磷酸化的MAPK作用激酶1表达与鼻咽癌发生发展及预后的关系

目的探讨磷酸化的MAPK作用激酶1(pMnK1)表达与鼻咽癌病人发生发展及预后的关系。方法选取2015年1月至2017年7月南阳市中心医院收集的90例鼻咽癌病理学标本、90例经病理学检查证实鼻部慢性炎症的鼻黏膜组织(对照组),应用免疫组化染色分析检测pMnk1蛋白表达,并按照年龄、性别、组织学类型、临床分期、淋巴结转移情况进行分组分析,分析pMnk1蛋白阳性与阴性表达的鼻咽癌病人2年生存率及预后。结果鼻咽癌组的pMnK1蛋白阳性率74.44%高于对照组的26.67%,差异有统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、淋巴结转移的鼻咽癌组的pMnK1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);经2年随访,pMnK1蛋白阳性的鼻咽癌病人失访4例、阴性病人失访1例,pMnK1蛋白阳性的鼻咽癌病人2年生存率61.90%与阴性病人的77.27%,差异无统计学意义(P>0.05);pMnK1蛋白阳性的鼻咽癌病人的生存时间20.0个月短于阴性组23.0个月,差异有统计学意义[Log-rank(Mantel-Cox)=3.285,P<0.05]。结论鼻咽癌组织中pMnK1蛋白呈高表达,并且与肿瘤的发生发展及不良预后关系密切。

MAPK相互作用蛋白激酶1对心肌细胞炎症的作用

目的于在体水平和离体水平研究MAPK相互作用蛋白激酶1对心肌细胞炎症的作用。方法应用MAPK相互作用蛋白激酶1基因敲除小鼠和C57 BL/6野生型小鼠,行主动脉缩窄术,于术后4周取材。应用免疫荧光染色,检测心肌组织中P-NF-κBp65在心肌细胞中的核转位。应用Western blot法检测心肌组织中P-NF-κBp65和TNF-α。应用Mnk1 sh RNA腺病毒转染技术,降低H9c2细胞中Mnk1的表达,给予血管紧张素Ⅱ刺激48h。应用免疫荧光染色,检测H9c2细胞中P-NF-κBp65的核转位。应用RT-PCR检测H9c2细胞中TNF-αm RNA的表达。结果在体实验表明,主动脉缩窄术后4周,与野生型小鼠相比,MAPK相互作用蛋白激酶1基因敲除小鼠心肌组织中P-NF-κBp65在心肌细胞中的核转位明显增多,TNF-α和P-NF-κBp65的蛋白表达明显增加。离体实验表明,MAPK相互作用蛋白激酶1表达降低的H9c2细胞中P-NF-κBp65的核转位明显增多,TNF-αm RNA的表达明显增加。结论 MAPK相互作用蛋白激酶1基因缺失促进压力负荷诱导的小鼠心肌组织炎症,其表达降低可促进血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞炎症。

Smad7基因对胞外信号调节激酶磷酸化水平的调控

研究在BEP2D细胞中,作为Smads蛋白家族的抑制分子,Smad7对胞外信号调节的蛋白激酶(ERK1/2或p44/42)磷酸化水平的调控。将Smad7真核表达载体或人工合成的Smad7-siRNA转染BEP2D细胞,TGF-β刺激,通过Western印迹检测Smad7对p44/42蛋白磷酸化的影响。结果在永生化BEP2D细胞中,TGF-β1刺激后5min开始,可以检测到磷酸化的p44/42;到60min达到高峰,之后逐渐降低。细胞转染Smad7,TGF-β作用60min后,p44/42磷酸化水平明显增高;而转染Smad7-SiRNA,TGF-β作用60min后,p44/42磷酸化水平显著降低。p44/42蛋白水平基本上不受TGF-β1刺激及Smad7表达水平的影响。以上结果说明,在BEP2D细胞中,Smad7可参与TGF-β对ERK/MAPK通路的活化作用。

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对脓毒症大鼠多器官损伤的保护作用研究

目的 探讨脓毒症致多器官损伤的原因,以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用和机制。方法 采用盲肠结扎穿刺术(CL P)制备脓毒症大鼠模型,治疗组采用术前给予p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80灌胃。在不同时间点观察大鼠血清肿瘤坏死因子- α(TNF-α)和白细胞介素- 1β(IL- 1β)以及生化指标如丙氨酸转氨酶(AL T)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸磷酸激酶同工酶(CPK -MB)浓度的变化。结果 CL P术后大鼠血清TNF-α、IL -1β显著升高,AL T、BU N、Cr、CPK- MB也进行性升高;血清AL T、BU N、Cr、CPK -MB变化与TNFα、IL 1β呈显著正相关。应用SB2 0 35 80后,血清TNF-α、IL- 1浓度显著降低,同时AL T、BUN、Cr、CPK MB也降低。结论 TNF-α、IL- 1β的大量释放是脓毒症致多器官损伤的原因之一,通过调控p38MAPK信号转导通路可对脓毒症所致多器官损伤起保护作用。

大鼠重症急性胰腺炎发病机制中p38丝裂原活化蛋白激酶的作用

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号转导通路在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)胰腺组织中的变化规律,探讨p38 MAPK特异性抑制剂CNI1493对SAP 的保护作用. 方法:50 g/L牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立雄性SD 大鼠SAP模型,随机分为SO组(假手术组,n=30)、SAP—NS组(n=25)及SAP—CNI1493组(n=25),各组大鼠质量相似.Western blot法检测大鼠胰腺组织磷酸化p38 MAPK的表达;ELISA方法检测血清IL-1β,TNF-α水平:光镜下评估胰腺组织病理学积分. 结果:SO组胰腺组织存在磷酸化p38 MAPK弱表达, SAP—NS组造模后15 min时磷酸化p38 MAPK的表达即显著增高至峰值,3 h后开始下降,6 h时磷酸化p38 MAPK活性与SO组相似.SAP—NS组和SAP-CNI1493 组Western blot检测15,30 min条带光密度值5 200±360, 3 500±250和4 910±320,2 500±340,SAP—CNI1493组15,30 min时胰腺组织磷酸化p38 MAPK的表达显著低于SAP—NS组(P<0.01).SAP-CNI1493组3,6 h时间点血清IL-1β,TNF-α水平及3 h时间点胰腺组织病理学积分均显著低于SAP—NS组(P<0.01). 结论:p38 MAPK信号转导通路与牛磺胆酸钠大鼠SAP 发病机制有关,CNI1493预处理可能通过抑制p38 MAPK的激活、减少炎症细胞因子的产生而改善腓炎病理改变的严重程度.

ERK在NGF诱导PC12细胞分化中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1/2蛋白和磷酸化ERK1/2蛋白水平的影响,并观察MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对NGF诱导的细胞形态学改变的影响。结果ERK1/2蛋白的磷酸化呈现NGF剂量和时间依赖性。NGF作用细胞5min即可观察到明显的ERK1/2蛋白磷酸化,持续1h左右,2h时降低到初始水平,而细胞形态的改变出现在NGF作用12h以后。倒置相差显微镜观察可见PC12细胞分化的程度与ERK1/2活化持续的时间正相关,U0126可完全即时抑制ERK1/2的活化,而ERK1/2活化的抑制可完全阻断NGF诱导的PC12细胞分化。结论ERK1/2的活化是PC12细胞发生分化的必需事件,其活化时间的长短对分化具有决定作用。

促分裂原活化蛋白激酶磷酸酶

促分裂原活化蛋白激酶磷酸酶(mitogen-activatedproteinkinasephosphatases,MKPs)是一类丝/苏氨酸和酪氨酸双特异性的磷酸酶。它在细胞分化、增殖和基因表达过程中起着重要的作用。MKPs可以选择性地结合促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK),对MAPK进行去磷酸化,从而调节MAPK信号通路的活性。另一方面,MAPK也可以激活MKPs,它们的相互作用确保了细胞内信号的精确传递,并参与细胞功能的调节。

推拿对神经病理性疼痛大鼠脊髓磷酸化P38MAPK表达及炎性因子IL-1Β的影响

目的探讨推拿对CCI大鼠脊髓磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及白介素(IL)-1β的影响并分析其作用机理。方法将32只SD大鼠随机分为4组:(1)正常组,(2)假手术组,(3)模型组,(4)推拿组,每组8只。正常组自然喂养,不做任何干预;假手术组暴露坐骨神经,不予结扎;模型组参照Bennett的方法建立坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型;推拿组在从造模3天后开始推拿治疗,直至造模后第14天取材,推拿选穴:"环跳""风市""阳陵泉"穴,每天1次,每次治疗9min。于术前(0)天及术后第3、7、10、14天观察SD大鼠热痛缩腿反应潜伏期(PWL);术后第14天采用western blot测定脊髓(L4~L6)磷酸化P38 MAPK表达;RT-PCR检测IL-1βmRNA表达。结果术后3天,正常组及假手术组痛阈较高,模型组和推拿组因进行CCI手术后,痛阈明显降低,模型组和推拿组痛阈差异不大(P>0.05);经推拿干预后,术后第7天推拿组较模型组痛阈增高(P<0.05),术后第10、14天推拿组痛阈持续提高,与模型组比较差异显著(P<0.01);假手术组手术3天后热痛阈值逐渐升高,至第14天其热痛阈值较正常组比较无显著差异(P>0.05)。模型组较正常组及假手术组大鼠脊髓磷酸化P38MAPK及IL-1βmRNA表达增强(P<0.05);与模型组相比,推拿组在造模后第14天可显著下调脊髓磷酸化P38蛋白水平及IL-1βmRNA表达(P<0.05)。结论推拿可抑制CCI大鼠痛敏反应,其机制可能与下调脊髓磷酸化P38MAPK,从而阻断其介导的免疫炎症反应有关。

MAPK/ERK通路相关蛋白在肺癌组织中的表达及其与肺叶切除术患者预后关系

目的MAPK/ERK通路相关蛋白在肺癌组织中的表达及其在肺叶切除术肺癌患者预后评估中的作用鲜有报道。文章旨在分析MAPK/ERK通路相关蛋白细胞外信息调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)蛋白及其磷酸化(p-ERK1/2)蛋白在肺癌组织中的表达情况,并探讨其与肺叶切除术患者临床预后的关系。方法回顾性收集2014年1月至2016年10月于武汉市第三医院胸外科行全胸腔镜肺叶切除术治疗的62例肺癌患者的肺癌组织标本及同一患者距癌变组织>5 cm的癌旁组织标本各62份。采用免疫组化法检测患者肺癌组织及癌旁组织中ERK1/2、p-ERK1/2表达阳性率,采用χ^(2)检验分析肺癌组织中ERK1/2、p-ERK1/2与患者临床病理特征的关系。随访至2021年10月,共57例患者获得随访。采用Kaplan-Meier生存分析法分析ERK1/2、p-ERK1/2表达与患者预后的关系,并拟合Cox模型评价不同指标与患者预后的关系。结果ERK1/2、p-ERK1/2在肺癌组织中主要定位于肿瘤细胞的细胞膜和细胞浆中,阳性肿瘤细胞弥漫分布;ERK1/2在癌旁正常组织中表达较少,p-ERK1/2在癌旁正常组织中呈阴性表达。肺癌组织中ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达阳性率均高于癌旁组织(P<0.05)。ERK1/2在不同分化程度、淋巴结有无转移患者中表达阳性率差异有统计学意义(P<0.05);p-ERK1/2在不同分化程度、临床病理分期、淋巴结有无转移患者中表达阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线及log-rank分析显示,ERK1/2、p-ERK1/2表达阳性患者与其表达阴性患者术后累积生存率比较,差异有统计学意义(P=0.021、0.018)。多因素Cox比例风险模型显示,肿瘤分化程度低[HR:1.887(1.149~2.684)]、淋巴结转移[HR:2.348(1.109~3.527)]、p-ERK1/2表达阳性[HR:3.258(1.236~5.148)]是影响肺癌患者预后的风险因素(P<0.05)。结论MAPK/ERK通路相关蛋白ERK1/2、p-ERK1/2在肺癌组织中呈现高表达,其中p-ERK1/2表达与肺癌患者预后关系密切,可作为评判肺癌患者预后的重要指标。

肺癌中NTRK1基因重排具有致癌性和药物敏感性

本实验确认一个肺癌患者新融合基因的激酶结构域——高亲和力神经生长因子受体（TRKA）的NTRK1基因的激酶结构域。MPRIP-NTRK1和CD74-NTRK1融合基因均可能导致TRKA激酶激活而产生致癌作用。用TRKA激酶抑制剂治疗表达NTRK1融合蛋白的细胞系发现TRKA激酶抑制剂能够抑制TRKA自身磷酸化和细胞生长。在未用二代测序或荧光原位杂交技术检测的肺癌患者（3.3%,3/91）肿瘤组织揭示了NTRKl融合基因的证据。

2-Methoxy-6-acetyl-7-methyljuglone exhibits anti-inflammatory properties via MKP-1 in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages

Aim Recent study have reported 2-Methoxy-6-acetyl-7-methyljuglone （MAM） for its potential antimicro- bial, neuroprotective and anticancer activity. However, the anti-inflammation effects of MAM remains to be elucida- ted. We investigated the anti-inflammation activity of MAM. Methods RAW 264.7 macrophages were exposed to LPS with or without MAM. Inducible nitric oxide synthase （iNOS） expression and signaling molecules activated by LPS were evaluated. Results LPS-induced iNOS expression and nitric oxide （NO） expression was suppressed by MAM. MAM attenuated p38MAPK in cells treated with LPS. In addition, MAM caused an increase in MKP-1 expres- sion, which could suppress p38MAPK phosphorylation. Conclusions MAM may activate MKP-1, which then de- phosphorylates p38MAPK, resulting in iNOS down-regulation in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages. The pres- ent study indicate that MAM may possess the potential to alleviate LPS-associated inflammatory disorders.

探讨双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B在宫颈癌中的潜在促癌机制

目的 探讨DRYK1B在宫颈癌中的促癌机制及其临床意义。方法 采用生物信息学数据分析及实验验证,探索DRYK1B在宫颈癌的生长、迁移、凋亡等方面的作用。结果 DYRK1B基因在宫颈鳞状细胞癌肿瘤中的表达量显著高于正常宫颈组织;DYRK1B基因高表达的患者无瘤生存率明显降低;免疫组化及Western blot实验结果显示DYRK1B在宫颈癌组织中的高表达。DYRK1B抑制剂AZ191处理宫颈癌Siha细胞系后,其生长受到抑制,迁移能力减弱,凋亡程度增加。结论 DYRK1B通过蛋白激酶相关通路促进宫颈癌细胞生长及迁移,抑制肿瘤细胞凋亡。

EPSTI1通过调节AKT活化促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化

目的探讨上皮基质相互作用蛋白1(epithelial stromal interaction1,EPSTI1)在胰腺癌发生发展过程中对癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的作用。方法对132例胰腺癌组织样本进行免疫组化染色评估,对体外培养的癌细胞进行转染,采用Westernblot、Transwell试验分析EPSTI1对胰腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响。结果EPSTI1在胰腺癌细胞中的异常高表达可导致癌细胞的上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),增加胰腺癌细胞的迁移和侵袭(均P<0.05)。通过与胰腺星形细胞共培养,癌细胞中EPSTI1表达显著升高。EPSTI1与磷酸化蛋白激酶(phosphorylatedproteinkinase,AKT)相互作用,可诱导AKT磷酸化,促进上述恶性表型(均P<0.05)。结论EPSTI1部分通过调节AKT激活促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT。

电磁辐射诱导PC12细胞凋亡中丝裂原活化蛋白激酶的差别激活

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导系统的差别激活与电磁辐射诱导PC12细胞凋亡的关系。方法以65mWcm2电磁波辐照离体培养PC12细胞20min,分为辐照后即刻及3、12、24h共4个观察时相点,采用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,采用蛋白质免疫印迹法检测ERK12、JNK、P38MAPK蛋白质磷酸化水平。结果电磁波辐照后即刻PC12细胞凋亡开始增加;3h后凋亡细胞进一步明显增多,凋亡率约为23.5%;12h后细胞凋亡率与3h相比,差异无统计学意义(P>0.05);24h后细胞凋亡再次明显增加,并达到高峰。电磁辐射后PC12细胞ERK12和JNK蛋白质磷酸化都明显增加,但ERK12的增加持续到3h,JNK蛋白磷酸化水平增高一直持续到12h,24h后两者都较对照组明显降低。P38MAPK蛋白质磷酸化水平在辐照后一直处于较高水平,其变化趋势呈双峰状,即在3h和24h出现2次磷酸化高峰。结论电磁辐射可以激活MAPK信号转导系统,但ERK12、JNK、P38MAPK表现为差别激活。MAPK信号转导系统可能参与了电磁辐射诱导的PC12细胞凋亡,正是MAPK这种差别激活才导致PC12细胞出现特有的凋亡变化形式。

幽门螺杆菌改变人肝细胞系HepG2蛋白质表达谱

目的研究H.pylori作用后肝细胞系HepG2蛋白质表达谱的改变,通过对差异蛋白质点的鉴定与分析,以探讨H.pylori对肝细胞的病理作用。方法采用体外肝细胞和H.pylori共培养,应用双向凝胶电泳分离H.pylori处理前后细胞总蛋白,筛选出差异表达的蛋白质点,并进行质谱分析鉴定。结果鉴定出7种表达上调的蛋白质点,包括整合素-β1、蛋白激酶C-α、LIM同源盒蛋白Lhx1、真核翻译起始因子2-β亚单位、PINCH蛋白、MAPK激酶3、Ras相关蛋白Rab-37等。这些蛋白质参与了基因表达调控、细胞免疫、细胞生长、信号传导等众多事件。结论H.pylori可能通过介导这些蛋白质的上调而发挥对HepG2细胞的病理作用。这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝胆疾病的关系。

大黄灵仙方调控TAK1与TRAF6相互作用及共定位对胆管细胞炎症反应的影响

目的:观察大黄灵仙方(DHLX)对大鼠胆管上皮细胞的修复作用,探讨其作用机制是否通过调节转化生长因子-β(TGF-β)激活激酶1(TAK1)与肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的相互结合,调控核转录因子-κB(NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化而发挥作用。方法:将20只SD大鼠随机分为正常组和DHLX组,分别予生理盐水及DHLX(320 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃8 d,制备正常血清及含DHLX血清;从正常SD大鼠中提取胆管上皮细胞,取胆管上皮细胞分为9组:正常组、模型组(20 mg·L^(-1))、脂多糖(LPS)+DHLX组(20 mg·L^(-1)+10%含药血清)、LPS+PDTC组(20 mg·L^(-1)+200μmol·L^(-1))、LPS+SB203580组(20 mg·L^(-1)+0.5μmol·L^(-1))、LPS+PDTC+SB203580组(20 mg·L^(-1)+200μmol·L^(-1)+0.5μmol·L^(-1))、LPS+PDTC+DHLX组(20 mg·L^(-1)+200μmol·L^(-1)+10%含药血清)、LPS+SB203580+DHLX组(20 mg·L^(-1)+0.5μmol·L^(-1)+10%含药血清)、LPS+PDTC+SB203580+DHLX组(20 mg·L^(-1)+200μmol·L^(-1)+0.5μmol·L^(-1)+10%含药血清);显微镜下观察药物干预后各组细胞的形态学变化,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中白细胞介素(IL)-1β与IL-6的表达量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中TAK1与TRAF6蛋白表达水平,免疫共沉淀技术检测TAK1与TRAF6的相互作用,激光共聚焦显微镜观察TAK1与TRAF6在细胞中的分布及共定位情况。结果:LPS作用后,细胞突触减少,胞体变圆变小,用药后各组细胞形态趋向正常;与正常组比较,模型组IL-1β和IL-6表达量明显上升(P<0.05),TAK1表达量降低而TRAF6的表达量升高(P<0.05),TAK1-TRAF6蛋白质复合物含量呈降低趋势;与模型组比较,LPS+DHLX组IL-1β和IL-6表达量明显降低(P<0.05),TAK1表达量升高而TRAF6表达量降低(P<0.05),TAK1-TRAF6蛋白质复合物含量显著增加(P<0.01),两蛋白共定位于细胞质中;与LPS+DHLX组比较,其余各组IL-1β和IL-6表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01),通路阻滞剂干预后各组TAK1-TRAF6蛋白质复合物含量明显降低(P<0.05),通路阻滞剂联合DHLX干预后各组TAK1-TRAF6蛋白质复合物含量明显增加(P<0.05),两蛋白在细胞质中存在共定位但不明显。结论:在LPS诱导的胆管细胞炎症反应中,TAK1与TRAF6相互结合呈减弱趋势,大黄灵仙方可逆转此现象,其作用机制可能与促进TAK1与TARF6的相互结合从而抑制NF-κB/MAPK信号通路活化有关。

乳腺癌中雌激素诱导的细胞增殖与有丝分裂素激活蛋白激酶活性的关系

目的 探讨雌二醇与有丝分裂素激活蛋白激酶 (MAPK)信号通路的关系以及MAPK在乳腺癌细胞系中的表达情况。方法 分别用上皮生长因子 (EGF)和不同浓度的雌二醇诱导人类乳腺癌细胞系MCF 7细胞 ,诱导不同时间后用Westernblot方法检测磷酸化ERK1/ 2的表达 ;用抗雌激素物质ICI182 780和MAPK抑制剂PD980 5 9作用于雌二醇诱导的MCF 7细胞 ,检测磷酸化ERK1/ 2的表达 ;用流式细胞仪检测雌二醇对MCF 7细胞周期的影响。结果 MAPK信号通路的诱导剂EGF可以明显诱导磷酸化MAPK的表达 ;雌二醇也可以诱导磷酸化MAPK的表达。PD980 5 9可以完全抑制雌二醇诱导的磷酸化ERK1/ 2水平 ,而ICI182 780只能减少雌二醇诱导的磷酸化ERK1/ 2的表达。随着作用时间的延长 ,雌二醇可以使MCF 7细胞G2 /M期的细胞数增加。结论 雌二醇、雌激素受体与MAPK信号途径关系较为密切 。

PI3K/AKT途径在HGF介导肝干细胞抗凋亡调控中的作用

目的 研究PI3K(磷脂酰肌醇 3激酶 )和MAPK(丝裂原活化蛋白激酶 )途径如何参与肝干细胞的凋亡调控 ;探讨PI3K和MAPK信号途径在HGF介导的抗凋亡信号中的调控。方法 用大鼠肝干细胞系WBF 344细胞进行实验 ;用流式细胞仪检测细胞及DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡 ;用Westernblot方法检测磷酸化MAPK及PI3K蛋白的表达。结果 发现TNF α对ActD致敏的WBF 344细胞能诱导凋亡 ,并且这种细胞凋亡呈现剂量效应关系 ;HGF对ActD TNF α诱导WBF 344细胞凋亡具有保护作用 ,并且这种保护作用呈剂量效应关系 ;Westernblot结果显示 ,在WB细胞 ,HGF确实能够激活ERK、p38MAPK、PI3K AKT信号转导途径 ;进一步用特异的抑制剂阻断ERK及p38MAPK途径后 ,并不能改变HGF对TNF α诱导凋亡的拮抗作用 ,而阻断PI3K AKT途径后 ,HGF的抗凋亡作用被抑制。结论 TNF α能诱导ActD致敏的肝干细胞发生凋亡 ,而HGF则对这种细胞凋亡有明显的拮抗作用 ;ERK1 2和p38MAPK途径的激活并不参与HGF介导的抗凋亡作用 ,HGF的抗凋亡作用是通过PI3K途径转导的。

大黄庶虫虫丸加减对大鼠肾间质纤维化的保护作用及机制

目的:探讨大黄庶虫虫丸加减对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的保护作用及机制。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致大鼠肾间质纤维化模型,将50只SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组,模型组,依那普利组(0. 001 g·kg^(-1)),大黄庶虫虫丸加减大、小剂量组(19,9. 5 g·kg^(-1))。术后第15天处死各组大鼠,收集血清,酶法测定血肌酐(SCr),尿素氮(BUN)水平,收集24 h尿液,连苯三酚红钼终点法测定24 h尿蛋白量(24 h-Upro);留取结扎侧肾组织行苏木素-伊红(HE)染色,马松(Masson)染色;采用免疫组化法(IHC)检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1),纤连蛋白(FN),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β_1,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠24 h-Upro,SCr,BUN含量明显增高(P <0. 01),光镜下肾组织损伤严重,TGF-β_1,FN,α-SMA含量明显升高(P <0. 05),TGF-β_1,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白表达明显升高(P <0. 05);与模型组比较,大黄庶虫虫丸加减大、小剂量组24 h-Upro,SCr,BUN明显降低(P <0. 05),肾脏组织损伤减轻,TGF-β_1,FN,α-SMA含量明显降低(P <0. 05),TGF-β_1,p-p38 MAPK蛋白表达明显降低(P <0. 05)。结论:大黄庶虫虫丸加减方可通过降低FN,α-SMA的高表达,下调p38 MAPK信号通路中的p-p38 MAPK,TGF-β_1表达,减少细胞外基质过度沉积和肾脏固有细胞损伤来改善肾间质纤维化。