三氧化二砷通过降低Pin1表达及调节Wnt/β-连环素通路抑制肝癌细胞增殖

目的探讨三氧化二砷(ATO)在肝癌中对肽基脯氨酰基顺反异构酶NIMA相互作用蛋白1(Pin1)表达的抑制作用及其分子机制。方法使用DepMap数据库和GEPIA数据库中的数据分析Pin1在人肝癌细胞系和肝癌组织中的表达情况。以人肝癌细胞系Huh7和小鼠肝癌细胞系H22为细胞模型,通过ATP法检测ATO对肿瘤细胞活力的影响;通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色和qPCR检测ATO对Pin1在蛋白质水平和转录水平表达的作用。用氯喹预处理Huh7细胞抑制溶酶体途径后,通过蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测ATO对Pin1表达的调控作用。通过皮下荷瘤小鼠模型和免疫组织化学染色验证ATO在体内对肝癌细胞生长和Pin1表达的影响。采用RNA测序分析ATO可能影响的信号通路,并通过蛋白质印迹法和qPCR验证。结果在DepMap数据库23种人肝癌细胞系和GEPIA数据库人肝癌组织中,Pin1的表达均呈现较高水平。在体外实验中,ATO处理后Huh7和H22细胞的细胞活力均降低,细胞中Pin1在蛋白质和转录水平的表达均降低,但用氯喹抑制溶酶体途径逆转了ATO对Pin1表达的影响。在皮下荷瘤小鼠模型中,ATO表现出一定的抗肿瘤效果,免疫组织化学染色显示ATO处理后Pin1表达和肿瘤细胞增殖受到抑制。在ATO处理的H22细胞中Wnt/β-连环素通路相关基因富集,抑制H22细胞中Pin1的表达后β-连环素表达减少。结论ATO通过溶酶体途径抑制Pin1表达,以及影响Wnt/β-连环素信号通路来抑制肝癌细胞增殖。

上皮钙粘素、β-连环蛋白、细胞周期素D1在进行期寻常型银屑病皮损的表达

目的通过检测银屑病患者皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1的表达,探讨其在银屑病角质形成细胞高度增殖中的意义。方法用免疫组化方法检测正常组织及进行期银屑病皮损处上皮钙粘素、β-连环蛋白和细胞周期素D1蛋白的表达。结果银屑病患者皮损增生的表皮细胞上皮钙粘素和β-连环蛋白在颗粒层和基底细胞层表达明显降低,与正常人相比有显著性差异(P<0.01)。而细胞周期素D1在银屑病患者皮损基底细胞层表达显著升高,并与β-连环蛋白的异常表达相关。结论上皮钙粘素和β-连环蛋白表达的下调可能与银屑病角质形成细胞高度增殖有关,Wnt信号转导系统异常可能参与银屑病的发病机制。

E-钙黏素、β-连环蛋白与肿瘤关系的研究进展

肿瘤细胞具有转移性和侵袭性,肿瘤的发展、预后差均与这两个特性有关。肿瘤细胞的转移主包括细胞间黏附、细胞运动和突破基底膜3个方面,其中细胞与细胞之间的相互作用对肿瘤的形成和转移关系重大,细胞黏附分子是细胞与细胞之间作用的主分子。钙黏素（cadherin）是细胞黏附分子中的一类,细胞间黏附连接的形成是通过相邻细胞表面的cadherin分子胞外区的彼此作用来实现的。

上皮型钙黏素和β-连环蛋白表达与胃癌的关系

目的探讨上皮型钙黏素和β-连环蛋白在胃癌分化、浸润和转移中的作用。方法用免疫组织化学方法检测胃癌组织及其配对的转移淋巴结肿瘤组织中上皮型钙黏素和β-连环蛋白的表达,并分析两种蛋白间的相互关系。结果50例胃癌中,肠型胃癌的上皮型钙黏素或β-连环蛋白的表达均高于弥漫型胃癌(P=0.0077,P=0.016);上皮型钙黏素蛋白阳性表达与β-连环蛋白阳性表达之间呈正相关(r=0.4766,P=0.0005);12例胃癌原发灶和其配对的淋巴结转移灶之间,上皮型钙黏素和β-连环蛋白的阳性表达之间均无显著差异(P>0.05)。结论上皮型钙黏素和β-连环蛋白的联合表达有利于细胞分化和细胞—细胞间的黏附,对癌细胞的弥散具有抑制作用。

β-连环素及相关蛋白在脂多糖致急性肺损伤小鼠气道上皮的表达

目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时β-连环素(-βcate-nin,-βcat)在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上,应用免疫组织化学染色检测-βcat、糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)在气道上皮的表达;应用Western blot检测肺组织内蛋白激酶C(PKC)、GSK3-β、磷酸化GSK3-β(P-GSK3-β)以及-βcat蛋白的表达。结果免疫检测显示,与正常组小鼠相比,LPS致急性肺损伤的小鼠气道上皮中,胞膜上-βcat及胞质内GSK3-β蛋白含量均明显降低(均P<0.05);Western blot检测显示,肺组织内PKC、P-GSK3-β及-βcat蛋白含量均较正常组小鼠明显升高(均P<0.05),而GSK3-β蛋白含量显著下降(P<0.05)。结论由LPS所致的小鼠ALI,一方面引起胞膜上行使连接功能的-βcat含量显著下降;另一方面可能通过PKC激活、GSK3-β磷酸化失活,导致胞质内-βcat含量的增加,使-βcat转入核内并与转录因子结合,启动Wnt途径靶基因转录,从而在气道上皮的损伤修复中发挥重要作用。

人成釉细胞瘤中上皮性钙黏附蛋白和β-连环素的表达

目的 :研究成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中上皮性钙黏附蛋白 (E -cad)及 β-连环素 ( β -cat)的表达探讨其生物学意义。方法 :免疫组化 (SP法 ) ,分别对AB72例 (原发 3 4例 ,复发 3 2例 ,恶性 6例 )E -cad、AB5 9例 (原发 2 2例、复发 3 1例 ,恶性 6例 ) β -cat进行了研究。 结果 :在正常口腔粘膜上皮细胞膜有E -cad和β -cat的完整表达 ,在AB中的星网状层及外周层细胞均有E -cad和β -cat的表达。表达强度无明显差异 ,在不同组织及病变中E -cad和 β -cat有不同的表达 (P <0 .0 0 1)伴随AB的复发与恶变 ,E -cad和 β -cat表达强度下降和丢失 ,浆、核的异位表达增加 ,三者相比P <0 .0 5。结论 :E -cad和 β-cat的表达水平与AB的细胞分化程度成负向关系 。

血管内皮-钙粘附素/连环蛋白复合体在炎症微血管通透性方面的作用

VE-cadherin forms VE-cadherin/catenins complex by interacting with catenins,and VE-cadherin/catenins complex is an important component of adherens junctions(AJ). During inflammation ,different kinds of factors can increase the microvascular permeability eventually by causing the disassembly of VE-cadherin/catenins complex.

上皮钙粘素和β-连环蛋白在皮肤Bowen病、鳞癌中的表达

目的研究上皮钙粘素(E-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)在皮肤Bowen病(BD)、鳞癌(SCC)中的表达情况。方法免疫组化法检测15例正常皮肤、28例BD、18例SCC标本中E-cadherin和β-catenin蛋白的表达,根据染色强度、阳性细胞比率和胞质染色对结果进行半定量分析。结果与正常皮肤相比,E-cadherin和β-catenin在BD和SCC肿瘤细胞膜上的表达显著降低,而在SCC和BD肿瘤细胞的胞质或胞核β-catenin表达显著升高。结论E-cadherin/catenin复合体的异常表达在BD和SCC中常见。

β-连环蛋白和生存素在老年结直肠腺癌患者中的表达及其意义

目的检测β-连环蛋白(β-catenin)和生存素(survivin)蛋白在老年结直肠腺癌组织中的表达,分析其与老年结直肠腺癌患者性别、淋巴结转移以及肿瘤-淋巴结-转移(TNM)分期之间的关系,探讨β-catenin和survivin蛋白表达的相关性。方法收集2015年1月至2017年12月在长治医学院附属和平医院及和济医院进行手术切除治疗的结直肠腺癌患者50例,将外科手术切除后的标本分为2组:癌组织组和正常组织组(距离癌组织边缘>2 cm,病理检测结果正常),每组50例。采用免疫组织化学法检测β-catenin和survivin蛋白表达。采用SPSS 22.0软件进行数据处理。组间比较采用Mann-Whitney U秩和检验。Spearman相关分析β-catenin蛋白表达与survivin蛋白表达的相关性。结果β-catenin蛋白在结直肠腺癌细胞膜、细胞浆及细胞核呈阳性表达,在老年癌组织组的阳性表达率显著高于正常组织组(64.0%vs 0.0%,P<0.001),其表达与性别无关(P>0.05),与淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05)。survivin蛋白在结直肠腺癌细胞核呈阳性表达,在老年癌组织组的阳性表达率显著高于正常组织组(54.0%vs 0.0%,P<0.001),其表达与性别、TNM分期无关(P>0.05),与淋巴结转移相关(P<0.05)。Spearman相关分析统计结果显示,老年结直肠腺癌患者的β-catenin蛋白表达与survivin蛋白表达呈显著正相关(r=0.645,P<0.001)。结论β-catenin和survivin蛋白均参与老年结直肠腺癌的发生发展,可能共同促进老年结直肠癌的进展。

乳腺癌中上皮钙黏蛋白和β-连环素的表达及其意义

目的 探讨乳腺癌组织中上皮钙黏蛋白和 β -连环素的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组织化学方法检测上皮钙黏蛋白和 β -连环素在乳腺癌、癌旁乳腺组织、乳腺单纯性增生和非典型增生的表达情况 ,并进行对比。结果 乳腺癌组织中上皮钙黏蛋白和 β -连环素的异常表达率分别为 5 1.9%和 61.1%。上皮钙黏蛋白异常表达与组织学分级密切相关。β -连环素异常表达与TNM分期、腋淋巴结转移和术后远处转移显著相关。COX多元回归分析显示两种蛋白表达均未能成为影响乳腺癌预后的独立指标。结论 上皮钙黏蛋白和 β -连环素表达异常与乳腺癌的发生和发展有关 ,上皮钙黏蛋白和 β -连环素的异常表达是判断乳腺癌侵袭、转移的良好指标。

β-连环素与上皮型钙粘蛋白在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的 探讨 β 连环素 (β cat)与上皮型钙粘蛋白 (E cad)在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义。 方法 应用免疫组化SP法 ,检测 4 0例宫颈鳞癌 ,1 0例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 1 0例正常宫颈上皮组织中的 β cat与E cad的表达。结果 正常宫颈上皮组织中 ,β cat与E cad表达均显著位于细胞膜 ,而胞浆表达很少见 ;在CINⅢ与宫颈鳞癌组织中 ,β cat与E cad表达特征发生改变 ,胞膜表达量减少甚至缺失 ,呈现不同程度的胞浆表达 ,其中有些在细胞核内还可检出 β cat蛋白。随着肿瘤病理分级的升高 ,β cat与E cad的膜表达减弱 ,浆表达增强。淋巴结转移组的 β cat与E cad的异常表达率明显高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。 结论 β cat异位表达可能参与了宫颈鳞癌发生、发展过程 ;β cat与E cad胞膜表达缺失可能与宫颈鳞癌的侵袭和转移有关。

磷酸化神经型钙黏素和磷酸化连环蛋白在胃癌中的共表达及临床意义

目的 观察磷酸化神经型钙黏素（ p-N-cadherin ）（ p-β-catenin） 蛋白在胃癌组织中表达水平，探讨其与临床病理参数的相关性及其临床意义。方法 选择手术切除的78例胃癌组织标本为试验组，胃癌旁组织68例，以及正常胃黏膜组织36例为对照组。应用免疫组织化学法检测胃癌组织、癌旁组织和正常组织中的p-N-cadherin 和p-β-catenin蛋白的表达情况，用SPSS13.0统计软件对p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白的表达差异及其与患者的临床病理特征进行统计学分析。结果 p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白在胃癌中阳性表达率分别为82.1 % （ 64 / 78 ） 和84.6 % （ 66 / 78 ） ，与癌旁组织76.5 % （ 52 / 68 ） 和75 % （ 51 / 68 ）比较无明显差异 （ P 〉 0.05 ），但两者与对照组11.1 % （ 4 / 36 ） 和13.9 % （ 5 / 36 ）比较有明显统计学差异（P 〈 0.01 ）。在试验组中，p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白表达与患者的年龄、性别和类型均无明显统计学差异，而与肿瘤的分化程度、TNM 分期和淋巴结转移相关[ p-N-cadherin： 74.4% vs 91.4 % ，73.3 % vs 87.5 % ，73.6 % vs 90.0 %; p-β-catenin： 76.7 % vs 94.2 % , 73.3 % vs 91.7 %, 76.3 % vs 92.5 % （ P均 〈 0.05 ）]。结论 p-N-cadherin和p-β-catenin蛋白在胃癌组织中表达明显上调，二者呈正相关，可联合作为评估胃癌恶性生物学行为和预后指标。

视神经损伤后脑衰反应调节蛋白-2表达及其磷酸化修饰的变化及意义

背景 脑衰反应调节蛋白-2（CRMP-2）具有促进中枢神经轴突生长的作用,但中枢神经损伤后在细胞周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）诱导下CRMP-2会发生过度磷酸化修饰,从而导致生长锥塌陷,阻碍神经系统的修复.视神经作为一种特殊的中枢神经组织,其损伤后是否发生CRMP-2表达的变化和磷酸化修饰鲜见研究报道. 目的 探讨视神经钳夹伤小鼠模型视神经组织中CRMP-2表达及其磷酸化修饰水平的动态变化及意义.方法 选取8～9周龄健康BALB/c小鼠48只,雌雄不限.采用随机数字表法将小鼠随机分为假手术组和损伤后3、7、14 d组,每组12只.各损伤组小鼠右眼术中暴露视神经,用小号动脉夹于球后2 mm处夹持视神经10s,假手术组小鼠手术操作同各损伤组,但不钳夹视神经.分别于术后3、7、14 d获取小鼠视神经组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2蛋白、磷酸化CRMP-2（p-CRMP-2）及CDK5的表达变化,检测结果进行组间比较.结果 假手术组及损伤后3、7、14d组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA及蛋白相对表达量的总体比较差异均无统计学意义（CRMP-2 mRNA：F=2.971,P=0.097;CRMP4蛋白：F=1.202,P=0.370）.假手术组及损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2蛋白的相对表达量分别为0.001±0.000、0.064±0.003、0.136±0.005和0.346±0.012,CDK5蛋白的相对表达量分别为0.440±0.009、0.723±0.011、0.874±0.015和0.952±0.019,总体比较差异均有统计学意义（p-CRMP-2：F=445.600,P＜0.001;CDK5：F=186.600,P＜0.001）,其中损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2和CDK5蛋白的相对表达量均明显高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 小鼠视神经钳夹伤后视神经组织中CRMP-2的表达无明显变化,但视神经组织中CDK5和p-CRMP-2蛋白表达均明显上调,且随着损伤后时间的延长上调更为明显.

上皮型钙黏素、细胞周期素D1和β-连环蛋白表达与胃癌的关系

目的探讨上皮型钙黏素E(E-cad)、细胞周期素D1(Cyclin D1)和β-连环蛋白(β-cat)与胃癌发生及胃癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化法检测E-cad、Cyclin D1和β-cat在50例胃癌组织标本、10例正常胃黏膜标本及20例胃癌前病变组织标本中的表达。结果胃癌前病变的E-cad、Cyclin D1和β-cat异常表达率分别为50%、60%、60%,分别与胃癌E-cad(84.0%)、Cyclin D1(72.0%)、β-cat(78.0%)的异常表达率相比差异有统计学意义(P<0.05)。低分化胃癌的E-cad、Cyclin D1和β-cat异常表达率分别为80%、90%、73.4%,分别比高分化胃癌E-cad(50%)、Cyclin D1(55%)、β-cat(40%)的异常表达更明显(P<0.05)。胃癌浸润到浆膜外及伴淋巴结转移时E-cad的异常表达率较高(P<0.01)。肿瘤直径≥5.0cm的胃癌组E-cad的异常表达率较高(P<0.05)。90%的胃癌及60%的胃癌前病变E-cad系统中至少有一项表达异常,二者差异有统计学意义(P<0.05),且至少有一项为表达异常患者的淋巴结转移率明显高于无蛋白异常表达者(P<0.05)。结论E-cad和β-cat的异常表达与胃癌的分化和转移密切相关,β-cat异常表达影响Cyclin D1的激活而引起细胞增殖和分化失控。E-cad、Cyclin D1和β-cat在由胃不典型增生转化为胃癌的过程中起作用。联合检测E-cad、β-cat和Cyclin D1可提高检测结果的参考价值。E-cad、β-cat和Cyclin D1可作为反映胃癌生物学行为的指标。

姜黄素对结肠癌SW480细胞中β-连环蛋白及前列腺素E2的影响

目的探讨姜黄素对体外培养人结肠癌SW480细胞增殖及细胞株中β-连环蛋白（p—catenin）、前列腺素E2（PGE2）表达的影响。方法采用不同浓度的姜黄素作用于SW480细胞，噻唑蓝法（MTT）检测细胞增殖；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测药物作用后肿瘤细胞PGE，蛋白水平表达变化，蛋白免疫印迹（Westernblot）检测药物处理后B—catenin蛋白水平的表达。结果姜黄素对SW480细胞的增殖具有抑制作用，且呈剂量-时间依赖性（P〈0．05），姜黄素处理后，p-catenin、PGE2蛋白表达水平降低。结论姜黄素能够抑制SW480细胞的增殖，并下调结肠癌SW480细胞中B—catenin及PGE2的表达，这可能是其抗肿瘤作用的机制之一。

E-钙粘素、γ-连环素及基质金属蛋白酶-9的表达与原发性肝癌侵袭转移的关系

目的研究细胞粘附分子E-钙粘素(E-cadherin,E-cad)、γ-连环素(γ-catenin,γ-cat)及基质金属蛋白酶-9(matrix metallo-proteinase9,MMP-9)与原发性肝癌侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学方法,对经过石蜡包埋的40例原发性肝细胞癌组织和40例癌旁正常肝组织标本进行检测,并结合相关临床病理指标进行半定量分析。结果 E-cad、γ-cat及MMP-9在肝癌中的阳性表达率分别为30.0%(12/40)、32.5%(13/40)、77.5%(31/40),在癌旁正常肝组织中的阳性表达率分别为100%(40/40)、100%(40/40)、17.5%(7/40)。E-cad、γ-cat在肝癌组织中不同程度的表达减弱或缺失,在癌旁正常肝组织中全部正常表达,MMP-9在肝癌组织呈现高表达,在癌旁正常肝组织中呈现低表达或不表达,三者的表达随肝癌的侵袭转移而有显著性差异(P<0.05),且E-cad、γ-cat在肝癌组织中的表达都与MMP-9的表达水平呈负相关(r=-0.562,P<0.05;r=-0.649,P<0.05)。结论 E-cad、γ-cat及MMP-9参与肝癌的侵袭转移过程,在原发性肝癌恶性进展方面起着重要作用。

CD24、β-连环蛋白在卵巢癌及癌前病变患者组织中的表达及临床意义

目的:探究卵巢癌及癌前病变患者组织标本中CD24、β-连环蛋白(β-catenin)的表达状况及其与患者临床特征的关联性。方法:选取就诊并进行治疗的40例良性卵巢肿瘤患者(A组),40例交界性卵巢肿瘤患者(B组),60例卵巢癌患者(C组),同期60例体检健康的女性患者(N组)为研究对象。观察CD24、β-catenin与相关蛋白唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-10(Siglec-10)、Engrailed-2(EN2)在各组研究对象组织中的表达情况,同时分析CD24、β-catenin表达与卵巢癌患者临床特征间的关联性;并对CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达的相关性进行分析。结果:A组、B组、C组、N组四组研究对象中,CD24阳性表达率分别为22.50%、57.50%、85.00%、6.67%;β-catenin阳性表达率分别为27.50%、67.50%、81.67%、10.00%;Siglec-10阳性表达率分别为25.00%、65.00%、88.33%、8.33%,EN2阳性表达率分别为35.00%、62.50%、78.33%、10.00%,且组间比较差异有统计学意义(均P<0.05)。在卵巢癌患者组织中,CD24、β-catenin表达与患者年龄、病理类型不存在显著关联(均P>0.05),CD24表达与患者临床分期、淋巴结转移、组织分化均存在显著关联(均P<0.05),β-catenin表达与患者组织分化存在显著相关性(P<0.05),且CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达均呈现正相关性(r=0.865,r=0.901,均P=0.000)。结论:对于卵巢癌患者而言,随着患者病变程度的加深,CD24、β-catenin的表达呈现上调趋势,CD24相关蛋白Siglec-10、EN2的表达也呈现上调趋势;同时CD24的表达与患者临床分期、组织分化及淋巴结转移均存在显著关联,β-catenin的表达与患者组织分化存在显著关联。此外,卵巢癌患者组织中CD24与Siglec-10、β-catenin与EN2表达均呈现正相关性,为临床诊疗提供了参考价值。

Wnt3a转染小鼠胸腺激酶缺陷细胞及对β-连环素蛋白亚细胞分布的影响

背景:Wnt信号通路是动物胚胎发育过程中重要的调控通路,建立Wnt信号通路细胞模型对于研究该通路有重要意义。目的:以Wnt3a真核表达质粒转染小鼠胸腺激酶缺陷细胞,构建能够持续激活Wnt信号通路的体外细胞模型,观察经典Wnt信号通路对β-连环素蛋白亚细胞分布的影响。方法:将扩增真核表达质粒pgk-Wnt3a-pcDNA3.0进行酶切鉴定。应用脂质体转染技术将真核表达质粒pgk-Wnt3a-pcDNA3.0和对照质粒pgk-neo-pcDNA3.0转染入胸腺激酶缺陷细胞,经过G418筛选后挑出细胞克隆,扩大培养。应用RT-PCR技术检测表达产物,应用间接免疫荧光技术检测Wnt3a对鼠胸腺激酶缺陷细胞β-catenin亚细胞分布的影响。结果与结论:Wnt3a质粒经过酶切鉴定证明所扩增的质粒为目的质粒。经过G418筛选3周后,挑选10个稳定转染的细胞克隆,进行RT-PCR检测,可见在L-Wnt3a细胞的cDNA产生1条长度为320bp亮带,表明扩增产物为所需要的目的片段,Wnt3a质粒转染胸腺激酶缺陷细胞后有Wnt3a在mRNA转录水平表达。转染对照质粒的胸腺激酶缺陷细胞cDNA未扩增出目的条带。免疫荧光检测可见Wnt3a质粒转染胸腺激酶缺陷细胞后细胞浆中有Wnt3a蛋白表达,转染对照质粒组无表达。Wnt3a质粒转染胸腺激酶缺陷细胞核中可见明亮的红色荧光,提示β-连环素蛋白在胸腺激酶缺陷细胞-Wnt3a细胞聚集并进入细胞核中。转染对照质粒的胸腺激酶缺陷细胞浆未见有明显β-连环素蛋白着色,细胞核中无β-连环素蛋白的聚集。构建了能够持续激活Wnt信号通路的体外细胞模型,真核表达Wnt3a质粒转染胸腺激酶缺陷细胞能够获得稳定表达,促进胸腺激酶缺陷细胞浆中β-连环素蛋白向细胞核转移。

天麻素通过SOX2/β-catenin通路抑制脂多糖诱导的小胶质细胞活化

目的:研究天麻素(GAS)对脂多糖(LPS)激活的BV2小胶质细胞性别决定区Y框蛋白2(SOX2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路表达的影响。方法:体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组(Control)、LPS刺激组(LPS)、LPS+0.17 mmol/L GAS处理组(LPS+GAS-L)、LPS+0.34 mmol/L GAS处理组(LPS+GAS-H)、SOX2抑制剂丙萘洛尔(PR)处理组(PR)、LPS+PR处理组(LPS+PR)、LPS+PR+GAS处理组(LPS+PR+GAS)。通过CCK-8检测PR对BV2小胶质细胞活力的影响,并通过Western Blot和免疫荧光双标染色检测SOX2、β-catenin、甘露糖受体(CD206)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化。结果:PR在0~40μmol/L范围内不会引起显著的BV2小胶质细胞死亡;LPS刺激组中SOX2、β-catenin和TNF-α蛋白表达明显增强,而CD206表达显著降低(P<0.05)。GAS干预后SOX2、β-catenin和TNF-α表达显著减少,而CD206明显升高(P<0.05);与LPS组相比,用PR阻断SOX2后β-catenin和TNF-α蛋白表达显著降低(P<0.05),而PR与GAS联合应用与单纯GAS干预组相比,β-catenin和TNF-α蛋白表达无明显差异。结论:天麻素可能通过抑制SOX2/β-catenin通路减轻小胶质细胞的激活,发挥抗炎作用。

右旋柠烯对大鼠结直肠癌E-钙黏蛋白和β-连环素表达的影响

目的观察D-limonene(右旋柠烯)对大鼠结直肠癌的生长和E-cad(E-钙黏蛋白,E-cadherin)、β-cat(β-连环素,β-catenin)表达的影响,从分子学角度探讨其抗肿瘤的机制。方法皮下注射致癌剂二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)构建大鼠原发肠癌模型,中期后给予D-limonene干预,免疫组化染色观察癌组织E-cad、β-cat的表达情况。结果E-cad和β-cat在两组均有异常表达,治疗组异常表达率低;β-cat对照组异位表达增加。结论D-limonene降低了E-cad、β-cat异常表达率,可能抑制了肿瘤的发展和转移。