人增殖抑制基因(HSG)对肿瘤细胞系化疗敏感性的作用

目的:将人增殖抑制基因 (hHSG)用电子穿孔的转基因方式转染到体外培养的人肿瘤细胞系中,观察hHSG基因对内源性hHSG表达水平不同的肿瘤细胞系的化疗敏感性的影响。方法:首先用免疫组化方法检测不同组织来源的肿瘤细胞系中hHSG的表达水平,然后选择内源性hHSG表达水平较低的肺腺癌 (A549 )和内源性hHSG表达水平较高的宫颈癌(HeLaS3)细胞系,用电穿孔方法转染含有hHSG的真核表达载体 (pEGFP hHSG) 24h后,加入放线菌酮(CHX),采用细胞计数、MTT法观察hHSG对肿瘤细胞增殖抑制作用及对CHX的化疗敏感性的影响。结果:hHSG在不同组织来源的肿瘤细胞系都有不同程度的表达, pEGFP hHSG转染到两种内源性hHSG表达水平不同的肿瘤细胞系后,这两种肿瘤细胞的生长增殖都明显受到抑制,同时外源性的hHSG也增强了这些肿瘤细胞系对CHX的敏感性。结论:外源性hHSG可不依赖其内源性表达水平而抑制肿瘤细胞的增殖,与CHX并用可增强肿瘤细胞对CHX的敏感性,具有协同作用。

肿瘤抑制基因p53综述

本文从ｐ５３研究的历史，ｐ５３的基本分子生物学，ｐ５３与细胞周期调控，ｐ５３与肿瘤发生以及ｐ５３参与转录调控来实现其生物学功能等诸方面概述ｐ５３研究的进展。

肿瘤抑制基因P_(53)

肿瘤抑制基因 P53是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因。1979年,Lane 和 Grawford 等三个实验室几乎同时发现了一种位于细胞核内的具有53KD 磷酸化蛋白,命名为 P53。在猴空泡病毒(Simian vacuolating virus,SV40)感染或转化的细胞中,P53与 SV40T 抗原结合成蛋白复合体。Levine 等人通过免疫沉淀证实 P53蛋白不是 SV40

肿瘤抑制基因和卵巢癌转移的危险性

无症状的卵巢癌常在做出诊断之前发生转移扩散。虽然原因不明,但是分子水平的研究正开始揭示一些机制。肿瘤抑制基因的灭活被认为是多种癌症发生的原因。等位基因缺失的研究指出了可能发生灭活的基因组区。爱尔兰贝尔法斯特大学肿瘤学室的研究人员最近检验了上皮卵巢癌临床期与17号染色体上第三位点等位基因缺失之间的关系:随着疾病期的发展基因缺失逐步升级。

肿瘤来源的抑制性细胞因子影响树突状细胞的微观流变特性并导致免疫应答恶化

现已证明,在肿瘤发生过程中,司职抗原呈递的树突状细胞的功能存在缺陷和紊乱,从而导致了免疫系统的显著受抑和肿瘤的免疫逃逸.为了探索肿瘤的免疫逃逸机制,利用生物物理学和微观流变学的方法研究了肿瘤来源因素对树突状细胞(dendriticcells,DCs)分化过程的影响.发现来源于肿瘤微环境的细胞因子等成分,导致DCs的渗透脆性增加、细胞膜脂流动性显著下降,而且细胞的转录水平和能量状态也明显改变,导致DCs的抗原摄取能力和活化幼稚T细胞的能力显著下降.所以,DCs的微观流变特性的改变也许是肿瘤免疫逃逸机制的一个方面.

新结构组蛋白去乙酰化酶抑制剂筛选及抗肿瘤活性初步观察

组蛋白的乙酰化调节是基因表达调控的一种重要机制，它参与了机体病理、生理水平的多方面调节。组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶活性共同决定了组蛋白的乙酰化水平。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以提高组蛋白的乙酰化水平，从而调节某些特定基因的表达。我们建立了非同位素法高通量筛选组蛋白去乙酰化酶抑制剂的模型，筛选了约二百种化合物，发现三种能够抑制组蛋白去乙酰化酶的化合物。实验证明，它们能在细胞水平促进组蛋白的乙酰化，并对体外培养的多种肿瘤细胞具有明显的杀伤作用。初步体内实验表明，化合物H9能抑制小鼠体内肿瘤的发生、发展。新结构的组蛋白去乙酰化酶抑制剂可能具有新型抗肿瘤药物的应用前景。

肿瘤抑制基因、磷酸化AKT、细胞周期素D1在肺鳞癌和腺癌中不同的表达及与临床病理因素的相关性

目的探讨AKT信号转导通路中有关蛋白肿瘤抑制基因（PTEN）、磷酸化AKT（p-AKT）及细胞周期素D1（CyclinD1）在原发性肺鳞癌和腺癌中不同的表达意义及与临床病理因素的相关性。方法应用免疫组化的方法，检测原发性肺鳞癌44例、腺癌36例及35例非肿瘤性肺组织标本中PTEN、p-AKT、CycllnD1的表达，并与临床病理因素进行相关性分析。结果p-AKT、CyclinD1在肺鳞癌和腺癌中总的阳性率分别为78．8％、76．3％，均显著高于非肿瘤性肺组织中阳性表达0％（均P〈0．05）。PTEN在肺鳞癌和腺癌中总阳性率为47．5％，显著低于非肿瘤性肺组织中阳性表达94．3％（P〈0．05）。PTEN、P—AKT、CycllnD1在肺鳞癌和腺癌中的表达差异均无统计学意义（均P〉0．05）。PTEN表达与有无淋巴结转移和组织的高分化有关。p-AKT在高中分化腺癌中阳性表达显著高于低分化腺癌的表达。CyclinD1表达与淋巴结转移、鳞癌的低分化有关。在肺鳞癌和腺癌中，p-AKT蛋白的表达均与CyclinD1呈正相关。肺鳞癌中，PTEN表达与P，AKT、CyclinD1呈负相关；肺腺癌中，PTEN表达与p-AKT、CyclinD1均无相关关系。结论在肺鳞癌和腺癌中均存在AKT及其通路的激活。PTEN的失活参与了肺鳞癌和腺癌的发生和发展。在肺鳞癌中，AKT的激活与PTEN的失活有关；在肺腺癌中，PTEN的失活可能不是AKT活化的主要原因。在肺鳞癌和腺癌中可能存在不同的AKT活化机制。

细胞周期失控在肿瘤发生中的作用

细胞癌变过程中发生多次遗传改变,包括DNA复制,修复、基因组分离的丧失。多种细胞增殖反应忠实性的维持,有赖于细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK),节点控制及修复途径的协调作用。肿瘤抑制基因等可对细胞周期蛋白、CDKs或细胞周期蛋白-CDK复合物显示抑制作用。一些特异性细胞周期蛋白与CDKs瞬时结合,以及各类外源性信号。

子宫内膜癌组织中TMSG-1表达水平及临床意义

目的探讨子宫内膜癌组织中肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)表达水平及临床意义。方法选取2013年12月至2017年12月我院收治的102例子宫内膜癌患者作为研究对象,所有患者均采取手术等相应治疗,采用回顾性分析法分析所有患者的临床及随访资料,根据资料结果将手术过程中切取得102份子宫内膜癌病组织标本作为观察组,另选取102份癌旁正常子宫内膜组织标本作为对照组,所有组织标本均进行TMSG-1表达水平的测定和其治疗后的预后情况的评定,并根据结果比较不同组织标本中TMSG-1的表达情况以及不同预后子宫内膜癌患者间TMSG-1表达水平的差异。结果 (1)子宫内膜癌癌变组织中TMSG-1阳性表达率54.90%显著低于癌旁正常组织100%(χ2=58.396,P<0.001);(2)102例子宫内膜癌患者存活率为62.75%;(3)不同组织分级、肿瘤浸润深度和淋巴结是否转移以及TMSG-1阴阳性的子宫内膜癌患者间其存活率均存在差异(P<0.05);(4)经非条件多因素Logstic回归分析得组织分级过低、肿瘤浸润过深、淋巴结出现转移以及TMSG-1表达为阴性均为导致子宫内膜癌患者出现死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 TMSG-1在子宫内膜癌患者其癌变组织中呈较低水平表达,且为导致该患者死亡的独立危险因素,故可将其作为评估子宫内膜癌患者其病情和预后的有效指标。

p53与主反应基因Egr-1物理相互作用的研究(英文)

目的:肿瘤抑制因子p53和主反应基因Egr-1是细胞核转录因子,在介导细胞增殖、分化及细胞凋亡和生长停止的信号传导通路中扮演调控的角色。我们试图证明在体内、外这两种调控蛋白间有一种物理上的联系。方法:体内实验中,用免疫沉淀法和Western blot3分析含有高水平Egr-1活性的细胞裂解物的血清和过度表达Egr-1和突变型p53的人肺癌细胞株中两种蛋白间的相互作用。结果:p53突变在154密码子时与Egr-1没有联系,而当p53蛋白突变点在156,246,247和273殖基则与此锌指转录因子有联系。p53结合全长的Egr-1和1个Egr-1缺失5'活化范围的Egr-1突变体,但不能结合1个缺少包含头两个锌指区的内部片断的Egr-1蛋白,说明结合需要完整的锌指基序存在。肺成纤维细胞系MRC-9表达不同大小的Egr-1蛋白,该蛋白也同样与p53结合。结论:两种调控蛋白之间存在联系,它们之间的相互作用可能改变了它们的多种生物学活性尤其是关于转录控制的特性。

膀胱肿瘤

9737408 257例浅表膀胱移行细胞癌患者定量染色质图形描述与 DNA 倍体水平测定的比较作为附加的预测价值/vanVehhoven R∥Eur Urol.-1996,29(2).-245～251 湘医图9737409 膀胱扩大术后膀胱发生肾源性腺瘤/Goldman H B∥J Urol.-1996,155(4).-1410

表氧化二十碳三烯对eNOS磷酸化水平的影响及其相关信号转导通路

内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)是一氧化氮(NO)参与的血管稳态调节过程中的关键酶.多种体液因子和机械刺激都可以通过磷酸化修饰调节eNOS的活性,但具体的信号转导通路因刺激物不同而异.最近发现花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶代谢产物表氧化二十碳三烯(EETs)可以显著上调eNOS的蛋白表达并增强其活性,但其分子机制尚不清楚.通过在4代以内培养的牛主动脉内皮细胞中直接加入外源性EETs和转染CYP表氧化酶基因CYP2C11和CYPF87V,并同时给予实验组不同信号转导抑制剂进行干预,观察其对总的eNOS表达及其在Ser1179和Thr497位点磷酸化水平的影响.结果显示,内外源性EETs均可以显著上调eNOS的蛋白表达并增强及其在Ser1179和Thr497位点的磷酸化水平;PI3K抑制剂LY294002可以阻断EETs对eNOS-Ser1179的磷酸化上调作用,但它对eNOS-Thr(P)497并无影响,而Akt抑制剂却可以抑制eNOS在这两个位点的磷酸化,且这两种抑制剂都可以阻断EETs对eNOS的蛋白表达上调作用.结果提示:(i)EETs对eNOS的活性调节可能与PI3K/Akt所介导的eNOS-Ser1179和Akt所介导的eNOS-Thr497磷酸化水平改变相关;(ii)PI3K/Akt信号通路可能参与了EETs对eNOS的蛋白表达上调过程.

新肿瘤抑制基因溶质载体家族5成员8在结直肠癌组织中的表达及甲基化研究

溶质载体家族5成员8（SLC5A8）是一种新的候选肿瘤抑制基因,2002年由Rodriguez等发现,并且从人肾cDNA文库中克隆鉴定的编码610个氨基酸,认为是溶质载体家族5（SLC5）的第8个成员,被命名为SLC5A8,该基因位于人类染色体的12q13-23,编码蛋白属于钠离子/葡萄糖共转运蛋白家族成员[1].本研究旨在探讨SLC5A8基因在结直肠癌患者肿瘤组织中的表达及甲基化水平.

PTEN和磷酸化Smad2在原发性肝癌中的表达

目的探讨肝癌等组织中10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）和磷酸化Smad2（P-Smad2）表达的意义。方法采用免疫组织化学技术检测肝癌组织、癌旁肝组织和非癌性肝组织中P-Smad2和PTEN的表达。结果31份肝癌组织中PTEN表达以细胞质和细胞膜明显,细胞核基本不表达；25份癌旁及13份非癌性肝组织中则以细胞核和细胞质强表达,细胞膜弱表达。PTEN在肝癌组织的表达率（64．5％）低于癌旁肝组织（96．0％）和非癌性肝组织（100．0％）,表达强度（4．19±3．31）低于癌旁肝组织（7．88±0．93）和非癌性肝组织（7．77±0．93）,差异均有统计学意义（P＜0．05）。不同病理分级的肝癌组织中PTEN的表达率差异无统计学意义（P＞0．05）,≥Ⅱ级的肝癌组织细胞质表达强度（3．07±2．87）低于＜Ⅱ级（5．80±3．12）的肝癌组织（P＜0．05）。癌旁有、无肝内血管癌栓的肝癌组织中,PTEN表达率分别为45．5％和85．7％,表达强度分别为3．00±3．46和6．28±2．37,差异均有统计学意义（P＜0．05）。PTEN在肝细胞的表达定位与病理类型呈负相关（r=0．34,P＜0．01）,与肝内血管癌栓呈负相关（r=-0．43,P＜0．05）。非癌性肝组织、癌旁肝组织和病理分级＜Ⅱ级的肝癌组织中,P-Smad2表达以细胞核和细胞质明显,≥Ⅱ级的肝癌组织中则以细胞核为主。P-Smad2在肝细胞的表达定位与病理类型呈正相关（r=0．22,P＜0．05）,P-Smad2在细胞核的表达强度。肝癌组织与癌旁肝组织的差异无统计学意义,也与肝内血管有无癌栓无关。肝癌组织中PTEN和P-Smad2表达呈负相关（r=-0．73,P＜0．01）。结论PTEN的表达、强度以及和P-Smad2的核、质转位可能与肿瘤的发展和恶化有关,二者可能存在相互作用,共同参与肝癌的发生机制。

四君子汤对慢性肾脏病-蛋白质能量消耗模型小鼠的改善作用及机制研究

目的:研究四君子汤对慢性肾脏病-蛋白质能量消耗(CKD-PEW)模型小鼠骨骼肌萎缩的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将80只小鼠随机分为假手术组(n=10)和造模组(n=70)。造模组小鼠采用切除5/6肾联合低蛋白(4%酪蛋白)饮食法建立CKD-PEW模型。将造模成功的50只小鼠随机分为模型组,四君子汤低、中、高剂量组[2.34、4.68、9.36 g/(kg·d),以生药量计]和复方α-酮酸片组[阳性对照,1 g/(kg·d)],每组10只。各给药组小鼠灌胃相应药物,假手术组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续灌胃14 d。末次给药后,称定小鼠体质量、左侧胫骨前肌(TA)湿质量,并测定TA横截面积;检测小鼠TA蛋白合成与分解代谢情况;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测小鼠TA中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及胱天蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测小鼠TA中肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)、肌环指蛋白1(MuRF-1)、Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)、磷酸化肿瘤抑制基因(p-PTEN)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组小鼠的体质量、TA湿质量、TA蛋白合成代谢能力以及PI3K、p-Akt蛋白表达水平显著降低(P<0.05),TA横截面积显著减小(P<0.05),TA蛋白分解代谢能力、Bax/Bcl-2比值、Caspase-3 mRNA表达水平和Atrogin-1、MuRF-1、ROCK1、p-PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,四君子汤中、高剂量组和复方α-酮酸片组小鼠上述指标均显著改善(P<0.05)。结论:四君子汤能够增加CKD-PEW模型小鼠体质量,抑制其骨骼肌萎缩;其机制可能与调控ROCK1/PTEN/Akt信号通路,抑制Atrogin-1和MuRF-1表达有关。

nm23因子在大肠癌组织中的表达及其临床意义

肿瘤转移是一个复杂的、多步骤的、肿瘤细胞和宿主细胞相互作用的过程，是恶性肿瘤的重要生物学行为，往往是导致病人死亡的直接原因。随着分子生物学的发展，对肿瘤转移抑制的研究已进入分子水平，nm23基因即是近年来发现并被证实与多种肿瘤的转移有关的较新的肿瘤抑制基因，该基因可能通过影响细胞内微管的聚合／解聚和G蛋白介导的信号传导，而参与肿瘤的发生和发展。