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磁性氮化碳复合材料的制备及其对磷酸化肽的富集
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作者 姜丽艳 张玮璐 +1 位作者 赵璐 胡良海 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期564-571,共8页
蛋白质的磷酸化在细胞信号传导和疾病发生发展中起着重要作用,但磷酸化的动态变化和低丰度的特点使得对其直接分析有着较大的困难。为了解决磷酸化肽难离子化、检测丰度低的瓶颈问题,本研究制备了一种磁性氮化碳复合材料,结合基质辅助... 蛋白质的磷酸化在细胞信号传导和疾病发生发展中起着重要作用,但磷酸化的动态变化和低丰度的特点使得对其直接分析有着较大的困难。为了解决磷酸化肽难离子化、检测丰度低的瓶颈问题,本研究制备了一种磁性氮化碳复合材料,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),建立了一种对复杂样品中低丰度磷酸化肽富集与分析的方法。采用电子显微镜、红外光谱分析及X射线衍射分析等手段对合成的磁性氮化碳材料进行表征。以酪蛋白酶解产物为实验模型,发现磁性氮化碳材料能够实现对磷酸化肽的高选择性富集和高灵敏度检测,检出限为0.1 fmol。选择脱脂牛奶、人唾液和人血清为实际分析样品,发现磁性氮化碳材料对微量蛋白生物样品中磷酸化肽的分析具有较高的应用潜力。 展开更多
关键词 氮化碳 磁性固相萃取 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 磷酸化肽 富集
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功能化磁性复合纳米材料富集磷酸化肽综合实验设计
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作者 余凌竹 鲁建 谭言飞 《实验科学与技术》 2023年第4期81-85,131,共6页
随着国家对培养科研创新人才的发展需求,改革传统实验教学内容,将国家发展需求以及科学前沿的研究内容引入综合实验教学设计,结合生物医学工程专业多学科交叉的特点,设计了研究型综合实验——功能化磁性复合纳米材料富集磷酸化肽。该实... 随着国家对培养科研创新人才的发展需求,改革传统实验教学内容,将国家发展需求以及科学前沿的研究内容引入综合实验教学设计,结合生物医学工程专业多学科交叉的特点,设计了研究型综合实验——功能化磁性复合纳米材料富集磷酸化肽。该实验包含大量自主探索的研究性实验内容,覆盖化学、材料、生物医学等学科领域,具有较大的应用前景及可拓展性,通过多学科交叉与融合,旨在开发学生的科研创新思维,增强独立研究能力,培养科研创新人才。 展开更多
关键词 研究型综合实验 实验教学 磁性复合纳米材料 磷酸化肽
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磁性氮化碳复合材料的制备及在磷酸化肽富集中的应用
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作者 吕思琦 齐瑞雪 +2 位作者 刘景海 江丹丹 段莉梅 《生命科学仪器》 2023年第3期40-43,共4页
磷酸化肽的高效富集和鉴定在生物学中具有重要意义。本文制备了三氧化钼功能化的磁性氮化碳(g-C_(3)N_(4))复合材料(Fe_(3)O_(4)/g-C_(3)N_(4)/MoO_(3))。该磁性氮化碳复合材料具有多个亲和位点、高比表面积和快速磁响应性等特点。结合... 磷酸化肽的高效富集和鉴定在生物学中具有重要意义。本文制备了三氧化钼功能化的磁性氮化碳(g-C_(3)N_(4))复合材料(Fe_(3)O_(4)/g-C_(3)N_(4)/MoO_(3))。该磁性氮化碳复合材料具有多个亲和位点、高比表面积和快速磁响应性等特点。结合了金属氧化物亲和色谱法(MOAC)和离子交换色谱法(AEX)富集机理,对磷酸化肽具有良好的富集性能,比如高选择性(α-酪蛋白:β-酪蛋白:牛血清蛋白=1:1:2000)和低检出限(0.1 fmol)。同时实现了从脱脂牛奶样品中高效地富集磷酸化肽,进一步证实了其在微量生物检测和蛋白质组学分析方面的巨大潜力。 展开更多
关键词 磁性 氮化碳 磷酸化肽 富集
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Ti-SBA-15介孔材料用于磷酸化肽的高效富集 被引量:10
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作者 张宇 秦洪强 +1 位作者 吴仁安 邹汉法 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期123-127,共5页
结合基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)检测技术,考察了Ti-SBA-15介孔材料对β-酪蛋白酶解产物中磷酸化肽的选择性富集性能。实验结果显示,含Ti和Si物质的量比为0.08的Ti-SBA-15介孔材料可选择性地对β-酪蛋白酶解产物中的磷... 结合基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)检测技术,考察了Ti-SBA-15介孔材料对β-酪蛋白酶解产物中磷酸化肽的选择性富集性能。实验结果显示,含Ti和Si物质的量比为0.08的Ti-SBA-15介孔材料可选择性地对β-酪蛋白酶解产物中的磷酸化肽进行选择性富集;对于β-酪蛋白和牛血清白蛋白物质的量比为1:100的蛋白质酶解混合液,Ti-SBA-15仍能实现对其磷酸化肽的有效富集。上述结果表明,作为一种多孔、高比表面积的磷酸化多肽的选择性吸附材料,Ti-SBA-15有望在磷酸化蛋白质组的分析中得到广泛的应用。 展开更多
关键词 Ti-SBA-15介孔材料 磷酸化肽 选择性富集 基质辅助激光解吸飞行时间质谱
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超滤膜截留-二氧化钛选择性富集-纳升级液相色谱-串联质谱法检测血清中内源性磷酸化肽 被引量:4
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作者 邹丽娟 李娟 +2 位作者 万慧慧 李秀玲 梁鑫淼 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1781-1786,共6页
采用超滤膜(Ultrafiltration membrane)去除血清中的大量高丰度蛋白、DNA和RNA等大分子量干扰化合物,然后利用TiO2富集超滤膜滤过液中的磷酸化肽,结合纳升级超高压液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(nano UPLC-Q-TOF)分离和检测技术,提高了... 采用超滤膜(Ultrafiltration membrane)去除血清中的大量高丰度蛋白、DNA和RNA等大分子量干扰化合物,然后利用TiO2富集超滤膜滤过液中的磷酸化肽,结合纳升级超高压液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(nano UPLC-Q-TOF)分离和检测技术,提高了内源性磷酸化肽的检测灵敏度;将本方法应用于肺癌患者血清中的内源性磷酸化肽分析,成功检测到18种内源性磷酸化肽。本方法实现了高灵敏度、高选择性血清中内源性磷酸化肽的富集和检测,为肿瘤生物标志物的发现奠定了方法学基础。 展开更多
关键词 超滤膜 TiO2富集 内源性磷酸化肽 NANO UPLC-Q-TOF
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微柱液相色谱-电喷雾串联质谱检测多磷酸化肽位点 被引量:3
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作者 王晖 段继诚 +3 位作者 袁辉明 张丽华 张维冰 张玉奎 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期453-456,共4页
基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基... 基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基酸序列预计的单磷酸化肽相差80的色谱峰,可以证实样品中含有单磷酸化肽。此外,经碱性磷酸酶处理后的样品的色谱峰数目的增加,说明样品中可能存在多磷酸化肽段。通过控制去磷酸化反应的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基团被去除,从而可以推断其中3个磷酸化位点可能处于氨基酸残基序列的第17、18和19位。 展开更多
关键词 微柱液相色谱 电喷雾串联质谱 磷酸化肽 磷酸化位点 碱性磷酸
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硅锆复合氧化物的制备、表征及其在磷酸化肽段富集中的应用 被引量:3
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作者 吴剑虹 肖矿 +3 位作者 赵勇 章伟平 郭林 冯钰锜 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1231-1237,共7页
采用溶胶-凝胶法制备了氧化硅-氧化锆复合氧化物(SiO2-ZrO2),并对其物理与化学性质进行了详细地表征。以α-酪蛋白的酶解产物为探针,比较了氧化硅-氧化锆复合氧化物与氧化锆对磷酸化肽段的富集能力。结果表明:在pH<2时富集,SiO2-ZrO... 采用溶胶-凝胶法制备了氧化硅-氧化锆复合氧化物(SiO2-ZrO2),并对其物理与化学性质进行了详细地表征。以α-酪蛋白的酶解产物为探针,比较了氧化硅-氧化锆复合氧化物与氧化锆对磷酸化肽段的富集能力。结果表明:在pH<2时富集,SiO2-ZrO2对磷酸化肽的选择性要优于ZrO2;使用SiO2-ZrO2材料时,多磷酸化肽段的回收率更高。结合MALDI-TOFMS检测技术,SiO2-ZrO2成功地应用于脱脂牛奶酶解产物中磷酸化肽的分离和富集。 展开更多
关键词 氧化硅-氧化锆复合氧化物 磷酸化肽 富集 基质辅助激光解吸飞行时间质谱
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多金属氧酸盐/壳聚糖磁性复合材料的制备及其用于磷酸化肽的富集 被引量:5
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作者 江丹丹 马玖彤 贾琼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期247-251,共5页
建立了一种基于多金属氧酸盐磁性材料富集磷酸化肽的方法。采用层层自组装技术制备多金属氧酸盐/壳聚糖磁性材料,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测手段,用于磷酸化肽的富集。该磁性材料具有快速磁响应、亲水性... 建立了一种基于多金属氧酸盐磁性材料富集磷酸化肽的方法。采用层层自组装技术制备多金属氧酸盐/壳聚糖磁性材料,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测手段,用于磷酸化肽的富集。该磁性材料具有快速磁响应、亲水性、正电性等优点,对磷酸化肽具有高的富集选择性。实验用β-酪蛋白作为模型蛋白质,通过富集后,方法的检出限为0.02 fmol,说明合成的磁性材料对微量蛋白样品分析具有很高的应用潜力。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 磁性纳米粒子 多金属氧酸盐 富集 磷酸化肽
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二氧化钛结合超滤膜富集和分离肿瘤患者唾液中的磷酸化肽和唾液酸化糖肽 被引量:5
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作者 李娟 姜武辉 徐晓颖 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2073-2077,共5页
利用TiO2富集、超滤膜滤过实现了选择性富集和分离磷酸化肽和含唾液酸的N-链接糖肽.首先选取截留分子量为1×104的超滤膜分离糖肽和磷酸化肽,然后利用酪蛋白和牛血清白蛋白的酶解物验证所建立的方法,该方法的最低检出限是0.16 pmol... 利用TiO2富集、超滤膜滤过实现了选择性富集和分离磷酸化肽和含唾液酸的N-链接糖肽.首先选取截留分子量为1×104的超滤膜分离糖肽和磷酸化肽,然后利用酪蛋白和牛血清白蛋白的酶解物验证所建立的方法,该方法的最低检出限是0.16 pmol.将上述方法应用于肺癌患者的唾液检测,成功检测并鉴定到8个磷酸化肽和5个糖肽.本方法可有效提高磷酸化肽和糖肽检测的选择性和灵敏度,为疾病生物标志物的检测提供了新方法. 展开更多
关键词 二氧化钛 富集 超滤膜 磷酸化肽
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亲水模式下流动相pH值对磷酸化肽在Click OEG-CD材料上富集选择性的影响
10
作者 赵艳艳 郭志谋 +1 位作者 李秀玲 梁鑫淼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期763-768,共6页
以标准蛋白质α-酪蛋白的酶解液作为研究对象,考察流动相pH值对磷酸化肽在Click OEG-CD材料上富集选择性的影响。首先以磷酸苯二钠作为模型化合物考察流动相pH值对其在Click OEG-CD材料上的保留影响,结果表明当pH值低于磷酸根的p Ka值时... 以标准蛋白质α-酪蛋白的酶解液作为研究对象,考察流动相pH值对磷酸化肽在Click OEG-CD材料上富集选择性的影响。首先以磷酸苯二钠作为模型化合物考察流动相pH值对其在Click OEG-CD材料上的保留影响,结果表明当pH值低于磷酸根的p Ka值时,磷酸苯二钠难以电离,与材料的离子交换作用较弱,因而保留也较弱。然后在亲水模式下流动相pH值分别为2,4,6时考察Click OEG-CD材料对α-酪蛋白的酶解液中磷酸化肽的富集选择性影响。结果表明,当流动相pH为2时,磷酸化肽不能被材料富集;当pH为4时,磷酸化肽能够被富集,而且洗脱窗口较窄;当pH为6时,磷酸化肽也能够被富集,但是洗脱窗口较宽。因此适合亲水模式下富集磷酸化肽的流动相pH值为4。本研究结果能够为今后将Click OEG-CD材料更好的应用于磷酸化肽富集提供有意义的借鉴。 展开更多
关键词 流动相pH值 CLICK OEG—CD材料 磷酸化肽
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基于飞行时间质谱开发磷酸化肽检测基质及在实践教学中的应用
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作者 姜丽艳 闫国栋 +2 位作者 李江楠 玲玲 国新华 《生命科学仪器》 2022年第2期70-75,共6页
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)用于多肽、蛋白质组学、核酸、糖类、药物和有机化合物等研究领域,具有灵敏度高、准确度高及高通量等特点,是生命化学领域的一种强有力的分析测试技术。开发了一种离子液体基质用于选择... 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)用于多肽、蛋白质组学、核酸、糖类、药物和有机化合物等研究领域,具有灵敏度高、准确度高及高通量等特点,是生命化学领域的一种强有力的分析测试技术。开发了一种离子液体基质用于选择性检测多肽混合物中的磷酸化肽,具有响应信号强,特异性检测,高重现性和耐盐性等优点。该开发成果成功的应用于本科开放创新实践教学中,激发了学生的学习热情和实验兴趣,并提高了学生的创新能力和科研素养。 展开更多
关键词 飞行时间质谱 磷酸化肽 基质 实践教学
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血清磷酸化肽的分离富集和质谱定量及其作为潜在肿瘤标志物的评价 被引量:6
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作者 翟贵金 吴魁 汪福意 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1192-1198,共7页
血清中磷酸化肽种类和浓度的变化既能反映人体内蛋白质水解酶活性的变化,又能反映蛋白质翻译后磷酸化的水平,业已成为肿瘤标志物寻找和发现的重要目标。因而,血清中磷酸化肽的鉴定及其定量分析在具有临床应用价值的肿瘤标志物的筛选与... 血清中磷酸化肽种类和浓度的变化既能反映人体内蛋白质水解酶活性的变化,又能反映蛋白质翻译后磷酸化的水平,业已成为肿瘤标志物寻找和发现的重要目标。因而,血清中磷酸化肽的鉴定及其定量分析在具有临床应用价值的肿瘤标志物的筛选与发现中起着重要作用。由于血清中的内源性磷酸化肽丰度极低,在质谱分析中的离子化效率不高,且受到来自高丰度非磷酸化肽和蛋白质的信号抑制及干扰,血清中磷酸化肽的质谱定量分析是分析化学研究中的一个巨大挑战。文章对血清磷酸化肽的分离富集、质谱定量分析及其作为肿瘤标志物的筛选和评价等3个方面的研究进展进行总结、评述,并展望该领域的未来研究趋势和应用前景。 展开更多
关键词 磷酸化肽 分离富集 质谱定量 肿瘤标志物 血清 综述
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介孔氧化铁材料快速、高效富集分离磷酸化肽段和蛋白的新方法研究 被引量:4
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作者 单喆 韩路 +3 位作者 于锡娟 屠波 赵东元 杨芃原 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期885-889,共5页
以0.1μmol/Lβ-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO43-能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件... 以0.1μmol/Lβ-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO43-能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件下,在含有0.1%乙酸和30%乙腈的孵育液中孵育5min后,经1mol/LNH3.H2O溶液的洗脱,介孔氧化铁可有效地将磷酸化肽段从蛋白酶解液中富集分离。本方法也可以选择性地提取α-casein磷酸化蛋白,实现了简单、快速、高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离。同时,通过MALDI-TOF串级质谱分析,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 介孔氧化铁 磷酸化肽 磷酸化蛋白 快速富集分离
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精氨酸功能化磁性纳米材料的制备及在磷酸化肽富集中的应用 被引量:6
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作者 郑海娇 姜丽艳 贾琼 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期717-724,共8页
以精氨酸修饰的磁性微球作为磁性固相萃取(MSPE)平台的载体,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,实现了对复杂样品中低丰度磷酸化肽的分离富集.采用场发射扫描电子显微镜、Zeta电位测定、红外光谱分析、振动样品... 以精氨酸修饰的磁性微球作为磁性固相萃取(MSPE)平台的载体,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,实现了对复杂样品中低丰度磷酸化肽的分离富集.采用场发射扫描电子显微镜、Zeta电位测定、红外光谱分析、振动样品磁强计及X射线衍射分析等手段对合成的功能化磁性材料进行了表征.选择β-酪蛋白酶解产物磷酸化肽为标准品,在最佳实验条件下,利用构建的MSPE-MS平台能够实现对磷酸化肽的高选择性和高灵敏度检测,检出限为0.1 fmol.实验结果表明,经精氨酸修饰的磁性材料对牛奶样品中低含量的磷酸化肽具有较高的选择性,所建立的方法适用于复杂样品的分离分析. 展开更多
关键词 磁性纳米材料 精氨酸 磁性固相萃取 磷酸化肽 质谱检测
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纳升级电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱中磷酸化肽的离子抑制作用 被引量:2
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作者 邹瑶 姜武辉 +2 位作者 邹丽娟 李秀玲 梁鑫淼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期367-371,共5页
目前磷酸化蛋白质组学研究中的主要技术是蛋白质酶解产生的磷酸化肽的质谱检测。但是实际样品中的磷酸化肽(特别是多磷酸化肽)很难被检测到。其原因普遍认为是由于质谱检测时,非磷酸化肽抑制磷酸化肽。但也有认为非磷酸化肽对磷酸化肽... 目前磷酸化蛋白质组学研究中的主要技术是蛋白质酶解产生的磷酸化肽的质谱检测。但是实际样品中的磷酸化肽(特别是多磷酸化肽)很难被检测到。其原因普遍认为是由于质谱检测时,非磷酸化肽抑制磷酸化肽。但也有认为非磷酸化肽对磷酸化肽没有抑制作用。另外磷酸化肽之间是否存在离子抑制作用还没有报道。本文采用相同氨基酸序列的标准磷酸化肽和非磷酸化肽,将其单独和混合进行质谱检测,通过对比混合前后磷酸化肽的信号强度,证明了非磷酸化肽对磷酸化肽有离子抑制作用;单磷酸化肽对二磷酸化肽有一定的抑制作用,但不太显著;单磷酸化肽对三磷酸化肽、二磷酸化肽对三磷酸化肽均有显著的离子抑制作用。该研究为今后单磷酸化肽和多磷酸化肽的分段富集和检测提供了有力的证明。 展开更多
关键词 磷酸化肽 质谱 离子化抑制
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功能化磁性纳米材料在磷酸化肽富集中的应用 被引量:4
16
作者 熊芳芳 江丹丹 贾琼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期60-65,共6页
蛋白质磷酸化是最重要和最普遍的翻译后修饰之一。基于质谱的技术已成为分析蛋白质磷酸化的重要手段。然而,磷酸化肽固有的低丰度和电离效率以及由非磷酸化肽共存引起的严重抑制使得直接质谱分析仍然是一个挑战。为解决此问题,需在质谱... 蛋白质磷酸化是最重要和最普遍的翻译后修饰之一。基于质谱的技术已成为分析蛋白质磷酸化的重要手段。然而,磷酸化肽固有的低丰度和电离效率以及由非磷酸化肽共存引起的严重抑制使得直接质谱分析仍然是一个挑战。为解决此问题,需在质谱分析前对磷酸化蛋白质进行选择性富集。磁性纳米材料具有良好的磁响应性,可以在外界磁铁的帮助下实现与溶液的迅速分离。功能化磁性纳米材料作为一种新型的分析技术已在蛋白质组学研究中得到广泛的应用。该文就近年来对磁性纳米粒子进行各种功能化修饰以提高其特异性吸附能力的吸附材料在磷酸化肽的富集方面的应用予以综述,并展望了功能化磁性纳米材料在磷酸化肽富集领域的应用前景。 展开更多
关键词 功能化 磁性 磷酸化肽 综述
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智能聚合物基材料富集磷酸化肽和糖肽的研究进展 被引量:2
17
作者 郑鑫彤 王雪 +3 位作者 张福生 张旭阳 赵艳艳 卿光焱 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期15-25,共11页
翻译后修饰是蛋白质组学研究的前沿和重点,它不仅调节着蛋白质的折叠、状态、活性、定位以及蛋白质间的相互作用,也能帮助科学家更全面地了解生物体的生命过程,为疾病的预测、诊断和治疗提供更加强大的支撑和依据。翻译后修饰产物(例如... 翻译后修饰是蛋白质组学研究的前沿和重点,它不仅调节着蛋白质的折叠、状态、活性、定位以及蛋白质间的相互作用,也能帮助科学家更全面地了解生物体的生命过程,为疾病的预测、诊断和治疗提供更加强大的支撑和依据。翻译后修饰产物(例如磷酸化肽和糖肽)丰度很低,且存在着强烈的背景干扰,很难直接用质谱进行分析,因此迫切需要开发高效的富集材料和技术来选择性富集翻译后修饰产物。近年来,智能聚合物基材料通过外部物理、化学或生物刺激可逆地改变其结构和功能,实现对磷酸化肽和糖肽高度可控的吸附和脱附,进而衍生开发出一系列新颖的富集方法,极大地吸引研究者们的兴趣。一方面,智能聚合物基材料的响应变化包括材料疏水性的增加或减少、形状和形貌的改变、表面电荷的重新分布以及亲和配体的暴露或隐藏等特性。这些特性使得目标物和智能聚合物基材料之间的亲和力可以通过简单改变外部条件(如温度、pH值、溶剂极性和生物分子等)实现更可控和更智能的精细调节。另一方面,智能聚合物基材料为集成功能模块提供了便捷的可扩展平台,例如特定的识别组件,显著提高了目标物质的分离选择性。智能聚合物基材料在分离方面展现出巨大的潜力,这为蛋白质翻译后修饰产物的分析和研究带来了希望。围绕上述主题,该文依据Web of Science近20年来近50篇代表性文献,概述了智能聚合物基材料在磷酸化肽和糖肽分离及富集中的发展方向。 展开更多
关键词 蛋白质组学 富集 翻译后修饰 智能聚合物 磷酸化肽 综述
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磷酸化肽富集新方法研究进展 被引量:1
18
作者 徐林楠 白玉 刘虎威 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1804-1812,共9页
对组成复杂的生物样品中的低丰度磷酸化肽进行预富集,能够消除高丰度非磷酸化肽等干扰组分,从而提高磷酸化肽在质谱分析中的灵敏度,获得更好的检出和鉴定结果。在磷酸化肽富集过程中,对磷酸化肽具有选择性亲和作用的富集材料是实现对磷... 对组成复杂的生物样品中的低丰度磷酸化肽进行预富集,能够消除高丰度非磷酸化肽等干扰组分,从而提高磷酸化肽在质谱分析中的灵敏度,获得更好的检出和鉴定结果。在磷酸化肽富集过程中,对磷酸化肽具有选择性亲和作用的富集材料是实现对磷酸化肽特异高效富集的关键,多种具有不同类型亲和作用的富集材料已在磷酸化肽富集研究中得到了应用;而在材料形貌、富集操作形式、磷酸化肽富集特异性等方面,研究者们也不断在现有磷酸化肽富集材料的基础上进行多样化的改进。本文分别从不同类型亲和作用的磷酸化肽富集材料以及磷酸化肽富集方法改进两方面,对近年来磷酸化肽富集方法的研究进展进行了评述。 展开更多
关键词 磷酸化肽 样品前处理 富集 质谱分析 评述
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磷酸化肽段分离富集方法研究进展 被引量:1
19
作者 李莎 王露 +1 位作者 王迎 陈平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期416-422,共7页
目前磷酸化肽段鉴定主要依赖于质谱技术,但磷酸化肽段的低丰度性以及来自非磷酸化肽段的干扰等因素,影响质谱的分析与鉴定。因此质谱分析前磷酸化肽段的富集,是深入研究磷酸化蛋白质组学的先决条件。该文介绍了磷酸化蛋白质组学中传统... 目前磷酸化肽段鉴定主要依赖于质谱技术,但磷酸化肽段的低丰度性以及来自非磷酸化肽段的干扰等因素,影响质谱的分析与鉴定。因此质谱分析前磷酸化肽段的富集,是深入研究磷酸化蛋白质组学的先决条件。该文介绍了磷酸化蛋白质组学中传统的以及新建立的一些磷酸化肽段分离富集方法的原理及优缺点,这些方法包括固相金属离子亲和色谱法(IMAC)、金属氧化亲和色谱法(MOAC)、强阳/阴离子交换色谱法(SCX/SAX)、亲水相互作用色谱法(HILIC)、静电排斥亲水相互作用色谱法(ERLIC)、化学衍生法、MALDI靶盘富集法以及多种富集方法相结合。 展开更多
关键词 磷酸化肽 分离富集 质谱 综述
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新型反相/强阴离子交换混合模式材料用于磷酸化肽富集
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作者 董立君 张丽媛 +5 位作者 彭金咏 董佩佩 王丽莉 张利娟 候晓林 赵艳艳 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期61-68,共8页
建立了新型反相/强阴离子交换混合模式材料(C18/SAX)的磷酸化肽富集方法。考察了流动相组成(乙腈浓度、甲酸浓度、缓冲盐浓度)对酪蛋白(α-Casein)酶解液中磷酸化肽分离选择性的影响。实验结果表明,磷酸化肽在C18/SAX上的保留行为受疏... 建立了新型反相/强阴离子交换混合模式材料(C18/SAX)的磷酸化肽富集方法。考察了流动相组成(乙腈浓度、甲酸浓度、缓冲盐浓度)对酪蛋白(α-Casein)酶解液中磷酸化肽分离选择性的影响。实验结果表明,磷酸化肽在C18/SAX上的保留行为受疏水和离子交换作用力的共同调控,单磷酸化肽先于多磷酸化肽从材料上洗脱出来。随着甲酸浓度增加,磷酸化肽的保留减弱;随着盐浓度增加,磷酸化肽保留变小。采用优化后的流动相,建立以20%ACN/20 mmol/L NH4Ac作为上样溶液,20%ACN/0.1%FA和50%ACN/100 mmol/L NH4Ac/2%FA分别作为洗脱液分段洗脱单、多磷酸化肽的方法。以α-Casein和人血清白蛋白(HSA)酶解液的混合溶液(1∶20,n/n)作为模拟样品,实现了单、多磷酸化肽的同时富集和分段洗脱,分别检测到4条单磷酸化肽和14条多磷酸化肽的信号。将本方法用于牛奶中的磷酸化肽检测,共鉴定到4条单磷酸化肽和8条多磷酸化肽信号。结果表明,本富集方法选择性高,有良好的应用前景。 展开更多
关键词 磷酸化肽 反相/强阴离子交换材料 富集
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