运输机制的角度,介绍光合电子传递速率、中心碳代谢以及胞内氧化还原态调控机制的研究进展,同时深入探讨了藻类和陆生植物通过调控光合产物运输适应多变自然环境的机制。然而,在光合细胞中,叶绿体被膜转运体的转运特性以及不同转运体是如何相互协作调控光合效率以及胞内代谢平衡仍有待深入研究。这些研究为定向编程叶绿体和胞质代谢流、提升光合效率提供了基础和元件。 展开更多
关键词 光合同化产物运输 还原力穿梭 磷酸转运 光合效率
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