磷酸化P53与ERα在乳头状甲状腺癌中的相关性研究

目的探讨磷酸化P53[p-P53(Ser 6)]与雌激素受体(ER)α在乳头状甲状腺癌(PTC)中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学Elivision plus二步法检测p-P53(Ser 6)、突变P53(mut-p53)、ERα在34例生育期女性乳头状甲状腺癌组织石蜡切片中的表达,并进一步分析p-P53(Ser 6)与ERα表达的相关性。结果生育期女性的PTC组织中均有p-P53(Ser 6)的的表达,阳性率为100%,表现为细胞核或细胞核/质阳性染色,其表达与mut-P53的检测结果有明显不同。生育期女性PTC组织中p-P53(Ser6)的表达水平与ERα呈显著正相关(r=0.334,P=0.053),而mut-P53的表达水平与ERα表达无相关(r=-0.078,P=0.661)。结论 p-P53(Ser6)与ERα的表达呈显著正相关,提示P53磷酸化可能参与促进了生育期女性PTC的发生、发展。

高危型HPV-18E6引起小鼠骨髓源性树突细胞p53的磷酸化

目的 探讨高危型HPV-18E6对树突细胞中p53蛋白磷酸化的作用。方法 构建真核表达载体pGFP-18E6,转染小鼠骨髓源性的树突细胞,采用磷酸化的p53抗体免疫荧光化学染色,共聚焦显微镜下动态观察其表达水平。选用p53磷酸化位点的抗体（包括Ser6、Ser9、Ser15、Ser20、Ser37、Ser46和Ser392）对GFP-18E6融合蛋白表达的细胞进行免疫细胞化学染色,进一步探讨磷酸化的p53蛋白在转染后12-72 h的动态表达水平。结果 树突细胞在转染pGFP-18E6和p EGFP-C1质粒后,GFP-18E6主要定位于细胞核内,而对照组只表达GFP的蛋白则均匀分布于树突细胞。GFP-18E6诱导了p53蛋白的Ser15、Ser20和Ser392三个位点磷酸化。激光共聚焦显微镜测量细胞荧光强度显示,GFP-18E6的表达与时间有相关性。结论 高危型HPV-18E6可以诱导树突细胞的p53蛋白发生多个位点的磷酸化,包括Ser15、Ser20和Ser392,p53多个位点磷酸化是病毒宿主相互作用的一种机制。

p53蛋白的结构与功能及磷酸化修饰的生物学效应研究概述

p53是一个重要的抑癌基因,其表达产物在肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用。本文概述p53蛋白的结构与功能,以及磷酸化修饰的生物学效应。

健脑益智汤对阿尔茨海默病大鼠P53的影响

目的研究健脑益智汤对阿尔茨海默病（AD）大鼠海马P53蛋白表达的影响,探讨其对AD细胞凋亡的防治作用机制。方法正常老年大鼠60只,分为对照组、模型组、安理申组、健脑益智汤小、中和大剂量组,采用侧脑室注射聚集态Aβ_（25-35）建立AD模型,药物灌胃4周,Western-blot法检测海马P53蛋白及磷酸化P53（Ser15）蛋白（pP53-Ser15）表达水平。结果与对照组比,模型组P53及p P53-Ser15的表达增多（P〈0.01）;与模型组比,安理申组P53蛋白降低（P〈0.01）,pP53-Ser15降低无统计学意义,健脑益智汤随剂量增加,P53蛋白及pP53-Ser15呈下降趋势（P〈0.05,P〈0.01）;健脑益智汤大剂量组pP53-Ser15下降较安理申组明显（P〈0.05）。结论健脑益智汤降低AD大鼠细胞凋亡的可能机制是通过降低P53及pP53-Ser15蛋白的表达来实现的。

p53磷酸化修饰及其功能研究进展

p53蛋白被认为是迄今为止最著名的肿瘤抑制因子之一,在肿瘤发生发展过程中发挥复杂而重要的调控作用.在正常生理情况下,细胞内的p53维持在很低的水平,当细胞受到多种刺激后,p53被翻译后修饰,蛋白因稳定而活性被激活,参与细胞周期阻滞、细胞凋亡、细胞衰老、细胞代谢等生命活动过程.p53翻译后修饰的类型很多,本文重点就磷酸化修饰对p53功能及其在细胞生命活动过程中的作用予以探讨,以期为p53本身的修饰研究及其在肿瘤等疾病治疗中的作用提供参考.

p53修饰及其相互作用的研究进展

p53是一个重要的抑癌分子,在抑制肿瘤发生发展过程中起关键作用.正常生理状况下,p53水平很低,细胞受到外界刺激后,p53水平升高,稳定性增强,继而参与细胞周期阻滞、细胞衰老、DNA修复或细胞凋亡等重要的生命过程.p53功能的精确调控至关重要,涉及一系列翻译后修饰(泛素化、乙酰化、磷酸化、甲基化、泛素样蛋白质修饰等等),这些作用互相协作、相互影响,从而精密调节p53的活性.本文探讨p53的各种修饰作用,并分析其各种修饰与肿瘤发生的相互关系,为肿瘤的治疗提供一些参考价值.

冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制

目的探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制。方法浓度为1—50μmol／L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA（siRNA）的结肠癌细胞，噻唑蓝（MTY）法观察冬凌草甲素对结肠癌细胞活力的影响，Western blot检测冬凌草甲素作用的HT-29细胞中腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化AMPKα（p-AMPKα）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、磷酸化ACC（p-ACC）、磷酸化p53（p-p53）、磷酸化S6K（p-s6K）及磷酸化S6（p-S6）的表达。结果冬凌草甲素具有抑制结肠癌细胞活力的作用，其抑制作用呈时间剂量曲线，50μmol／L的冬凌草甲素作用HT-29细胞72h后的细胞活力最低，为21．6％。随着作用时间和剂量的增加，HT-29细胞P—AMPKot、p-ACC和p-p53蛋白表达逐渐增加，p-S6K及P—S6的蛋白表达减弱。转染AMPKotsiRNA的结肠癌细胞活力为（73．3±2．8）％，明显高于转染错义siRNA组的细胞活力[（19．5±1．2）％]，两组间差异有统计学意义（P〈0．05），p-AMPKα、p-ACC、AMPKα和p—p53蛋白表达强于转染错义siRNA组，而p—S6的蛋白表达弱于转染错义siRNA组。结论冬凌草甲索通过AMPKα活化通路抑制HT-29细胞活力。冬凌草甲素抑制结肠癌细胞活力与p-AMPKot、p-p53蛋白激活及p-S6K与p-S6的蛋白抑制相关，p53、S6可能是冬凌草甲素抑制结肠癌细胞p-AMPKα活化通路的下游蛋白。