微小RNA-214靶向调控PTEN对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的影响及机制研究

目的:探讨微小RNA-214(miR-214)靶向调控第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的影响及机制。方法:将成骨细胞MC3T3-E1分为miR-124 mimic组(转染miR-124 mimic)、miR-124 NC组(转染miR-124 NC)、pcDNA3.1-PTEN组(转染pcDNA3.1-PTEN)、miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN组(转染miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN)。采用在线生信预测miR-124和PTEN靶向结合位点,通过双荧光素酶报告基因进行验证。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞miR-124和PTEN mRNA表达。采用CCK-8法检测细胞增殖。采用碱性磷酸酶活性测定检测细胞分化能力。采用茜素红染色和骨钙素水平测定检测细胞的矿化。采用Werstern blot检测PTEN、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、骨桥蛋白(OPN)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)水平。结果:与miR-124 NC组比较,miR-124 mimic组野生型PTEN的荧光素酶活性降低(均P<0.05)。与miR-124 NC组比较,miR-124 mimic组miR-124及p-PI3K、p-AKT蛋白表达升高,PTEN mRNA和蛋白、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ和OPN蛋白、细胞矿化率和骨钙素水平降低,而pcDNA3.1-PTEN组则相反(均P<0.05)。与miR-124 mimic组比较,miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN组p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,PTEN mRNA和蛋白、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ和OPN蛋白、细胞矿化率和骨钙素水平升高(均P<0.05)。结论:miR-214通过靶向下调PTEN蛋白表达激活PI3K/AKT信号通路,从而调控成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化。

lncRNA-MALAT1基于p-PI3K/p-AKT通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的探究血浆长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,lncRNA-MALAT1)基于磷酸化-磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K)/磷酸化-苏氨酸蛋白激酶(phosphorylated threonine-protein kinase,p-AKT)通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法将培养的U87脑胶质瘤细胞分为脑胶质瘤组、空白组和转染组。采用PCR法检测lncRNA-MALAT1表达量,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT检测细胞增殖率,Transwell检测细胞侵袭,Western blot法检测p-PI3K/p-AKT通路相关蛋白、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白水平。结果与脑胶质瘤组相比,空白组、转染组lncRNA-MALAT1表达量较低;与空白组相比,转染组lncRNA-MALAT1表达量较低。与空白组、脑胶质瘤组相比,转染组细胞凋亡率较高;与空白组、脑胶质瘤组相比,转染组细胞增殖率较低;与空白组、脑胶质瘤组相比,转染组细胞侵袭个数较少;与空白组、脑胶质瘤组相比,转染组p-PI3K/p-AKT通路相关蛋白表达量较低;与空白组、脑胶质瘤组相比,转染组MMP2、MMP9蛋白表达量较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA-MALAT1可有效降低p-PI3K/p-AKT信号通路相关蛋白的表达,继而有效抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭,促进胶质瘤细胞的凋亡,降低MMP2、MMP9蛋白的表达量。

甲状腺乳头状癌中TROP2、p-Akt及vimentin的表达及临床意义

目的:探讨TROP2、p-Akt及vimentin在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测76例甲状腺乳头状癌、36例甲状腺瘤组织、36例正常甲状腺组织中TROP2、p-Akt及vimentin的表达,并对性别、年龄、肿瘤大小、临床TNM分期及淋巴结转移等因素进行分析。结果 :76例甲状腺乳头状癌中TROP2、p-Akt及vimentin蛋白的阳性表达率分别为65.8%、68.4%、69.7%,与甲状腺瘤组织、正常甲状腺组织相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TROP2、p-Akt及vimentin蛋白在淋巴结转移组的阳性表达率均高于淋巴结无转移组(P<0.05);TROP2、p-Akt及vimentin蛋白在Ⅲ+Ⅳ期中的阳性表达率均明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05)。经Spearman等级相关性分析表明,TROP2与p-Akt、vimentin的表达均呈正相关(r=0.313,P=0.038;r=0.402,P=0.031);p-Akt与vimentin的表达也呈正相关(r=0.464,P=0.026)。结论:TROP2的表达与甲状腺乳头状癌的恶性侵袭及转移有关,可作为靶向治疗甲状腺乳头状癌的潜在基因。

胡芦巴丸调控氧化应激通路改善大鼠糖尿病肾病的实验研究

目的:探讨胡芦巴丸及其单味药抗氧化应激治疗大鼠糖尿病肾病(DKD)的分子机制。方法:采用高糖高脂饮食和尾静脉小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病肾病模型,将大鼠随机分为模型组、胡芦巴组、补骨脂组、胡芦巴丸组、卡托普利组,另设正常对照组,给予相应药物灌胃治疗16周后,检测血糖、血脂、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿24 h总蛋白(UTP)、尿24 h尿白蛋白(UALB),光镜下观察肾脏形态学改变(HE染色、PAS染色、Masson染色)、电镜下观察肾脏超微结构改变,DHE染色评估肾脏组织超氧阴离子水平,浓度比色法检测肾组织烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)活性,Western Blotting检测肾脏组织磷酸化蛋白激酶C-α(PKC-α)、NADPH氧化酶p47^(phox)亚基、纤黏蛋白(Fibronectin)的表达水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肾脏组织p47^(phox)、PKC-α的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖升高、血脂紊乱,24 h尿总蛋白及白蛋白水平均明显升高(P<0.001),肾小球体积增大、肾小球纤维化、细胞外基质增生、足细胞足突融合;与模型组比较,胡芦巴、补骨脂、胡芦巴丸组大鼠血糖水平下降,血脂紊乱改善,24 h尿总蛋白及白蛋白水平均明显下降(P<0.01),上述肾脏病理学改变明显减轻。与正常组比较,模型组大鼠肾组织DHE染色荧光强度明显升高,肾组织NADPH氧化酶活性、磷酸化PKC-α、p47^(phox)、Fibronectin蛋白均明显升高(P<0.001);与模型组比较,胡芦巴、补骨脂、胡芦巴丸组大鼠肾组织DHE染色荧光强度明显降低,肾组织NADPH氧化酶活性、磷酸化PKC-α、p47^(phox)、Fibronectin蛋白均明显降低(P<0.01),p47^(phox)、PKC-α的mRNA表达水平降低(P<0.01)。与单味药比较,胡芦巴丸复方组在抗氧化应激,改善肾小球纤维化,降低血脂血糖优于胡芦巴组和补骨脂组。结论:胡芦巴丸通过抑制PKC-α/NADPH通路抗氧化应激以治疗糖尿病肾病。

金匮肾气丸通过调控PI3K-AKT-mTOR及PI3K-AKT-GLUT4通路干预多囊卵巢综合征大鼠的作用机制研究

目的:基于PI3K-AKT-mTOR、PI3K-AKT-GLUT4两通路探讨金匮肾气丸对多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠的干预作用及机制。方法:60只雌性SD大鼠随机为正常对照组、模型对照组、达英-35+二甲双胍(0.2 mg/kg+0.23 g/kg)组和金匮肾气丸0.5、1、2 g/kg,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠每天灌胃来曲唑1 mg/kg以建立PCOS模型,连续21 d。造模第16 d开始阴道涂片检测动情周期,见阴道上皮细胞持续角化者即为PCOS模型大鼠,第22 d开始灌胃给予相应药物或者CMC-Na, 1次/d,连续21 d。末次给药24 h后,腹主动脉取血,ELISA法测定血清雌二醇(Estrogen, E2)、睾酮(Testosterone, T)、促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone, GnRH)、促卵泡素(Follicle stimulating hormone, FSH)和促黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)含量;取大鼠双侧卵巢,称质量,计算卵巢系数;HE染色法观察卵巢病理变化;免疫组织化学法检测卵巢组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白阳性表达;实时荧光定量PCR法检测Pi3k、Akt、Mtor、Glut4 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠卵巢系数明显增加,血清T、GnRH、LH含量明显升高,FSH和E2含量明显降低(P<0.05);卵巢组织中闭锁卵泡增多,囊性病变增加,卵巢组织中PI3K、p-AKT、p-mTOR、GLUT4蛋白表达及mRNA表达明显下调(P<0.05);与模型对照组比较,各给药组大鼠卵巢系数明显减小,血清T、GnRH、LH含量明显降低,FSH和E2含量明显升高(P<0.05);卵巢组织囊性病变明显减轻,卵巢组织中PI3K、p-AKT、p-mTOR、GLUT4蛋白阳性表达及mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论:金匮肾气丸通过调节雌、雄激素分泌及PI3K-AKT-mTOR、PI3K-AKT-GLUT4两通路相关因子表达来实现其对PCOS大鼠的干预作用。

VEGF165b在肝细胞癌中的表达及其作用机制

目的:研究血管内皮生长因子165b(vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肝细胞癌和正常肝组织中的表达情况,初步探讨其与肝细胞癌的关系和作用机制.方法:用免疫组织化学法检测28例肝细胞癌组织和30例正常肝组织中VEGF165b蛋白的表达情况;用RT-PCR法分别检测肝细胞癌和正常肝组织中VEGF165b和VEGF165 mRNA的表达情况.用Western blot法检测上述肝细胞癌组织和正常肝组织中VEGF165b和VEGF165蛋白的表达情况.用Western blot法检测上述肝细胞癌和正常肝组织中FAK和P-Akt蛋白的表达情况.结果:正常肝脏组织中VEGF165b蛋白表达率为96.67%(29/30),肝细胞癌组织中VEGF165b蛋白的表达率为21.4%(6/28),表达差异有统计学意义(P<0.05).VEGF165b mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达明显低于正常肝脏组织的表达(P<0.01).VEGF165 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达明显高于正常肝脏组织的表达(P<0.01).FAK和P-Akt蛋白在肝癌组织中的表达明显高于正常肝脏组织的表达(P<0.01).结论:VEGF165b在肝细胞癌组织中的表达明显低于正常肝组织的表达,而VEGF165和FAK、P-Akt在肝细胞癌组织中的表达明显高于正常肝组织的表达.提示VEGF165b与肝癌发生、发展有关,其机制可能是VEGF165b抑制VEGF165、FAK和P-Akt表达及他们的促进血管生成、肿瘤生长作用.

CEF新辅助化疗对乳腺癌MAPK/PI3K通路的影响

目的通过检测CEF方案新辅助化疗前后乳腺癌组织中pMEK和pAKT蛋白水平的改变,分析该方案疗效与MAPK和PI3K信号通路之间的关系。方法选取Ⅱ～Ⅲ期乳腺癌患者54例,行CEF方案新辅助化疗。检测患者化疗前和手术后肿瘤标本中pMEK和pAKT蛋白的表达情况,分析该化疗方案对患者pMEK、pAKT的影响和化疗效果之间的关系。结果化疗后达到PR 42例,SD 7例,PD 5例,有效率77.78%(42/54)。pMEK及pAKT的表达与化疗效果均呈负相关(P<0.05)。化疗后pMEK及pAKT的表达水平下降(P<0.05)。结论CEF方案化疗可通过抑制MAPK和PI3K通路的关键蛋白pMEK和pAKT的表达发挥治疗作用,但对pMEK和pAKT高表达的患者疗效欠佳。检测这两条通路的关键蛋白pMEK和pAKT可能对指导乳腺癌化疗和判定疗效有一定价值。

PFKFB3在胃癌中的表达及对胃癌细胞生长和凋亡的影响研究

背景与目的:6-磷酸果糖激酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase 3,PFKFB3)与肿瘤的发生、发展密切相关,且对肿瘤细胞的生物学行为具有重要的调节作用。分析PFKFB3在胃癌组织及癌旁组织中的表达,并观察其对胃癌细胞生长和凋亡的作用及机制。方法:采用TCGA数据库分析72例在南昌大学第二附属医院及第三附属医院经外科手术切除的新鲜胃癌标本及其相应的癌旁组织中PFKFB3的表达,并分析PFKFB3的表达与胃癌预后的关系。进一步通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)及免疫组织化学法分析胃癌组织标本及癌旁组织标本中PFKFB3的表达。shNC及shPFKFB3质粒转染至胃癌细胞中,采用RTFQ-PCR和Western blot验证转染效率。分别通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验、EdU实验、流式细胞术和Western blot分析PFKFB3下调后对胃癌细胞的增殖能力、细胞周期变化和细胞凋亡的影响。最后采用Western blot分析PFKFB3影响胃癌细胞生长的机制。结果:TCGA数据库分析显示,胃癌组织中PFKFB3的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),且PFKFB3高表达与胃癌患者较差的预后密切相关。另外,RTFQ-PCR、Western blot及免疫组织化学检测也同样证实PFKFB3在胃癌组织中高表达(P<0.01),且PFKFB3的表达升高与淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05)。沉默胃癌细胞中PFKFB3的表达后,其生长能力明显减弱(P<0.01),胃癌细胞凋亡比例增加(P<0.01),细胞周期G1期阻滞(P<0.01)。PFKFB3通过激活磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路而调控胃癌细胞的生长。结论:PFKFB3在胃癌组织中高表达,且与患者预后密切相关,沉默PFKFB3的表达后抑制胃癌细胞的生长并促进其凋亡,PFKFB3可能是胃癌靶向治疗的潜在生物标志物。

基于PI3K/PKB信号通路研究吡菲尼酮缓解肝纤维化的作用机制

目的基于磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(PKB)信号通路研究吡菲尼酮缓解小鼠肝纤维化程度的作用机制。方法选择65只小鼠,饲养7 d后将其中60只随机均分为模型组、健康组和吡菲尼酮组,每组20只,另留5只不入组。使用四氯化碳诱导模型组和吡菲尼酮组肝纤维化。成功建立肝纤维化模型后,吡菲尼酮组给予吡菲尼酮灌胃,模型组和健康组给予等量生理盐水灌胃。2周后处死小鼠,取肝脏组织进行苏木精-伊红(HE)、胶原纤维(Masson)染色,评估各组肝纤维化程度,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫印迹法测定PI3K和PKB的mRNA及蛋白表达量,检测小鼠血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平。结果模型组与吡菲尼酮组小鼠ALT及AST水平均明显高于健康组(P<0.05);模型组小鼠ALT及AST水平均高于吡菲尼酮组(P<0.05)。模型组小鼠PI3K mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及健康组(P<0.05);吡菲尼酮组PI3K mRNA和蛋白表达量高于健康组(P<0.05);模型组小鼠PKB mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及健康组(P<0.05)。模型组肝纤维化3期小鼠最多(55.56%);吡菲尼酮组2期小鼠最多(66.67%)。结论吡菲尼酮具有明显缓解小鼠肝纤维化的作用,此作用与其降低小鼠肝脏内PI3K和PKB表达量机制密切相关。

p-JAK1/p-STAT3通路在蓝莓益生菌血清干预肝细胞脂肪变性中的作用

目的建立体外肝细胞脂肪变性模型,探讨白介素-22(IL-22)调控的磷酸化酪氨酸蛋白激酶-1(pJAK1)/磷酸化信号转导激活转录因子-3(p-STAT3)信号通路在蓝莓益生菌血清改善肝细胞脂肪变性实验中的作用机制。方法制备蓝莓益生菌原液,并制备大鼠10%蓝莓益生菌低、中、高剂量血清及生理盐水血清。建立游离脂肪酸(FFA)诱导的正常肝细胞株L-02细胞脂肪变性模型,设立正常组,模型组,蓝莓益生菌低、中、高剂量血清组。定量检测细胞内三酰甘油(TG)含量;油红O染色检测细胞内的脂质沉积;RT-PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组IL-22、p-JAK1、p-STAT3、胆固醇调节元件蛋白-1c(SREBP-1c)的基因表达;免疫荧光及Western blot检测各组IL-22、p-JAK1、p-STAT3、SREBP-1c的蛋白表达。结果 FFA诱导刺激24h后,模型组细胞TG含量高于正常组(P<0.01),细胞内可见大量脂质沉积,且IL-22、p-JAK1、p-STAT3基因表达及蛋白表达均较正常组减弱(P均<0.01)、SREBP-1c基因及蛋白表达较正常组升高(P均<0.01);与模型组相比,蓝莓益生菌低、中、高剂量血清组的TG逐渐降低(P均<0.01),细胞内的脂肪沉积逐渐减轻,高剂量血清组IL-22、pJAK1、p-STAT3的基因表达和蛋白表达较模型组、低剂量血清组、中剂量血清组增强(P均<0.01),SREBP-1c的表达降低(P<0.01)。结论蓝莓益生菌通过对p-JAK1/p-STAT3信号通路的调节,参与拮抗肝细胞脂肪变性的作用。

miR-451a对人胰腺癌BxPc3细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制研究

目的分析miR-451a对人胰腺癌BxPc3细胞增殖及凋亡的影响并探究其分子机制。方法以BxPc3细胞为研究对象,建立脂质体转染miR-451a模拟物并分别设不同浓度(25、50、100和200μmol/L)miR-451a组及空白对照组。实时荧光定量PCR法检测各组细胞内miR-451a mRNA表达情况;然后用MTT法、平板克隆实验、流式细胞术及Western blot法分别检测不同浓度miR-451a转染对BxPc3细胞的增殖能力、细胞克隆数、细胞周期及凋亡变化的影响以及BxPc3细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、钙结合蛋白39(CAB39)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白的表达情况。结果各浓度转染组BxPc3细胞中miR-451a mRNA表达量高于空白对照组(P<0.050);转染miR-451a可显著抑制BxPc3细胞增殖且呈时间及浓度依赖性(P<0.050);200μmol/L miR-451a转染组细胞克隆数明显少于空白对照组(P<0.050);miR-451a转染后可使BxPc3细胞分化停滞于G0/G1期并可诱导细胞凋亡且具有浓度依赖性(P<0.050);miR-451a转染后BxPc3细胞内MIF、CAB39、p-PI3K和p-AKT蛋白表达较空白对照组下调并呈现浓度依赖性(P<0.050)。结论从本研究实验结果看,miR-451a可抑制BxPc3细胞增殖、诱导细胞凋亡并呈现浓度依赖性,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

三七总皂苷调控PI3K/Akt/mTOR通路对乳腺增生大鼠乳腺组织细胞凋亡的影响

目的:探究三七总皂苷对乳腺增生大鼠乳腺组织细胞凋亡的影响及调控机制。方法:将60只雌性未孕SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七总皂苷低、中、高剂量(10、20、40 mg·kg^(-1))组及三苯氧胺组(1.8 mg·kg^(-1)),每组10只。采用肌肉注射苯甲酸雌二醇和黄体酮构建乳腺增生大鼠模型。按照实验分组剂量进行灌胃给药。每日1次,连续30 d。正常组和模型组大鼠给予每日等量的生理盐水灌胃。给药结束后,游标卡尺测量大鼠第2对乳头直径;留取组织标本,苏木素-伊红(HE)染色观察乳腺组织病理形态变化;免疫组织化学法观察细胞凋亡调控蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠第2对乳头直径明显增大(P<0.05),乳房小叶体积增大,腺泡数量增加,乳腺组织呈现弥散性增生,乳腺组织Bcl-2蛋白表达及磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显增加(P<0.05),Bax表达明显降低(P<0.05),与模型组比较,三七总皂苷低、中、高剂量组和三苯氧胺组大鼠第2对乳头直径明显减小(P<0.05),乳腺小叶数量、腺泡数、分泌物量均较少,乳腺增生减轻,乳腺组织Bcl-2蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显降低(P<0.05),Bax表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷能够改善大鼠乳腺增生,其机制与调控PI3K/Akt/mTOR通路,促进乳腺组织细胞凋亡有关。

头针调控局灶性脑缺血大鼠下丘脑V1aR/CaMKⅡ/AQP4信号通路

目的:观察头针对局灶性脑缺血大鼠下丘脑精氨酸加压素受体1a(V_(1a)R)、磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶-Ⅱ(p-CaMKⅡ)和水通道蛋白4(AQP_(4))表达的影响,探讨头针治疗急性缺血性脑卒中脑水肿的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、抑制剂组、头针组,每组24只。采用线栓法复制大脑中动脉栓塞大鼠模型。抑制剂组给予V_(1a)R抑制剂(30μg/kg)腹腔注射,1次/d,连续7 d;头针组于双侧“顶颞前斜线”以15°~20°接力式快速刺入2针,100 r/min捻转1 min,留针30 min,1次/d,连续7 d。干预前后评价大鼠神经功能缺损评分和神经行为学评分;real-time PCR法检测大鼠下丘脑V_(1a)R mRNA表达量;BIIiot法测定大鼠左侧脑组织含水量;免疫组织化学法检测大鼠下丘脑p-CaMKⅡ、AQP_(4)蛋白阳性表达水平。结果:与正常组比较,模型组神经功能缺损评分、神经行为学评分、下丘脑V_(1a)R mRNA表达量、脑组织含水量、下丘脑p-CaMKⅡ和AQP_(4)阳性表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,抑制剂组和头针组神经功能缺损评分、神经行为学评分、下丘脑V_(1a)R mRNA表达量、脑组织含水量、下丘脑p-CaMKⅡ和AQP_(4)阳性表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:调控脑缺血后下丘脑异常的V_(1a)R/CaMKⅡ/AQP_(4)信号通路可能是头针减轻缺血性脑卒中脑水肿的机制之一。